הפרוטוקולים הבאים יתקבלו תחת של אוניברסיטת מרילנד אכפת חיה מוסדיים שימוש הוועדה וכן את הועד המוסדי. הפרוטוקולים בצע סטנדרטים הפדרלי, המדינה והמקומיים ולאחר ההנחיות שנקבעו על ידי המדיניות באוניברסיטת מרילנד על אבטחה.
1. ניתוח העין מדגם
<ol><li>
להשיג דוגמה העין של הבנק המקומי בית מטבחיים או רקמות. אם מתקבל של הגלובוס כולו עיניים, מיד לחלץ את העדשה zonules צמוד, הזגוגיות. הערה: הפרטים הספציפיים המתוארים להלן מתייחסים העיניים חזירי והן האנושית.<ol>
<li>באמצעות מספריים כירורגיים מחוטא ומלקחיים, לחתוך ולהסיר את כל עודפי למגר את sclera.</li>
		<li>להחזיק את העין בצד שלה וביציבות, באמצעות סכין גילוח, עושים חתך קטן לאורך הצד של העין 3 מ מ בלבד הקרנית. להפוך את העמוקה לחתוך מספיק כדי הגיעו את הזגוגיות בתוך העין.</li>
		<li>בעזרת מספריים, לחתוך בזהירות לאורך החתך סביב ההיקף של העין. הימנע ניקב את העדשה. תמונת הנציגה מוצג באיור 2א.</li>
		<li>לאחר כבר לחתוך את ההיקף החיצוני של העין, להסיר את הרקמה האחורי של העין באמצעות מלקחיים. לבודד את העדשה, zonules, גוף ריסי, את הזגוגיות המצורפת עם מלקחיים. תמונת הנציגה מוצג באיור 2B.</li>
		<li>באמצעות מספריים מלקחיים, להסיר את עודף הזגוגיות ולכן העדשה יכולה להשתטח על ה-MLS. הערה: במקרים של הקרנית להשתלה, לחצן הקרנית משמש בניתוח, שאר העולם זמינה למטרות מחקר. עם זאת, ניתן להשתמש חלקי העולם הזה עדיין בהכנת רקמות של ההתקנה האלונקה עדשה. אם רק האחורי מתקבל, לבצע רק שלב 1.1.4–1.1.5.</li>
	</ol>
</li>
	<li>לחטא את כל ציוד משומש לנתיחה שלאחר בפתרון אקונומיקה 15% למשך 30 דקות.</li>
</ol>2. ניסיון הרכבה של האלונקה מדריך עדשה
<ol><li>הכנס תחתית הנעל 10 מ מ, והחלק העליון נעל המתאימה לתוך צלחת התחתון של ה-MLS אז נותר פער של 5 מ מ בין הקיר האחורי של כניסת נעל את הנעל עצמה.</li>
	<li>יישר את לוחות עליונים ותחתונים, הצמדת הלוחות יחד; המכשיר נמצא כעת במצב unstretched.</li>
	<li>הכנס את הצלחות לתוך המארז צלחת וכל הבורג בסימפטומים ולא במחלה עצמה לתוך החור ממוקם לצד צלחת התחתון.</li>
	<li>להכניס את המקרה צלחת הבסיס, למקם את הברגים כניסות מיושר.</li>
	<li>סובב את מפתח הברגים עם כיוון השעון עד שהוא מגיע הבורג לעצור כדי לכווץ את הנעליים, ולסובב בחזרה נגד כיוון השעון כדי להחזיר את הנעליים unstretched למיקום המקורי.</li>
</ol>3. הרכבה של העדשה
<ol><li>הכנס את תחתית הנעל 10 מ מ לתוך צלחת התחתון של ה-MLS כך 5 מ מ הפער בין שרידים של הקיר האחורי של כניסת הנעל, הנעל עצמה.</li>
	<li>בעזרת מלקחיים מעוקל, המקום את פני העדשה שחולצו למעלה על אמצע צלחת התחתון כך הנעליים תומכים העדשה מעל החור המרכזי.</li>
	<li>הצמד העליון המקביל של הנעליים למקומו, מסיכה רק את zonules, את הזגוגיות. מבחינה ויזואלית להבטיח העדשה כפי ממורכז ככל האפשר על צלחת התחתון.</li>
	<li>חזור על שלבים 2.3 – 2.4.</li>
</ol>4. מדידה של העדשה
<ol><li>להציב מערכת הדמיה ישירות מעל המנגנון כדי ללכוד סרטי הווידאו והתמונות של תהליך מתיחה. הקפד לכלול סרגל מסגרת של תמונה תמונות במדויק הגודל של סולם בעיבוד שלאחר. הערה: כל מערכת הדמיה מתאימים מספיקה בשלב זה; כאן אנו משתמשים של 12 מגה פיקסל, החכם autofocusing שותק רגל אחת מדגם.</li>
	<li>בחוזקה אך בצורה חלקה, סובב את מפתח הברגים כיוון השעון כדי למתוח את העדשה. איור 3 מראה להחליפן בתמונות-המדינה unstretched ומתח.</li>
	<li>לאחר לצלם את העדשה נמתח, לסובב את. מפתח הברגים בכיוון השעון כדי לשחזר את המדגם למצבו מנוחתו. הערה: זה הכרחי כי המדד של העדשה מבוצעת מבעוד כדי למזער את התייבשות של העדשה.</li>
	<li>ברור לצלם המדינה מנוחתו הסופי של העדשה.</li>
</ol>5. ניתוח נתונים
<ol><li>להעלות את התמונה ImageJ, להשתמש בתכונה "נקודת" כדי לבחור לפחות 40 נקודות סביב ההיקף של העדשה כפי שמוצג באיור 4א. להשתמש באפשרות "למדוד" 'נתח' ← להניב את המיקום של כל נקודה שנבחרה.</li>
	<li>מתאים (באמצעות תוכנה כגון MATLAB) את מיקום הנקודות על-מנת לתת מתפלג של התאים כפי שמוצג באיור 4Bבעלת רדיוס. להמיר את רדיוס הפיקסל, שגיאה מדדים באמצעות הסרגל המצולם.</li>
	<li>לבצע שני זנב למבחן t להשוואת של העדשה בודדים לפני ואחרי מתיחה של ה-MLS.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Von Helmholtz, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uber+die+akkommodation+des+auges.">Uber die akkommodation des auges.</a> Arch Ophthal. 1, 1-74 (1855).</li><li>Schachar, R. A., Black, T. D., Kash, R. L., Cudmore, D. P., Schanzlin, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mechanism+of+accommodation+and+presbyopia+in+the+primate.">The mechanism of accommodation and presbyopia in the primate.</a> Ann Ophthalmol. 27, 58-67 (1995).</li><li>Glasser, A., Campbell, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Presbyopia+and+the+optical+changes+in+the+human+crystalline+lens+with+age.">Presbyopia and the optical changes in the human crystalline lens with age.</a> Vision Res. 38 (2), 209-229 (1998).</li><li>Reilly, M. A., Hamilton, P. D., Perry, G., Ravi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+the+behavior+and+natural+and+refilled+porcine+lenses+in+a+robotic+lens+stretcher.">Comparison of the behavior and natural and refilled porcine lenses in a robotic lens stretcher.</a> Exp Eye Res. 88, 483-494 (2009).