JoVE Logo

Sign In

שימוש נכון בקלאבים אוטומטיים

Overview

רוברט ריו וז'יפנג צ'ן, אוניברסיטת פנסילבניה, פארק האוניברסיטה, הרשות הפלסטינית

Autoclaving היא אחת השיטות הנפוצות ביותר במעבדה לצורך טיהור. הפריטים הנפוצים ביותר מטוהרים עם autoclave הם אלה ליצור קשר עם דגימות ביולוגיות (בדרך כלל אלה המכילים מיקרואורגניזמים). תכשיר אוטומטי פועל על ידי שימוש בקיטור בטמפרטורה גבוהה בלחץ כדי להרוג מיקרואורגניזמים הקיימים בחומרים הטעונים. זרימת קיטור מספקת והעברת חום חיוניים עבור autoclaving יעיל מאוד, שהם העקרונות העיקריים שיש לקחת בחשבון בעת אריזת חומרים. יש לקחת בחשבון את הבטיחות בעת עבודה עם autoclave בשל הלחץ הגבוה והטמפרטורה המופעלים בו, אשר גם קובע גבולות אילו חומרים תואמים ועשוי לדרוש תשומת לב מיוחדת בעת אריזה, טעינה ופריקה של חומרים.

Principles

Autoclaving מנצל טמפרטורה גבוהה (121 °C ), קיטור בלחץ גבוה (לפחות 15 פסאיי) במשך 30 דקות לפחות כדי להשיג טיהור. זה הורג מיקרואורגניזמים על ידי התייבשות התא בתנאים קשים. קצב הפליטה תלוי באופי העומס. עבור חומרים מוצקים יבשים, ניתן להגיע למחזור פליטה מהיר. עם זאת, פסולת נוזלית וביולוגית דורשים מחזורי פליטה איטיים כדי למנוע רתיחה על נוזלים מחוממים במיוחד. קלטות מחוון משמשות לעתים קרובות כדי לאמת את האפקטיביות של autoclaving. האינדיקטורים פועלים באמצעות סימונים כימיים רגישים לחום כדי לראות אם ה- autoclave עומד בדרישות הטמפרטורה (121 °C (121 °F). שינוי הצבע של סרט מחוון מרמז על פירוק אוטומטי יעיל, בעוד ששום שינוי צבע אינו מציין שהעומס אינו מזוהם. עם זאת, אל תשתמש בסרט המחוון כמקור היחיד לראיות לטיהור, שכן הקלטת לא תשקף אם המיקרואורגניזמים נהרגים או לא, אלא רק אם ההקלבה האוטומטית עומדת בדרישות הטמפרטורה. תנאי העבודה גם קובעים גבולות אילו חומרים מתאימים ומהם מהווים חששות בטיחותיים. באופן עקרוני, הימנע מחומרים אשר בקלות לשרוף, להמיס, או להתפוצץ תחת תנאי טמפרטורה ולחץ גבוהים. יש להקפיד בעת טעינה ופריקה של דרכים אוטומטיות כדי למנוע כוויות על ידי קיטור או מים חמים. כדי להשיג טיהור מספיק, ודא שיש מספיק העברת חום וזרימה בתוך autoclaves, שקיות, וחומרים בעת האריזה.

Procedure

1. ללבוש ציוד מגן אישי מתאים (PPE)

תנאי הלחץ והטמפרטורה הגבוהים בהם נתקלו במהלך השעבוד האוטומטי מהווים סיכוני שריפת חום או פיצוץ פוטנציאליים. PPE מתאים כולל מעיל מעבדה, משקפי בטיחות, כפפות עמידות בחום ונעלי בוהן סגורות; אלה חייבים להיות משוחקים בעת טעינה ופריקה של חומרים מן autoclave. בעת התמודדות עם דגימות נוזליות, ללבוש סינר ומגן פנים כמו PPE נוסף.

