Colby Carpenter ve Spencer Mathias'a 3D baskı tasarımındaki yardımları için teşekkür ederiz. Fotoğraf figürlerinin üretilmesinde yardımcı olan Ellen Klinger'a ve revizyonlar konusunda yardım sağladığı için Jonathan B. Koch'a teşekkür ederiz. Fon USDA-ARS-Tozlaşan Böcek Biyolojisi, Yönetimi ve Sistematiği Araştırma Birimi tarafından sağlanmıştır.

1. Polen bindirme yapılarını yazdır
<ol><li>Bombus arılarının yuva yaptığı yuva kutusu için uygun STL dosyasını indirin (örneğin, Biobest veya Koppert tarzı kovanlar, https://www.ars.usda.gov/pacific-west-area/logan-ut/pollinating-insect-biology-management-systematics-research/docs/pollen-traps/). Dosyalar, son kullanıcı tarafından indirilmek ve değiştirilmek üzere ücretsiz olarak herkese açıktır.</li>
	<li>STL dosyasını yazıcı programında açın. Dört bindirme bileşeni oluşturmak için yazıcı üreticisinin yönergelerini izleyin. NOT: Tuzak gövdesinin yazdırabilmesi için yaklaşık 3 saat, yakalama havzasının yazdırabilmesi için 2 saat ve filtre ve bindirme kapatma kesici ucunun yazdırabilmesi için her biri 30 dakika izin verin. Tuzak gövde boyutu 6 cm x 3,8 cm x 7 cm'dir.</li>
</ol>2. Polen tuzak montajı
<ol><li>Tuzak gövdesi ile basılan destek yapılarını çıkarın ve tuzak gövdesinin elek yapısınınkiler de dahil olmak üzere havzayı yakalayın (Şekil 1).</li>
	<li>Bir arının filtre deliklerinde hareket etmesini engelleyebilecek polen filtresinin yükseltilmiş kenarlarını geçen plastik iplikçikleri temizlemek için el matkabına monte edilmiş 3/16 in. (0,476 cm) matkap ucu kullanın. Polen filtresinin düz tarafındaki tümsekleri veya yükseltilmiş kenarları eşitlemek için bir kutu kesme jilet ve zımpara kağıdı kullanın.</li>
	<li>Plastik filtreyi tuzak gövdesinin bir tarafından hafifçe iterek polen filtresini tuzak gövdesine yerleştirin. Tuzağın sol tarafı yükseltilmiş filtre konilerinin geçişini karşılamak için daha büyük bir açıklığa sahip olduğu için filtre yalnızca bir şekilde sığacaktır.<ol>
<li>Yan yarıklar polen filtresinin sorunsuz bir şekilde kayamayacağı kadar küçükse, bir jilet veya bir seferde küçük plastik kısımlarını çıkarabilen başka bir aletle tuzak gövdesindeki yarıktan yeterince plastik kazıyın. Polen filtresi ile tuzak gövdesi arasında en fazla 2 mm boşluk olacak şekilde polen filtresinin yerine güvenli bir şekilde uyduğundan emin olun.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Tuzak gövdesinin altındaki yükseltilmiş kenarları yakalama havzasının üstündeki oluğa kaydırarak yakalama havzasını tuzak gövdesine takın. Yakalama havzası doğrudan tuzak gövdesinin elek bölgesinin altına konumlandırılmalıdır (Şekil 1A\u2012E).</li>
	<li>Yakalama havzasının tuzak gövdesinden düzgün bir şekilde yerleştirilmesini ve çıkarılmasını sağlamak için plastiği keserek veya zımparalayarak uygun değişiklikleri yapın. Yakalama havzasının yerleştirilmesi polen filtresini yerine sabitler ve yakalama havzası çıkarılana kadar çıkarılamaz ve yakalama havzası yerindeyken polen filtresi takılamaz. NOT: Birden fazla kovan birbirine yakın yerleştirilirse, her kovana tuzak gövdesinin benzersiz bir renk kombinasyonunu sağlamak, çeşitli yönelimli kovanları dağıtmanın yanı sıra havza ve polen filtre yapılarını yakalamak, geri dönen işçilerin yuvalarını bulmasına yardımcı olacaktır.</li>
</ol>3. Bombus arısı kolonisi hazırlığı
<ol><li>Kolonileri dağıtmadan önce polen beslemeyi durdurun 24\u201248 h. Bu, işçilerin depolanan polenleri kullanmalarına ve polen aramak için yuvadan ayrılmalarını teşvik etmelerine neden olacaktır.</li>