</li><li>Langenbucher, A., Huber, S., Nguyen, N. X., Seitz, B., Gusek-Schneider, G. C., K&#252;chle, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+accommodation+after+implantation+of+an+accommodating+posterior+chamber+intraocular+lens.">Measurement of accommodation after implantation of an accommodating posterior chamber intraocular lens.</a> J Cataract Refract Surg. 29 (4), 677-685 (2003).</li><li>Ehrmann, K., Ho, A., Parel, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomechanical+analysis+of+the+accommodative+apparatus+in+primates.">Biomechanical analysis of the accommodative apparatus in primates.</a> Clin Exp Optom. 91 (4), 411 (2008).</li><li>Pinilla Cort&#233;s, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+Protocols+for+Ex+Vivo+Lens+Stretching+Tests+to+Investigate+the+Biomechanics+of+the+Human+Accommodation+Apparatus.">Experimental Protocols for Ex Vivo Lens Stretching Tests to Investigate the Biomechanics of the Human Accommodation Apparatus.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 56 (5), 2926 (2015).</li><li>Fisher, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+elastic+constants+of+the+human+lens.">The elastic constants of the human lens.</a> J Physiol. 212 (1), 147-180 (1971).</li><li>Eppig, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomechanical+eye+model+and+measurement+setup+for+investigating+accommodating+intraocular+lenses.">Biomechanical eye model and measurement setup for investigating accommodating intraocular lenses.</a> Z Med Ohys. 23 (2), 144-152 (2013).</li><li>Manns, F., Parel, , et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Response+of+Human+and+Monkey+Lenses+in+a+Lens+Stretcher.">Response of Human and Monkey Lenses in a Lens Stretcher.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 48 (7), 3260 (2007).</li><li>Scarcelli, G., Kim, P., Yun, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+measurement+of+age-related+stiffening+in+the+crystalline+lens+by+Brillouin+optical+microscopy.">In vivo measurement of age-related stiffening in the crystalline lens by Brillouin optical microscopy.</a> Biophys J. 101 (6), 1539-1545 (2011).</li><li>Besner, S., Scarcelli, G., Pineda, R., Yun, S. -. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vivo+Brillouin+Analysis+of+the+Aging+Crystalline+Lens.">In Vivo Brillouin Analysis of the Aging Crystalline Lens.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 57 (13), 5093 (2016).</li><li>Cortes, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+Protocols+for+Ex+Vivo+Lens+Stretching+Tests+to+Investigate+the+Biomechanics+of+the+Human+Accommodation+Apparatus.">Experimental Protocols for Ex Vivo Lens Stretching Tests to Investigate the Biomechanics of the Human Accommodation Apparatus.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 56 (5), 2926-2932 (2015).</li><li>Bernal, A., Parel, J. -. M., Manns, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+Posterior+Zonular+Fiber+Attachment+on+the+Anterior+Hyaloid+Membrane.">Evidence for Posterior Zonular Fiber Attachment on the Anterior Hyaloid Membrane.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 47 (11), 4708 (2006).</li><li>Kammel, R., Ackermann, R., Mai, T., Damm, C., Nolte, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pig+Lenses+in+a+Lens+Stretcher.">Pig Lenses in a Lens Stretcher.</a> Optom Vis Sci. 89 (6), 908-915 (2012).</li><li>Hahn, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+Ex+Vivo+Porcine+Lens+Shape+During+Simulated+Accommodation,+Before+and+After+fs-Laser+Treatment.">Measurement of Ex Vivo Porcine Lens Shape During Simulated Accommodation, Before and After fs-Laser Treatment.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 56 (9), 5332-5343 (2015).</li><li>D'Antin, J. C., Cortes, L. P., Montenegro, G. A., Barraquer, R. I., Michael, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+portable+manual+stretching+device+to+simulate+accommodation.">Evaluation of a portable manual stretching device to simulate accommodation.</a> Acta Ophthalmol. 93 (255), (2015).</li><li>Pierscionek, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+response+of+human+lenses+to+stretching+forces.">Age-related response of human lenses to stretching forces.</a> Exp Eye Res. 60 (3), 325-332 (1995).</li><li>Marussich, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+Crystalline+Lens+Volume+During+Accommodation+in+a+Lens+Stretcher.">Measurement of Crystalline Lens Volume During Accommodation in a Lens Stretcher.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 56 (8), 4239 (2015).</li><li>Martinez-Enriquez, E., P&#233;rez-Merino, P., Velasco-Ocana, M., Marcos, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OCT-based+full+crystalline+lens+shape+change+during+accommodation+in+vivo.">OCT-based full crystalline lens shape change during accommodation in vivo.</a> Biomed Opt Exp. 8 (2), 918-933 (2017).</li></ol>

