ويتم قبول البروتوكولات التالية تحت رعاية الحيوان المؤسسية في جامعة ميريلاند واستخدام اللجنة فضلا عن مجلس المراجعة المؤسسية. البروتوكولات تتبع المعايير الاتحادية والولائية والمحلية، والمبادئ التوجيهية التي وضعتها جامعة ماريلاند السياسة المتعلقة بالسلامة الأحيائية.
1-تشريح العين عينة
<ol><li>
الحصول على نموذج عين من مصرف محلي في المسلخ أو الأنسجة. إذا كان يتم الحصول عليها عين كامل أنحاء العالم، مباشرة استخراج العدسة، زونوليس المرفقة، والجسم الزجاجي. ملاحظة: التفاصيل المحددة الموصوفة أدناه تتصل بعيون الخنزير والبشرية على السواء.<ol>
<li>باستخدام مقص جراحي تطهيرها والملقط، قطع وإزالة جميع الأنسجة الزائدة المحيطة الصلبة العينية.</li>
		<li>إيمانا راسخا عقد العين في الجانب الخاص بها، واستخدام شفرة حلاقة، جعل شق صغير بجانب العين 3 ملم بعيداً عن القرنية. جعل العميقة قص ما يكفي توصلنا إلى الجسم الزجاجي داخل العين.</li>
		<li>باستخدام مقص، قص بعناية إضافية على طول شق حول المحيط العين. تجنب ثقب العدسة. ويبين الشكل 2ألفصورة تمثيلية.</li>
		<li>مرة واحدة وقد تم قطع خارج محيط العين، إزالة الأنسجة الخلفي للعين باستخدام الملقط. عزل زونوليس والجسم الهدبي، العدسة والجسم الزجاجي المرفقة مع الملقط. ويبين الشكل 2بصورة تمثيلية.</li>
		<li>باستخدام المقص والملقط، إزالة الزائدة زجاجي حتى يمكن وضع العدسة مسطح على MLS. ملاحظة: في حالات زراعة القرنية، يستخدم الزر القرنية في الجراحة وبقية أنحاء العالم متاحة لأغراض البحث. ومع ذلك، يمكن استخدامها هذا العالم الجزئي لا يزال في إعداد الأنسجة الإعداد عدسة نقالة. إلا إذا كان يتم الحصول مؤخرة، فقط تنفيذ الخطوة 1.1.4–1.1.5.</li>
	</ol>
</li>
	<li>تطهير جميع التشريح بعد المعدات المستخدمة في حل التبييض 15% لمدة 30 دقيقة.</li>
</ol>2-محاكمة جمعية نقالة عدسة دليل
<ol><li>إدراج قيعان الأحذية 10 ملم وقمم الأحذية المقابلة في أسفل لوحة من MLS حيث لا تزال هناك فجوة 5 ملم بين الجدار الخلفي للمسافة البادئة الأحذية والأحذية نفسها.</li>
	<li>قم بمحاذاة لوحات العلوي والسفلي، والعض اللوحات معا؛ الجهاز الآن في موقف أونستريتشيد.</li>
	<li>إدراج اللوحات في حالة اللوحة والمسمار سداده في حفرة تقع على جانب أسفل لوحة.</li>
	<li>إدراج قضية اللوحة إلى القاعدة ووجع في المسافات البادئة تمت محاذاته.</li>
	<li>تطور وجع عقارب الساعة حتى يصل المسمار وقف التعاقد الأحذية، وتطور عقارب الساعة إلى الوراء العودة الأحذية إلى موقف أونستريتشيد الأصلي.</li>
</ol>3-تركيب العدسة
<ol><li>إدراج قيعان الأحذية 10 ملم في أسفل لوحة في MLS حيث مم 5 الفجوة بين ما زال الجدار الخلفي للمسافة البادئة الأحذية والأحذية نفسها.</li>
	<li>استخدام الملقط المنحنية، مكان مواجهة عدسة المستخرجة في منتصف أسفل لوحة حيث أن الأحذية هي دعم العدسة أكثر من ثقب مركزي.</li>
	<li>انجذاب أعلى المقابلة للأحذية في مكانها، لقطة فقط في زونوليس وفي الجسم الزجاجي. ضمان بصريا أن العدسة يبقى كما تركزت قدر الإمكان في أسفل لوحة.</li>
	<li>كرر الخطوات من 2، 2، 3-4.</li>
</ol>4-قياس العدسة
<ol><li>وضع نظام تصوير مباشرة أعلى الجهاز لالتقاط الفيديو والصور من عملية تمتد. تأكد من تضمين مسطرة في إطار الصورة بدقة حجم ونطاق الصور في مرحلة ما بعد المعالجة. ملاحظة: أي نظام تصوير مناسبة كافية لهذه الخطوة؛ هنا علينا استخدام 12 ميجا بكسل، autofocusing الذكي قدم واحدة من العينة.</li>
	<li>بشدة حتى الآن بسلاسة، تدوير وجع في اتجاه عقارب الساعة لتمتد العدسة. ويبين الشكل 3 صور الممثل في أونستريتشيد وامتدت الدولة.</li>
	<li>بعد تصوير العدسة ممدد، تدوير وجع في اتجاه عقارب الساعة لاستعادة العينة إلى حالة الراحة. ملاحظة: من الضروري أن يتم قياس العدسة في الوقت مناسب بغية التقليل من الجفاف للعدسة.</li>
	<li>وضوح تصوير الحالة النهائية يستريح للعدسة.</li>
</ol>5-بيانات التحليل
<ol><li>تحميل الصورة إلى إيماجيج، واستخدام ميزة "نقطة" لتحديد مالا يقل عن 40 نقطة حول المحيط العدسة كما هو موضح في الشكل 4أ. استخدم الخيار "قياس" ← "تحليل" تسفر عن موقع كل نقطة المحدد.</li>
	<li>صالح (باستخدام برامج مثل MATLAB) موقع النقاط بغية الحصول نصف قطرها و chi-square لصالح كما هو موضح في الشكل 4ب. تحويل نصف قطرها بكسل والخطأ في القياسات باستخدام المسطرة وتصويرها.</li>
	<li>أداء إقران اثنين الذيل الاختبار t لمقارنة عدسة فردية قبل وبعد تمتد من MLS.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Von Helmholtz, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uber+die+akkommodation+des+auges.">Uber die akkommodation des auges.</a> Arch Ophthal. 1, 1-74 (1855).</li><li>Schachar, R. A., Black, T. D., Kash, R. L., Cudmore, D. P., Schanzlin, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mechanism+of+accommodation+and+presbyopia+in+the+primate.">The mechanism of accommodation and presbyopia in the primate.</a> Ann Ophthalmol. 27, 58-67 (1995).</li><li>Glasser, A., Campbell, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Presbyopia+and+the+optical+changes+in+the+human+crystalline+lens+with+age.">Presbyopia and the optical changes in the human crystalline lens with age.</a> Vision Res. 38 (2), 209-229 (1998).</li><li>Reilly, M. A., Hamilton, P. D., Perry, G., Ravi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+the+behavior+and+natural+and+refilled+porcine+lenses+in+a+robotic+lens+stretcher.">Comparison of the behavior and natural and refilled porcine lenses in a robotic lens stretcher.</a> Exp Eye Res. 88, 483-494 (2009).