Method Article
* These authors contributed equally
מאמר זה מתאר פרוטוקול רומן המשלב המניפולציה התרופתית של טלמטריה זיכרון ורדיו לתעד ולכמת את תפקיד הקוגניציה בניווט.
יכולתו של בהמה לחוש וללמוד על סביבתו ממלאת תפקיד מרכזי בתהליכים רבים התנהגותיים, כוללים ניווט, הגירה, פיזור ליקוט. עם זאת, ההבנה של תפקיד הקוגניציה בפיתוח אסטרטגיות ניווט ואת המנגנונים אסטרטגיות אלה הוא מוגבל על ידי קשיים מתודולוגיים מעורב ניטור, מניפולציה של קוגניציה של, ומעקב אחר חיות בר. מחקר זה מתאר פרוטוקול להתמודדות עם תפקיד הקוגניציה בניווט המשלב מניפולציה תרופתית של התנהגות עם טלמטריה רדיו דיוק גבוה. הגישה משתמשת סקופולמין, אנטגוניסט קולטן מוסקריני, לתמרן יכולות מרחביות קוגניטיבית. חיות שטופלו אז מנוטרות בתדירות גבוהה ברזולוציה מרחבית גבוהה באמצעות טריאנגולציה מרחוק. פרוטוקול זה יושם בתוך אוכלוסיה של מזרח צבוע צבים (Chrysemys picta) אשר מיושבמקורות מי חלוף עונתיות ~ 100 שנים, נעו בין מקורות הרחוקים באמצעות מדויק (± 3.5 מ '), מורכבות (כלומר, שאינו ליניארי עם tortuosity הגבוה החוצים בתי גידול מרובים), ומסלולים צפויים לומדים לפני 4 שנים. מחקר זה הראה כי התהליכים שמוצגים צבים אלה עולים בקנה אחד עם היווצרות ויזכור זיכרון המרחבי. יחד, תוצאות אלו עולות בקנה אחד עם תפקיד של קוגניציה מרחבית בניווט מורכב ולהאיר את האינטגרציה של טכניקות אקולוגיות תרופתיות בחקר הקוגניציה וניווט.
קוגניציה (להלן מוגדרים "כל התהליכים כרוכים ברכישה, אחסון, ושימוש במידע מהסביבה" 1) היא מרכזית מערך של משימות ניווט מורכבות 2. לדוגמא, עגור קנדי (canadensis עגור) מראה שיפור ניכר דיוק נודדות עם ניסיון 3, והטבעת מינים של צבי הים בחופי הולדתן כמו גוזלים ולחזור כמבוגרים 4-6. בדומה לכך, הגירה, פיזור מוצלח, ואת ציר ליקוט על יכולתו של בעל חיים כדי לאסוף מידע על הסביבה המרחבית שלהם 7,8. חלק מבעלי החיים מופיעים ללמוד דרכי ניווט ביחס לתכונות נוף ספציפיות 9 ועלולים להשתמש קוגניציה מרחבית בעת מעבר בין קינון ומחפש מזון באזורים 10. מחקר שנערך לאחרונה על צבים צבועים מזרח (Chrysemys picta) מרמז תקופה קריטית ניווט, שבו ניווט מוצלח של בית גידול שבהרים כבוגרים תלוי Juveניסיון הנילוס בטווח גילאים צר (<4 שנים 11-13). למרות יחד מחקרים אלה להדגים את ההתקדמות שחלה בהבנת התפקיד של למידה בניווט 4-6, 14-16, המנגנונים העומדים בבסיס התנהגויות כאלה והתפקיד מלא קוגניציה בניווט להישאר חידתית, במיוחד בקרב בעלי חוליות 8, 17 , 18.