AB יש זיקת Bioniko ייעוץ LLC.

לנו יש המציאו שיטה כדי לספק מדויק ויעיל דרך של הלומדים את היכולת לינה של העדשה על ידי ניצול מנגנון clamping כפול-חתיכת זוג את האלונקה לדגימת. במהלך לינה, העדשה מרגיע, ומפחית את הקוטר בתגובה הרפיה של4,192,1,zonular סיבים. השיטה מתמקדת תופעה זו על ידי מחבר חובק למעקה ושליטה על המתח של סיבי zonular. מסיבה זו, יש לקחת טיפול קריטיים כדי לצבוט את zonules בתוך הנעליים לחקות במדויק לינה עדשה פיזיולוגיים. כדי להבטיח מחבר חובק למעקה נכונה, העדשה צריכה לנוח שווידאתם מרכז הנעליים התחתון עם הזגוגיות מינימלי המצורפת. נוספים להקפיד בעת ושלפה כדי להבטיח מתיחה רדיאלי שווה מתבצע סביב היקף העדשה. אם העדשה מתיחה שנראה nonequivalent, או אם zonules להיות מנותקת את התפסים, הדגימה יש לטעון מחדש במידת האפשר.
פרוטוקולים מתיחה דומה של העדשה כעת במקדמי ללמוד לינה ו זוקן ראייה4,6,7,9,12. עם זאת, פרוטוקולים אלה הם בדרך כלל מורכבים ויקרים, הדורשים מכונות מורכבות, תוכנות. בנוסף, שיטות אלה דורשים עין כל דגימות-מעל $500.00 לכל ניסוי אשר עוד יותר מקטין אימוץ נרחב. פרוטוקול שלנו מגדילה את כדאיות על-ידי החלפת המכונה-התכנות עדשת ידני מתיחה זמינות המערכת, לדוגמה על-ידי דרישת רק שבריר של המדגם. . הצד האחורי הדרוש על העלויות עין באופן משמעותי פחות ב $250.00 לכל ניסוי. עם זאת, ישנן כמה מגבלות הקשורות פרוטוקול שלנו. כאמור, אי-התאמות של העדשה או שווים zonule מתח תגרום מתיחות המיותר. בנוסף, כוח משיכה חלה שאינו נמדד, ובכך מסתמך על מרקם של המשתמש כדי למנוע unclamping או קריעת zonules. אם zonules דמעה, חייב להיות מושלך המדגם כמו הנעליים MLS לא יוכל מספיק נכנעתי. המאמצים העתידיים יתמקד לכימות הכוח שימושית כדי להבטיח עקביות והרלוונטיות פיזיולוגיים. בנוסף, הפרוטוקול כרוך מתיחה צריך להיות מוגברת עד הופסקה על-ידי הבורג עצירה. מתיחה אפשרות, לכן, לשנותם או מגוונים בין דגימות ומציג מעדיף מדינה מלאה נמתח או unstretched בינארי.
מניעת או innovating לטיפול זוקן ראייה הוא מוקד מחקר עינית, כפי התנאי הוא כרגע בלתי נמנע וחשכה. עם זאת, ביומכניקה של לינה, זוקן ראייה הם לא מובן במלואו. פרוטוקול הציג מאפשר סימולציה מדויקת של העדשה מתיחה במהלך לינה תוך דרישת פחות חומר מדגם, התקן הבנייה, וזמן. על ידי הגדלת זמינות, השיטה מאפשרת עוד מעבדות להתבונן וללמוד על ביומכניקה של העדשה מקומות לינה.