</li><li>Langenbucher, A., Huber, S., Nguyen, N. X., Seitz, B., Gusek-Schneider, G. C., K&#252;chle, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+accommodation+after+implantation+of+an+accommodating+posterior+chamber+intraocular+lens.">Measurement of accommodation after implantation of an accommodating posterior chamber intraocular lens.</a> J Cataract Refract Surg. 29 (4), 677-685 (2003).</li><li>Ehrmann, K., Ho, A., Parel, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomechanical+analysis+of+the+accommodative+apparatus+in+primates.">Biomechanical analysis of the accommodative apparatus in primates.</a> Clin Exp Optom. 91 (4), 411 (2008).</li><li>Pinilla Cort&#233;s, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+Protocols+for+Ex+Vivo+Lens+Stretching+Tests+to+Investigate+the+Biomechanics+of+the+Human+Accommodation+Apparatus.">Experimental Protocols for Ex Vivo Lens Stretching Tests to Investigate the Biomechanics of the Human Accommodation Apparatus.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 56 (5), 2926 (2015).</li><li>Fisher, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+elastic+constants+of+the+human+lens.">The elastic constants of the human lens.</a> J Physiol. 212 (1), 147-180 (1971).</li><li>Eppig, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomechanical+eye+model+and+measurement+setup+for+investigating+accommodating+intraocular+lenses.">Biomechanical eye model and measurement setup for investigating accommodating intraocular lenses.</a> Z Med Ohys. 23 (2), 144-152 (2013).</li><li>Manns, F., Parel, , et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Response+of+Human+and+Monkey+Lenses+in+a+Lens+Stretcher.">Response of Human and Monkey Lenses in a Lens Stretcher.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 48 (7), 3260 (2007).</li><li>Scarcelli, G., Kim, P., Yun, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+measurement+of+age-related+stiffening+in+the+crystalline+lens+by+Brillouin+optical+microscopy.">In vivo measurement of age-related stiffening in the crystalline lens by Brillouin optical microscopy.</a> Biophys J. 101 (6), 1539-1545 (2011).</li><li>Besner, S., Scarcelli, G., Pineda, R., Yun, S. -. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vivo+Brillouin+Analysis+of+the+Aging+Crystalline+Lens.">In Vivo Brillouin Analysis of the Aging Crystalline Lens.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 57 (13), 5093 (2016).</li><li>Cortes, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+Protocols+for+Ex+Vivo+Lens+Stretching+Tests+to+Investigate+the+Biomechanics+of+the+Human+Accommodation+Apparatus.">Experimental Protocols for Ex Vivo Lens Stretching Tests to Investigate the Biomechanics of the Human Accommodation Apparatus.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 56 (5), 2926-2932 (2015).</li><li>Bernal, A., Parel, J. -. M., Manns, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+Posterior+Zonular+Fiber+Attachment+on+the+Anterior+Hyaloid+Membrane.">Evidence for Posterior Zonular Fiber Attachment on the Anterior Hyaloid Membrane.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 47 (11), 4708 (2006).</li><li>Kammel, R., Ackermann, R., Mai, T., Damm, C., Nolte, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pig+Lenses+in+a+Lens+Stretcher.">Pig Lenses in a Lens Stretcher.</a> Optom Vis Sci. 89 (6), 908-915 (2012).</li><li>Hahn, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+Ex+Vivo+Porcine+Lens+Shape+During+Simulated+Accommodation,+Before+and+After+fs-Laser+Treatment.">Measurement of Ex Vivo Porcine Lens Shape During Simulated Accommodation, Before and After fs-Laser Treatment.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 56 (9), 5332-5343 (2015).</li><li>D'Antin, J. C., Cortes, L. P., Montenegro, G. A., Barraquer, R. I., Michael, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+portable+manual+stretching+device+to+simulate+accommodation.">Evaluation of a portable manual stretching device to simulate accommodation.</a> Acta Ophthalmol. 93 (255), (2015).</li><li>Pierscionek, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+response+of+human+lenses+to+stretching+forces.">Age-related response of human lenses to stretching forces.</a> Exp Eye Res. 60 (3), 325-332 (1995).</li><li>Marussich, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+Crystalline+Lens+Volume+During+Accommodation+in+a+Lens+Stretcher.">Measurement of Crystalline Lens Volume During Accommodation in a Lens Stretcher.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 56 (8), 4239 (2015).</li><li>Martinez-Enriquez, E., P&#233;rez-Merino, P., Velasco-Ocana, M., Marcos, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OCT-based+full+crystalline+lens+shape+change+during+accommodation+in+vivo.">OCT-based full crystalline lens shape change during accommodation in vivo.</a> Biomed Opt Exp. 8 (2), 918-933 (2017).</li></ol>