תחקירים מבצעיים לתוך התפקיד של קוגניציה בניווט הם נדירים 2, 8, 18, בעיקר בשל קשיים מתודולוגיים מעורב ניטור, מניפולציה, ומעקב אחר חיות בר. לדוגמה, את הכף במרחב ובזמן גדול שעליו בעלי חיים רבים מנווט לעתים קרובות ימנע חקירות הן סוג של מידע כי החיות האלה פוטנציאל ללמוד וכיצד מידע כי היא רכשה. מבצעי ניסוי לעתים קרובות להתמודד עם הקשיים הלוגיסטיים גילוי ואיתור חיות כאשר ניטור התנהגות על פני שטחים גדולים כגון ומסגרות זמן, וכך להגביל את הסוגנתונים שניתן לגבות והמסקנות שניתן להסיק. למרות השימוש של מערכת מיקום הגלובלי רכוב בעלי חיים (GPS) חליליות עשוי לשפר את ההסתברות לגילוי של חיות החל נרחב, נתונים מרחביים שנאספו על ידי אמצעים אלה הם בדרך כלל החלטה מאוד גסה חסר מרכיב ההתנהגותי מפורט. כתוצאה מכך, הנתונים שניתן לגבות בנסיבות כאלה הם בעלי ערך המוגבל לבחינת וריאציה קלה בביצועים בין קבוצות שונות או טיפולים ניסיוניים. באופן דומה, המניפולציה הישירה, המבוקר של התנהגויות היעד אסורה לעתים קרובות על ידי המאזניים במרחב ובזמן הטיפוסיים של התנהגויות ניווט, כמו גם על ידי אילוצים לוגיסטיים טבועים של מחקרי שדה. מציאת בעלי חיים בסביבתם הטבעית, ללכוד לתמרן אותם, ולאחר מכן לאסוף נתונים התנהגותיים מבלי לייצר התנהגויות מזויפות בשוגג אתגרים גדולים של עבודה עם בעלי חיים בתחום. לכן, את העיצוב של ניסויים על frEE יריעת חיות מוגבל לעתים קרובות את היכולת לבצע ניסויים בשדה קפדניים, נשלטו על עצם את התפקיד של קוגניציה בניווט מוגבלת.
המחקר הנוכחי עוקף רבים מהקשיים הקודמים של חוקר את היחסים בין קוגניציה וניווט בתחום באמצעות שילוב רומן של מניפולציה תרופתית ומעקב ברזולוציה גבוהה של חיות ניווט בחופשיות בתנאי שדה. Scopolamine, קולטן אצטילכולין מוסקריניים (mAChR) אנטגוניסט, הוכח לחסום היווצרות הזיכרון המרחבי ותזכרו ידי חסימת פעילות כולינרגית במוחם של מגוון מינים חוליות 18-24. Scopolamine ניתן להשתמש ביעילות על חיות חינם היקף בתנאי שדה 11, 18 ויש לו השפעה ניכרת אך זמנית (למשל, 6 - 8 שעות אצל זוחלים). Methylscopolamine, אנטגוניסט mAChR שאינו לחצות מחסום הדם-מוח-מחסום 19-21, יכול לשמש כדי לשלוט עלההשפעות שנלוות האפשריות של סקופולמין ועבור בהיבטים הלא-קוגניטיביים של התנהגות 11. פרמקולוגיה מאפשרת המניפולציה והמדויקת של הכרה על ידי קולטנים המשפיעים ישירות, וטלמטריה רדיו דיוק גבוה מאפשרת התצפית של תופעות הנובעות על התנהגות. מדידות שבוצעו באמצעות טריאנגולציה מרחוק בשתי מרחבית גבוהה (± 2.5 מ ') ובזמן (15 דקה') ברזולוציה לאפשר תיעוד כימות המדויק של יחסים בהתנהגות בעלי החיים אל המניפולציה הניסויית של קוגניציה.
המחקר 11 זה נערך בין החודשים מאי ואוגוסט 2013 ו 2014 בחוות Chesapeake, אזור מחקר וניהול בטבע 3,300 דונם וחקלאות בקנט ושות 'MD, ארה"ב (39.194 ° N, 76.187 ° W). הפרוטוקול כולל חמישה שלבים עיקריים: (1) לכידה וטיפול בבעלי חיים (2) הדבקת משדרי רדיו (3) הכינו הסוכנים התרופתיים (4) ניטור וטיפול תנועות של בעלי חיים, (5) analyzing נתונים מרחביים. המחקר שיתואר בהמשך התמקד המזרח צבוע צב (Chrysemys picta). צבי באוכלוסייה מוקדי לעסוק בתנועות יבשות שנתיות שבה הם עוזבים ברכות ביתם ונווט אל בתי גידול מימיים חלופיים באמצעות אחד מארבעה מאוד מדויק (± 3.5 מ '), מורכבים, וצפויים למדי נתיבים 11, 12. מניפולציה תרופתית של בעלי חיים מערכת זו יחד עם טלמטריה רדיו ברזולוציה גבוהה שופכת אור על תפקיד הקוגניציה בניווט חיות ברות חופשי.
כל הנהלים הקשורים בנושאי בעלי חיים אושרו על ידי ועדות הטיפול בבעלי החיים המוסדיים השתמש של פרנקלין מרשל וושינגטון מכללות אחרי כל התקנות מקומיות, המדינה, פדרלית.
לכידה וטיפול 1.
