継続的な支援と当社の研究の資金のため、新たなる希望研究財団に感謝したいと思います。我々 はまた IITC をありがとうこの仕事の一部を支援したいと思います。

記載のすべてのプロトコルに則し、行ったし、女王の大学動物ケア委員会によって承認されました。行動テストの頻度は、毎週または毎月、または 2 つの組み合わせをすることができます (すなわち、 1 つ期待する最大の違いを確認するときは毎週、毎月他の所で)。
注: マウスの行動学主性別/年齢/ひずみ依存したがって適切な時間ポイントを収集して実験のグループ間で一貫性を維持するために不可欠です。環境要因 (例えば香り、騒音、温度、湿度照明、等) は、動作とマウスの不安に大きく影響します。可能な限り、これらの環境要因を軽減しようとします。
1. オープン フィールド試験
注: 行動テストの前に動物は、テストの開始前に 10-15 分のための場所を取ることですテスト部屋に慣れさせる必要があります。その適切な個人用保護具とガイドラインに従う行動のテスト プロトコルすべてのローカル施設を確認します。
注: テスト前にトレーニングはなし。
<ol><li>実行、され、カメラまたはオープン フィールド ボックスに正しく接続されているコンピューターと OFT プログラムは、上にことを確認します。Smartware プログラム、オープン フィールドのアイコンと"OK"をクリックします。カメラのオプションから「デジタル ・ アナログ ・ コンバーター」ソースを選んだ。「検出」をクリックし、、全体のオープン フィールド領域を可視化すると寸法が 30 cm × 30 cm であることを確認します。 注: 機器のレイアウトにスペースの制約によって異なりますがコンピューターとオープン フィールド装置が適切なビデオ キャプチャのための明るい部屋でお互いに近くにいることを確認します。</li>
	<li>「校正」を「スナップショット」し、オープン フィールドの範囲内で、マウスが認識されていることを確認して「OK」をクリックします。事前; マウスをテストする時間の量を設定する「時間」をクリックこの場合は、5 分を設定します。</li>
	<li>「科目一覧」アイコンをクリックして科目を入力します。「スケジューラ」および強調表示 all テスト科目し、緑の二重矢印クリックをクリックし、、データの収集を開始するためにすべての被験者にもたらすこの「フェーズ 1、1 セッション」。</li>
	<li>オープン フィールドの中心にマウスを置き、録音を開始するプログラムを要求する「スタート」アイコンをクリックしますします。一度に 1 つだけのマウスをテストします。</li>
	<li>5 分が完了すると、プログラムは自動的に次の話題に移動します。この場合、テストを完了しているマウスを取り外してオープン フィールドに次の科目を配置します。クリックして「スタート」。</li>
	<li>機器を拭きます。残りの試験科目について、手順 1.3 1.4。</li>
	<li>上部に「分析」アイコンをクリックしてすべての科目のテストを経て後データを分析するために、画面の右。もう一度「分析」し「要約レポート」をクリックします。必要に応じて、USB にデータをエクスポートします。</li>
</ol>2. メッシュ テスト
注: 面積と MT 上のメッシュのサイズのパフォーマンスに影響可能性があります。MT、マウスは最初の 10 の内で落ちる場合にコレクションの最初の 2 時間の間に s のポイントは、彼らに戻される 2 番目の試みのためにすぐにメッシュ。ここで使用されるメッシュは、メッシュ穴直径約 1.5 mm のワイヤー メッシュだった。
注: 同じ時間帯にこれらのテストを実行している推奨は 1 日を通して生理学的および生化学的パラメーターが変動するので。体重はこのテストでパフォーマンスに影響を与える可能性があり、従って考慮する必要があります。
<ol><li>メッシュの中心にマウスを置き、上記の明確なコンテナー メッシュ、少なくとも 20 cm を反転します。逆に一度タイマーを開始します。</li>
	<li>時間とレコードに落ちる待ち時間の時間。マウスが 60 に該当しない場合 s、いいえそれの 60 s および行為のスコアを与える試験をさらに。少なくとも 5 分の残りの部分にマウスを許可します。これはトライアル 1 の終わりです。</li>
	<li>ワイプ装置を 5 分間試験期間中に、必要な場合、2 番目のマウスをテストします。必要に応じて手順を繰り返します 2 と 3、試験 2.1 2.2 (マウスに 60 得点しない限り、s、それは 3 つの試験を受ける必要があります)。</li>
</ol>3. Rotarod テスト
注: 表面と RT の棒の直径のパフォーマンスに影響可能性があります。マウスが最初の 10 の内で落ちる場合は、RT の最初 2 コレクションの時間ポイントの間に s は、2 番目の試みのためにすぐにロッドにそれを戻します。
注: 同じ時間帯にこれらのテストを実行している推奨は 1 日を通して生理学的および生化学的パラメーターが変動するので。体重はこのテストでパフォーマンスに影響を与える可能性があり、従って考慮する必要があります。
<ol><li>IITC rotarod とコンピューターを入れます。データ記録に正しく接続されていることを確認します。</li>
	<li>プログラムで加速のプロトコルが実行されていることを確認します。Xxx (有効範囲は 000 ~ 999); rotarod テストの目的の長さを設定します。この場合、300 を押します *。Xxx (有効範囲は 001 005 ~); に使用される車線の数を設定します。この場合、005 を押します *。開始速度を xxx rpm に設定 (5 rpm の 3005 を入力; 有効範囲は 001 ~ 045);この場合、押して 004 *。</li>
	<li>Xxx rpm に最高速度を設定 (30 rpm の 4,030 を入力; 有効範囲は 001 ~ 045);この場合、040 を押します *。ランプ速度 s の xxx に設定 (30 のランプのトップ スピードに 5,030 を入力; 有効範囲は 000 ~ 999);この場合は 300 を押します *。ユニットをマウスモードに設定 (マウス前方の 6001 と 6002 逆のマウスを入力してください;)この場合、6001 を押します *。</li>
	<li>すべて磁化レーンが試験を開始する前にバランスがとれていることを確認します。Rotarod の各車線に 1 つのマウスを置きます。</li>
	<li>プログラムを開始して開始を押す。マウスが落ちるよう速やかに、彼ら「は旅行をしない」他の車線を確保するための車線からそれらを削除します。</li>
	<li>10 分間間隔の残りの部分にマウスを許可します。これはトライアル 1 の終わりです。間の間隔の間に機器を拭くし、マウスの次のセットのための試験を開始します。</li>
	<li>必要に応じて、手順 4-6 を繰り返します。マウスが完全 5 分試用版の rotarod に残っている場合、さらに試験のマウスの必要はありません。</li>
</ol>