وقد آب حصة ملكية في "شركة استشارات بيونيكو".

ونحن قد وضعت طريقة جديدة لتوفير طريقة دقيقة وفعالة لدراسة إمكانية الإقامة للعدسة باستخدام إليه لقط المزدوج-قطعة لزوجين نقالة للعينة. أثناء الإقامة، يرتاح العدسة، وإنقاص القطر ردا على الاسترخاء من ألياف زونولار1،،من24،19. الأسلوب الذي يركز على هذه الظاهرة لقط والسيطرة على توتر ألياف زونولار. لهذا السبب، يجب اتخاذ العناية المركزة المشبك زونوليس داخل الحذاء محاكاة بدقة السكن عدسة الفسيولوجية. لضمان لقط سليم، ينبغي أن بقية العدسة مسطح ضد مركز أحذية أسفل مع الحد الأدنى زجاجي يعلق. ينبغي أن تؤخذ الرعاية الإضافية بينما الموجع لضمان المساواة تمتد شعاعي تتم حول محيط العدسة. إذا تمتد عدسة يبدو، أو إذا أصبحت زونوليس من المشابك، يجب تحميلها العينة إذا كان ذلك ممكناً.
يجري حاليا تنفيذ البروتوكولات تمتد عدسة مماثلة لدراسة السكن وشيخوخة4،،من67،،من912. ومع ذلك، هذه البروتوكولات عموما معقدة ومكلفة، تتطلب آليات معقدة وبرامج البرمجة. بالإضافة إلى ذلك، تتطلب هذه التقنيات عينات العين كامل في ما يزيد على مبلغ 500.00 كل التجربة مما يقلل كذلك من اعتماد على نطاق واسع. لدينا بروتوكول يزيد من جدوى باستبدال الجهاز-البرمجة مع عدسة دليل تمتد توافر النظام وعينه باشتراط إلا جزء صغير من العينة. الخلفي المطلوب من تكاليف العين أقل بشكل ملحوظ في $250.00 كل تجربة. ومع ذلك، هناك بعض القيود المرتبطة ببروتوكول لدينا. وكما ذكر سابقا، سيؤدي إلى اختلالها العدسة أو التوتر زونولي غير متكافئة التمدد غير قابل للتطبيق. بالإضافة إلى ذلك، لا تقاس القوة الموجع تطبيقها وهكذا يعتمد على تناسق للمستخدم لمنع أونكلامبينج أو تمزق زونوليس. إذا كانت زونوليس للدموع، ينبغي التخلي العينة كما أحذية MLS لن يكون قادراً على المشبك بما فيه الكفاية. الجهود المقبلة ستركز على تحديد مقدار القوة المطبقة لضمان الاتساق وأهميتها الفسيولوجية. وبالإضافة إلى ذلك، يتضمن البروتوكول تمتد إلى زيادة حتى توقف بالمسمار وقف. تمتد لا، ولذلك، يمكن تغيير أو تتراوح بين العينات ويعرض بدلاً من ذلك دولة امتدت كلياً أو أونستريتشيد ثنائي.
منع أو ابتكار علاج شيخوخة نقطة ارتكاز للعين للبحث، كما الحالة الآن لا مفر منه وغير قابل للعلاج. ومع ذلك، الميكانيكا الحيوية من السكن وشيخوخة ليست مفهومة تماما. يسمح البروتوكول المقدم لمحاكاة دقيقة للعدسة تمتد خلال الإقامة بينما تتطلب أقل المواد عينة، وبناء الجهاز، والوقت. عن طريق زيادة توافر، الأسلوب يسمح لمزيد من المختبرات لمراقبة ودراسة الميكانيكا الحيوية السكن في العدسة.