2. משדר רדיו פרזול
3. הכנה תרופתית
זהירות: hydrobromide Scopolamine ו methylbromide סקופולמין הם אנטגוניסטים אצטילכולין חזק. כשעובד עם תרופות אלה, עיינו בגיליון בטיחות חומרים, להשתמש בציוד מגן אישי מתאים (למשל, כפפות, קטר מכסה מנוע), אחרי פרוטוקולי בטיחות במעבדה להימנע accidenקשר טל.
4. תנועות צב מסלול באמצעות 11 טלמטריה רדיו, 12
5. ניתוח מרחבים
שימוש בפרוטוקול לעיל, את התפקיד של קוגניציה בניווט התבצע במסגרת אוכלוסיית המזרח צבוע צבים (Chrysemys picta) כי חווה מקורות מי חלוף עונתיים עבור ~ 100 שנים. אוכלוסייה זו שוכנת שילוב של חלוף (הסחוט בשנה ובמהירות - בכמה שעות) ובתי גידול מימי קבע (איור 1). מחקרים קודמים מראים כי לאחר הבריכות שלהם הן סחוטות, צבי התושב לנווט למקורות מים חלופיים עם דיוק גבוה (± 3.5 מ ') באמצעות מסלולים מורכבים, צפויים למדו לפני 4 שנים של גיל 11-13 (איור 1).
מחקר זה הראה כי התהליכים שמוצגים צבים אלה עולים בקנה אחד עם היווצרות זיכרון המרחבי ולהיזכר 11. Scopolamine פעילות חסומה כולינרגית במוחם של בעלי חיים (כולל היווצרות מרחבית זיכרון ולהיזכר 19-21 ) במהלך הניווט. מבוגרים מנוסים שטופלו סקופולמין שהוטה הנתיבים ההסטוריים המדויקים שלהם תוך קטינים נאיביים חסרי ניסיון (ובכך זיכרון) לא הושפעו סקופולמין, דבר המצביעים על השפעה של סקופולמין על תהליכי תפיסה קוגניטיבית או שאינם מרחבית 11 (איורים 1 ו -2). יתר על כן, לא ניווט מבוגר ולא לנוער הושפע מלא methylscopolamine. בעלי חיים בוגרים (כלומר, אלה עם ניסיון קודם באתר) הזריק סקופולמין אבדו את יכל לעקוב אחר השבילים ההסטוריים ואת הקטינים המשתמשים רמזים מקומיים לנווט ומבוגרים אלה שקבלו זריקת הסם כי אינו חוצים את מחסום דם-המוח היה לֹא מְעוּשֶׂה. לכן, ניווט במבוגרים במערכת זו נראה קוגניטיבי בטבע. יחד, תוצאות אלו עולות בקנה אחד עם הרעיון כי יש צבי תקופה קריטית שבמהלכה הם חייבים ללמוד נתיבים ולהשתמש מערכת הקוגניטיבית תלויה כולינרגיתs (הזיכרון המרחבי) כדי לנווט כמבוגרים 11-13.
איור 1. ניווט מבוסס על עיבוד קוגניטיביים אצל צבי בוגרי תנועות נציג של (א) מבוגרים מנוסים (ב) קטינים תמימים. (1 - 3 שנים) מן הזמני (T) כדי ברכות קבעו (P) בזמן שטופלו או סקופולמין או methylscopolamine. כל מבוגרי קבלת סקופולמין (א, צהוב, n = 9) התרחקו דרמטיים (מעל 200 מ ') מן הדרכים המסורתיות (האדום, p <0.001), בעוד כל בני הנוער התמימים שטופלו בתרופה (ב, צהוב, n = 7) שמור תנועה בדיוק בתוך דרכים מסורתיות (p> 0.999). כל המבוגרים המלאים (א, לבן, n = 9) ולשלוט קטינים תמימים (ב, לבנים, n = 6) ואחריו דרכים מסורתיות (p> 0.999). כל שורה של נקודות מייצגות אדם אחד. כל צבים מכל הקבוצהים מתוחזק דיוק גבוה לפני ההזרקה (p> 0.999). מנתוני רוט קרוכמל 11. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 2. Precision של הניווט הוא פונקציה של עיבוד קוגניטיביים אצל צבים בוגרים א) כל הצבים הפגינו דיוק גבוה של תנועה לפני הזריקה של הטיפול (סקופולמין) או מלא (methylscopolamine;.. P> 0.999) ב) לאחר הזרקה, מבוגרים בטיפול סקופולמין חרגו באופן משמעותי (p <0.001) מן הדרכים המסורתיות שלהם. בניגוד לכך, כל הקבוצות האחרות המשיכו לנווט עם דיוק גבוה (± 3.5 מ '; p> 0.999). הוספת להציג פירוט רב של חפיפה מן 0.5 - 3.5 מ '. Points הם אמצעי ± SEM. מנתוני רוט קרוכמל 11. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
הפרוטוקול המובא כאן מאפשר הנסיין לתעד ולכמת את תפקיד הקוגניציה בניווט. קוגניציה מניפולציה בתחום הוכיחה קשה, כמו רוב הגישות לעזוב הנסיינים מסוגלים לדעת אילו היבטים ספציפיים של התנהגות בעלי החיים מנוצלים. עם זאת, הפרוטוקול המובא כאן מאפשר הנסיין לתמרן במדויק ובכך להעריך את התפקיד של קוגניציה בניווט. הטכניקה נוספת מאפשרת הנסיינים לפקח ניווט חיה בזמן אמת עם רזולוציה מרחבית גבוהה במיוחד ובזמן, ובכך מעצימה לחוקרים ברור לתעד את השלכות התנהגותיות של מניפולציה ניסויית של קוגניציה בטבע הפראי.