2. הכנת חומרים להעמסה

  1. זהה חומר תואם אוטומטית ומנע אוטומטית חומר לא תואם
    למרות autoclaving מייצג שיטה נפוצה וכלכלית לטיהור, לא כל החומרים מתאימים autoclaving בשל הלחץ הגבוה ותנאי העבודה בטמפרטורה. באופן כללי, כל החומרים שיתאדו או יימסו תחת הקיטור בלחץ גבוה אינם תואמים ל- autoclaving. זה כולל חומרים כמו ממיסים אורגניים, פלסטיק עמיד בחום נמוך כגון פוליסטירן, פוליאתילן, ומתכות למעט נירוסטה. לעולם אל תדליק אוטומטית כימיקלים דליקים, מאכלים, רעילים, תגובתיים או רדיואקטיביים. חומרים התואמים עבור autoclaving כוללים Pyrex או סוג I זכוכית בורוסיליקט, פוליפרופילן, פוליקרבונט, כפפות, נירוסטה, טיפים פיפטה, נייר (לשים בתוך שקיות autoclave), ופתרונות מדיה.
  2. חומר אריזה
    לאחר זיהוי חומרים תואמי autoclave, אריזה מתאימה חשובה גם מכיוון שהיא מבטיחה בטיחות והפעלה אוטומטית יעילה. להלן העקרונות הבסיסיים בעת אריזת חומרים:
    1. השתמש תמיד במיכל משני עשוי פוליפרופילן או נירוסטה.
    2. עבור דגימות נוזליות, מלא את הקרבון סביב 1/2 מלא ולשחרר את המכסות או להשתמש סגירות מאוורר. לעולם אל תמלאו את המיכלים מעל 2/3 מלאים עם המכסה מהודק לחלוטין.
    3. בדוק את כלי הזכוכית כדי לוודא שאין סדקים. אם מזוהים סדקים, יש להיפטר מכלי זכוכית בכלי קיבול ראויים. לעולם אל תרכב אוטומטית כלי זכוכית שבור ידוע.
    4. השתמש תמיד בשקיות תואמות-תכולה אוטומטית כדי לארוז פסולת. על התיקים צריכות להיות קלטות אינדיקציה ויש לפתוח בקצוות לפני הטעינה כדי לאפשר קיטור בתוך השקית.
    5. לעולם אל תעמיסו על השקיות או המיכל כדי לאפשר זרימת קיטור מספקת לעיקור מלא. השאר רווח בין פריטים.
    6. אל תערבב חומרים לא תואמים.
    7. לעולם אל תשים פריטים חדים בשקית הפסולת.

3. חומר עומס

  1. בדוק את פנים ה- autoclave כדי לוודא שלא נותר סכנה פוטנציאלית מהמשתמש הקודם.
  2. נקה את הניקוז לפני טעינת חומרים כדי לאפשר זרימת דם טובה.
  3. ודא את התיקים לא לגעת בקירות הפנימיים של autoclave כדי למנוע נמס.
  4. נוזלים וחומרים יבשים דורשים מחזורים שונים ויש צורך לעבוד באופן אוטומטי בנפרד.
  5. סגור את הדלת בחוזקה.

4. פעולת ההקלבה האוטומטית

  1. רק כוח אדם מאומן צריך להיות מותר להפעיל autoclaves. עיין במדריך הציוד במידת הצורך, מאחר שפרוטוקולי הפעולה משתנים בין דרכים אוטומטיות שונות.
  2. לאחר לוודא את הדלת autoclave סגורה היטב, להגדיר את טמפרטורת autoclaving ל 121 °C (55 °F) ולשמור על לחץ של לפחות 15 פסאיי.
  3. כדי להגדיר את הזמן והמחזור של ההקלבה האוטומטית, יש לקחת בחשבון את הגורמים הבאים:
    1. המלצות ציוד ממדריך היצרן.
    2. סוג החומרים הטעונים בפנים: יבש או נוזלי.
    3. כמויות החומרים שנטענו.
    4. צורה וגודל של גורם מכיל בשימוש.
    5. מוליכות חום של מיכל וחומרים.
    6. מטרת הטיהור.