السكن هو العملية التي العين البشرية قادرة على التكيف بشكل حيوي على شكل عدسة البلورية رؤية الأشياء على مسافات بعيدة أو قريبة في التركيز الحاد. السكن عملية النشاط الحيوي ارتباطاً وثيقا. عند العصبية التحفيز، تنتج العضلات الهدبية قوة على الجسم الهدبي وألياف زونولي أن نعلق على محيط عدسة كبسولة1،2. بينما هناك نظريات مختلفة وراء الميكانيكا الحيوية الإقامة، الأكثر قبولا هو فرضية هلمهولتز. ووفقا للفرضية، العدسة في دولة امتدت طبيعية، المقابلة للشكل أنحف من العدسة التي الأمثل لتركيز الأشياء البعيدة. لتغيير التركيز إلى كائنات أوثق، عقد العضلات الهدبية واسترخاء الألياف زونولار. وفي المقابل، يمسك العدسة، زيادة الانحناءات السطح الأمامي والخلفي. يقابل ذلك زيادة في الطاقة ديوبتريك التي ضرورية للقرب من الرؤية، ولذلك، البعد البؤري أقصر1.
القدرة على استيعاب الخطر مع مرور الوقت عن طريق شرط اسمه شيخوخة. التي تؤثر على كل فرد من سن 50 سنة، يجعل شيخوخة العين غير قادر على بشكل حيوي تغيير التركيز من الآن لإغلاق المسافات3. ولمكافحة شيخوخة، الأساليب الحالية السلبية بما في ذلك العدسات التصحيحية والنظارة. مع زيادة قدرة المرء على التركيز على الأشياء القريبة في قليل من الطائرات، لا يمكن استعادة هذه العلاجات السلبي قدرة التركيز الحيوي4،العدسة5. من أجل علاج شيخوخة كفاءة، أو ربما منع ذلك، هناك حاجة مستمرة إلى فهم أفضل للإقامة.
لدراسة عدسة الإقامة، قد وضعت عددا من أجهزة لمحاكاة ظاهرة السابقين فيفو4،6،7،،من89. وأدخلت الغزل الأقراص أولاً لرصد تمتد من العدسة عن طريق القوى المركزية الطاردة8. لتكرار هذه الظاهرة أكثر دقة، وعرض الأجهزة العدسة تمتد تدريجيا وابتكر. استخدام عدسة نقالة، Manns وآخرون. وتتميز القوة المطلوبة لاستيعاب العدسة بينما ربط مثل هذه السلطة العدسة وقطرها الاستوائي9. الفهم الحالي أن يتصلب العدسة مع التقدم في السن، أدى إلى انخفاض تغيير شكل عدسة استجابة لقوة متساوية من الجسم الهدبي3،10،،من1112.
الحالي عدسة نقالات غالباً ما تنطوي على إعداد معقدة، تنفيذ معدلات تمتد للبرمجة، والإلكترونيات، ويتطلب جثة كاملة مقلة العين6،،من710،13. هذا الشرط يزيد من التكلفة لكل تجربة لما يزيد على مبلغ 500.00 كل العين ويقلل من توافر عينة. هنا نقدم طريقة لتكرار الإقامة عدسة تكلفة منخفضة كما العين الخلفي يبلغ حوالي 200.00 دولار. أقل تطورا من العديد من الأجهزة المستخدمة اليوم، في حين الأسلوب أكثر فعالية من حيث التكلفة وتبني دون المساس بنتائج. هذا الأسلوب تتمحور حول عدسة يدوية نقالة (MLS) هو مبين في الشكل 1، ويستخدم نظام لقط فريدة من نوعها على ألياف زونولار وطريقة اللف شعاعي لتوسيع قطر العدسة. يتم التحقق من دقة الفسيولوجية للبروتوكول باستنتاجات برنال et al.، الذي درس المسار الذي ترتبط الألياف زونولار الأمامي والخلفي ل كبسولة العدسة14. باستخدام تصميم الأحذية المخصصة التي لا تتطلب سوى العدسة، زونولي، والجسم الهدبي، نحن تهدف إلى دراسة الميكانيكا الحيوية العدسة بتكرار الإقامة الفسيولوجية.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:856px;" width="856">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:191px;">Manual Lens Stretcher</td>
			<td style="width:233px;">Bioniko</td>
			<td style="width:132px;">MLS</td>
			<td style="width:300px;">Different animal species will require different shoe sizes</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Porcine Eye Samples</td>
			<td>George G. Ruppersberger; slaughterhouse</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Whole eyeballs were obtained</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Human Eye Samples</td>
			<td>The National Disease Research Interchange</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Posterior poles without corneas were ordered</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Dissecting Scissors (5 1/2&#39;&#39; Straight)</td>
			<td>Electron Microsopy Sciences</td>
			<td>72960</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tissue Forceps (4 1/2&#39;&#39;)</td>
			<td>Electron Microsopy Sciences</td>
			<td>72960</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">iPhone 6s</td>
			<td>Apple</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Any imaging system with ~0.1 mm resolution will work</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Sodium Hypochorite</td>
			<td>Clorox</td>
			<td>Clorox Regular-Bleach</td>
			<td>Any disinfectant will work</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

simulating the mechanics of lens accommodation via a manual lens stretcher

والهدف من هذا البروتوكول تقليد الميكانيكا الحيوية الفسيولوجية الإقامة بطريقة فعالة من حيث التكلفة، وعملياً. يتحقق السكن من خلال انكماش الجسم الهدبي والاسترخاء من ألياف زونولي، الذي ينتج سماكة العدسة اللازم للقرب من الرؤية. نقدم هنا، الرواية، والأسلوب البسيط الذي يتكرر الإقامة بتوتير زونوليس متصلة بكبسولة العدسة عن طريق عدسة يدوية نقالة (MLS). هذا الأسلوب ترصد تمتد شعاعي، يتحقق بعدسة عندما يتعرض لقوة متسقة ويسمح بإجراء مقارنة لاستيعاب العدسات، والتي يمكن أن تمتد إلى مراعاة عدم العدسات، والتي لا يمكن أن يتم تمدد. الأهم من ذلك، الأزواج نقالة زونوليس مباشرة، ولا على الصلبة العينية للعين، وبالتالي تتطلب فقط العدسة، زونوليس، والجسم الهدبي بدلاً من نموذج الكرة الأرضية بأسرها. يمكنك تقليل هذا الاختلاف إلى حد كبير تكاليف اقتناء العدسات الجثث المانحة بحوالي 62% مقارنة بالحصول الكرة الأرضية بأسرها.