<ol>
	<li>Osmon, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+Gene+Transfer+of+a+Hexosaminidase+Variant+Using+an+scAAV9.47+Vector+Corrects+GM2+Gangliosidosis+in+Sandhoff+Mice.">Systemic Gene Transfer of a Hexosaminidase Variant Using an scAAV9.47 Vector Corrects GM2 Gangliosidosis in Sandhoff Mice.</a> Human Gene Therapy. 27 (7), 497-508 (2016).</li><li>Brooks, S. P., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tests+to+assess+motor+phenotype+in+mice:+a+user's+guide.">Tests to assess motor phenotype in mice: a user's guide.</a> Nature Reviews, Neuroscience. 10, 519-529 (2009).</li><li>Ma, M., Basso, D. M., Walters, P., Stokes, B. T., Moser, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioural+and+histological+outcomes+following+graded+spinal+cord+contusion+injury+in+the+C57Bl/6+mouse.">Behavioural and histological outcomes following graded spinal cord contusion injury in the C57Bl/6 mouse.</a> Exp. Neurol. 169, 239-254 (2001).</li><li>Menalled, L. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+motor+dysfunction+and+striosomal+distribution+of+huntingtin+microaggregates+in+Huntington's+disease+knock-in+mice.">Early motor dysfunction and striosomal distribution of huntingtin microaggregates in Huntington's disease knock-in mice.</a> J.Neurosci. 22, 8266-8276 (2002).</li><li>Grusser, C., Grusser-Cornehls, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+in+motor+performance+of+Weaver+mutant+mice+following+lesion+of+the+cerebellum.">Improvement in motor performance of Weaver mutant mice following lesion of the cerebellum.</a> Behav. 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A., Tilson, H. A., Mitchell, C. L., Dennis, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+recording+grip+strength+device.">A simple recording grip strength device.</a> Pharmacol. Biochem. 8, 101-102 (1978).</li><li>Barn&#275;oud, P., Loliver, J., Sanger, D., Moser, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+motor+assessment+in+FALS+mice:+a+longitudinal+study.">Quantitative motor assessment in FALS mice: a longitudinal study.</a> Neuroreport. 8, 2861-2865 (1997).</li><li>Lui, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+GM2+activator+deficiency+manifests+cerebellar+pathology+and+motor+impairment.">Mouse model of GM2 activator deficiency manifests cerebellar pathology and motor impairment.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 94, 8133-8143 (1997).</li><li>Sango, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+Tay-Sachs+and+Sandhoff+diseases+differ+in+neurologic+phenotype+and+ganglioside+metabolism.">Mouse models of Tay-Sachs and Sandhoff diseases differ in neurologic phenotype and ganglioside metabolism.</a> Nature Genetics. 11 (2), 170-176 (1995).</li><li>Jones, B. J., Roberts, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rotarod+suitable+for+quantitative+measurements+of+motor+inco-ordination+in+na&#239;ve+mice.">A rotarod suitable for quantitative measurements of motor inco-ordination in na&#239;ve mice.</a> Nauyn-Schmiedebergs Arch. Pharmacol. 259 (2), 211 (1968).</li><li>Deacon, R. M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+the+Strength+of+Mice.">Measuring the Strength of Mice.</a> Journal of Visualized Experiments JoVE. (76), (2013).</li></ol>