לינה היא התהליך שבו העין האנושית הוא מסוגל באופן דינמי להתאים את צורת העדשה הגבישי שלה כדי לראות אובייקטים במרחקים רחוק או קרוב בפוקוס חדה. לינה היא תהליך מהותי ביו-מכני. על גירוי העצבים, השרירים ciliary לייצר כוח על גוף ריסי וכדי את הסיבים zonule לצרף ההיקף של עדשה כמוסה1,2. בעוד ישנן תיאוריות שונות מאחורי ביומכניקה של מקומות לינה, הכי נפוצה ומקובלת היא ההשערה הלמהולץ. על-פי ההשערה, העדשה היא במצב מתוח טבעי, התואם לצורה הדק של העדשה אשר אופטימאלית המוקד של עצמים רחוקים. כדי לשנות את המיקוד על עצמים קרובים יותר, ciliary השרירים מתכווצים, הסיבים zonular רגועות. בתורו, העדשה מסתבכת, הגדלת את עקמומיות משטח anterior ואת אחורי. זה תואם עלייה במחירי החשמל dioptric אשר יש צורך ליד חזון, לכן, אורך מוקד קצר יותר1.
היכולת להכיל בסכנה לאורך זמן באמצעות תנאי בשם זוקן ראייה. זוקן ראייה להשפיע על כולם בגיל 50, גורם לעין אפשרות לשנות באופן דינאמי את המוקד מן רחוק כדי לסגור את המרחקים3. כדי להילחם זוקן ראייה, שיטות הנוכחי הן סבילות כולל עדשות מתקנות, משקפיים. תוך הגדלת היכולת להתמקד באובייקטים קרובים-כמה מטוסים, טיפולים פאסיביים כאלה לא יכול לשחזר את היכולת מיקוד דינמי של עדשה4,5. על מנת לטפל ביעילות זוקן ראייה, או אולי למנוע את זה, אין צורך מתמשך להבין טוב יותר את לינה.
ללמוד עדשה לינה, פותחו מספר התקנים כדי לדמות את התופעה שמחוץ4,6,7,8,9. ספינינג דיסקים הוכנסו הראשון כדי לפקח על מתיחה של העדשה באמצעות כוחות צנטריפוגלי8. כדי להעתיק במדויק יותר את התופעה, עדשה מתיחה היו בהדרגה הציג והתקנים מומצאים. משתמש עם עדשה אלונקה, מנס ואח. אפיינו את הכוח הנדרש כדי להכיל את העדשה תוך מתאם כזה כוח העדשה, קוטר המשוונית9. ההבנה הנוכחית היא כי העדשה נעמד לו עם הגיל, וכתוצאה מכך שינוי מופחתת במצב עדשה בתגובה כוח שווה גוף ריסי3,10,11,12.
אלונקות עדשה הנוכחי לעתים קרובות כרוך תהליך מורכב, יישום אלקטרוניקה ושיעורי מתיחות לתכנות, ודורש כל גופה גלגל העין6,7,10,13. דרישה זו מגבירה את העלות לכל ניסוי כדי מעל $500.00 לכל עין ומקטינות מדגם זמינות. כאן אנו מציגים שיטה כדי לשכפל את העדשה לינה במחיר נמוך ככל שהעין האחורי סיכומים בסביבות $200.00. זמן פחות מתוחכמים יותר התקנים רבים בשימוש כיום, השיטה היא הרבה יותר חסכוני וגם לאימוץ מבלי להתפשר על תוצאות. שיטה זו גולת הכותרת אלונקה מדריך עדשה (MLS) מתואר באיור1, ומשתמש clamping מערכת ייחודי על הסיבים zonular, שיטה ומפותלים רדיאלי כדי להרחיב את קוטר העדשה. דיוק פיזיולוגיים של הפרוטוקול תאומת על-ידי הממצאים של ברנל ואח., מי למד השביל שבו הסיבים zonular anterior ואת אחורי מחובר עדשה כמוסה14. באמצעות עיצוב נעליים מותאמות אישית אשר דורשים רק את העדשה zonule, גוף ריסי, כיוונו ללמוד עדשה ביומכניקה על-ידי שכפול לינה פיזיולוגיים.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:856px;" width="856">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:191px;">Manual Lens Stretcher</td>
			<td style="width:233px;">Bioniko</td>
			<td style="width:132px;">MLS</td>
			<td style="width:300px;">Different animal species will require different shoe sizes</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Porcine Eye Samples</td>
			<td>George G. Ruppersberger; slaughterhouse</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Whole eyeballs were obtained</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Human Eye Samples</td>
			<td>The National Disease Research Interchange</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Posterior poles without corneas were ordered</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Dissecting Scissors (5 1/2&#39;&#39; Straight)</td>
			<td>Electron Microsopy Sciences</td>
			<td>72960</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tissue Forceps (4 1/2&#39;&#39;)</td>
			<td>Electron Microsopy Sciences</td>
			<td>72960</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">iPhone 6s</td>
			<td>Apple</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Any imaging system with ~0.1 mm resolution will work</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Sodium Hypochorite</td>
			<td>Clorox</td>
			<td>Clorox Regular-Bleach</td>
			<td>Any disinfectant will work</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

simulating the mechanics of lens accommodation via a manual lens stretcher

המטרה של פרוטוקול זה היא לחקות את ביומכניקה של לינה פיזיולוגיים באופן יעיל, מעשי. לינה מושגת דרך ההתכווצות של הגוף ריסי והרפיה של סיבי zonule, שתוצאתה התקרשות של העדשה הדרושות ליד חזון. כאן, נציג של הרומן, שיטה פשוטה שבה לינה המשוכפלים באמצעות מקשיח את zonules מחובר הקפסולה העדשה באמצעות אלונקה מדריך עדשה (MLS). שיטה זו מנטרת מושגת על ידי עדשה כאשר נתון עקבי כוח מתיחה רדיאלי ומאפשר השוואה של התאמת עדשות, אשר יכול להיות מתוח, כדי שאינו אדיב עדשות, אשר לא ניתן למתוח. חשוב מכך, האלונקה זוגות את zonules ישירות, ולא את sclera של העין, וכך רק מצריכים את העדשה, zonules, ועל גוף ריסי ולא המדגם בכל כדור הארץ. הפרש זה יכול להפחית באופן משמעותי את העלות של רכישת עדשות גווייה התורמים מאת על 62% לעומת רכישת של כל העולם.

