קרן Wellcome למתן מימון גישה פתוחה לאוניברסיטת אוקספורד. רוברט דיקון הוא חבר בקבוצת OXION אוקספורד, במימון קרן Wellcome מענק WT084655MA.

1. מנגנון מבחן המסך ההפוך של 1.1 Kondziela המסך ההפוך הוא 43 ס&quot;מ מרובעים של רשת תיל בהיקף של 12 מ&quot;מ ריבועים של 1 חוט בקוטר מ&quot;מ (איור 1). הוא מוקף בסנטימטר חרוזים עץ עמוק 4 (מה שמונע את העכבר מדי פעם שמנסה מטיפוס על לצד השני) (איור 2). מבחן משקולות 1.2 שבע משקולות מהוות את המנגנון. כל אחד מורכב מכדור של חוט סבוך בסדר מד נירוסטה, &quot;אספן קנה מידה&quot;, כפי שנהג למנוע היווצרות קנה מידה גיר בקומקומים מקומיים. המשקל של זה הוא קטן (7 גרם) אבל בכל קנה מידה אספן מצורף לסדרה של קישורי שרשרת פלדה, כל אחד במשקל של כ -13 גרם. מספר קישורי טווחי 1-7. המשקולות שלהם ולכן הם: 20, 33, 46, 59, 72, 85 ו -98 גר &#39;(איורים 3 ו -4). 2. מקצועןcedure לכל הבדיקות, מביא לדקות ניסיוניות חדר 5-20 עכברים לפני הבדיקה כדי לוודא שהם ער כמו שצריך. ככלל, כדי לאפשר התאוששות של כוח שרירים וחזרו לרמות נורמליות של עוררות, הנח את העכברים על ידי חזרה לכלוב בבית אחרי כל בדיקת מנוע. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מבחן המסך ההפוך של Kondziela </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נוהל: מניח את העכבר במרכז מסך רשת התיל, להתחיל stopclock, לסובב את המסך למצב הפוך מעל 2 שניות, עם ראשו של העכבר בירידה הראשון. החזק את מסך בהתמדה 40-50 ס&quot;מ מעל משטח מרופד. שים לב לזמן שבו העכבר נופל, או להסיר אותו כשהוא הגיע בפעם הקריטריון של 60 שניות. פעמים קריטריון ארוכות יותר עשויות להיות שימושיות עבור כמה ניסויים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הבקיע את המסך ההפוך: </li></ol> נופל בין 1-10 שניות = 1 נופלים בין 11-25 שניות = 2 נופל בין 26-60 שניות = 3 נפילה אחרי 60 שניות = 4 או, לדוגמה, עבור 2 דקות: נופל בין 1-10 שניות = 1 נופלים בין 11-25 שניות = 2 נופל בין 26-60 שניות = 3 נופל בין 61-90 שניות = 4 נפילה אחרי 90 שניות = 5 3. מבחן משקולות החזק את עכבר על ידי בסיס האמצע / של הזנב ומוריד אותה כדי לאפשר לו לתפוס את המשקל הראשון (20 גר &#39;) שהוא שוכב על ספסל המעבדה. כפי שהוא תופס את אספן קנה המידה החוט עם כפותיו קדמיות, תתחיל שעון תחנה ולהעלות את העכבר עד לקישור ברור של הספסל. ההמתנה של שלוש שניות היא הקריטריון. אם העכבר יורד במשקל בפחות מ -3 שניות, שים לב לזמן שהחזיק במשקל. הנח את העכבר לכ -10 שניות ולנסות את זה במשקל שוב. אם זה נכשל שלוש פעמים, שמסיים את המשפט, והטיל עליו את העכבר הוא הזמן / המשקל המרבי שהושג. אם מחזיק אותו במשך 3 שניות ואז לנסות את זה על המשקל הבא הכבד ביותר. אם זה מרים את זה במשך 3 שניות, לבדוק אותו במשקל הכבד הבא, אחרי שיש לךבדק את כל cagemates במשקל הראשון. שוב, ניתן לו שלוש הזדמנויות להחזיק את המשקל ל3 שניות. ציון כולל סופי מחושב כמכפלה של מספר החוליות בשרשרת הכבדה ביותר שנערכה עבור 3 שניות המלאה, מוכפל בזמן (שניות) שהוא החזיק. אם הוא ירד במשקל הכבד ביותר לפני 3 שניות ערך הביניים מתאים מחושב. כך עכבר מחזיק במשקל של 5 קישור במשך 3 שניות, אבל לא הצליח להרים את משקל 6-קישור, מוקצה ציון של (5 x 3) = 15. אם מחזיק את המשקל 6-הקישור ל1 שנייה, זה עשרות (5 X 3) + (1) = 16. לפעמים עכברים לא יכולים להיות מונעים במידה מספקת כדי לאחוז את המכשיר. זה בדרך כלל מתרחש בבעלי חיים גדולים יותר. בעיה זו ניתן למזער על ידי מחזיק את העכברים בזנבו לזמן ארוך יותר לפני שהביא אותו במרחק מרתק של כדור התיל.