	<li>Tuzak takılırken arıların kaçmasını önlemek için filtre yuvasına bir tuzak kapatma kesici ucu yerleştirerek kovan tuzak gövdesini kuruluma hazırlayın.</li>
	<li>Arıların uçmasını önlemek için kırmızı ışık altında çalışarak plastik yuva kutusunu karton dış kutudan kaldırın.</li>
	<li>Yuvanın önündeki plastik yuva girişini bulun. Yuva tedarikçisine bağlı olarak iki giriş stili vardır: Koppert tarzı kutular (adım 3.5) ve Biobest tarzı kutular (adım 3.6).</li>
	<li>Koppert tarzı kovan girişleri için polen tuzağını her iki giriş deliği açılana kadar giriş sekmesine çekerek yuva girişine monte edin.<ol>
<li>Polen tuzağının iki tüpünü giriş deliklerine yerleştirin, polen tuzağının eleklerinin altta olmasını sağlayın. Polen tuzağını yerinde sabitlemek için plastik giriş sekmesini hafifçe aşağı itin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Polen tuzağını Biobest tarzı kovan girişlerine takmak için, plastik giriş cihazını yuva kutusundan hafifçe çıkarmak için düz bir kafa tornavida kullanın. Polen tuzağı yuvaya sıkıca karşı olana kadar polen tuzağını yuva giriş deliklerine yerleştirin (Şekil 1E).<ol>
<li>Tuzak, gerekirse yuva kutusuyla temas ettiği teyp veya hızlı kuru tutkal kullanarak yuvaya sabitleyin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Plastik yuva kutusunu karton kutuya geri verin. Polen tuzağını yerleştirmek için kartonun kesilmesi gerekebilir.</li>
</ol>4. Yuvaların dağıtımı
<ol><li>Yuva kutularını çalışma alanına yerleştirin. Toplanan polenlerin kalitesini ve miktarını olumsuz yönde etkileyebileceğinden, yağıştan ve rüzgar için ankrajdan korunmak için kapak sağlayın. Aşırı ısınmayı azaltmak için seralara yerleştirilen kovanları yeterli güneş örtüsü ile sağlayın.</li>
	<li>Arıların serbestçe yem atmasını sağlamak için tuzak kapatma kesici uçlarını tuzak gövdesinden çıkarın, böylece yemciler kendilerini çevredeki alan ve yuvalarının konumu ile yönlendirebilirler. Oryantasyon uçuş süresi normal koşullarda 24 saat içinde tamamlanmalıdır.</li>
</ol>5. Polen koleksiyonu
<ol><li>Tuzağı devreye sokmak için polen filtresini filtre yuvasına kaydırın ve güvenli bir şekilde yerinde olduğundan emin olun.</li>
	<li>Yakalama havzasını, tamamen kapanana kadar önden tuzak gövdesine kaydırarak takın. Yakalama havzası aşırı gevşekse veya tuzak gövdesiden düşerse, tuzak gövdesine sabitlemek için bir lastik bant kullanın.</li>
	<li>Polen filtre deliklerinin arıları barındıracak kadar büyük olduğundan emin olmak için ilk dağıtımda polen tuzağına giren ve çıkan arıları gözlemleyin.<ol>
<li>Çalışanlar polen filtresinden geçemezse, filtreyi çıkarın ve delik boyutlarını artırmak için 3/16 in.'den (0,476 cm) daha büyük matkap uçlarını kullanın. Bunu sıralı bir şekilde yapın, delik çapını her seferinde 1/32 in. (0,079 cm) artırın, çünkü çok büyük delikler herhangi bir polen toplamaz.</li>
		<li>Arılar filtreden geçtikten sonra, polenlerin tekrar girildikten sonra çıkarıldığından emin olmak için girişi gözlemlemeye devam edin. NOT: Arılar, polen filtre delikleri olsa da, özellikle ilk birkaç kez geçerken hareket etmekte biraz zorluk çekmelidir. Çok kolay geçerlerse, polen korbisülden yerinden olmayabilir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Polen toplamanın belirlenen döneminden sonra, yakalama havzasını sür ve tuzak gövdesinden çıkarın.</li>
	<li>Polen yüklerini deneysel tasarımınıza göre işleyin.</li>
	<li>İşçilerin bir sonraki polen toplama dönemine kadar serbestçe yemlenebilmeleri için polen filtresini çıkarın. Tuzak gövdesi deney süresince kovana bağlı kalabilir. NOT: Polen tuzakları, araştırmacı bir koloniden polen toplamak istediği sürece devreye girmiş olabilir. Bununla birlikte, polen tuzaklarının bir haftada 24 saatin üzerinde konuşlandırılması, bir kovanda ve geri zekalı koloni gelişiminde yavrunun açlığına neden olabilir.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Michener, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The bees of the world. , (2000).</li><li>Corbet, S. A., Williams, I. H., Osborne, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bees+and+the+pollination+of+crops+and+wild+flowers+in+the+European+Community.">Bees and the pollination of crops and wild flowers in the European Community.</a> Bee world. 72 (2), 47-59 (1991).</li><li>Cameron, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterns+of+widespread+decline+in+North+American+bumble+bees.">Patterns of widespread decline in North American bumble bees.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 108 (2), 662-667 (2011).</li><li>Goulson, D., Nicholls, E., Bot&#237;as, C., Rotheray, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bee+declines+driven+by+combined+stress+from+parasites,+pesticides,+and+lack+of+flowers.">Bee declines driven by combined stress from parasites, pesticides, and lack of flowers.</a> Science. 347 (6229), 1255957 (2015).</li><li>Jha, S., Stefanovich, L. E. V., Kremen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bumble+bee+pollen+use+and+preference+across+spatial+scales+in+human-altered+landscapes.">Bumble bee pollen use and preference across spatial scales in human-altered landscapes.</a> Ecological Entomology. 38 (6), 570-579 (2013).</li><li>Thomson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Competitive+interactions+between+the+invasive+European+honey+bee+and+native+bumble+bees.">Competitive interactions between the invasive European honey bee and native bumble bees.</a> Ecology. 85 (2), 458-470 (2004).</li><li>Kleijn, D., Raemakers, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+retrospective+analysis+of+pollen+host+plant+use+by+stable+and+declining+bumble+bee+species.">A retrospective analysis of pollen host plant use by stable and declining bumble bee species.</a> Ecology. 89 (7), 1811-1823 (2008).</li><li>Harmon-Threatt, N. H., Kremen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bumble+bees+selectively+use+native+and+exotic+species+to+maintain+nutritional+intake+across+highly+variable+and+invaded+floral+resource+pools.">Bumble bees selectively use native and exotic species to maintain nutritional intake across highly variable and invaded floral resource pools.</a> Ecological Entomology. 40, 471-478 (2015).</li><li>Harmon-Threatt, N. H., Valpine, P., Kremen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimating+resource+preferences+of+a+native+bumblebee:+the+effects+of+availability+and+use-availability+models+on+preference+estimates.">Estimating resource preferences of a native bumblebee: the effects of availability and use-availability models on preference estimates.</a> Oikos. , (2016).</li><li>Martin, A. P., Carreck, N. M. L., Swain, J. L., Goulson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modular+system+for+trapping+and+mass-marking+bumblebees:+applications+for+studying+food+choice+and+foraging+range.">A modular system for trapping and mass-marking bumblebees: applications for studying food choice and foraging range.</a> Apidologie. 37, (2006).</li><li>Saifuddin, M., Jha, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colony-level+variation+in+pollen+collection+and+foraging+preferences+among+wild-caught+bumble+bees.