Distruzione genica ad alta efficienza nei macrofagi primari derivati dal midollo osseo utilizzando complessi elettroporati Cas9-sgRNA

Il nostro laboratorio studia l'interazione tra micobatterio, tubercolosi e sistema immunitario dell'ospite, con particolare attenzione all'interazione iniziale tra il batterio e il macrofago. C'è una varietà di tecniche di distruzione genica utilizzate nei macrofagi, comprese le tecnologie RNAi e le tecnologie CRISPR. Una delle principali sfide è la bassa efficienza della distruzione genica nei macrofagi.

Questo protocollo consente la manipolazione genetica rapida e ad alta efficienza dei macrofagi primari senza la necessità di clonazione e costruzione plasmidici. Questi metodi dovrebbero essere ampiamente applicabili in immunologia, consentendo ai ricercatori di interrompere i geni nei macrofagi primari per un'ampia gamma di studi.