<ol>
	<li>Bulfield, G., Siller, W. G., Wight, P. A., Moore, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=K.J.X+chromosome-linked+muscular+dystrophy+(mdx)+in+the+mouse.">K.J.X chromosome-linked muscular dystrophy (mdx) in the mouse.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 81, 1189-1192 (1984).</li><li>Contet, C., Rawlins, J. N. P., Deacon, R. M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+129S2/SvHsd+and+C57BL/6JOlaHsd+mice+on+a+test+battery+assessing+sensorimotor,+affective+and+cognitive+behaviours:+implications+for+the+study+of+genetically+modified+mice.">A comparison of 129S2/SvHsd and C57BL/6JOlaHsd mice on a test battery assessing sensorimotor, affective and cognitive behaviours: implications for the study of genetically modified mice.</a> Behavioural Brain Research. 124, 33-46 (2001).</li><li>Deacon, R. M. J., Brook, R. C., Meyer, D., Haeckel, O., Ashcroft, F. M., Miki, T., Seino, S., Liss, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+phenotyping+of+mice+lacking+the+KATP+channel+subunit+Kir6.2.">Behavioral phenotyping of mice lacking the KATP channel subunit Kir6.2.</a> Physiol. Behav. 87, 723-733 (2006).</li><li>Deacon, R. M. J., Croucher, A., Rawlins, J. N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippocampal+cytotoxic+lesion+effects+on+species-typical+behaviors+in+mice.">Hippocampal cytotoxic lesion effects on species-typical behaviors in mice.</a> Behav. Brain Res. 132, 203-213 (2002).</li><li>Rawlins, J. N. P., Morley, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+the+behavior+of+C57BL/6+and+C57BL/10+mice.">A comparison of the behavior of C57BL/6 and C57BL/10 mice.</a> Behav. Brain Res. 179, 239-247 (2007).</li><li>Guenther, K., Deacon, R. M. J., Perry, V. H., Rawlins, J. N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+behavioural+changes+in+scrapie-affected+mice+and+the+influence+of+dapsone.">Early behavioural changes in scrapie-affected mice and the influence of dapsone.</a> Eur. J. Neurosci. 14, 401-409 (2001).</li><li>Kondziela, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eine+neue+method+zur+messung+der+muskularen+relaxation+bei+weissen+mausen.">Eine neue method zur messung der muskularen relaxation bei weissen mausen.</a> Arch. Int. Pharmacodyn. 152, 277-284 (1964).</li></ol>