במסגרת זו, טלמטריה רדיו מספקת את היכולת לפקח על תנועות חיה בדיוק על פני מרחקים גדולים, מניב הוא מרחבית איכותית נתונים התנהגותיים. למרות יישום זה של טלמטריה הוא בשום פנים ואופן לא28 חדש, רוב המחקרים להשתמש בטכניקה זו כדי לענות על שאלות גסות באקולוגית התנהגות (למשל, שימוש גידול, גודל טווח הביתה, וכו '). הניטור התכוף על המיקום בעלי חיים (4 - 5 פעמים לכל hr) תאר בשילוב כאן עם ניתוחים מרחביים בקנה מידה זעירה לספק רכיב ההתנהגותי מפורט יותר למיקום של חיה בחלל. ראוי לציין, כי מרחק המעקב האופטימלי יהיה פונקציה של הכח המשדר ואת רגישות הציוד. בדרך כלל זה הוא להתאמן הכי טוב להישאר לפחות 25 מ 'הרחק מן החי כדי למנוע להפריע לזה, אם כי כאשר החיה ממוקמת צמחייה פתוחה, המרחק הדרוש כדי למנוע הפרעה כזאת עשויה להיות גדול.
ביישום הנוכחי, טלמטריה רדיו דיוק גבוה מציעה יתרונות ייחודיים על השימוש חליליות GPS רכוב חיה. משדרים יכולים להיות קטנים, הם פחות יקרים, ויש לי חיי סוללה ארוכים יותר מאשר יחידות GPS 28. יתר על כן, לארזולוציה emporal של טריאנגולציה מרחוק באמצעות טלמטריה רדיו הוא עדיף בהרבה על GPS חיה רכוב. באופן זמני, יחידות GPS רכוב בעלי חיים מוגבלים על ידי חיי הסוללה (כלומר, מספר סופי של מדידות שניתן לנקוט, ובכך מגבילה את התדירות שלהן). מעקב דיוק גבוה עם GPS ידרוש סוללה גדולה להשיג עמדה בתדירות גבוהה לאורך תקופה ארוכה של זמן. המסה המשמעותית של הסוללות האלה מונעת מהם השימוש ביחידות GPS חיה רכובה קטנות 28. יתר על כן, טלמטריה רדיו דיוק גבוה אינה מוגבלת על ידי עלויות יחזרו נתונים יקרים, או להגבלה על פי זיכרון אחסון ב- Board. עם זאת, טלמטריה רדיו אינה אופטימלית עבור מעקב אחר בעלי חיים עם טווחי תנועה גדולים במיוחד (למשל, במהלך נדידה למרחקים ארוכים), במים עמוקים או מיני fossorial, או אלה בבתי גידול גדל בבתים תלולים. בנוסף, מעקב רדיו דיוק גבוה יכול להיות מאוד זמן אינטנסיבי ודורש צוות שדה גדול יחסית, במיוחד fאו מהיר מינים; ולכן, גישה זו אולי לא מתאימה לכל השאלות.