著者が明らかに何もありません。

すべてのテストのためきれいにし contagions とマウスにディスを最小限に抑えるために表面を消毒します。また、ことマウス試験および行動間の十分な休憩時間の与えられたテスト OFT、RR と MT を使用する場合を確認してください。
OFT の各マウスがオープン フィールドの真ん中に配置されていると、プログラムが中心にマウスのリリース時に開始が重要です。プログラムの開始時に、センサーを登録可能性があります手の動きがないことを必ずください。
MT、マウスがハング メッシュ領域とに下落しているコンテナーの側面間の障壁を持つことが重要です。それはマウス コンテナーの側に到達することができます、彼らは、彼らの前部足をゆっくりと解放し、ジャンプする足の裏を指摘されています。壁とメッシュの中心間の障壁を大きくテーピングこの現象を減少し、筋肉の強さのより正確な測定のためできます。
単独では、これらのテストの一般的な歩行 (オープン フィールド試験)、筋力 (メッシュ テスト)、調整 (rotarod)2,7,8の良い測定です。ただし、一緒に取られて、これらの 3 つの行動テストの完全なコレクションは、マウスにおける運動の広範な評価できます。このテスト群は、複雑なモーター機能のモーター減損の効果の欠如を個別に確認します。これらのメソッドの主な制限は、非常に特定の赤字の問題行動の機能は、移動の彼らの一般的な評価です。さらに、すべての行動のテストと同様に、これらのテストは予告音、温度変化や光のサイクルなどの外部ストレスによる行動の変化。テスト主題すべての一貫性のある外部環境を維持することをお勧めします。行動テストのこのバッテリーは、運動失調とメモリのテストを含めるように拡張できます。筋力2,8,9の勉強のため他の方法など山と筋力の結果を相関する定速 RR を実施筋力、調整、または失調症の具体的な評価は、あるグリップ強度2重量テスト15平均台や歩行分析試金2、それぞれ。

行動テストの目的は、中枢神経系に影響を与える疾患の新しいマウス モデル、あるいは新しい治療法の試みの研究でかどうか表現型特性を測定するためです。さまざまなから選択する行動のテストがあります。行動テストの組み合わせを使用するための理論的根拠は頻繁完全に前臨床試験の治療成績を評価します。メッシュ テスト (MT) と、rotarod テスト (RR)、行動テスト バッテリーに本オープン フィールド試験 (OFT) が含まれています。
OFT は一般的な自発運動1,2,3,4,5,6、7のメジャーとして使用されます。この評価により、オープン フィールドを自由に移動するマウスと測定した行動の裁判の過程でマウスの動きがあります。飼育、移動距離、時間を含める、OFT 使用定量分析過ごした移動 (例えば、歩行・走行)、および変更活動でなぜそれが便利である (例えば、ジャンプと遅い/非常に活発な動き)、時間の経過と齧歯動物の行動を徹底的に分析。
MT は、マウス1,2,8,9,10,11の強さを評価するために使用されます。ワイヤー グリッド メッシュのオフにハングアップするすべての 4 つの手足は、重力の影響を反対している間持続的な手足の緊張を表示するマウスの機能の非侵襲的計測の使用します。この評価は、倒立のメッシュにマウスを配置して落下する待機時間のタイミングで行われます。このテストは、どのくらいの期間保持できる自体反転画面上に落下する前に測定することによって、マウスの筋力を評価します。
RR は、加速プロトコル1,2,7,8,9,12,13を使用している間、マウスの調整を評価します。Rotarod 装置は、4 rpm から始まる空気で回転する円筒形根太で構成されています。マウスはこのモーターの調整スキルを学ぶことができる、40 rpm までゆっくりと、増分量の増加は、挑戦します。RR の加速プロトコル評価調整、持久力と筋力1,2,7,クラシック、定速プロトコルは筋肉の強さの測定14。
これらの 3 つの行動テストの利点は、齧歯動物行動テスト コミュニティ2,7,8,9、全体との合計としてだけではなく撮影時に広く受け入れられていること、個々 のテストしかし、総称して、彼らは、実験的治療の異なる結果を調査するときに、表現型の動作の全体的な査定として使用できます。OFT は、全体的な自発運動2の唯一のテストであります。RR はまた、ここでは説明しません、歩行分析ソフトウェアを使用するよりも、他調整2を評価する唯一の方法の 1 つです。マウスの筋力を評価できます。 いくつかの方法があります。ただし、海抜文献で使用されている MT、またはワイヤー ハング テストを使用して、筋力2,8,9,10、をテストするための信頼性の高い方法として受け入れられています。11. 一般的な歩行運動と調整を測定するための他の多くの技術は非常に時間がかかり、信頼性の高いデータ (例えば、手動でマウスの動きのタイミングや手動で歩行分析のため足の塗装) を生成可能性があります。OFT と RR のための自動化されたシステムは、信頼性と妥当性の生産データと時間と労力を節約を増やします。
たとえば、サンドホフ病マウスモデルの神経変性を与えられて、この一連のテストを実行するとき、OFT は最初の通常生後 3 か月から始まるこのマウス モデルで見られるモーターの異常を評価するために使用されるこれらのテストの最初になります。モーターの調整で赤字も 12 週齢で見かけの先頭になります。筋力の赤字は、年齢の約 14 週間を開始するが、彼らは最終的にはるかに重要な 16 週目になります。
これらのテストは、サンドホフ病1,8,13,7パーキンソン病など神経変性疾患9を含む、重要な運動障害を引き起こす病気を勉強して役に立つハンチントン病、多発性硬化症。テストは、高齢化を研究し、比較的高齢者評価や健康の測定にも使えます。歩行障害と歩行とバランスの変化は、これらの疾病の多くで見られます。ただし、これらのテストの有用性は一般的な神経筋症状を伴う疾患に限定ではありません。
動機や説明の行動テストの手段のいずれかの目新しさについて指摘した交絡変数がずっとないことに注意してください。それは命令の特定の病気の状態と病態マウス表現型の症状を示しています前に、研究者が予備行動データを取得すること研究者が、定期的にすべての運動障害が考慮できるように (毎週)。多くの病気の表現型の症状を簡単に発症、毎週テストすることがなくこれらの症状が考慮されません。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="629">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">IITC Life Sciences Rotarod with Series 8 computing software&#160;</td>
			<td style="width:127px;">IITC Life Sciences</td>
			<td align="right" style="width:119px;">755</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Square Open Field 45 x 45 x 40 cm (grey color). Other floor color available: white, black.</td>
			<td style="width:127px;">Harvard Aparatus (PanLab)</td>
			<td align="right">760190</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">&#160;Open Field Preconfigured Module</td>
			<td style="width:127px;">Harvard Aparatus (PanLab)</td>
			<td align="right">760688</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Smart V3.0 Software Platform&#160;</td>
			<td style="width:127px;">Harvard Aparatus (PanLab)</td>
			<td align="right">760681</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Video converter (analog/digital)</td>
			<td style="width:127px;">Harvard Aparatus (PanLab)</td>
			<td align="right">760262</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Roof fixing sys for camera</td>
			<td style="width:127px;">Harvard Aparatus (PanLab)</td>
			<td align="right">760277</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Analog Sony Camera &#38; lenseNTSC</td>
			<td style="width:127px;">Harvard Aparatus (PanLab)</td>
			<td align="right">760505</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