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

מודלים עכבר של מחלות רבות המשפיעות על מערכות רכב האדם ללא הרף מפותחים, ולכן מבחני טובים של כוח בעכברים הם חיוניים. דוגמאות כוללות את צורות רבות של ניוון שרירים, פרקינסון והנטינגטון כוריאה. מבחני חוזק גם למצוא שימוש במודלים של התחדשות עצב לאחר פגיעה עצבית בעמוד השדרה או פריפריה. התעשייה ותאונות הדרכים ממשיכות לגרום נכות ניכרת לבני אדם, אבל הרבה עבודה קלינית היא חוקרת כיום דרכים אפשריות של טיפול המבוססות על גורמי גדילה עצביים. שרירים לא עובדים בנפרד. הם מופעלים על ידי המוח, רפלקסים המקומי או בעמוד השדרה גבוה יותר, דרך צמתים neuromuscular והעבודה במסגרת המגבלות של שרירים אחרים ומערכת השלד. לכן, המורכבות של מערכת פירושו במבחני vivo של כוח שרירים בבעלי החיים ער הם חיוניים בהערכת מצבו הנוכחי וeffeCTS של כל טיפולים משוערים. עכברים להחזיק באופן אינסטינקטיבי לחומרים בעלי אחיזה חזקה, וכך מאסכאלאס Mus הוא חיה מודל אידיאלית שבו כדי להעריך את ההפרעות של כוח שרירים וטיפולים אפשריים.

לאדם חילוני, הרעיון של מדידת כוח בעכברים עשוי להיראות מגוחך, אפילו משהו של אוקסימורון. עם זאת, זה לא בלי סיבה, כי עכברי בית / מעבדה נקראים מאסכאלאס Mus. יש להם למעשה חוזק גבוה מאוד / יחס משקל, גדול יותר מזה של חולדות. למשל, עכברים בוגרים בקלות יכולים לתמוך במשקל הגוף שלהם, אפילו רק באמצעות קדמי או כפותיו אחוריות, מעט מאוד חולדות מעבדה בוגרים יכולות לעשות את זה. עכברים הם משחקים תפקיד גדול עוד יותר במחקר ביו. הם יכולים לשמש למודל הפרעות מוטוריות אנושיות רבות, הן במערכת עצבים מרכזית ובמקור הגופני. לשעבר כוללים את יותר משלושים צורות של ניוון שרירים תורשתי 1 ומיאסטניה גרביס, ואילו דוגמאות של האחרונים הן טרשת נפוצה, ניוון שרירים, פרקינסון, מחלת הנטינגטון וטרשת לרוחב amyotrophic. לכל הדגמים הללו, הערכה מלאה של הליקויים המוטוריים שלהם חייבת לכלול בדיקות ספציפיותשל כוח.

measuring the strength of mice

Kondziela 7 המציא את מבחן המסך ההפוך ופרסם אותו בשנת 1964. זהו מבחן של כוח שרירים תוך שימוש בכל ארבעת הגפיים. עכברים נורמלים ביותר להבקיע בקלות המרבית במשימה זו, הוא מסך ברוטו מהיר אך חסר רגישות, ומבחן המשקולות המתוארים במאמר זה יספק מדד מדויק יותר של כוח שרירים. יש גם כמה חתיכות מתח מבוססות מד של מכשיר זמינה באופן מסחרי, שתספק נתונים מדורגים יותר ממבחן המסך ההפוך, אבל העלות שלהם יכולה לשים אותם מעבר להישג ידם של מעבדות רבות שאינו מתמחים בבדיקת חוזק. לפיכך בשנת 2000 מכשירים זולים ופשוטים שפותחו על ידי המחבר. הוא מורכב מסדרה של קישורי שרשרת באורך הולך וגדל, שצורפו ל&quot; אספן פרווה &quot;כדור של רשת תיל דקה שנמכר למניעת אבנית להצטבר באזורי מים קשים. תצפית מקרית גילתה כי עכברים יכולים לאחוז בחוזקה אלה מאוד, ולכן הם אידיאליים כפי שהוכיחו את אחיזת poinלא למנגנון הרמת משקולות. אשמה משותפת עם מטר כוח מסחרי היא שהבר או תכונה אחרת היא אחיזה לא רזה מספיק לעכברים להפעיל אחיזה מקסימלית. ככלל, דק יותר חוט או בבר, טוב יותר עכבר יכול לאחוז בציפורניים הקטנות שלה. זהו מבחן של כוח טהור, אם כי כמו לכל מבחן גורמי מוטיבציה שעלול לשחק תפקיד. נראה השימוש של אספנים בקנה מידה, עם זאת, כדי למזער את בעיות מוטיבציה כמוטיבציה נראית גבוהה מאוד לעכברים בוגרים נורמלים הצעירים ביותר.

