Humanes Pseudoislet-System zur synchronen Bestimmung der Dynamik fluoreszierender Biosensoren und Hormonsekretionsprofile

Unser Labor arbeitet daran, Betazell-Dysfunktion und andere Augenlidanomalien bei Typ-1- und Typ-2-Diabetes zu verstehen, zu verhindern und umzukehren. Unsere Studien konzentrieren sich auf die Pathogenese des menschlichen Diabetes, indem wir Studien zur Biologie der menschlichen Bauchspeicheldrüse und Augenlider sowie zur Gesundheit und Krankheit integrieren. Menschliche Ösen sind sphärische 3D-Strukturen, und der Zugang zu Zellen über die gesamte Öse hinweg stellt einige experimentelle Herausforderungen dar.

Wenn wir beispielsweise versuchen, Biosensoren einzuführen, um die Signalübertragung von Augenzellen zu verstehen, überwindet unser Pseudo-Augenlidprotokoll diese Herausforderung, indem es genetische Manipulationen im Einzelzellzustand durchführt und diese transduzierten menschlichen Augenzellen für nachgelagerte Studien zu Pseudo-Augenlidern aggregiert. Unser Pseudo-Augenlidsystem ermöglicht es uns, Biosensoren in der gesamten Öse und nicht nur in der Augenlidoberfläche zu exprimieren. In Kombination mit unserer Lebendzell-Bildgebung und unserem Mikroperfusionssystem können wir dynamische intrazelluläre Prozesse mit nachgeschalteter Hormonsekretion sowohl messen als auch mitregistrieren.

Dieses Protokoll könnte angewendet werden, um eine Vielzahl wichtiger wissenschaftlicher Fragen zu beantworten. Zum Beispiel könnten Gen-Silencing-Strategien mit diesem Ansatz kombiniert werden, um den Einfluss eines interessierenden Gens auf die Augenlidfunktion und die damit verbundenen Signalwege zu verstehen, entweder global oder auf selbstspezifische Weise.