העיניים חזירי, מדגם נפוצות ללמוד זוקן ראייה דרך העדשה מתיחה4,15, התקבלו, (n = 10) בית מטבחיים מקומיים, פרוטוקול זה שימש כדי לבחון את היכולת לינה של העדשות. איור 5 A מציג ההשוואה של העדשה חזירי לפני ואחרי מתיחת באמצעות ה-MLS. חלה עלייה 0.07 מ מ ± ממוצע 0.19 ברדיוס העדשה כאשר נמתח (p < 0.001), שווה עלייה 1.62% 4.2 ± מ רדיוס המקורי. לינה הוא מתואם עם עדשה אלסטיות, לכן, ההבדל רדיאלי בין העמדה unstretched ומתח מציע את היכולת להכיל. מצאנו גידול עקבי רדיוס עדשה שלאחר מתיחת, אשר הוא מסכים עם מחקרים דומים16,17. עקביות וסטיות נמוכה יחסית בתוך המחקר עוד יותר מאמת את הפרוטוקול שלנו.
פרוטוקול זה מאפשר השוואת עדשות אדיב וגם תהססו. ההבדל רדיאלי גדול בין מצבו unstretched מצביע על יכולת טובה יותר כדי להכיל. כדי לתת תוקף נוסף הפרוטוקול, הבחנו יכולות אירוח האנושית כפונקציה של גיל. בדקנו ילדה בת 21 ו- 60 בן העין האנושית (הלאומית מחלות מחקר מחלף, פילדלפיה, PA). התוצאות, כמוצג באיור 5B, הצביעו על ירידה ביכולת להכיל עם הגיל. עדשה בת 21 הרדיוס גדל 0.22 ± 0.13 מ"מ או 5.2% על מתיחות בהשוואה 0.0059 ± 0.099 מ"מ או 0.14% הגידול של העדשה בת 60. הוכח כי עדשות האדם לאבד בהדרגה את היכולת להכיל עם גיל3. תוצאות אלו הראו הבדל קטן יותר בין הרדיוס מתוח, unstretched של העדשה בת 60 לעומת העדשה בת 21, המציינת את אובדן יכולת לינה. העדשה אדם מבוגר הוכחת יכולת ירידה של למתוח הוא מסכים עם מחקרים דומים על לינה כפונקציה של גיל8,18,20.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57162/57162fig1.jpg"> איור 1 : סכימטי של האלונקה מדריך עדשה. (א) שהורכב מרכיבי ה-MLS, לרבות נעליים, תיק צלחת, הלוח העליון, הצלחת התחתונה. (B) דיאגרמה נציג של הנעליים מחובר בצורה רדיאלית המדגם. (ג) Clamped הנעל בו zonules (לא בתמונה) הם מחוברים ומתח. <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57162/57162fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57162/57162fig2.jpg"> איור 2 : להחליפן בתמונות של פרוטוקול לנתיחה. (א) הדגימה העין רוכז, החתך הראשוני לאורך העולם ייעשה כ 3 מ מ הקרנית. (B) העולם העין כראוי נחתך סביב והיקפו. (ג) האחורי בסקלרה הופרד לחלוטין מן העולם,. (ד) העדשה הזגוגיות, zonules, גוף ריסי להיות מבודדת מן העולם. <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57162/57162fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57162/57162fig3.jpg"> איור 3 : תמונת הנציגה של העדשה unstretched ומתיחה באמצעות ה-MLS. (א) העדשה מוחזקת בתוך המכשיר, לפני ושלפה, בעמדה שלו unstretched. (B) המכשיר מופעל בצורה רדיאלית באמצעות הברגים, כפי העדשה נמתחת לתוך מעמדה מוארך. סרגל קנה מידה = 10 מ מ. <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57162/57162fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57162/57162fig4.jpg"> איור 4 : להחליפן בתמונות מניתוח הנתונים של העדשה דגימות. (א) 50 נבחרים נקודות נבחרו על היקף המדגם עדשה באמצעות תוכנת ImageJ. (B) רדיוס מחושב פיקסלים 37.4955 והיה הערך מהתפלגות חי-בריבוע של התאים 0.77636 פיקסלים. תוצאות אלו ישתנו מן העדשה-כדי-עדשה, יש להמיר את הפיקסלים מטרי יחידות באמצעות הסרגל המצולם. <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57162/57162fig4large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57162/57162fig5v2.jpg"> איור 5 : רדיוס עדשה לפני ואחרי מתיחה באמצעות מדריך עדשה האלונקה. (א) unstretched ומתח רדיוס של 10 עדשות חזירי נתון ה-MLS. (B) גרף מייצג רדיוס מדודה של שתי עדשות אנושי, בן 21 ו- 60 שנים, לפני ואחרי מתיחת מדריך עדשה. קווי השגיאה והן חלק (א) ו (ב) מייצגים את השגיאה שדווחה להתאים את ההיקף של העדשה. <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57162/57162fig5v2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Simulating the Mechanics of Lens Accommodation via a Manual Lens Stretcher at JoVE.com

Simulating the Mechanics of Lens Accommodation via a Manual Lens Stretcher

כדי לדמות את המכניקה של העדשה לינה דרך אלונקה מדריך עדשה

אנו מציגים שיטה יעילה של הלומדים עדשה לינה באמצעות אלונקה עדשה ידנית. פרוטוקול מחקה לינה פיזיולוגיים על ידי משיכת את zonules מחובר סביב הקפסולה העדשה, ובכך, מותח את העדשה.

The goal of this protocol is to mimic the biomechanics of physiological accommodation in a cost-efficient, practical manner. Accommodation is achieved ...

simulating-mechanics-lens-accommodation-via-manual-lens

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Bioengineering

6.7K Views.  University of Maryland. אנו מציגים שיטה יעילה של הלומדים עדשה לינה באמצעות אלונקה עדשה ידנית. פרוטוקול מחקה לינה פיזיולוגיים על ידי משיכת את zonules מחובר סביב הקפסולה העדשה, ובכך, מותח את העדשה.

