Erişkin Murin Subventriküler Bölgesinden Nöral Kök Hücrelerin İzolasyonu, Genişlemesi ve Nükleofeksiyonu

Araştırmamız, nöral kök hücre popülasyonunun yetişkin memeli beyninde nasıl düzenlendiğini incelemeye odaklanmıştır. Nörojenik nişler içindeki nöral kök hücreleri düzenleyen içsel ve dışsal moleküler mekanizmaların anlaşılması, biyolojiyi anlamak ve gelecekteki potansiyel terapötik uygulamaları geliştirmek için önemlidir. Nöral kök hücre davranışını incelemek için hem in vivo hem de in vitro yaklaşımlar yaygın olarak kullanılmaktadır.

İn vitro nöral kök hücre kültürleri, kontrollü ortamlar ve bu hücre popülasyonunu kolayca manipüle etme ve izleme imkanı sunar. İn vitro gen ekspresyonunun korunması teknikleri, hücre biyolojisini yöneten moleküler mekanizmaları incelemek için çok yönlü bir yaklaşımdır. Bununla birlikte, nöral kök hücrelerde aday genleri aşırı eksprese etmek ve yıkmak için verimli ve tekrarlanabilir bir yöntem, bu alanda hala zordur.

Gen iletimi için geleneksel transfeksiyon yöntemlerinin merkezi sinir sistemi hücrelerinde etkili olduğu kanıtlanmıştır. Ayrıca, bu yöntemler hücre canlılığını ve işlevselliğini etkiler. Bu nedenle, nöral kök hücrelerde gen ekspresyonunu manipüle etmek için alternatif yaklaşımların iyileştirilmesi çok önemlidir.

Bu protokol ile, erişkin murin subventriküler bölgesinden alınan nöral kök hücre kültürlerinde yüksek gen iletimi verimliliği sağlayan ve %80'in üzerinde sağkalım oranları sağlayan gelişmiş bir nükleofeksiyon sistemi sunuyoruz