battery of behavioral tests assessing general locomotion, muscular strength, and coordination in mice

特定の病気または治療は動物の幸福と健康、表現型効果と成果を評価するために臨床試験で使用行動テストします。適用可能性があります多数の行動テストがあります。我々 は一般的な歩行のためのテストを選択すると、オープン フィールド テスト (OFT);筋力のテスト、メッシュのテスト (MT);rotarod テスト (RR) の調整のためのテスト。毎週または毎月の基礎のテストが実施できます。一般的な歩行のためのテストとして客観的にマウスの動作パラメーターを監視することによって OFT 作品は、オープン フィールド機器です。フィールド 2' x2 ' ボックス、およびレーザー検出やビデオ キャプチャの動きが記録されます。マウスはオープン フィールドの中央に配置、テストを自由に移動できます。MT は、筋肉の強さの尺度として画面の反転から落ちないようにマウスの遅延を使用します。マウスは、クリア ボックスの上が反転し、秋にその遅延時間は画面に配置されます。3 つの試験は、その日に獲得した 3 つの試験の最高の実行されます。60 点 s は反転マウスが残っている最大の時間。マウスは、メッシュ テスト試験の間の 5 分間の休息期間が与えられています。最後に、RR の加速プロトコルは運動協調性と耐久性を評価します。40 rpm 5 分間に 4 回転数から速度を増加すると、試用期間中に回転棒上マウスを歩きます。マウス落下時に磁化の圧力センサーに触れたときに、試用が終了。各マウスは、3 つの試験を受けるし、その日の最高のトライアルを獲得します。この結合された行動データは、移動、調整、強さ、および実験動物の動きの全体的な査定のためことができます。少なくとも 2 つの 3 つの行動のテスト対策は全体的な改善運動機能を持つものとして修飾する動物のための改善を示す必要があります。