תוצאות צפויות Contet et al. 2 הראו כי עכברי 129S2/sv בוצעו באופן דומה במבחן המשקולות לעכברים C57BL / 6. עכברי C57BL / 6 נקבה קלעו כ 15, 129 17 עכברים, מה שאומר שהם יכולים להרים כ 5 קישורי שרשרת, סביב 70 גרם. זהו ערך גבוה; בדרך כלל 2-3 קישורי שרשרת (ציון 6-9, 33-46 גר &#39;) הם הרימו על ידי עכברי C57BL / 6 5. הבדלים אלה קשורים ככל הנראה לגורמים כגון כמה טיפול בעכברים שקיבלת ואת הפרטים של הטכניקה של הנסיין. הנגעים בהיפוקמפוס לא השפיעו על כוח כפי שהיא נמדדת גם על ידי בדיקת משקולות או 4 מסך ההפוך. פריון (מרוסק) עכברים חולים היו לקויים על המסך ההפוך על ידי 18 שבועות לאחר הדבקת 6. למרות שנפגע במידה מסוימת בסרגל האופקי וrotarod יחסית לעכברים C57BL / 6, C57BL/10 עכברים לא היו נפגעים בהרמת משקולות 5. עכברים בנוקאאוט לtהוא KATP מקטע ערוץ Kir6.2 לא היו נפגעים במסך ההפוך או בדיקות משקולות, אם כי הנקבות קבלו ציון גבוהה יותר מאשר גברים על 3 האחרונים. זה היה יוצא דופן; ​​בדרך כלל הזכרים הכבדים יותר להציג העצמה גדולה יותר מאשר הנקבות. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/2610/2610fig1.jpg" /> איור 1. המסך ההפוך. <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/2610/2610fig2.jpg" /> איור 2. סגור תצוגה של עכבר על המסך ההפוך. <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/2610/2610fig3.jpg" /> איור 3. משקולות, הנע בין 20 גרם ל -98 גרם. <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/2610/2610fig4.jpg" /> <strong&gt; איור 4. הרמת משקולות עכבר.

Watch this Scientific Journal Video about Measuring the Strength of Mice at JoVE.com

Measuring the Strength of Mice

גירעונות בכוח השרירים להתרחש בתנאים רבים קליניים כגון מחלת הנוירון מוטורית. המסך ההפוך ובדיקות הרמת משקולות מתוארות כאן כוח למדוד בעכברים באופן כמעט בלעדי, עם השפעה מינימאלית של גורמים כגון תיאום.

מדידת עוצמת העכברים

Kondziela7 devised the inverted screen test and published it in 1964. It is a test of muscle strength using all four limbs. Most normal mice easily score ...

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

53.8K Views.  University of Oxford. גירעונות בכוח השרירים להתרחש בתנאים רבים קליניים כגון מחלת הנוירון מוטורית. המסך ההפוך ובדיקות הרמת משקולות מתוארות כאן כוח למדוד בעכברים באופן כמעט בלעדי, עם השפעה מינימאלית של גורמים כגון תיאום.

Video: Measuring the Strength of Mice

Programmed Electrical Stimulation in Mice

Genetically-modified mice have emerged as a preferable animal model to study the molecular mechanisms underlying conduction abnormalities, atrial and ventricular arrhythmias, and sudden cardiac death.1 Intracardiac pacing studies can be performed in mice using a 1.1F octapolar catheter inserted into the jugular vein, and advanced into the right atrium and ventricle. Here, we illustrate the steps involved in performing programmed electrical stimulation in mice. Surface ECG and intracardiac electrograms are recorded simultaneously in the atria, atrioventricular junction, and ventricular myocardium, whereas intracardiac pacing of the atrium is performed using an external stimulator. Thus, programmed electrical stimulation in mice provides unique opportunities to explore molecular mechanisms underlying conduction defects and cardiac arrhythmias.

