La isquemia es una de las principales causas de muerte en todo el mundo. Este procedimiento se puede realizar para inducir una lesión por isquemia-reperfusión en el corazón. Este protocolo es para ligar el LAD de manera precisa, segura y consistente.
Para preparar bolas de algodón húmedas con solución salina, pellizque una pequeña porción de algodón estéril y enróllela repetidamente para formar una bola. Sumerja las bolas de algodón en solución salina estéril al 0,9% y exprima el exceso de solución salina. Guarde las bolas de algodón en una caja limpia esterilizada con etanol al 75%.
Para preparar ganchos de sujeción, esterilice clips y bandas de goma con etanol al 75%. Para preparar un asa de ligadura, coloque el centro de una puntada de seda 7-0 en el ojo de resorte de tamaño tres del tamaño de un círculo de una aguja quirúrgica cónica no abatida. Para preparar un controlador de lazo de caja, corte un tubo de polietileno 10 de cinco milímetros con tijeras.
A continuación, para el experimento, anestesia una rata macho Sprague Dawley de ocho semanas de edad y verifique los reflejos pellizcando la cola y las patas traseras. Luego abra el tejido entre los dos anillos de cartílago debajo de la glotis con tijeras e inserte un tubo de polietileno 50 de tres centímetros para que actúe como un tubo endotraqueal. Conecte el tubo endotraqueal a un ventilador.
Toca el pecho y encuentra el manubrio y el ángulo esternal. Luego identifique la costilla del lado izquierdo que se conecta con el ángulo esternal. Identifique el espacio intercostal debajo de la costilla A.Use pinzas de punta fina para levantar suavemente la piel cerca del espacio intercostal.
Luego use tijeras para crear una incisión oblicua de un centímetro a lo largo de las líneas de tensión de la piel desde el punto aproximadamente cinco milímetros a la izquierda del cuerpo esternal. Separe la piel y las capas musculares de la incisión con unas tijeras. Luego enganche las capas musculares fuera de la pared torácica anterior izquierda hacia abajo con clips doblados para exponer las costillas debajo.
Después de identificar la costilla B debajo de la costilla A, corte la costilla B con una tijera roma desde el centro del cartílago de las costillas. Toque suavemente y comprima la herida con una bola de algodón húmeda con solución salina durante varios segundos si se produce sangrado. A continuación, enganche los cuatro clips doblados al músculo intercostal y las costillas para extender suavemente la pared torácica en cuatro direcciones y cree una ventana quirúrgica rectangular para abrir el tórax con cuidado del corte de la costilla B.Hook suavemente contra el pulmón izquierdo y los tejidos adyacentes que cubren el pericardio con otro clip doblado para evitar daños tisulares accidentales durante el procedimiento.
Exponga el corazón extirpando el pericardio delgado con fórceps. Luego identifique la primera rama de la arteria coronaria principal izquierda, o LMCA, entre la arteria pulmonar y la aurícula izquierda. Usando una aguja quirúrgica, cree un asa de ligadura abierta insertando y pasando la puntada de seda debajo de la LAD en un lugar inmediatamente distal a la primera rama de la LMCA en la dirección desde la izquierda hacia el lado derecho de la LAD para evitar perforar accidentalmente la aurícula izquierda.
Si el LAD es invisible debido al líquido o la sangre que cubre la superficie del corazón, frote suavemente la superficie del corazón para visualizar las arterias coronarias. Inserte los dos extremos de la sutura de seda en un lado del lazo abierto en el círculo del otro lado para formar un lazo de trampa. Luego inserte los dos extremos de la sutura de seda del lazo de la trampa en el controlador de caja preparado antes de cerrar el bucle.
Deslice el controlador del lazo de la caja a lo largo de la sutura de seda mientras estira suavemente la seda para cerrar el lazo de la caja. Detener el flujo coronario de la LAD para inducir isquemia miocárdica durante una hora. Una vez que el lazo se haya atado de forma segura, sostenga la seda para fijar la posición del controlador de lazo de la caja con pinzas Kelly.
Coloque el otro extremo de los fórceps Kelly en la mesa quirúrgica. Cubra la ventana quirúrgica con bolas de algodón húmedas de solución salina durante la ligadura de LAD. Abra los fórceps Kelly y luego suelte el controlador de bucle de la trampa para la reperfusión del flujo coronario durante dos horas.
Se muestra la validación de la calidad de la ligadura LAD con azul de Evans. El miocardio con perfusión coronaria se tiñó de azul en comparación con una región no perfundida, que permaneció roja. Una baja variación en el área de riesgo, o porcentaje AAA entre los animales del estudio, indicó la ubicación precisa de la ligadura de LAD.
Además, el tamaño del infarto se estimó como la relación entre el área del infarto y el AAR en los grupos control y tratados. El porcentaje de tamaño del infarto del grupo de tratamiento es menor que el grupo de ligadura de LAD controlada. Esta técnica allana el camino para que los investigadores exploren nuevos enfoques terapéuticos contra la cardiopatía isquémica.