Video: Simulating the Mechanics of Lens Accommodation via a Manual Lens Stretcher

Impulsive Pressurization of Neuronal Cells for Traumatic Brain Injury Study

A novel impulsive cell pressurization experiment has been developed using a Kolsky bar device to investigate blast-induced traumatic brain injury (TBI). We demonstrate in this video article how blast TBI-relevant impulsive pressurization is applied to the neuronal cells in vitro. This is achieved by using well-controlled pressure pulse created by a specialized Kolsky bar device, with complete pressure history within the cell pressurization chamber recorded. Pressurized neuronal cells are inspected immediately after pressurization, or further incubated to examine the long-term effects of impulsive pressurization on neurite/axonal outgrowth, neuronal gene expression, apoptosis, etc. We observed that impulsive pressurization at about 2 MPa induces distinct neurite loss relative to unpressurized cells. Our technique provides a novel method to investigate the molecular/cellular mechanisms of blast TBI, via impulsive pressurization of brain cells at well-controlled pressure magnitude and duration.

A novel impulsive cell pressurization experiment has been developed using a Kolsky bar device to investigate the molecular/cellular mechanisms of blast-induced traumatic brain injury.

Pressurization אימפולסיבית של תאים עצביים לחקר פגיעה מוחית טראומטי

A novel impulsive cell pressurization experiment has been developed using a Kolsky bar device to investigate blast-induced traumatic brain injury (TBI). ...

Magnetic Resonance Elastography Methodology for the Evaluation of Tissue Engineered Construct Growth

Traditional mechanical testing often results in the destruction of the sample, and in the case of long term tissue engineered construct studies, the use of destructive assessment is not acceptable. A proposed alternative is the use of an imaging process called magnetic resonance elastography. Elastography is a nondestructive method for determining the engineered outcome by measuring local mechanical property values (i.e., complex shear modulus), which are essential markers for identifying the structure and functionality of a tissue. As a noninvasive means for evaluation, the monitoring of engineered constructs with imaging modalities such as magnetic resonance imaging (MRI) has seen increasing interest in the past decade1. For example, the magnetic resonance (MR) techniques of diffusion and relaxometry have been able to characterize the changes in chemical and physical properties during engineered tissue development2. The method proposed in the following protocol uses microscopic magnetic resonance elastography (&mu;MRE) as a noninvasive MR based technique for measuring the mechanical properties of small soft tissues3. MRE is achieved by coupling a sonic mechanical actuator with the tissue of interest and recording the shear wave propagation with an MR scanner4. Recently, &mu;MRE has been applied in tissue engineering to acquire essential growth information that is traditionally measured using destructive mechanical macroscopic techniques5. In the following procedure, elastography is achieved through the imaging of engineered constructs with a modified Hahn spin-echo sequence coupled with a mechanical actuator. As shown in Figure 1, the modified sequence synchronizes image acquisition with the transmission of external shear waves; subsequently, the motion is sensitized through the use of oscillating bipolar pairs. Following collection of images with positive and negative motion sensitization, complex division of the data produce a shear wave image. Then, the image is assessed using an inversion algorithm to generate a shear stiffness map6. The resulting measurements at each voxel have been shown to strongly correlate (R2&gt;0.9914) with data collected using dynamic mechanical analysis7. In this study, elastography is integrated into the tissue development process for monitoring human mesenchymal stem cell (hMSC) differentiation into adipogenic and osteogenic constructs as shown in Figure 2.

The procedure demonstrates the methodology of magnetic resonance elastography for monitoring the engineered outcome of adipose and osteogenic tissue engineered constructs through noninvasive local assessment of the mechanical properties using microscopic magnetic resonance elastography (&mu;MRE).

תהודה מגנטית elastography מתודולוגיה להערכת של רקמות מהונדסות צמיחה Construct

Traditional mechanical testing often results in the destruction of the sample, and in the case of long term tissue engineered construct studies, the use ...

Monitoring the Wall Mechanics During Stent Deployment in a Vessel

Clinical trials have reported different restenosis rates for various stent designs1. It is speculated that stent-induced strain concentrations on the arterial wall lead to tissue injury, which initiates restenosis2-7. This hypothesis needs further investigations including better quantifications of non-uniform strain distribution on the artery following stent implantation. A non-contact surface strain measurement method for the stented artery is presented in this work. ARAMIS stereo optical surface strain measurement system uses two optical high speed cameras to capture the motion of each reference point, and resolve three dimensional strains over the deforming surface8,9. As a mesh stent is deployed into a latex vessel with a random contrasting pattern sprayed or drawn on its outer surface, the surface strain is recorded at every instant of the deformation. The calculated strain distributions can then be used to understand the local lesion response, validate the computational models, and formulate hypotheses for further in vivo study.

Stent-induced arterial strain distributions are characterized using an optical surface strain measurement system. This visualization technique is used to gain insights into the impact of stent implantation on the host vessel.

מעקב אחר מכניקה קיר במהלך פריסה סטנט בכלי

Clinical trials have reported different restenosis rates for various stent designs1. It is speculated that stent-induced strain concentrations on the ...

Lignin Down-regulation of Zea mays via dsRNAi and Klason Lignin Analysis

To facilitate the use of lignocellulosic biomass as an alternative bioenergy resource, during biological conversion processes, a pretreatment step is needed to open up the structure of the plant cell wall, increasing the accessibility of the cell wall carbohydrates. Lignin, a polyphenolic material present in many cell wall types, is known to be a significant hindrance to enzyme access. Reduction in lignin content to a level that does not interfere with the structural integrity and defense system of the plant might be a valuable step to reduce the costs of bioethanol production. In this study, we have genetically down-regulated one of the lignin biosynthesis-related genes, cinnamoyl-CoA reductase (ZmCCR1) via a double stranded RNA interference technique. The ZmCCR1_RNAi construct was integrated into the maize genome using the particle bombardment method. Transgenic maize plants grew normally as compared to the wild-type control plants without interfering with biomass growth or defense mechanisms, with the exception of displaying of brown-coloration in transgenic plants leaf mid-ribs, husks, and stems. The microscopic analyses, in conjunction with the histological assay, revealed that the leaf sclerenchyma fibers were thinned but the structure and size of other major vascular system components was not altered. The lignin content in the transgenic maize was reduced by 7-8.7%, the crystalline cellulose content was increased in response to lignin reduction, and hemicelluloses remained unchanged. The analyses may indicate that carbon flow might have been shifted from lignin biosynthesis to cellulose biosynthesis. This article delineates the procedures used to down-regulate the lignin content in maize via RNAi technology, and the cell wall compositional analyses used to verify the effect of the modifications on the cell wall structure.