研究動物は、解析に必要な必要な時間ポイントに合わせて毎週または毎月の行動テスト パラダイムを受ける可能性があります。行動テスト タイミング例については図 1を参照してください。以下の代表的なデータで、Osmonらから撮影。(2016) マウスの毎月、行動テスト バッテリーを受けた年齢の約 40 週間、人道的エンドポイントまでの生後 12 週から始まります。行動テストのタイミングは、実験の重要な特にとき扱われた動物対未処理の生存範囲大幅にあり、比較が必要。
これらのテストは、神経変性疾患のため使用していませんが、サンドホフ マウス (図 2を参照) を使用しました。このマウスは、ますます不安定と放置し、通常年齢1の 16 週間で euthanization を必要とする場合の年齢の 12-16 週間からまとまりのない取得をモデルします。図 2 Dのデータは、どのように扱われたマウスは、通常のヘテロ接合体マウスと比較して動作するための手段として、rotarod の使用を示します。40 週で 2 つのグループの相違は、健常者と比較すると治療群の低下調整の先頭を示します。軽度の表現型が検討されている他のマウス モデルで今後のエクスパンションおよびこの一連のテストの特殊な形式を推奨します。
パブリケーションに関連する結果を選択すると、それは心の 2 つの要因に注意してください。最初のメトリックを使用する必要があります使用されている動物モデルに固有のものに選択されることです。しばしば、最も一般的に使用されるメトリックは、(に見られるように図 2);「時間移動」しかし、「距離の旅」はまた一般的な歩行のための一般的なメトリックです。RR で「終わり rpm」と「距離の旅」は、一般的に使用される指標です。適切な結果として選択されるメトリックを選択する第 2 の要因はメトリックを明らかに最も重要な分岐または結果の予想に応じて、行動の結果に収束を中心に展開します。
収集されたデータは、複数の統計的検定を用いた分析でしたが、一貫して毎週または毎月行動テスト同じマウスを使用して、2 方向繰り返し対策分析の分散 (2 ウェイ RM-ANOVA) お勧め。反復測定 ANOVA により、同じ動物から結果の縦断的評価とグループ間だけでなく、時間をかけて、動物の行動の変化の比較が可能になります。ボンフェローニ補正も示唆されました。同じ timepoint 内で試験治療を比較するとき図 2に見られるように、一方向の分散分析が示唆されました。
<img alt="Figure 1" src="/files/ftp_upload/55491/55491fig1.jpg"> 図 1: 行動テストの可能な実験的タイムラインの例。実験の必要性に応じて、タイムラインの様々 な行動テストを行うことができます。毎月、毎週、または組合せごとにテストを行うことができます。例では、研究期間は、0 週は治療管理 23 週間続きます。毎月発生するテストと、4、8、12、16、20 週間のテストが実行されます。毎週発生するテストと、テストが 23 週エンドポイントの前に毎週 (週 1-22) を実施します。組合せに基づいて発生するとテスト、試験の週 1-8 には毎週と毎月 23 週エンドポイント前に、20、16、12 週間のテストの実行。<a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55491/55491fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 2" src="/files/ftp_upload/55491/55491fig2.jpg"> 図 2:扱われた動物が未処理動物を上回る月間行動テスト結果。12 週間で扱われた動物は MT (E)未処理動物 OFT (A)で「時間移動」、秋に「待ち時間」を上回る。12 週間(C)で「rotarod エンド rpm」の処理と未処理の動物間の統計的な差異がないです。毎月の行動テストで扱われたマウスは OFT (B)、 (D)RR MT (F)で通常のヘテロ接合体のコントロールに同様に実行します。統計ソフトウェア (例えばグラフパッド) を使用してすべての統計的解析を行った、12 週の解析 (2 a C、およびE) の一方通行 ANOVA テストを行った、月次分析 (の 2 ウェイ RM ANOVA テストを行った2 b、D、 、 F)。すべての誤差範囲が SEM次の図は、Osmonらから変更1メアリー アン リーバート出版社から許可を得て転載と<a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55491/55491fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。

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Battery of Behavioral Tests Assessing General Locomotion, Muscular Strength, and Coordination in Mice

病気や動物の健康の治療の表現型の影響を評価するために臨床試験で使用行動テストします。モーター機能をグローバルに評価するために我々 は、一般的な歩行、筋力、調整テストを選択: オープン フィールド試験、メッシュ テストと rotarod テストそれぞれ。

行動のバッテリー テスト評価の一般的な運動、筋肉の強さと連携マウス

Behavioral testing is used in pre-clinical trials to assess the phenotypic effects and outcomes that a particular disease or treatment has on the ...

battery-behavioral-tests-assessing-general-locomotion-muscular

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Behavior

13.4K ビュー.  Queen's University. 病気や動物の健康の治療の表現型の影響を評価するために臨床試験で使用行動テストします。モーター機能をグローバルに評価するために我々 は、一般的な歩行、筋力、調整テストを選択: オープン フィールド試験、メッシュ テストと rotarod テストそれぞれ。

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Shallow Water (Paddling) Variants of Water Maze Tests in Mice

When Richard Morris devised his water maze in 19817, most behavioral work was done in rats. However, the greater understanding of mouse genetics led to the mouse becoming increasingly important. But researchers found that some strains of mutant mice were prone to problems like passively floating or diving when they were tested in the Morris water maze11. This was unsurprising considering their natural habitat; rats swim naturally (classically, the "sewer rat"), whereas mice evolved in the dry areas of central Asia.
To overcome these problems, it was considered whether shallow water would be a sufficient stimulus to provide escape motivation for mice. This would also avoid the problems of drying the small creatures with a towel and then putting them in a heated recovery chamber to avoid hypothermia, which is a much more serious problem than with rats; the large ratio of surface area to volume of a mouse makes it particularly vulnerable to rapid heat loss.
Another consideration was whether a more natural escape strategy could be used, to facilitate learning. Since animals that fall into water and swim away from the safety of the shore are unlikely to pass on their genes, animals have evolved a natural tendency to swim to the edge of a body of water. The Morris water maze, however, requires them to swim to a hidden platform towards the center of the maze - exactly opposite to their evolved behavior. Therefore the paddling maze should incorporate escape to the edge of the apparatus. This feature, coupled with the use of relatively non-aversive shallow water, embodies the "Refinement" aspect of the "3 Rs" of Russell and Burch8.
Various types of maze design were tried; the common feature was that the water was always shallow (2 cm deep) and escape was via a tube piercing the transparent wall of the apparatus. Other tubes ("false exits") were also placed around the walls but these were blocked off. From the inside of the maze all false exits and the single true exit looked the same. Currently a dodecagonal (12-sided) maze is in use in Oxford, with 12 true/false exits set in the corners. In a recent development a transparent paddling Y-maze has been tested successfully.