Programmed electrical stimulation provides the ability to determine conduction properties of the heart, and the possibility to induce and terminate cardiac arrhythmias using various pacing protocols. Using a transvenous catheter, intracardiac electrogram recordings can be obtained in mice following programmed electrical stimulation protocols to identify arrhythmogenic substrates.

גירוי חשמלי מתוכנת עכברים

Genetically-modified mice have emerged as a preferable animal model to study the molecular mechanisms underlying conduction abnormalities, atrial and ...

Transthoracic Echocardiography in Mice

In recent years, murine models have become the primary avenue for studying the molecular mechanisms of cardiac dysfunction resulting from changes in gene expression. Transgenic and gene targeting methods can be used to generate mice with altered cardiac size and function,1-3 and as a result, in vivo techniques are needed to evaluate their cardiac phenotype. Transthoracic echocardiography, pulse wave Doppler (PWD), and tissue Doppler imaging (TDI) can be used to provide dimensional measurements of the mouse heart and to quantify the degree of cardiac systolic and diastolic performance. Two-dimensional imaging is used to detect abnormal anatomy or movements of the left ventricle, whereas M-mode echo is used for quantification of cardiac dimensions and contractility.4,5 In addition, PWD is used to quantify localized velocity of turbulent flow,6 whereas TDI is used to measure the velocity of myocardial motion.7 Thus, transthoracic echocardiography offers a comprehensive method for the noninvasive evaluation of cardiac function in mice.

Transthoracic echocardiography offers a noninvasive method for the evaluation of cardiac function in mice. A combination of ultrasound and Doppler imaging modalities can be used to obtain dimensional measurements of the heart and intracardiac blood flow, which together provide an assessment of cardiac systolic and diastolic performance.

אקו Transthoracic ב עכברים

In recent years, murine models have become the primary avenue for studying the molecular mechanisms of cardiac dysfunction resulting from changes in gene ...

Manual Muscle Testing:  A Method of Measuring Extremity Muscle Strength Applied to Critically Ill Patients

Survivors of acute respiratory distress syndrome (ARDS) and other causes of critical illness often have generalized weakness, reduced exercise tolerance, and persistent nerve and muscle impairments after hospital discharge.1-6 Using an explicit protocol with a structured approach to training and quality assurance of research staff, manual muscle testing (MMT) is a highly reliable method for assessing strength, using a standardized clinical examination, for patients following ARDS, and can be completed with mechanically ventilated patients who can tolerate sitting upright in bed and are able to follow two-step commands. 7, 8 
This video demonstrates a protocol for MMT, which has been taught to &ge;43 research staff who have performed &gt;800 assessments on &gt;280 ARDS survivors. Modifications for the bedridden patient are included. Each muscle is tested with specific techniques for positioning, stabilization, resistance, and palpation for each score of the 6-point ordinal Medical Research Council scale.7,9-11 Three upper and three lower extremity muscles are graded in this protocol: shoulder abduction, elbow flexion, wrist extension, hip flexion, knee extension, and ankle dorsiflexion. These muscles were chosen based on the standard approach for evaluating patients for ICU-acquired weakness used in prior publications. 1,2.

Survivors of acute respiratory distress syndrome (ARDS) and critical illness frequently develop long-lasting muscle weakness. Manual muscle testing (MMT) is a standardized clinical examination commonly used to measure strength of peripheral skeletal muscle groups. This video demonstrates MMT using the 6-point Medical Research Council scale.

בדיקת שרירים ידנית: שיטת מדידת חוזק שרירים בגפיים יישומית על חולים אנושים

Survivors of acute respiratory distress syndrome (ARDS) and other causes of critical illness often have generalized weakness, reduced exercise tolerance, ...

Orthotopic Aortic Transplantation in Mice for the Study of Vascular Disease

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. This is largely true, but there are a number of important principles that can reduce the difficulty of these procedures and enhance reproducibility. Orthotopic aortic transplantation is an excellent procedure in which to learn these principles because it involves only two end-to-end anastomoses, but requires good suturing technique and handling of the vessels for consistent success. This procedure begins with the procurement of a length of abdominal aorta from a donor animal, followed by division of the native aorta in the recipient. The procured aorta is then placed between the divided ends of the recipient aorta and sutured into place using end-to-end anastomoses. To accomplish this objective successfully requires a high degree of concentration, good tools, a steady hand, and an appreciation of how easily the vasculature of a mouse can be damaged, resulting in thrombosis. Learning these important principles is what occupies most of the beginner's time when learning microsurgery in small rodents. Throughout this protocol, we refer to these important points. This model can be used to study vascular disease in a variety of different experimental systems1-8. In the context shown here, it is most often used for the study of post-transplant vascular disease, a common long-term complication of solid organ transplantation in which intimal hyperplasia occurs within the allograft. The primary advantage of the model is that it facilitates quantitative morphometric analyses and the transplanted vessel lies contiguous to the endogenous vessel, which can serve as an additional control9. The technique shown here is most often used for mice weighing 18-25 grams. We have accumulated most of our experience using the C57BL/6J, BALB/cJ, and C3H/HeJ strains.

We describe a technique in which a section of the abdominal aorta from a mouse is transplanted orthotopically to just below the renal arteries in an allogeneic or syngeneic recipient. This technique can be useful in studies in which transplantation of large arteries of uniform size is deemed advantageous.

השתלת אב עורקים בעכברי orthotopic לחקר מחלת כלי דם

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. ...

Measuring Ascending Aortic Stiffness In Vivo in Mice Using Ultrasound

We present a protocol for measuring in vivo aortic stiffness in mice using high-resolution ultrasound imaging. Aortic diameter is measured by ultrasound and aortic blood pressure is measured invasively with a solid-state pressure catheter. Blood pressure is raised then lowered incrementally by intravenous infusion of vasoactive drugs phenylephrine and sodium nitroprusside. Aortic diameter is measured for each pressure step to characterize the pressure-diameter relationship of the ascending aorta. Stiffness indices derived from the pressure-diameter relationship can be calculated from the data collected. Calculation of arterial compliance is described in this protocol.
This technique can be used to investigate mechanisms underlying increased aortic stiffness associated with cardiovascular disease and aging. The technique produces a physiologically relevant measure of stiffness compared to ex vivo approaches because physiological influences on aortic stiffness are incorporated in the measurement. The primary limitation of this technique is the measurement error introduced from the movement of the aorta during the cardiac cycle. This motion can be compensated by adjusting the location of the probe with the aortic movement as well as making multiple measurements of the aortic pressure-diameter relationship and expanding the experimental group size.

Measuring Ascending Aortic Stiffness In Vivo in Mice Using Ultrasound

We describe a technique for measuring aortic stiffness from its pressure-diameter relationship in vivo in mice. Aortic diameter is recorded by ultrasound and aortic pressure is measured invasively with a solid-state pressure catheter. Blood pressure is changed incrementally and the resulting diameter is measured.

מדידה עולה אבי העורקים נוקשים<em&gt; In vivo</em&gt; בעכברים באמצעות אולטראסאונד

We present a protocol for measuring in vivo aortic stiffness in mice using high-resolution ultrasound imaging. Aortic diameter is measured by ultrasound ...

Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) is a more desirable method for the constriction of the transverse aorta in mice than standard open-chest transverse aortic constriction (TAC). Although transverse aortic constriction is a highly functional method for the induction of high pressure in the left ventricle, it is a more difficult and lengthy procedure due to its use of artificial ventilation with tracheal intubation. TAC is oftentimes also less survivable, as the newer method, MTAC, neither requires the cutting of the ribs and intercostal muscles nor tracheal intubation with a ventilation setup. In MTAC, as opposed to a thoracotomy to access to the chest cavity, the aortic arch is reached through a midline incision in the anterior neck. The thyroid is pulled back to reveal the sternal notch. The sternum is subsequently cut down to the second rib level, and the aortic arch is reached simply by separating the connective tissues and thymus. From there, a suture can be wrapped around the arch and tied with a spacer, and then the sternal cut and skin can be closed. MTAC is a much faster and less invasive way to induce left ventricular hypertension and enables the possibility for high-throughput studies. The success of the constriction can be verified using high-frequency trans-thoracic echocardiography, particularly color Doppler and pulsed-wave Doppler, to determine the flow velocities of the aortic arch and left and right carotid arteries, the dimension of the blood vessels, and the left ventricular function and morphology. A successful constriction will also trigger significant histopathological changes, such as cardiac muscle cell hypertrophy with interstitial and perivascular fibrosis. Here, the procedure of MTAC is described, demonstrating how the resulting flow changes in the carotid arteries can be examined with echocardiography, gross morphology, and histopathological changes in the heart.

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) conserves the essentials of regular transverse aortic constriction (TAC) while eliminating the use of a ventilator with tracheal intubation. It proves to be a highly desirable method for high-throughput studies on left ventricular overload, particularly in translational studies.

פולשנית רוחבי אבי העורקים התכווצות עכברים

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) is a more desirable method for the constriction of the transverse aorta in mice than standard ...

Improving Strength, Power, Muscle Aerobic Capacity, and Glucose Tolerance through Short-term Progressive Strength Training Among Elderly People

This protocol describes the simultaneous use of a broad span of methods to examine muscle aerobic capacity, glucose tolerance, strength, and power in elderly people performing short-term resistance training (RET). Supervised progressive resistance training for 1 h three times a week over 8 weeks was performed by RET participants (71&#177;1 years, range 65-80). Compared to a control group without training, the RET showed improvements on the measures used to indicate strength, power, glucose tolerance, and several parameters of muscle aerobic capacity. Strength training was performed in a gym with only robust fitness equipment. An isokinetic dynamometer for knee extensor strength permitted the measurement of concentric, eccentric, and static strength, which increased for the RET group (8-12% post- versus pre-test). The power (rate of force development, RFD) at the initial 0-30 ms also showed an increase for the RET group (52%). A glucose tolerance test with frequent blood glucose measurements showed improvements only for the RET group in terms of blood glucose values after 2 h (14%) and the area under the curve (21%). The blood lipid profile also improved (8%). From muscle biopsy samples prepared using histochemistry, the amount of fiber type IIa increased, and a trend towards a decrease in IIx in the RET group reflected a change to a more oxidative profile in terms of fiber composition. Western blot (to determine the protein content related to the signaling for muscle protein synthesis) showed a rise of 69% in both Akt and mTOR in the RET group; this also showed an increase in mitochondrial proteins for OXPHOS complex II and citrate synthase (both ~30%) and for complex IV (90%), in only the RET group. We demonstrate that this type of progressive resistance training offers various improvements (e.g., strength, power, aerobic capacity, glucose tolerance, and plasma lipid profile).

The effect of short-term resistance training on elderly people was investigated through the simultaneous use of several methods. Compared to a control group, many improvements were seen, including on muscle aerobic capacity, glucose tolerance, strength, power, and muscle quality (i.e., protein involved in cell signaling and muscle fiber type composition).

שיפור כוח, כוח, יכולת שריר אירובי, סובלנות גלוקוז באמצעות אימון לטווח קצר כוח מתמשך בקרב אנשים קשישים

This protocol describes the simultaneous use of a broad span of methods to examine muscle aerobic capacity, glucose tolerance, strength, and power in ...

