Erken Zebra Balığı Embriyoları için Işık Levha Mikroskobu Görüntüleme ve Montaj Stratejileri

Sol-sağ eksen boyunca iç asimetrilere rağmen, çoğu yüksek organizmada, iskelet ve kas gibi dış yapılar simetrik bir şekilde gelişir. Zebra balığı embriyolarını kullanarak, simetri oluşturma ilkelerini araştırmak için yüksek çözünürlüklü canlı görüntüleme, nicel analiz ve teorik modellemeyi birleştiriyoruz. Alan, yüksek uzay-zamansal çözünürlüğe sahip gelişmekte olan embriyoları görüntülemek için çeşitli mikroskopi tekniklerine ve ardından elde edilen görüntülerin kantitatif analizine büyük ölçüde bağlıdır.

Farklı mikroskopi formları benzersiz avantajlar sağlar. Bununla birlikte, son zamanlarda, ışık tabakası ve canlı süper çözünürlüklü mikroskopi, embriyonik gelişimdeki dinamik süreçlere ilişkin görüşümüzü önemli ölçüde geliştirmiştir. Geleneksel konfokal ve multifoton mikroskobu, canlı embriyoları görüntülerken sınırlı bir görüş alanına ek olarak sıklıkla foto-ağartma ve fototoksisiteye yol açar.

Çok görüşlü bir ışık tabakası mikroskobu, daha uzun gözlem sürelerine ve numune rotasyonuna izin vererek bu sorunları ele alır. Bununla birlikte, bu tekniği kullanarak görüntüleme için numune hazırlama ve montajda zorluklar devam etmektedir. Başarılı bir görüntüleme seansının önemli bir sınırlaması, numunenin uygun şekilde monte edilmesi ve yönlendirilmesidir.

Burada, çok görüntülü ışık tabakası mikroskobunda görüntüleme için erken zebra balığı embriyolarını monte etme stratejilerini ve çok görüntülü görüntüleri elde etmek ve yeniden yapılandırmak için genel prosedürü açıklıyoruz.