Shallow Water Paddling Variants of Water Maze Tests in Mice

Mice can swim, but many strains appear to find this activity stressful. To overcome this problem mazes have been devised where escape from shallow water is used to motivate behaviour. These have been demonstrated to support learning at least as good as the traditional and widely used Morris water maze.

マウスの水迷路試験の浅い水（スパンキング）バリアント

When Richard Morris devised his water maze in 19817, most behavioral work was done in rats. However, the greater understanding of mouse genetics led to ...

行動学

Marble Burying and Nestlet Shredding as Tests of Repetitive, Compulsive-like Behaviors in Mice

Obsessive-compulsive disorder (OCD) and autism spectrum disorders (ASD) are serious and debilitating psychiatric conditions and each constitutes a significant public health concern, particularly in children. Both of these conditions are highlighted by the repeated expression of meaningless behaviors. Individuals with OCD often show checking, frequent hand washing, and counting. Children with ASDs also engage in repetitive tapping, arm or hand flapping, and rocking. These behaviors can vary widely in intensity and frequency of expression. More intense forms of repetitive behaviors can even result in injury (e.g.&#160;excessive grooming, hand washing, and self-stimulation). These behaviors are therefore very disruptive and make normal social discourse difficult. Treatment options for repetitive behaviors in OCD and ASDs are somewhat limited and there is great interest in developing more effective therapies for each condition. Numerous animal models for evaluating compulsive-like behaviors have been developed over the past three decades. Perhaps the animal models with the greatest validity and ease of use are the marble burying test and the nestlet shredding test. Both tests take advantage of the fact that the target behaviors occur spontaneously in mice. In the marble burying test, 20 marbles are arrayed on the surface of clean bedding. The number of marbles buried in a 30 min session is scored by investigators blind to the treatment or status of the subjects. In the nestlet shredding test, a nestlet comprised of pulped cotton fiber is preweighed and placed on top of cage bedding and the amount of the nestlet remaining intact after a 30 min test session is determined. Presently, we describe protocols for and show movie documentation of marble burying and nestlet shredding. Both tests are easily and accurately scored and each is sensitive to small changes in the expression of compulsive-like behaviors that result from genetic manipulations, disease, or head injury.

Disease, head injury, genetic modifications, and treatment of mice with drugs can have profound effects on behavior. Utilizing well-characterized and validated approaches such as marble burying and nestlet shredding, compulsive-like behaviors can be documented accurately in mice as models of human obsessive-compulsive disorder and autism spectrum disorder.

マウスにおける反復、強迫様行動の試験などのガラス玉覆い隠しとNestletシュレッダー

Obsessive-compulsive disorder (OCD) and autism spectrum disorders (ASD) are serious and debilitating psychiatric conditions and each constitutes a ...

Operant Procedures for Assessing Behavioral Flexibility in Rats

Executive functions consist of multiple high-level cognitive processes that drive rule generation and behavioral selection. An emergent property of these processes is the ability to adjust behavior in response to changes in one&#8217;s environment (i.e., behavioral flexibility). These processes are essential to normal human behavior, and may be disrupted in diverse neuropsychiatric conditions, including schizophrenia, alcoholism, depression, stroke, and Alzheimer&#8217;s disease. Understanding of the neurobiology of executive functions has been greatly advanced by the availability of animal tasks for assessing discrete components of behavioral flexibility, particularly strategy shifting and reversal learning. While several types of tasks have been developed, most are non-automated, labor intensive, and allow testing of only one animal at a time. The recent development of automated, operant-based tasks for assessing behavioral flexibility streamlines testing, standardizes stimulus presentation and data recording, and dramatically improves throughput. Here, we describe automated strategy shifting and reversal tasks, using operant chambers controlled by custom written software programs. Using these tasks, we have shown that the medial prefrontal cortex governs strategy shifting but not reversal learning in the rat, similar to the dissociation observed in humans. Moreover, animals with a neonatal hippocampal lesion, a neurodevelopmental model of schizophrenia, are selectively impaired on the strategy shifting task but not the reversal task. The strategy shifting task also allows the identification of separate types of performance errors, each of which is attributable to distinct neural substrates. The availability of these automated tasks, and the evidence supporting the dissociable contributions of separate prefrontal areas, makes them particularly well-suited assays for the investigation of basic neurobiological processes as well as drug discovery and screening in disease models.

The ability to assess executive functions such as behavioral flexibility in rats is useful for investigating the neurobiology of cognition in both intact animals and disease models. Here we describe automated tasks for assessing strategy shifting and reversal learning, which are particularly sensitive to disruptions in prefrontal cortical networks.

ラットの行動の柔軟性を評価するためのオペラント手順

Executive functions consist of multiple high-level cognitive processes that drive rule generation and behavioral selection. An emergent property of these ...