Measuring the Effect of Chemicals on the Growth and Reproduction of Caenorhabditis elegans

Toxicological evaluation is crucial for understanding the effects of chemicals on living organisms in basic and applied biological science fields. A non-mammalian soil round worm, Caenorhabditis elegans, is a valuable model organism for toxicology studies due to its convenience and lack of animal ethics issues compared with mammalian animal systems. In this protocol, a detailed procedure of toxicological evaluation of chemicals in C. elegans is described. A clinical anticancer drug, etoposide, which targets human topoisomerase II and inhibits DNA replication of human cancer cells, was selected as a model testing chemical. Age-synchronized C. elegans eggs were exposed to either dimethyl sulfoxide (DMSO) or etoposide, and then the growth of C. elegans was monitored every day for 4 days by the stereo microscope observation. The total number of eggs laid from C. elegans treated with DMSO or etoposide was also counted by using the stereo microscope. Etoposide treatment significantly affected the growth and reproduction of C. elegans. By comparison of the total number of eggs laid from worms with different treatment periods of chemicals, it can be decided that the reproductive toxicity of chemicals on C. elegans reproduction is reversible or irreversible. These protocols may be helpful for both the development of various drugs and risk assessment of environmental toxicants.

Measuring the Effect of Chemicals on the Growth and Reproduction of Caenorhabditis elegans

A basic protocol to evaluate the toxicity of chemicals in a model animal, Caenorhabditis elegans, is described. The method is convenient and useful for the development of pharmaceuticals as well as for the risk assessment of various environmental pollutants.

מדידת אפקט של כימיקלים על גדילה, רבייה של Caenorhabditis elegans

Toxicological evaluation is crucial for understanding the effects of chemicals on living organisms in basic and applied biological science fields. A ...

Assessment and Characterization of Hyaloid Vessels in Mice

In the eye, the embryonic hyaloid vessels nourish the developing lens and retina and regress when the retinal vessels develop. Persistent or failed regression of hyaloid vessels can be seen in diseases such as persistent hyperplastic primary vitreous (PHPV), leading to an obstructed light path and impaired visual function. Understanding the mechanisms underlying the hyaloid vessel regression may lead to new molecular insights into the vascular regression process and potential new ways to manage diseases with persistent hyaloid vessels. Here we describe the procedures for imaging hyaloid in live mice with optical coherence tomography (OCT) and fundus fluorescein angiography (FFA) and a detailed technical protocol of isolating and flat-mounting hyaloid ex vivo for quantitative analysis. Low-density lipoprotein receptor-related protein 5 (LRP5) knockout mice were used as an experimental model of persistent hyaloid vessels, to illustrate the techniques. Together, these techniques may facilitate a thorough assessment of hyaloid vessels as an experimental model of vascular regression and studies on the mechanism of persistent hyaloid vessels.

This protocol describes both in vivo and ex vivo methods to fully visualize and characterize hyaloid vessels, a model of vascular regression in mouse eyes, using optical coherence tomography and fundus fluorescein angiography for the live imaging and ex vivo isolation and subsequent flat mount of hyaloid for quantitative analysis.

הערכה ואפיון של אוניות היאלואיד בעכברים

In the eye, the embryonic hyaloid vessels nourish the developing lens and retina and regress when the retinal vessels develop. Persistent or failed ...

Blood Collection Through Subclavian Vein Puncture in Mice

The mouse is the foremost mammalian model for studying human disease and human health. However, blood sample collection from mice is challenging in research work. Tail blood collection is a popular method when a small amount of blood sample is needed. Orbital artery could be considered if a large amount of blood is needed but this blood collection method has ethical issues. Formerly, we demonstrated the feasibility and safety of blood sample collection through subclavian vein puncture in rats, and here we investigate whether this method could be used in mice. We report that this method is safe and practical for blood collection in mice. Blood collection through the subclavian vein puncture in mice can be a convenient method in daily research works.

Here, we present a protocol to take blood samples from the subclavian vein of mice.

איסוף דם באמצעות ניקוב ורידים תת-מותני בעכברים

The mouse is the foremost mammalian model for studying human disease and human health. However, blood sample collection from mice is challenging in ...