Ишемия сердца является основной причиной смерти во всем мире. Эта процедура может быть выполнена, чтобы вызвать ишемию-реперфузионное повреждение сердца. Этот протокол предназначен для точного, надежного и последовательного управления LAD.
Чтобы приготовить солевые влажные ватные тампоны, отщипните небольшую часть стерильной ваты и несколько раз скатайте ее, чтобы сформировать шар. Окуните ватные тампоны в стерильный 0,9%-ный физиологический раствор и отожмите излишки физиологического раствора. Храните ватные тампоны в чистой коробке, стерилизованной 75% этанолом.
Чтобы подготовить удерживающие крючки, стерилизуйте зажимы и резинки 75% этанолом. Чтобы подготовить петлю для перевязки, поместите середину шелкового стежка 7-0 в полукруг тройного пружинного ушка конической хирургической иглы без обжима. Чтобы подготовить контроллер петли малого барабана, отрежьте ножницами пятимиллиметровую полиэтиленовую трубку 10.
Затем, для эксперимента, обезболите восьминедельного самца крысы Sprague Dawley и проверьте рефлексы, ущипнув хвост и задние лапы. Затем откройте ткань между двумя хрящевыми кольцами ниже голосовой щели с помощью ножниц и вставьте трехсантиметровую полиэтиленовую трубку 50, чтобы она действовала как эндотрахеальная трубка. Подключите эндотрахеальную трубку к аппарату искусственной вентиляции легких.
Дотроньтесь до груди и найдите манубриум и стернальный угол. Затем определите левое боковое ребро, которое соединяется с углом грудины. Определите межреберье под ребром A. Используйте щипцы с тонкими наконечниками, чтобы аккуратно приподнять кожу близко к межреберью.
Затем с помощью ножниц создайте косой разрез в один сантиметр вдоль линий натяжения кожи от точки примерно в пяти миллиметрах слева от грудинного тела. Отделите кожу и мышечные слои от разреза с помощью ножниц. Затем зацепите мышечные слои за пределами левой передней грудной стенки вниз с помощью согнутых зажимов, чтобы обнажить ребра под ними.
Определив ребро В ниже ребра А, отрежьте ребро В тупыми ножницами от середины реберного хряща. Осторожно прикоснитесь к ране и сожмите ее солевым влажным ватным тампоном на несколько секунд, если возникает кровотечение. Затем зацепите четыре согнутых зажима за межреберную мышцу и ребра, чтобы аккуратно раздвинуть стенку грудной клетки в четырех направлениях и создать прямоугольное хирургическое окно, чтобы осторожно открыть грудную клетку от разреза ребра B. Осторожно прижмите левое легкое и прилегающие ткани, покрывающие перикард, другим изогнутым зажимом, чтобы предотвратить случайное повреждение тканей во время процедуры.
Обнажите сердце, удалив тонкий перикард щипцами. Затем определите первую ветвь левой главной коронарной артерии, или LMCA, между легочной артерией и левой ушной раковиной. Используя хирургическую иглу, создайте открытую петлю лигирования, вставив и пропустив шелковый стежок под LAD в месте, расположенном непосредственно дистальнее первой ветви LMCA в направлении слева на правую сторону LAD, чтобы избежать случайного прокола левой ушной раковины.
Если LAD невидим из-за жидкости или крови, покрывающих поверхность сердца, аккуратно проведите мазок с поверхности сердца, чтобы визуализировать коронарные артерии. Вставьте два конца шелкового шва с одной стороны открытой петли в круг другой стороны, чтобы образовалась петля для петли. Затем вставьте два конца шелкового шва петли малого барабана в подготовленный контроллер малого барабана, прежде чем замкнуть петлю.
Проведите контроллером петли малого барабана вдоль шелкового шва, осторожно растягивая шелк, чтобы закрыть петлю малого барабана. Остановите коронарный кровоток LAD, чтобы вызвать ишемию миокарда на один час. После того, как петля будет надежно завязана, возьмитесь за шелк, чтобы зафиксировать положение контроллера петли малого барабана щипцами Келли.
Положите другой конец щипцов Келли на хирургический стол. Закройте операционное окно влажными ватными тампонами с физиологическим раствором во время перевязки LAD. Откройте щипцы Келли, затем отпустите контроллер петли малого барабана для реперфузии коронарного кровотока в течение двух часов.
Показана валидация качества лигирования LAD синим по Эвансу. Миокард с коронарной перфузией окрашивался в синий цвет по сравнению с неперфузированной областью, которая оставалась красной. Низкая вариация в области риска, или процент ААА среди исследуемых животных, указывает на точное местоположение лигирования LAD.
Кроме того, размер инфаркта оценивали как отношение площади инфаркта к AAR в контрольной и обработанной группах. Процент размера инфаркта в группе лечения ниже, чем в контролируемой группе перевязки LAD. Этот метод открывает исследователям путь к изучению новых терапевтических подходов против ишемической болезни сердца.
