שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בביולוגיה של התא, כגון, עד כמה חשוב המתח בסיפוק מחסום הציר, ומהו התפקיד על חיבור ציר בהתנהגות כרומוזום במיוזיס? היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שזו טכניקה לא תלותית המאפשרת לנסיין להחיל מתח על, או למקם מחדש כרומוזומים בתא חי. כדי להתחיל, להכין שקופית 75 על 25 מילימטר עם חור עגול בקוטר 20 מילימטר לחתוך מהמרכז.
לאחר מכן, לרוץ 25 על ידי 25 מילימטר מספר 1.5 לכסות חתוך דרך להבה מבער bunsen במשך שתי שניות. החל גריז ואקום סביב קצה החור בשקופית הזכוכית. לאחר מכן, מניחים את החלקת הכיסוי מעל החור ולחץ עליו כדי ליצור חותם הדוק.
הופכים את הגלישה וממלאים היטב את הניתוח החדש שנוצר בשמן ההלוקרבון. לאחר קבלת כמה צרצרים זכר בוגרים, להשתמש במספריים לנתח לחתוך דרך פני הגב במקביל לציר הארוך של הבטן, ישירות מאחורי ניצני הכנף. לאחר מכן, בעדינות לסחוט את הבטן כדי לדחוף את האשכים דרך החתך של השלד החיצוני.
באמצעות מדפים, למקם את האשכים המבודדים לתוך הניתוח היטב. מתחת למיקרוסקופ המ לנתח, השתמש במדפים מצביעים עדין כדי לחלק את האשכים לחתיכות קטנות יותר, ולהסיר כל שומן. לאחר מכן, להפיץ את התוכן של האשכים מתחת לשמן על פני השטח של חריץ הכיסוי.
המשך להפיץ את תכולת האשכים עד שחלק ההתפשטות בקושי נראה לעין בלתי. בארות ניתוח טעונות שמן נוספות עשויות לשמש במידת הצורך. ראשית, מניחים את הקצה של צינור זכוכית בלהבה של מבער בונזן.
החזק את קצה הצינור כדי ליצור זווית של 150 מעלות ושער מורחב של צינורות זכוכית צרים. יש לשבור את הצינורות באזור הדק כך שהאזור הדק המשתרע מהזווית שנוצרה קודם לכן יהיה באורך של כ-10 מילימטרים. באמצעות המיקרופורג', ממיסים את קצה מחט הזכוכית ויוצרים זווית של 45 מעלות בין המחט לחוט הפלטינה של המיקרופורג'.
לאחר מכן, למשוך את הזכוכית מן החוט בעת ובעונה אחת לכבות את החום. מקם את השקופית שהוכנה קודם לכן על הבמה של מיקרוסקופ ניגודיות פאזה הפוך. לאחר מכן, מצא את התאים המפרידים ומרכז אותם בשדה התצוגה באמצעות ההגדלה הנמוכה ביותר האפשרית.
מניחים את המיקרונידל במחזיק המחט של המיקרומניפולטור. לאחר מכן, מקם ידנית את המיקרונידל בנתיב האור של המיקרוסקופ. מקד את המיקרוסקופ מספר מישורי מוקד מעל המישור המכיל את התאים.
לאחר מכן, השתמש בבקר מוט ההיגוי כדי למקם מחדש את המיקרונידל מספר פעמים כדי למצוא את צל המחט בגרזני x ו- y. להתאים מחדש את מיקום המחט עד המיקום של הקצה גלוי, ולאחר מכן, להתאים את המיקום של המחט לאורך ציר z עד הקצה הוא בפוקוס. לאחר מכן, התמקדו מחדש בתאים, ומקדו את המיקרוסקופ ממש מעל מישור התא.
לאחר מכן, תן מחדש את מיקום המחט כך שהקצה יהיה בפוקוס במישור המוקד הזה. חזור על תהליך זה באמצעות מטרת ההגדלה הגבוהה יותר והגדרת רגישות גבוהה יותר. פוקוס מחדש על התאים, ולהתאים את מיקומם, כך שהם נשארים במרכז שדה המבט.
השתמש בהיגוי כדי לשלוט במיקרונידל כשהוא דוחף כרומוזומים בתוך התא. ודא קצה המחט נשאר במישור מעל התאים. כדי להזיז את הכרומוזום, התמקד כרומוזום ליד החלק העליון של התא.
לאחר מכן, להתאים את ציר z על מוט ההיגוי כדי להביא את קצה המחט לפוקוס, ולהזיז את המחט עם מוט ההיגוי ב x ו- y. מניחים את קצה המחט ישירות על כרומוזום של עניין, ולדחוף אותו בכיוון הרצוי. החל מספיק מתח כדי להפריד את הכרומוזום מן הציר.
לבסוף, מניחים את הכרומוזום בכל מקום בתוך התא. באמצעות פרוטוקול זה, ניתן למקם מחדש, להחיל מתח על, ולנתק לחלוטין כרומוזום מתרד באמצעות micromanipulation. בדוגמה זו, שני כרומוזומים מניפולציה נשמרו מלהיות מחוברים מחדש לתרד על ידי דחיפה מתמדת עם מחט מיקרומניפולציה.
לאחר השליטה, ניתן להכין דגימות למניפולציה, ואת micromanipulator יכול להיות ממוקם בתוך 15 עד 20 דקות. ניסויי מיקרו-ניהול יכולים להימשך בין כמה שניות למספר שעות. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור לתפעל כרומוזומים בצד התא הרחוק ביותר מתיק הכיסוי.
לאחר התפתחותה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום הביולוגיה של התא לחקור את מחסום הצירים ב חגבים וגמל שלמה מתפלל.