5. פריקת חומרים משועבדים אוטומטית

  1. ללבוש PPE מתאים כמתואר לעיל.
  2. ודא שהטמפרטורה והלחץ של ה-autoclave חזרו לטווח בטוח.
  3. עמדו מאחורי הדלת ופתחו בזהירות את הדלת כדי לשחרר כל שאריות קיטור בתוך האוטוקלבה לחדר.
  4. אפשר לחומרים בתוך autoclave לעמוד במשך 10 דקות כדי לשחרר כל קיטור או אוויר חם לכוד בתוך החומר.
  5. אין לנער חומר נוזלי בעת הסרתו מהאוטוקלבה. במידת הצורך, לתייג את החומר כמו חם כדי למנוע כוויות חום לאדם אשר עשוי להיות מודע לעובדה כי החומר כבר autoclaved לאחרונה.
  6. המתן עד שהחומר יתקרר לטמפרטורת החדר לפני ההובלה בתוך המעבדה או מחוץ למעבדה. בשני המקרים, הקפד להשתמש בלימה מתאימה להובלה.
  7. רשום את פרטי החומרים ותנאי השעבוד האוטומטי ביומן המשתמש.

Application and Summary

בהשוואה לשיטות טיהור כימיות או קרינתיות, autoclaving מייצג את השיטה הכלכלית והמעשית ביותר במעבדה. עם זאת, כדי להבטיח בטיחות (הימנעות מהמסה, כוויות חום או פיצוץ), זהה חומרים תואמי autoclave ותרגל אריזה, טעינה ופריקה תקינים. הבטחת יעילות טיהור מספקת דורשת מיכל או חומרי שקית ומספיק מקום בין חומרים בתוך האוטוקלבה. תחזוקה ובדיקה של autoclave על לוח זמנים קבוע נדרשים כדי להבטיח autoclaves פועלים כראוי.

References

  1. Autoclave Safety and Operation, 2015, Division of Research Safety, University of Illinois. at Autoclave Use, Environmental Health & Safety, Princeton University. atProper Use of a Steam Autoclave, 2016, Environmental Health & Safety, Arizona State University.
  2. Fact Sheet: Using Autoclaves Safely, Environmental Health & Safety, California State University, Los Angeles.
  3. Guideline for the Safe Use of Autoclaves, 2003, Environmental Health and Safety Service, University of Ottawa.

Tags

Skip to...

0:00

Overview

0:46

Principles of Autoclave Use

1:58

Preparing Samples for the Autoclave

3:53

Using the Autoclave

6:14

Summary

Videos from this collection:

article

Now Playing

שימוש נכון בקלאבים אוטומטיים

Lab Safety

87.5K Views

article

ציוד מגן אישי מתאים

Lab Safety

234.2K Views

article

תחנות חירום לשטיפת עיניים ומקלחת

Lab Safety

82.3K Views

article

בטיחות חשמלית

Lab Safety

42.0K Views

article

עבודה עם צנטריפוגות

Lab Safety

95.6K Views

article

עבודה עם מקורות חמים וקרים

Lab Safety

41.4K Views

article

הנחיות במקרה חירום במעבדה

Lab Safety

182.8K Views

article

אחסון כימי: קטגוריות, סיכונים ותאימות

Lab Safety

108.4K Views

article

טיפול בטוח בחומצות מינרליות

Lab Safety

44.7K Views

article

טיפול בשפכים כימיים

Lab Safety

87.4K Views

article

ברדסים אדים וארונות זרימה למינאר

Lab Safety

68.7K Views

article

טיפול בכימיקלים רגישים לאוויר ומים באמצעות קו שלנק

Lab Safety

21.9K Views

article

הפעלה נכונה של ציוד מבוסס ואקום

Lab Safety

15.8K Views

article

הפעלת תא הכפפות

Lab Safety

28.7K Views

article

הפעלת כלי כור בלחץ גבוה

Lab Safety

16.1K Views

See More

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved