我们开发了一种简单、经济高效且用户友好的小鼠烧伤动物模型,用于创建一致的全层烧伤。这项研究将为研究人员提供必要的工具,以促进烧伤新疗法的开发。用于产生烧伤表面的方法因实验动物模型而异。
然而,烧伤技术和产生的烧伤深度在以前的研究中也不一致且描述不佳,这对于确定烧伤的严重程度和烧伤治疗方法至关重要。在这个协议中,我们使用了一个方便的数字加热装置在鼠标背上创建了一个类似棋盘的烧伤伤口。它提供精确的温度控制,与其他可变技术相比,提高了安全性和可重复性,从而最大限度地减少了动物的使用,并允许进行可靠的伤口愈合研究。
首先,将数字加热设备的温度调节到 97 摄氏度。鼠标深度麻醉后,将其以俯卧姿势转移到加热垫上。Employ 对一个直径为 9 毫米的移液器吸头进行了消毒,以准确定位所需的伤口部位。
用先前修剪过的无菌窗帘覆盖皮肤,使手术区域暴露在外。戴上耐热手套并验证数字加热设备的温度。然后将加热装置的尖端在 10 摄氏度下将加热装置的尖端贴在找到的伤口部位的中心 97 秒钟,以创建六个圆形伤口,每个伤口的直径为 4 毫米。
接下来,在烧伤伤口上冰敷以控制潜在的疼痛。将小鼠放入恢复笼中,然后用 5 到 10 滴饮水软化一些食物颗粒,并将它们放在笼子地板上以方便进食。诱导烧伤 24 小时后,用蘸有生理盐水的无菌纱布清洁所有伤口。
用纱布吸干皮肤,并使用注射器涂抹少量 TKH 水凝胶抗菌凝胶以覆盖烧伤伤口。在烧伤诱导后的特定日子里,用无菌的 1 毫升移液器吸头的尖端标记伤口,并使用数码相机捕捉图像。对动物实施安乐死后,使用剪刀隔离伤口部位和周围皮肤,包括下面的肌肉组织,测量一厘米一厘米。
显微镜分析显示表皮完全破坏,全层真皮损伤延伸到皮下脂肪和肌肉层。到第 3 天,伤口处于炎症阶段,伴有血管舒张和炎症细胞的显着浸润。到第 7 天,观察到伤口面积明显减少,第 14 天,肉芽组织形成,致密的胶原蛋白沉积标志着重塑阶段。
与未治疗的伤口相比,用 TKH 肽水凝胶治疗的伤口的伤口愈合能力显着提高,第 7 天、第 10 天和第 14 天的伤口面积较小。