تم الحصول على عيون الخنزير، ونموذج مشترك لدراسة شيخوخة عبر العدسة تمتد15من4،،، (n = 10) من المسالخ محلية وهذا البروتوكول تم استخدامه لمراقبة إمكانية الإقامة للعدسات. الشكل 5 A يظهر المقارنة بين العدسة الخنزير قبل وبعد تمتد عبر MLS. كانت هناك زيادة 0.07 مم ± متوسط 0.19 في دائرة نصف قطرها العدسة عندما امتدت (ف < 0.001)، ومساواة إلى زيادة 1.62% 4.2 ± من دائرة نصف قطرها الأصلي. يرتبط بالإقامة مع مرونة العدسة، ولذلك تشير شعاعي الفرق بين موقف أونستريتشيد وامتدت إلى القدرة على استيعاب. وجدنا زيادة ثابتة في قطر العدسة تمتد بعد، الذي يوافق16،دراسات مماثلة17. الاتساق والانحراف منخفضة نسبيا داخل الدراسة أيضا بالتحقق من صحة لدينا بروتوكول.
يسمح هذا البروتوكول لمقارنة العدسات استيعاب وأوناككوموداتينج على حد سواء. الفرق شعاعي أكبر بين حالته أونستريتشيد يشير إلى قدرة أكبر على استيعاب. كذلك التحقق من البروتوكول، لاحظنا قدراتهم البشرية الإقامة كدالة للعمر. نحن اختبار يبلغ من العمر 21 عاماً و 60 عاماً عين بشرية (الوطنية مرض بحوث التبادل، فيلادلفيا، بنسلفانيا). وبينت النتائج، كما هو مبين في الشكل 5بمن انخفاض في القدرة على استيعاب مع التقدم في السن. دائرة نصف قطرها 21 سنة العدسة بنسبة 0.22 ± 0.13 مم أو 5.2 في المائة عند تمتد مقارنة بالزيادة مم 0.099 أو 0.14 في المائة ± 0.0059 العدسة عمرها 60. فقد ثبت أن العدسات البشرية تفقد تدريجيا القدرة على استيعاب مع سن3. وأظهرت نتائج هذه أصغر فرق بين نصف قطر العدسة 60 سنة مقارنة بالعدسة عمرها 21 سنة، والتي تشير إلى فقدان القدرة على الإقامة ممدد وأونستريتشيد. العدسة البشرية القديمة مما يدل انخفاض قدرة على تمتد باﻻتفاق مع دراسات مماثلة في أماكن الإقامة كدالة لسن8،،من1820.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57162/57162fig1.jpg"> الشكل 1 : التخطيطي لنقالة العدسة اليدوي. (أ) تجميع مكونات MLS، بما في ذلك الأحذية وحالة اللوحة، لوحة العلوي، وأسفل لوحة. (ب) الرسم التخطيطي الممثل من الأحذية إشعاعيا متصلاً العينة. (ج) كلامبيد الأحذية التي تعلق زونوليس (ليس في الصورة) وامتدت. <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57162/57162fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57162/57162fig2.jpg"> الشكل 2 : الصور التمثيلية من البروتوكول تشريح. (أ) العينة العين قد جمعت وستبذل الشق الأول على امتداد المعمورة تقريبا 3 مم من القرنية. (ب) خفضت العالم العين حول محيط به بشكل صحيح. تم فصل الصلبة (ج) مؤخرة تماما عن العالم. (د) العدسة والجسم الزجاجي، وزونوليس، والجسم الهدبي وقد تم عزل من أنحاء العالم. <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57162/57162fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57162/57162fig3.jpg"> الشكل 3 : صورة تمثيلية العدسة أونستريتشيد وامتدت عبر MLS. (أ) عقد العدسة داخل الجهاز، وقبل الموجع، في موقفه أونستريتشيد. (ب) الجهاز إشعاعيا تشغيل عبر وجع، كما يتم تمديد العدسة في موضعه ممدود. شريط مقياس = 10 مم- <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57162/57162fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57162/57162fig4.jpg"> الشكل 4 : صور الممثل من تحليل بيانات العينات العدسة. (أ) 50 المحدد وتم اختيار النقاط على محيط العدسة العينة باستخدام البرمجيات إيماجيج. (ب) دائرة نصف قطرها المحسوبة 37.4955 بكسل، وكانت قيمة كاي تربيع يصلح ل 0.77636 بكسل. سيتم تغيير هذه النتائج من العدسة إلى العدسة، ويجب تحويلها بكسل للوحدات المترية باستخدام المسطرة وتصويرها. <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57162/57162fig4large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57162/57162fig5v2.jpg"> الشكل 5 : نصف قطر العدسة قبل وبعد تمتد عبر نقالة العدسة اليدوي. (أ) أونستريتشيد، وامتدت إنصاف أقطار من 10 العدسات بريموم تعرض MLS. (ب) الرسم البياني الممثل لإنصاف أقطار المقاسة من اثنين من العدسات البشرية، 21 عاماً و 60 عاماً، قبل وبعد تمتد العدسة اليدوي. أشرطة الخطأ في جزء (أ) و (ب) تمثل خطأ تم الإبلاغ عنها في محيط العدسة المناسب. <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57162/57162fig5v2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>

Watch this Scientific Journal Video about Simulating the Mechanics of Lens Accommodation via a Manual Lens Stretcher at JoVE.com

Simulating the Mechanics of Lens Accommodation via a Manual Lens Stretcher

محاكاة ميكانيكا عدسة السكن عن طريق عدسة يدوية نقالة

نقدم وسيلة فعالة لدراسة السكن العدسة باستخدام عدسة يدوية نقالة. بروتوكول يقلد متصلة السكن الفسيولوجية عن طريق سحب زونوليس حول كبسولة العدسة، وبالتالي تمتد العدسة.

The goal of this protocol is to mimic the biomechanics of physiological accommodation in a cost-efficient, practical manner. Accommodation is achieved ...

simulating-mechanics-lens-accommodation-via-manual-lens

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Bioengineering

6.7K Views.  University of Maryland. نقدم وسيلة فعالة لدراسة السكن العدسة باستخدام عدسة يدوية نقالة. بروتوكول يقلد متصلة السكن الفسيولوجية عن طريق سحب زونوليس حول كبسولة العدسة، وبالتالي تمتد العدسة.

