JoVE Journal

Genetics

This content is Open Access.

Dissection de la fonction de Enhancer utilisant le Multiplex Enhancer CRISPR axée sur les interférences dans les lignées cellulaires

Ce protocole décrit les étapes nécessaires pour concevoir et effectuer le ciblage multiplexé des rehausseurs avec la protéine de fusion désactivant SID4X-dCas9-KRAB, également connu sous le nom des interférences enhancer (Enhancer-i). Ce protocole permet l’identification des activateurs qui régulent l’expression des gènes et facilite la dissection des relations entre les exhausteurs de réglementer un gène cible commun.

Chapitres dans cette vidéo

0:05

Title

0:37

Guide RNA Design

3:37

Guide RNA Cloning

6:27

Transfection of Enhancer-I, Cell Harvest, and RNA Extraction

8:21

Results: Guide RNA Design/Cloning and Evaluation of Gene Expression in Response to Enhancer-i

9:23

Conclusion

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