מניפולציה תרופתית עם סקופולמין ו methylscopolamine מציעה מקדמות ספציפיות לחקר הקוגניציה בסביבה טבעית. התנהגות יכולה להיות קשה לפרש, במיוחד בתנאי שדה, וכך להגביל את היקף החקירה פוטנציאלית. Scopolamine מאפשר מניפולציה של קולטנים ספציפיים המשפיעים על תהליכים קוגניטיביים, המאפשר החוקר לשאול שאלות במפורש על מניפולציה של קוגניציה. יתר על כן, כפי סקופולמין בקלות חוצה את מחסום דם-מוח methylscopolamine לא, חוקרים יכולים לשלוט על השפעות שנלוות של סקופולמין ובכך מתנערים קוגניטיבי מבוסס מהתנהגויות לא קוגניטיבית. יתרונות אלה של מניפולציה תרופתית לאפשר לדור ובדיקות עוקבות של תחזיות התנהגותית ברורות להרשות את שימוש עיצובים ניסיוניים מורכבים בתנאי שדה. עם זאת, SCopolamine הוא אנטגוניסט אצטילכולין מאוד כללי כי יכולות להיות השפעות בלתי צפויות על התנהגותי, חושיות אחרות, וקוגניטיבית מערכות 21-24. לכן, יתכן כי השימוש סקופולמין יכול לייצר תופעות שיכולות להפריע הפרשנות של התנהגויות מורכבות (למשל, הרחבת אישון, רגישות תרמית 21-24, 29, 30); אין תופעות של בלבול כזה זוהו במחקרים זה או קודם 11-13, 19, 20.
בעיות נפוצות נתקלו תוך מעקב רדיו כולל אות חלשה, אובדן האות, והפרעה. כדי להתמודד עם אות חלשה, להגדיל רווח, נטיית אנטנת שינוי, להתקרב אל החיה (להיות זהיר, כדי למנוע להפריע Anima), ולרומם את האנטנה 28. אם האות לאיבוד לחלוטין, לחפש עם הרווח ואנטנה גבוהה ככל האפשר בתוך מוגבל מתפתל באזור כלפי חוץ חיפוש 28. הפרעות ניתן להיאבק ידי הפחתת רווח, באמצעות attenuator או ביטול רעש מסנן (ואם כן מצויד), ושינוי כיוון האנטנה. במקרה של הפרעה לפעולה לא ניתן להתגבר על ידי אמצעים אלה, לעבוד בעתיד באתר המחקר צריך להתמקד רוחבי פס שאינם מושפעים על ידי הפרעה.
בסך הכל, מניפולציה תרופתית בשילוב עם טלמטריה דיוק גבוה מספקת תובנה ייחודית התפקיד קוגניציה מתנגנת המוצא ביטוי של ניווט. החידוש של שיטה ייחודית זו מאפשרת לחוקרים להבין טוב יותר את מנגנוני נוירולוגיות הבסיסית כי להצמיח קוגניציה בניווט. יתר על כן, טכניקות אלה יכולים לשמש למחקרים נוספים של קוגניציה בטבע עם תחולה בפרט להתנהגויות מפורשות מרחבית (למשל, ניווט, הגירה, חיפוש אחר מזון, ופיזור) 11-13, 33, את האבולוציה של קוגניציה 1, 7, ושימור (למשל, טרנסלוקציה, השבה) 31, 32. טכניקה זו שימושית עבור צלצל רחבהדואר של מינים במגוון רחב של בתי גידול יהיה חיוני להבנת דפוסי phylogenic בקוגניציה.
The authors have nothing to disclose.
This research was funded by Washington College's Provost's Office, Middendorf Fund, Hodson Trust, and Franklin and Marshall's Hackman Fund and College of Grants. We thank E. Counihan, S. Giordano, F. Rauh, and A. Roth for assistance in the field. We thank M. Conner, R. Fleegle, and D. Startt at Chesapeake Farms, and Chino Farms for permission and access. The Washington College GIS Program helped with the preparation of maps.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Scopolamine bromide | Sigma | S0929 | USP |
Scopolamine methylbromide | Sigma | S8502, 1421009 | USP and non USP versions |
Saline | Hanna Pharmaceutical Supply Co., Inc. | 409488850 | USP, formulated as an injectable |
Syringe filter | Fisher | 09-720-004 | |
Syringe | Fisher | 14-823-30 | |
Hypodermic needle | Fisher | 14-823-13 | |
Antenna | Wildlife Materials | 3 Element Folding Yagi | Antennae with additional elements are available, but can be cumbersome in the field. |
Radio Receiver | Wildlife Materials | TRX-2000S | Water resistant models are also available. |
Compass | Brunton | Truarc 15 | |
Radio transmitters | Holohil Inc. | BD-2, PD-2, RI-2B | Transmitter models vary in lifespan and signal output as a function of battery size and pulse rate settings, which can be customized based on the study question and organism. |
GPS | Garmin | eTrex Venture | |
Coaxial cable | newegg.com | C2G 40026 | BNC connections are necessary. |
Hoop net | Memphis Net and Twine | TN325 | Net mesh size should be chosen based on the minimum size of the target animal. |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved