Lo scopo della ricerca è la riparazione dell'osso endocondrale mandibolare. Il nostro obiettivo è quello di sviluppare una tecnica per la frattura mandibolare non stabilizzata con perdita ossea minima e lesione dei tessuti molli per rappresentare al meglio il processo di riparazione dell'osso endocondrale. Il processo di riparazione ossea è influenzato dalle forze esercitate sull'osso calloso e dipende dalle sedi anatomiche.
Pochi autori riportano lo studio della riparazione dell'osso mandibolare. La diffusione del nostro protocollo faciliterà lo sviluppo della ricerca in questo specifico campo. Il nostro protocollo ha il vantaggio di evitare un'eccessiva perdita ossea e danni ai tessuti molli nel sito della frattura dell'osso mandibolare per rappresentare al meglio la riparazione dell'osso endocondrale.
Per iniziare, posizionare il topo anestetizzato sulla schiena su una piastra riscaldante coperta da un campo sterile mantenuto a 37 gradi Celsius durante tutta la procedura. Applicare lubrificante per gli occhi su entrambi gli occhi per prevenire la secchezza causata dall'anestesia generale. Applicare una maschera sul muso per l'inalazione continua di isoflurano.
Quindi fissare le estremità del mouse con del nastro adesivo. Dopo aver indossato i guanti sterili, disinfettare la pelle con diverse spruzzi di soluzione di iodio povidone al 10% e alcol. Per eseguire l'approccio cutaneo sottomandibolare, utilizzando delle micro forbici, praticare un'incisione cutanea dall'angolo mandibolare fino alla giunzione del ramo orizzontale della mandibola.
Sezionare i tessuti sottocutanei per esporre il muscolo massetere. Ora usa un elevatore periostale per staccare gli attacchi del muscolo massetere dal bordo inferiore della mandibola. Elevare il muscolo massetere su un piano sottoperiostale lungo il ramo mandibolare con l'elevatore.
Utilizzando il dispositivo piezoelettrico per la chirurgia ossea con irrigazione con siero salino anteriormente all'angolo mandibolare nella parte posteriore della concavità, creare una piccola osteotomia al bordo inferiore della mandibola. Individua il bordo posteriore della mandibola e la tacca coronoidea. Quindi completare la frattura utilizzando piccole forbici diritte inserite lungo il ramo mandibolare per evitare ulteriori aperture muscolari e lesioni.
Posizionare le forbici perpendicolarmente al bordo inferiore della mandibola per consentire il corretto orientamento della frattura. Ora controlla la totale mobilità tra i due segmenti ossei durante una manipolazione delicata con una pinza per garantire la frattura completa. Chiudere l'incisione cutanea utilizzando punti separati.
Eseguire radiografie laterali cefaliche per verificare la direzione della frattura. Prepara una gabbia per topi senza crocchette e arricchimento duro per prevenire qualsiasi forza masticatoria. Isolare il topo operato in una gabbia singola per la prima settimana fino a quando la pelle non è completamente guarita.
Somministrare buprenorfina per iniezione sottocutanea a 4, 24, 48 e 72 ore dopo la procedura. Nutrire i topi con un gel dietetico morbido dal giorno zero alla fine del periodo di consolidamento per evitare dolore e spostamento secondario della frattura. Pesare i topi ogni giorno dal giorno zero al quarto giorno dopo la frattura al mattino prima dell'iniezione di buprenorfina, e poi tre volte alla settimana fino al sacrificio animale.
Le immagini istologiche confermano lo sviluppo di un callo molle con stampo cartilagineo 14 giorni dopo la frattura in un topo wild type.