Lignin Down-regulation of Zea mays via dsRNAi and Klason Lignin Analysis

A double stranded RNA interference (dsRNAi) technique is employed to down-regulate the maize cinnamoyl coenzyme A reductase (ZmCCR1) gene to lower plant lignin content. Lignin down-regulation from the cell wall is visualized by microscopic analyses and quantified by the Klason method. Compositional changes in hemicellulose and crystalline cellulose are analyzed.

ליגנין Down-תקנה של<em&gt; Zea mays</em&gt; באמצעות dsRNAi וKlason ליגנין ניתוח

To facilitate the use of lignocellulosic biomass as an alternative bioenergy resource, during biological conversion processes, a pretreatment step is ...

Determination of Zeta Potential via Nanoparticle Translocation Velocities through a Tunable Nanopore: Using DNA-modified Particles as an Example

Nanopore technologies, known collectively as Resistive Pulse Sensors (RPS), are being used to detect, quantify and characterize proteins, molecules and nanoparticles. Tunable resistive pulse sensing (TRPS) is a relatively recent adaptation to RPS that incorporates a tunable pore that can be altered in real time. Here, we use TRPS to monitor the translocation times of DNA-modified nanoparticles as they traverse the tunable pore membrane as a function of DNA concentration and structure (i.e., single-stranded to double-stranded DNA).
TRPS is based on two Ag/AgCl electrodes, separated by an elastomeric pore membrane that establishes a stable ionic current upon an applied electric field. Unlike various optical-based particle characterization technologies, TRPS can characterize individual particles amongst a sample population, allowing for multimodal samples to be analyzed with ease. Here, we demonstrate zeta potential measurements via particle translocation velocities of known standards and apply these to sample analyte translocation times, thus resulting in measuring the zeta potential of those analytes.
As well as acquiring mean zeta potential values, the samples are all measured using a particle-by-particle perspective exhibiting more information on a given sample through sample population distributions, for example. Of such, this method demonstrates potential within sensing applications for both medical and environmental fields.

Here we use a polyurethane tunable nanopore integrated into a resistive pulse sensing technique to characterize nanoparticles surface chemistry via the measurement of particle translocation velocities, which can be used to determine the zeta potential of individual nanoparticles.

קביעת פוטנציאל זטה באמצעות Nanoparticle טרנסלוקציה מהירויות באמצעות nanopore מתכוונן: באמצעות חלקיקים שונה-DNA כמשל

Nanopore technologies, known collectively as Resistive Pulse Sensors (RPS), are being used to detect, quantify and characterize proteins, molecules and ...

Patterning the Geometry of Human Embryonic Stem Cell Colonies on Compliant Substrates to Control Tissue-Level Mechanics

Human embryonic stem cells demonstrate a unique ability to respond to morphogens in vitro by self-organizing patterns of cell fate specification that correspond to primary germ layer formation during embryogenesis. Thus, these cells represent a powerful tool with which to examine the mechanisms that drive early human development. We have developed a method to culture human embryonic stem cells in confined colonies on compliant substrates that provides control over both the geometry of the colonies and their mechanical environment in order to recapitulate the physical parameters that underlie embryogenesis. The key feature of this method is the ability to generate polyacrylamide hydrogels with defined patterns of extracellular matrix ligand at the surface to promote cell attachment. This is achieved by fabricating stencils with the desired geometric patterns, using these stencils to create patterns of extracellular matrix ligand on glass coverslips, and transferring these patterns to polyacrylamide hydrogels during polymerization. This method is also compatible with traction force microscopy, allowing the user to measure and map the distribution of cell-generated forces within the confined colonies. In combination with standard biochemical assays, these measurements can be used to examine the role mechanical cues play in fate specification and morphogenesis during early human development.

Extracellular matrix ligands can be patterned onto polyacrylamide hydrogels to enable the culture of human embryonic stem cells in confined colonies on compliant substrates. This method can be combined with traction force microscopy and biochemical assays to examine the interplay between tissue geometry, cell-generated forces, and fate specification.

הקמת הגיאומטריה של האדם תא גזע עובריים המושבות על מצעים תואמי כדי לשלוט במכניקה ברמת רקמות

Human embryonic stem cells demonstrate a unique ability to respond to morphogens in vitro by self-organizing patterns of cell fate specification that ...

Transplantation of a 3D Bioprinted Patch in a Murine Model of Myocardial Infarction

Testing regenerative properties of 3D bioprinted cardiac patches in vivo using murine models of heart failure via permanent left anterior descending (LAD) ligation is a challenging procedure and has a high mortality rate due to its nature. We developed a method to consistently transplant bioprinted patches of cells and hydrogels onto the epicardium of an infarcted mouse heart to test their regenerative properties in a robust and feasible way. First, a deeply anesthetized mouse is carefully intubated and ventilated. Following left lateral thoracotomy (surgical opening of the chest), the exposed LAD is permanently ligated and the bioprinted patch transplanted onto the epicardium. The mouse quickly recovers from the procedure after chest closure. The advantages of this robust and quick approach include a predicted 28-day mortality rate of up to 30% (lower than the 44% reported by other studies using a similar model of permanent LAD ligation in mice). Moreover, the approach described in this protocol is versatile and could be adapted to test bioprinted patches using different cell types or hydrogels where high numbers of animals are needed to optimally power studies. Overall, we present this as an advantageous approach which may change preclinical testing in future studies for the field of cardiac regeneration and tissue engineering.