Video: Simulating the Mechanics of Lens Accommodation via a Manual Lens Stretcher

Impulsive Pressurization of Neuronal Cells for Traumatic Brain Injury Study

A novel impulsive cell pressurization experiment has been developed using a Kolsky bar device to investigate blast-induced traumatic brain injury (TBI). We demonstrate in this video article how blast TBI-relevant impulsive pressurization is applied to the neuronal cells in vitro. This is achieved by using well-controlled pressure pulse created by a specialized Kolsky bar device, with complete pressure history within the cell pressurization chamber recorded. Pressurized neuronal cells are inspected immediately after pressurization, or further incubated to examine the long-term effects of impulsive pressurization on neurite/axonal outgrowth, neuronal gene expression, apoptosis, etc. We observed that impulsive pressurization at about 2 MPa induces distinct neurite loss relative to unpressurized cells. Our technique provides a novel method to investigate the molecular/cellular mechanisms of blast TBI, via impulsive pressurization of brain cells at well-controlled pressure magnitude and duration.

A novel impulsive cell pressurization experiment has been developed using a Kolsky bar device to investigate the molecular/cellular mechanisms of blast-induced traumatic brain injury.

التسرع الضغط من الخلايا العصبية في الدماغ الرضية لدراسة الإصابات

A novel impulsive cell pressurization experiment has been developed using a Kolsky bar device to investigate blast-induced traumatic brain injury (TBI). ...

Magnetic Resonance Elastography Methodology for the Evaluation of Tissue Engineered Construct Growth

Traditional mechanical testing often results in the destruction of the sample, and in the case of long term tissue engineered construct studies, the use of destructive assessment is not acceptable. A proposed alternative is the use of an imaging process called magnetic resonance elastography. Elastography is a nondestructive method for determining the engineered outcome by measuring local mechanical property values (i.e., complex shear modulus), which are essential markers for identifying the structure and functionality of a tissue. As a noninvasive means for evaluation, the monitoring of engineered constructs with imaging modalities such as magnetic resonance imaging (MRI) has seen increasing interest in the past decade1. For example, the magnetic resonance (MR) techniques of diffusion and relaxometry have been able to characterize the changes in chemical and physical properties during engineered tissue development2. The method proposed in the following protocol uses microscopic magnetic resonance elastography (&mu;MRE) as a noninvasive MR based technique for measuring the mechanical properties of small soft tissues3. MRE is achieved by coupling a sonic mechanical actuator with the tissue of interest and recording the shear wave propagation with an MR scanner4. Recently, &mu;MRE has been applied in tissue engineering to acquire essential growth information that is traditionally measured using destructive mechanical macroscopic techniques5. In the following procedure, elastography is achieved through the imaging of engineered constructs with a modified Hahn spin-echo sequence coupled with a mechanical actuator. As shown in Figure 1, the modified sequence synchronizes image acquisition with the transmission of external shear waves; subsequently, the motion is sensitized through the use of oscillating bipolar pairs. Following collection of images with positive and negative motion sensitization, complex division of the data produce a shear wave image. Then, the image is assessed using an inversion algorithm to generate a shear stiffness map6. The resulting measurements at each voxel have been shown to strongly correlate (R2&gt;0.9914) with data collected using dynamic mechanical analysis7. In this study, elastography is integrated into the tissue development process for monitoring human mesenchymal stem cell (hMSC) differentiation into adipogenic and osteogenic constructs as shown in Figure 2.

The procedure demonstrates the methodology of magnetic resonance elastography for monitoring the engineered outcome of adipose and osteogenic tissue engineered constructs through noninvasive local assessment of the mechanical properties using microscopic magnetic resonance elastography (&mu;MRE).

المغناطيسي منهجية Elastography الرنين لتقييم الأنسجة المهندسة النمو كونستركت

Traditional mechanical testing often results in the destruction of the sample, and in the case of long term tissue engineered construct studies, the use ...

Monitoring the Wall Mechanics During Stent Deployment in a Vessel

Clinical trials have reported different restenosis rates for various stent designs1. It is speculated that stent-induced strain concentrations on the arterial wall lead to tissue injury, which initiates restenosis2-7. This hypothesis needs further investigations including better quantifications of non-uniform strain distribution on the artery following stent implantation. A non-contact surface strain measurement method for the stented artery is presented in this work. ARAMIS stereo optical surface strain measurement system uses two optical high speed cameras to capture the motion of each reference point, and resolve three dimensional strains over the deforming surface8,9. As a mesh stent is deployed into a latex vessel with a random contrasting pattern sprayed or drawn on its outer surface, the surface strain is recorded at every instant of the deformation. The calculated strain distributions can then be used to understand the local lesion response, validate the computational models, and formulate hypotheses for further in vivo study.

Stent-induced arterial strain distributions are characterized using an optical surface strain measurement system. This visualization technique is used to gain insights into the impact of stent implantation on the host vessel.

رصد ميكانيكا الحائط أثناء النشر ستينت في وعاء

Clinical trials have reported different restenosis rates for various stent designs1. It is speculated that stent-induced strain concentrations on the ...

Lignin Down-regulation of Zea mays via dsRNAi and Klason Lignin Analysis

To facilitate the use of lignocellulosic biomass as an alternative bioenergy resource, during biological conversion processes, a pretreatment step is needed to open up the structure of the plant cell wall, increasing the accessibility of the cell wall carbohydrates. Lignin, a polyphenolic material present in many cell wall types, is known to be a significant hindrance to enzyme access. Reduction in lignin content to a level that does not interfere with the structural integrity and defense system of the plant might be a valuable step to reduce the costs of bioethanol production. In this study, we have genetically down-regulated one of the lignin biosynthesis-related genes, cinnamoyl-CoA reductase (ZmCCR1) via a double stranded RNA interference technique. The ZmCCR1_RNAi construct was integrated into the maize genome using the particle bombardment method. Transgenic maize plants grew normally as compared to the wild-type control plants without interfering with biomass growth or defense mechanisms, with the exception of displaying of brown-coloration in transgenic plants leaf mid-ribs, husks, and stems. The microscopic analyses, in conjunction with the histological assay, revealed that the leaf sclerenchyma fibers were thinned but the structure and size of other major vascular system components was not altered. The lignin content in the transgenic maize was reduced by 7-8.7%, the crystalline cellulose content was increased in response to lignin reduction, and hemicelluloses remained unchanged. The analyses may indicate that carbon flow might have been shifted from lignin biosynthesis to cellulose biosynthesis. This article delineates the procedures used to down-regulate the lignin content in maize via RNAi technology, and the cell wall compositional analyses used to verify the effect of the modifications on the cell wall structure.