Asymmetric Walkway: A Novel Behavioral Assay for Studying Asymmetric Locomotion

Behavioral assays are commonly used for the assessment of sensorimotor impairment in the central nervous system (CNS). The most sophisticated methods for quantifying locomotor deficits in rodents is to measure minute disturbances of unconstrained gait overground (e.g., manual BBB score or automated CatWalk). However, cortical inputs are not required for the generation of basic locomotion produced by the spinal central pattern generator (CPG). Thus, unconstrained walking tasks test locomotor deficits due to motor cortical impairment only indirectly. In this study, we propose a novel, precise foot-placement locomotor task that evaluates cortical inputs to the spinal CPG. An instrumented peg-way was used to impose symmetrical and asymmetrical locomotor tasks mimicking lateralized movement deficits. We demonstrate that shifts from equidistant inter-stride lengths of 20% produce changes in the forelimb stance phase characteristics during locomotion with preferred stride length. Furthermore, we propose that the asymmetric walkway allows for measurements of behavioral outcomes produced by cortical control signals. These measures are relevant for the assessment of impairment after cortical damage.

Here, we present a protocol to quantify precise stepping in rodents. Cortical and the spinal central pattern generator signals are required for precise foot-placement during obstructed locomotion. We report here the novel constrained walking task that directly examines precise stepping behavior.

非対称遊歩道：非対称歩行研究のための新しい行動アッセイ

Behavioral assays are commonly used for the assessment of sensorimotor impairment in the central nervous system (CNS). The most sophisticated methods for ...

Assessment of Cocaine-induced Behavioral Sensitization and Conditioned Place Preference in Mice

It is thought that rewarding experiences with drugs create strong contextual associations and encourage repeated intake. In turn, repeated exposures to drugs of abuse make lasting alterations in the brain function of vulnerable individuals, and these persistent alterations likely serve to maintain the maladaptive drug seeking and taking behaviors characteristic of addiction/dependence2. In rodents, reward experience and contextual associations are frequently measured using the conditioned place preference assay, or CPP, wherein preference for a previously drug-paired context is measured. Behavioral sensitization, on the other hand, is an increase in a drug-induced behavior that develops progressively over repeated exposures. Since sensitized behaviors can often be measured after several months of drug abstinence, depending on the dose and length of initial exposure, they are considered observable correlates of lasting drug-induced plasticity. Researchers have found these assays useful in determining the neurobiological substrates mediating aspects of addiction as well as assessing the potential of different interventions in disrupting these behaviors. This manuscript describes basic, effective protocols for mouse CPP and locomotor behavioral sensitization to cocaine.

This protocol is intended to enable researchers to conduct experiments designed to test these aspects of addiction using the conditioned place preference and locomotor behavioral sensitization assays.

コカイン誘発性行動感作の評価とマウスにおける条件付け場所嗜好

It is thought that rewarding experiences with drugs create strong contextual associations and encourage repeated intake. In turn, repeated exposures to ...

The Rodent Psychomotor Vigilance Test (rPVT): A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article describes a rodent version of the PVT&#8212;termed the &#34;rPVT&#34;&#8212;that measures similar aspects of attention (i.e., performance accuracy, motor speed, premature responding, and lapses in attention). Data are presented that demonstrate both the short- and long-term usefulness of the rPVT when employed with laboratory rats. Rats easily learn the rPVT, and learning to perform the basic procedure takes less than two weeks of training. Once acquired, rat performances in the rPVT show a high degree of similarity to these same performance measures in the human PVT, including similarities in, lapses in attention, reaction times, vigilance decrements across session time (i.e., the human &#34;time-on-task&#34; effects), and the response-stimulus interval (RSI) effect described for humans. Thus the rPVT can be an extremely valuable tool for assessing the effects of a wide range of variables on sustained attention quite similar to human PVT performances, and thus can be useful for developing novel treatments for neurobehavioral dysfunctions.

The Rodent Psychomotor Vigilance Test rPVT: A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

A rat version of the human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is described that measures aspects of attention similar to those measured with the human PVT, including aspects of human vigilance such as performance accuracy, motor speed, premature responding, and lapses in attention.

げっ歯類精神運動警戒試験（rPVT）：ラットとマウスの神経行動のパフォーマンスを評価するための方法

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article ...

Assessing Working Memory in Children: The Comprehensive Assessment Battery for Children &#8211; Working Memory (CABC-WM)

The Comprehensive Assessment Battery for Children - Working Memory (CABC-WM) is a computer-based battery designed to assess different components of working memory in young school-age children. Working memory deficits have been identified in children with language-based learning disabilities, including dyslexia1,2 and language impairment3,4, but it is not clear whether these children exhibit deficits in subcomponents of working memory, such as visuospatial or phonological working memory. The CABC-WM is administered on a desktop computer with a touchscreen interface and was specifically developed to be engaging and motivating for children. Although the long-term goal of the CABC-WM is to provide individualized working memory profiles in children, the present study focuses on the initial success and utility of the CABC-WM for measuring central executive, visuospatial, phonological loop, and binding constructs in children with typical development. Immediate next steps are to administer the CABC-WM to children with specific language impairment, dyslexia, and comorbid specific language impairment and dyslexia.

Working memory predicts a significant amount of variance for a variety of cognitive tasks, including speaking, reading, and writing. However, few tools are available to assess working memory in children. We present an innovative, computer-based battery that comprehensively assesses different components of working memory in school-age children.

子供の働く記憶を評価する：子供のための総合評価バッテリー - ワーキングメモリ（CABC-WM）

The Comprehensive Assessment Battery for Children - Working Memory (CABC-WM) is a computer-based battery designed to assess different components of ...