This protocol aims to transplant a 3D bioprinted patch onto the epicardium of infarcted mice modeling heart failure. It includes details regarding anesthesia, the surgical chest opening, permanent ligation of the left anterior descending (LAD) coronary artery and application of a bioprinted patch onto the infarcted area of the heart.

השתלה של תיקון ביו-מודפס בתלת מיתד במודל מורין של אוטם שריר הלב

Testing regenerative properties of 3D bioprinted cardiac patches in vivo using murine models of heart failure via permanent left anterior descending (LAD) ...

Probing Myosin Ensemble Mechanics in Actin Filament Bundles Using Optical Tweezers

Myosins are motor proteins that hydrolyze ATP to step along actin filament (AF) tracks and are essential in cellular processes such as motility and muscle contraction. To understand their force-generating mechanisms, myosin II has been investigated both at the single-molecule (SM) level and as teams of motors in vitro using biophysical methods such as optical trapping.
These studies showed that myosin force-generating behavior can differ greatly when moving from the single-molecule level in a three-bead arrangement to groups of motors working together on a rigid bead or coverslip surface in a gliding arrangement. However, these assay constructions do not permit evaluating the group dynamics of myosin within viscoelastic structural hierarchy as they would within a cell. We have developed a method using optical tweezers to investigate the mechanics of force generation by myosin ensembles interacting with multiple actin filaments.
These actomyosin bundles facilitate investigation in a hierarchical and compliant environment that captures motor communication and ensemble force output. The customizable nature of the assay allows for altering experimental conditions to understand how modifications to the myosin ensemble, actin filament bundle, or the surrounding environment result in differing force outputs.

Formation of actomyosin bundles in vitro and measuring myosin ensemble force generation using optical tweezers is presented and discussed.

חקר מכניקת אנסמבל מיוזין בצרורות נימה של אקטין באמצעות פינצטה אופטית

Myosins are motor proteins that hydrolyze ATP to step along actin filament (AF) tracks and are essential in cellular processes such as motility and muscle ...

Chemical Triphosphorylation of Oligonucleotides

The 5&#8242;-triphosphate is an essential nucleic acid modification found throughout all life and increasingly used as a functional modification of oligonucleotides in biotechnology and synthetic biology. Oligonucleotide 5&#8242;-triphosphates have historically been prepared in vitro by enzymatic methods. However, these methods are limited to natural RNA oligonucleotides, have strong sequence preferences, and tend to produce heterogeneous products. New methods of chemical triphosphorylation complement both the reduced cost of automated oligonucleotide synthesis by phosphoramidite chemistry and the diverse range of nucleotide modifications now available. Thus, the synthesis of oligonucleotide triphosphates of arbitrary sequence and length, and optionally containing various nonnatural modifications, is now accessible.
This paper presents the appropriate methods and techniques for chemical triphosphorylation of oligonucleotides using salicyl phosphorochloridite and pyrophosphate. This method uses commercially available reagents, is compatible with most oligonucleotides prepared by standard solid-phase synthesis methods, and can be completed in 2 h following oligonucleotide synthesis, before deprotection and purification. Two uses of chemically triphosphorylated oligonucleotides as substrates for catalytic RNA enzymes are demonstrated, including the synthesis of a mirror-image version of the hammerhead ribozyme from nonbiological L-RNA triphosphates.

Oligonucleotide 5&#8242;-triphosphates are ubiquitous components in essential biological pathways and have seen increasing use in biotechnology applications. Here, we describe techniques for the routine synthesis and purification of oligonucleotide 5&#8242;-triphosphates, starting from oligonucleotides prepared by standard automated synthesis techniques.

טריפוספורילציה כימית של אוליגונוקלאוטידים

The 5&#8242;-triphosphate is an essential nucleic acid modification found throughout all life and increasingly used as a functional modification of ...

Facilitating Cerebral Organoid Culture via Lateral Soft Light Illumination

At present, cerebral organoid culture technology is still complicated to operate and difficult to apply on a large scale. It is necessary to find a simple and practical solution. Therefore, a more feasible cerebral organoid protocol is proposed in the present study. To solve the unavoidable inconvenience in medium change and organoid transfer in the early stage, the current research optimizes the operation technology by applying the engineering principle. A soft light lamp was adopted to laterally illuminate the embryoid body (EB) samples, allowing the EBs to be seen by the naked eye through the enhanced diffuse reflection effect. Using the principle of secondary flow generated by rotation, the organoids gather toward the center of the well, which facilitates the operation of medium change or organoid transfer. Compared to the dispersed cell, the embryoid body settles faster in the pipette. Using this phenomenon, most of the free cells and dead cell fragments can be effectively removed in a simple way, preventing EBs from incurring damage from centrifugation. This study facilitates the operation of cerebral organoid culture and helps to promote the application of brain organoids.

Facilitating Cerebral Organoid Culture via Lateral Soft Light Illumination

Cerebral organoids provide unprecedented opportunities for studying organ development and human disease pathology. Although great success has been achieved with cerebral organoid culture systems, there are still operational difficulties in applying this technology. The present protocol describes a cerebral organoid procedure that facilitates medium change and organoid transfer.

הקלה על תרבית אורגנואידית מוחית באמצעות תאורת אור רך לרוחב

At present, cerebral organoid culture technology is still complicated to operate and difficult to apply on a large scale. It is necessary to find a simple ...