Lignin Down-regulation of Zea mays via dsRNAi and Klason Lignin Analysis

A double stranded RNA interference (dsRNAi) technique is employed to down-regulate the maize cinnamoyl coenzyme A reductase (ZmCCR1) gene to lower plant lignin content. Lignin down-regulation from the cell wall is visualized by microscopic analyses and quantified by the Klason method. Compositional changes in hemicellulose and crystalline cellulose are analyzed.

اللجنين أسفل تنظيم<em&gt; ذرة شامية</em&gt; عبر dsRNAi وKlason تحليل اللجنين

To facilitate the use of lignocellulosic biomass as an alternative bioenergy resource, during biological conversion processes, a pretreatment step is ...

Determination of Zeta Potential via Nanoparticle Translocation Velocities through a Tunable Nanopore: Using DNA-modified Particles as an Example

Nanopore technologies, known collectively as Resistive Pulse Sensors (RPS), are being used to detect, quantify and characterize proteins, molecules and nanoparticles. Tunable resistive pulse sensing (TRPS) is a relatively recent adaptation to RPS that incorporates a tunable pore that can be altered in real time. Here, we use TRPS to monitor the translocation times of DNA-modified nanoparticles as they traverse the tunable pore membrane as a function of DNA concentration and structure (i.e., single-stranded to double-stranded DNA).
TRPS is based on two Ag/AgCl electrodes, separated by an elastomeric pore membrane that establishes a stable ionic current upon an applied electric field. Unlike various optical-based particle characterization technologies, TRPS can characterize individual particles amongst a sample population, allowing for multimodal samples to be analyzed with ease. Here, we demonstrate zeta potential measurements via particle translocation velocities of known standards and apply these to sample analyte translocation times, thus resulting in measuring the zeta potential of those analytes.
As well as acquiring mean zeta potential values, the samples are all measured using a particle-by-particle perspective exhibiting more information on a given sample through sample population distributions, for example. Of such, this method demonstrates potential within sensing applications for both medical and environmental fields.

Here we use a polyurethane tunable nanopore integrated into a resistive pulse sensing technique to characterize nanoparticles surface chemistry via the measurement of particle translocation velocities, which can be used to determine the zeta potential of individual nanoparticles.

تقرير زيتا المحتملة عبر جسيمات متناهية الصغر إزفاء السرعات من خلال الانضباطي ثقب النانو: استخدام الجسيمات المعدلة الحمض النووي كمثال

Nanopore technologies, known collectively as Resistive Pulse Sensors (RPS), are being used to detect, quantify and characterize proteins, molecules and ...

Patterning the Geometry of Human Embryonic Stem Cell Colonies on Compliant Substrates to Control Tissue-Level Mechanics

Human embryonic stem cells demonstrate a unique ability to respond to morphogens in vitro by self-organizing patterns of cell fate specification that correspond to primary germ layer formation during embryogenesis. Thus, these cells represent a powerful tool with which to examine the mechanisms that drive early human development. We have developed a method to culture human embryonic stem cells in confined colonies on compliant substrates that provides control over both the geometry of the colonies and their mechanical environment in order to recapitulate the physical parameters that underlie embryogenesis. The key feature of this method is the ability to generate polyacrylamide hydrogels with defined patterns of extracellular matrix ligand at the surface to promote cell attachment. This is achieved by fabricating stencils with the desired geometric patterns, using these stencils to create patterns of extracellular matrix ligand on glass coverslips, and transferring these patterns to polyacrylamide hydrogels during polymerization. This method is also compatible with traction force microscopy, allowing the user to measure and map the distribution of cell-generated forces within the confined colonies. In combination with standard biochemical assays, these measurements can be used to examine the role mechanical cues play in fate specification and morphogenesis during early human development.

Extracellular matrix ligands can be patterned onto polyacrylamide hydrogels to enable the culture of human embryonic stem cells in confined colonies on compliant substrates. This method can be combined with traction force microscopy and biochemical assays to examine the interplay between tissue geometry, cell-generated forces, and fate specification.

زخرفه هندسه مستعمرات الخلايا الجذعية الجنينية البشرية علي ركائز متوافقة للتحكم في ميكانيكا مستوي الانسجه

Human embryonic stem cells demonstrate a unique ability to respond to morphogens in vitro by self-organizing patterns of cell fate specification that ...

Transplantation of a 3D Bioprinted Patch in a Murine Model of Myocardial Infarction

Testing regenerative properties of 3D bioprinted cardiac patches in vivo using murine models of heart failure via permanent left anterior descending (LAD) ligation is a challenging procedure and has a high mortality rate due to its nature. We developed a method to consistently transplant bioprinted patches of cells and hydrogels onto the epicardium of an infarcted mouse heart to test their regenerative properties in a robust and feasible way. First, a deeply anesthetized mouse is carefully intubated and ventilated. Following left lateral thoracotomy (surgical opening of the chest), the exposed LAD is permanently ligated and the bioprinted patch transplanted onto the epicardium. The mouse quickly recovers from the procedure after chest closure. The advantages of this robust and quick approach include a predicted 28-day mortality rate of up to 30% (lower than the 44% reported by other studies using a similar model of permanent LAD ligation in mice). Moreover, the approach described in this protocol is versatile and could be adapted to test bioprinted patches using different cell types or hydrogels where high numbers of animals are needed to optimally power studies. Overall, we present this as an advantageous approach which may change preclinical testing in future studies for the field of cardiac regeneration and tissue engineering.

