El modelo quirúrgico de ligadura permanente de la arteria izquierda en ratones se puede utilizar para investigar la fisiopatología y la respuesta inflamatoria asociada después del infarto de miocardio. Este método proporciona un modelo de ratón confiable y producible de MI, que es fácil, seguro y menos invasivo. Para comenzar, precaliente un esterilizador de cuentas a 250 grados centígrados y coloque instrumentos quirúrgicos esterilizados en autoclave durante unos minutos.
Asegure la profundidad de la anestesia en el ratón comprobando la respuesta a un pellizco firme del dedo del pie. Pesar el ratón para estimar la dosis del fármaco analgésico preoperatorio buprenorfina e inyectar el fármaco por vía intraperitoneal. Recorte el pelaje en el lado izquierdo del tórax con una máquina de afeitar eléctrica.
Después de desinfectar el sitio quirúrgico, coloque el ratón en posición supina sobre una tabla inclinada. Asegure la cabeza y las extremidades del ratón con una banda elástica unida a los incisivos superiores y cinta adhesiva, respectivamente. Aplique lubricante oftálmico estéril en los ojos para evitar la sequedad mientras está bajo anestesia.
Abra la mandíbula y saque suavemente la lengua de la cavidad oral. Identifique la abertura de la laringe iluminando la faringe oral con un laringoscopio. Corte aproximadamente 0,5 centímetros de una aguja de catéter de calibre 24 e inserte la aguja roma en el protector de plástico.
Dirija la aguja roma con el protector de plástico hacia la tráquea. Saque la aguja, dejando el escudo de plástico en la tráquea. Ajuste el ventilador a una frecuencia respiratoria de 137 latidos por minuto, optimizado para los ratones utilizados en este estudio y capacidad de cierre de volumen corriente de 0,18.
Conecte los tubos del respirador al protector del catéter y confirme la intubación correcta buscando un movimiento torácico sincronizado con el ventilador. Desconecte el tubo del respirador del protector del catéter y coloque al animal en posición supina en una placa quirúrgica precalentada con temperatura controlada. Vuelva a conectar el ratón al ventilador.
Después de desinfectar el sitio quirúrgico, levante suavemente la piel con un par de fórceps y haga una pequeña incisión transversal cutánea a lo largo de la línea entre los músculos pectorales mayores y menores izquierdos con un par de tijeras quirúrgicas. Separe los músculos pectorales subyacentes con fórceps y tijeras de disección. Después de hacer una incisión en el tercer espacio intercostal, estire suavemente las costillas con retractores para exponer el ventrículo izquierdo.
Mueva la grasa pericárdica a un lado y localice la arteria coronaria izquierda, que va desde el borde de la aurícula izquierda hacia el ápice del corazón. Pase un 8-0 Sutura de nylon debajo de la arteria coronaria izquierda con la ayuda de un soporte de aguja. Legar la arteria coronaria izquierda con un nudo doble seguido de un segundo nudo.
Retire los retractores e inserte una aguja de catéter de calibre 22 en la cavidad torácica. Retire la aguja, dejando la punta del protector de plástico en la cavidad torácica. Cierre la caja torácica con una sutura de nylon 4-0.
Conecte una jeringa al protector de plástico de calibre 22 y elimine lentamente el exceso de aire atrapado en la cavidad torácica presionando suavemente el tórax para establecer una presión de aire negativa. Retire el protector de plástico. Apague el suministro de isoflurano y coloque el ratón en el ventilador que suministra oxígeno.
Una respiración espontánea del ratón comienza, apague el ventilador. Mantenga el ratón bajo una lámpara de calor y monitoree hasta que esté despierto. El animal no debe dejarse desatendido hasta que haya recuperado suficiente conciencia para mantener la decúbito esternal.
Controle el ratón diariamente para detectar cualquier signo de dolor o molestia. Continúe la inyección intraperitoneal de buprenorfina cada 6 a 8 horas durante dos días adicionales después de la cirugía. El ECG activo y las señales de respiración se verificaron antes de adquirir los datos ecocardiográficos.
La medición ecocardiográfica de los parámetros funcionales cardíacos se observó 28 días después de la ligadura de la arteria coronaria izquierda. Se observaron las imágenes en modo M de la vista peronea de eje corto de corazones SHAM e IM. Las imágenes de IM mostraron un movimiento defectuoso de la pared cardíaca después de la ligadura de la arteria coronaria izquierda.
Se observaron indicadores de insuficiencia cardíaca, como aumento de la masa ventricular izquierda, disminución de la fracción de eyección y disminución del gasto cardíaco en el grupo de IM en comparación con el grupo de simulacro. La tinción tricrómica de Masson de las secciones del ventrículo inferior, medio y superior mostró un aumento de la tinción de colágeno en el corazón infartado, lo que indica un aumento de la fibrosis. En la mayoría de los casos, la arteria no es factible.
Sin embargo, ligar el tejido miocárdico de 2 a 4 milímetros por debajo del borde de la aurícula izquierda da como resultado una ligadura eficiente de la arteria.
