لقد قمنا بتطوير نموذج حيواني بسيط وفعال من حيث التكلفة وسهل الاستخدام لإحداث حروق متسقة كاملة السماكة. ستزود هذه الدراسة الباحثين بالأدوات الأساسية لتسهيل تطوير علاجات جديدة لإصابات الحروق. تختلف الطرق المستخدمة لإنتاج أسطح الحروق بين النماذج الحيوانية التجريبية.
ومع ذلك ، فإن تقنية إحداث الحروق وأعماق الحروق الناتجة غير متسقة أيضا وسيئة الوصف في الدراسات السابقة ، وهو أمر بالغ الأهمية في تحديد شدة الحرق وطرق علاج الحروق. في هذا البروتوكول ، استخدمنا جهاز تسخين رقمي مناسب لإنشاء جرح حروق يشبه رقعة الشطرنج على ظهر الفأر. يوفر تحكما دقيقا في درجة الحرارة ، مما يعزز السلامة وقابلية التكرار مقارنة بالتقنيات المتغيرة الأخرى ، مما يقلل من استخدام ويسمح بإجراء دراسات موثوقة لالتئام الجروح.
للبدء ، اضبط درجة حرارة جهاز التسخين الرقمي على 97 درجة مئوية. بمجرد تخدير الماوس بعمق ، انقله إلى الوسادة الساخنة في وضع الانبطاح. قامت Employ بتعقيم طرف ماصة واحد مليلتر بقطر تسعة ملليمترات لتحديد مواقع الجرح المطلوبة بدقة.
قم بتغطية الجلد بستارة معقمة مشذبة مسبقا ، مع ترك المنطقة الجراحية مكشوفة. ارتد قفازات مقاومة للحرارة وتحقق من درجة حرارة جهاز التسخين الرقمي. ثم ضع طرف جهاز التسخين على وسط مواقع الجرح الموجودة لمدة 10 ثوان عند 97 درجة مئوية لإنشاء ستة جروح مستديرة ، يبلغ قطر كل منها أربعة ملليمترات.
بعد ذلك ، ضع الثلج على جرح الحروق للتحكم في الألم المحتمل. ضع الفأر في قفص الاسترداد, ثم تليين بعض الكريات الغذائية بخمس إلى 10 قطرات من ماء الشرب وضعها على أرضية القفص لتسهيل التغذية. بعد 24 ساعة من تحريض الحروق ، نظف جميع الجروح بشاش معقم مبلل بالمحلول الملحي.
امسح الجلد بالشاش ، وضعي كمية صغيرة من جل الهيدروجيل المضاد للبكتيريا TKH باستخدام حقنة لتغطية جروح الحروق. في أيام محددة بعد تحريض الحرق، ضع علامة على الجرح بطرف طرف ماصة معقمة سعة مليلتر واحد والتقط صورة بكاميرا رقمية. بعد القتل الرحيم للحيوان ، باستخدام المقص ، اعزل موقع الجرح والجلد المحيط بما في ذلك العضلات الأساسية ، بقياس سنتيمتر واحد.
أظهر التحليل المجهري تدميرا كاملا للبشرة وتلف الجلد كامل السماكة يمتد إلى طبقات الدهون والعضلات تحت الجلد. بحلول اليوم الثالث ، كانت الجروح في المرحلة الالتهابية مع توسع الأوعية وتسلل كبير للخلايا الالتهابية. بحلول اليوم السابع ، لوحظ انخفاض ملحوظ في منطقة الجرح ، وفي اليوم 14 ، تشكلت أنسجة التحبيب مع ترسب الكولاجين الكثيف الذي يشير إلى مرحلة إعادة التشكيل.
تحسنت قدرات التئام الجروح بشكل ملحوظ في الجروح التي عولجت بهيدروجيل ببتيد TKH كما يتضح من مناطق الجرح الأصغر في الأيام السابع و 10 و 14 مقارنة بالجروح غير المعالجة.