This protocol aims to transplant a 3D bioprinted patch onto the epicardium of infarcted mice modeling heart failure. It includes details regarding anesthesia, the surgical chest opening, permanent ligation of the left anterior descending (LAD) coronary artery and application of a bioprinted patch onto the infarcted area of the heart.

زرع رقعة مطبوعة بيولوجية ثلاثية الأبعاد في نموذج مورين من احتشاء عضلة القلب

Testing regenerative properties of 3D bioprinted cardiac patches in vivo using murine models of heart failure via permanent left anterior descending (LAD) ...

Probing Myosin Ensemble Mechanics in Actin Filament Bundles Using Optical Tweezers

Myosins are motor proteins that hydrolyze ATP to step along actin filament (AF) tracks and are essential in cellular processes such as motility and muscle contraction. To understand their force-generating mechanisms, myosin II has been investigated both at the single-molecule (SM) level and as teams of motors in vitro using biophysical methods such as optical trapping.
These studies showed that myosin force-generating behavior can differ greatly when moving from the single-molecule level in a three-bead arrangement to groups of motors working together on a rigid bead or coverslip surface in a gliding arrangement. However, these assay constructions do not permit evaluating the group dynamics of myosin within viscoelastic structural hierarchy as they would within a cell. We have developed a method using optical tweezers to investigate the mechanics of force generation by myosin ensembles interacting with multiple actin filaments.
These actomyosin bundles facilitate investigation in a hierarchical and compliant environment that captures motor communication and ensemble force output. The customizable nature of the assay allows for altering experimental conditions to understand how modifications to the myosin ensemble, actin filament bundle, or the surrounding environment result in differing force outputs.

Formation of actomyosin bundles in vitro and measuring myosin ensemble force generation using optical tweezers is presented and discussed.

فحص ميكانيكا فرقة الميوسين في حزم خيوط الأكتين باستخدام ملاقط بصرية

Myosins are motor proteins that hydrolyze ATP to step along actin filament (AF) tracks and are essential in cellular processes such as motility and muscle ...

Chemical Triphosphorylation of Oligonucleotides

The 5&#8242;-triphosphate is an essential nucleic acid modification found throughout all life and increasingly used as a functional modification of oligonucleotides in biotechnology and synthetic biology. Oligonucleotide 5&#8242;-triphosphates have historically been prepared in vitro by enzymatic methods. However, these methods are limited to natural RNA oligonucleotides, have strong sequence preferences, and tend to produce heterogeneous products. New methods of chemical triphosphorylation complement both the reduced cost of automated oligonucleotide synthesis by phosphoramidite chemistry and the diverse range of nucleotide modifications now available. Thus, the synthesis of oligonucleotide triphosphates of arbitrary sequence and length, and optionally containing various nonnatural modifications, is now accessible.
This paper presents the appropriate methods and techniques for chemical triphosphorylation of oligonucleotides using salicyl phosphorochloridite and pyrophosphate. This method uses commercially available reagents, is compatible with most oligonucleotides prepared by standard solid-phase synthesis methods, and can be completed in 2 h following oligonucleotide synthesis, before deprotection and purification. Two uses of chemically triphosphorylated oligonucleotides as substrates for catalytic RNA enzymes are demonstrated, including the synthesis of a mirror-image version of the hammerhead ribozyme from nonbiological L-RNA triphosphates.

Oligonucleotide 5&#8242;-triphosphates are ubiquitous components in essential biological pathways and have seen increasing use in biotechnology applications. Here, we describe techniques for the routine synthesis and purification of oligonucleotide 5&#8242;-triphosphates, starting from oligonucleotides prepared by standard automated synthesis techniques.

الفسفرة الثلاثية الكيميائية لأوليغونوكليوتيدات

The 5&#8242;-triphosphate is an essential nucleic acid modification found throughout all life and increasingly used as a functional modification of ...

Facilitating Cerebral Organoid Culture via Lateral Soft Light Illumination

At present, cerebral organoid culture technology is still complicated to operate and difficult to apply on a large scale. It is necessary to find a simple and practical solution. Therefore, a more feasible cerebral organoid protocol is proposed in the present study. To solve the unavoidable inconvenience in medium change and organoid transfer in the early stage, the current research optimizes the operation technology by applying the engineering principle. A soft light lamp was adopted to laterally illuminate the embryoid body (EB) samples, allowing the EBs to be seen by the naked eye through the enhanced diffuse reflection effect. Using the principle of secondary flow generated by rotation, the organoids gather toward the center of the well, which facilitates the operation of medium change or organoid transfer. Compared to the dispersed cell, the embryoid body settles faster in the pipette. Using this phenomenon, most of the free cells and dead cell fragments can be effectively removed in a simple way, preventing EBs from incurring damage from centrifugation. This study facilitates the operation of cerebral organoid culture and helps to promote the application of brain organoids.

Facilitating Cerebral Organoid Culture via Lateral Soft Light Illumination

Cerebral organoids provide unprecedented opportunities for studying organ development and human disease pathology. Although great success has been achieved with cerebral organoid culture systems, there are still operational difficulties in applying this technology. The present protocol describes a cerebral organoid procedure that facilitates medium change and organoid transfer.

تسهيل الثقافة العضوية الدماغية من خلال إضاءة الضوء الناعم الجانبي

At present, cerebral organoid culture technology is still complicated to operate and difficult to apply on a large scale. It is necessary to find a simple ...