Systematic Assessment of Well-Being in Mice for Procedures Using General Anesthesia

In keeping with the 3R Principle (Replacement, Reduction, Refinement) developed by Russel and Burch, scientific research should use alternatives to animal experimentation whenever possible. When there is no alternative to animal experimentation, the total number of laboratory animals used should be the minimum needed to obtain valuable data. Moreover, appropriate refinement measures should be applied to minimize pain, suffering, and distress accompanying the experimental procedure. The categories used to classify the degree of pain, suffering, and distress are non-recovery, mild, moderate, or severe (EU Directive 2010/63). To determine which categories apply in individual cases, it is crucial to use scientifically sound tools.
The well-being-assessment protocol presented here is designed for procedures during which general anesthesia is used. The protocol focuses on home cage activity, the Mouse Grimace Scale, and luxury behaviors such as burrowing and nest building behavior as indicators of well-being. It also uses the free exploratory paradigm for trait anxiety-related behavior. Fecal corticosterone metabolites as indicators of acute stress are measured over the 24-h post-anesthetic period.
The protocol provides scientifically solid information on the well-being of mice following general anesthesia. Due to its simplicity, the protocol can easily be adapted and integrated in a planned study. Although it does not provide a scale to classify distress in categories according to the EU Directive 2010/63, it can help researchers estimate the degree of severity of a procedure using scientifically sound data. It provides a way to improve the assessment of well-being in a scientific, animal-centered manner.

We developed a protocol to assess well-being in mice during procedures using general anesthesia. A series of behavioral parameters indicating levels of well-being as well as glucocorticoid metabolites were analyzed. The protocol can serve as a general aid to estimate the degree of severity in a scientific, animal-centered manner.

全身麻酔を使用してプロシージャのマウスにおける体系的な評価

In keeping with the 3R Principle (Replacement, Reduction, Refinement) developed by Russel and Burch, scientific research should use alternatives to animal ...

Assessing Activity-based Anorexia in Mice

Rodents develop activity-based anorexia (ABA) when exposed to a restricted feeding schedule and allowed free access to a running wheel. These conditions lead to a life-threatening reduction in body weight. However, rodents exposed to only one of these conditions ultimately adapt to re-establish normal body weight. Although increased running coupled with reduction in voluntary food intake appear paradoxical under ABA conditions, ABA behavior is observed across numerous mammalian species. 
The ABA paradigm provides an animal model for anorexia nervosa (AN), an eating disorder with severe dysregulation of appetite-behavior. Subjects are singly housed with free access to a running wheel. Each day, the subject is offered food for a limited amount of time. During the course of the experiment, a subject's body weight decreases from high activity and low caloric intake. The duration of the study varies based on how long food is offered daily, the type of food offered, the strain of mouse, if drugs are being tested, and environmental factors.
A lack of effective pharmacological treatments for AN patients, their low quality of life, high cost of treatment, and their high mortality rate indicate the urgency to further research AN. We provide a basic outline for performing ABA experiments with mice, offering a method to investigate AN-like behavior in order to develop novel therapies. This protocol is optimized for use in Balb/cJ mice, but can easily be manipulated for other strains, providing great flexibility in working with different questions, especially related to genetic factors of ABA.

Mice individually housed with a running wheel while given limited access to food develop reductions in food consumption and increase activity on the running wheel. This experimental phenomenon is called activity-based anorexia. This paradigm provides an experimental tool for studying the neurobiology and behaviors underlying aspects of anorexia nervosa.

マウスでの拒食症のアクティビティ ベースの評価

Rodents develop activity-based anorexia (ABA) when exposed to a restricted feeding schedule and allowed free access to a running wheel. These conditions ...

The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by many patients prompts the need to develop new therapeutic alternatives and to better understand the etiology of the disorder. Pre-clinical models with translational merits are rudimentary for this task. Here we present a protocol for the unpredictable chronic mild stress (UCMS) method in mice. In this protocol, adolescent mice are chronically exposed to interchanging unpredictable mild stressors. Resembling the pathogenesis of depression in humans, stress exposure during the sensitive period of mice adolescence instigates a depressive-like phenotype evident in adulthood. UCMS can be used for screenings of antidepressants on the variety of depressive-like behaviors and neuromolecular indices. Among the more prominent tests to assess depressive-like behavior in rodents is the sucrose preference test (SPT), which reflects anhedonia (core symptom of depression). The SPT will also be presented in this protocol. The ability of UCMS to induce anhedonia, instigate long-term behavioral deficits and enable reversal of these deficits via chronic (but not acute) treatment with antidepressants strengthens the protocol&#39;s validity compared to other animal protocols for inducing depressive-like behaviors.

Here we present the unpredictable chronic mild stress protocol in mice. This protocol induces a long-term depressive-like phenotype and enables to assess the efficacy of putative antidepressants in reversing the behavioral and neuromolecular depressive-like deficits.

マウスで無快感を誘導するため予測不可能な慢性的な軽度ストレス プロトコル

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

行動のバッテリー テスト評価の一般的な運動、筋肉の強さと連携マウス

行動のバッテリーテスト評価の一般的な運動、筋肉の強さと連携マウス