+(Hymenoptera:+Apidae).">Colony-level variation in pollen collection and foraging preferences among wild-caught bumble bees. (Hymenoptera: Apidae).</a> Environmental Entomology. 42 (2), 393-401 (2014).</li><li>Heinrich, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Bumblebee Economics. , (2004).</li><li>Leonhart, S. D., Bluthgen, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+same,+but+different:+pollen+foraging+in+honeybee+and+bumblebee+colonies.">The same, but different: pollen foraging in honeybee and bumblebee colonies.</a> Apidologie. 43, (2012).</li><li>Kriesell, L., Hilpert, A., Leonhardt, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+but+the+same:+bumblebee+species+collect+pollen+of+different+plant+sources+but+similar+amino+acid+profiles.">Different but the same: bumblebee species collect pollen of different plant sources but similar amino acid profiles.</a> Apidologie. 48, 102-116 (2017).</li><li>Al-Tikrity, W. S., Benton, A. W., Hillman, R. C., Clarke, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+the+amount+of+unsealed+brood+in+honeybee+colonies+and+their+pollen+collection.">The relationship between the amount of unsealed brood in honeybee colonies and their pollen collection.</a> Journal of Apicultural Research. 11 (1), 9-12 (1972).</li><li>Spaethe, J., Weidenm&#252;ller, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Size+variation+and+foraging+rate+in+bumblebees+(Bombus+terrestris).">Size variation and foraging rate in bumblebees (Bombus terrestris).</a> Insectes Sociaux. 49 (2), 142-146 (2002).</li><li>Goodwin, R. M., Perry, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+pollen+traps+to+investigate+the+foraging+behaviour+of+honey+bee+colonies+in+kiwifruit.">Use of pollen traps to investigate the foraging behaviour of honey bee colonies in kiwifruit.</a> New Zealand Journal of Crop and Horticulture Science. 20 (1), 23-26 (1992).</li><li>Chua, C. K., Leong, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> 3D PRINTING AND ADDITIVE MANUFACTURING: Principles and Applications (with Companion Media Pack) of Rapid Prototyping. , (2014).</li><li>Kearns, C. A., Inouye, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Techniques for Pollination Biologists. , (1993).</li><li>Velthuis, H. H., van Doorn, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+century+of+advances+in+bumblebee+domestication+and+the+economic+and+environmental+aspects+of+its+commercialization+for+pollination.">A century of advances in bumblebee domestication and the economic and environmental aspects of its commercialization for pollination.</a> Apidologie. 37 (4), 421-451 (2006).</li><li>Moisan-Deserres, J., Girard, M., Chagnon, M., Fournier, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pollen+loads+and+specificity+of+native+pollinators+of+lowbush+blueberry.">Pollen loads and specificity of native pollinators of lowbush blueberry.</a> Journal of Economic Entomology. 107 (3), 1156-1162 (2014).</li><li>Medler, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+nest+of+Bombus+huntii+Greene+(Hymenoptera:+Apidae).">A nest of Bombus huntii Greene (Hymenoptera: Apidae).</a> Entomological News. 70, 179-182 (1959).</li><li>Husband, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Observation+on+colony+of+bumblebee+species+(Bombus+spp).">Observation on colony of bumblebee species (Bombus spp).</a> Great Lakes Entomologist. 10, 83-85 (1977).</li><li>Buttermore, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Observations+of+successful+Bombus+terrestris++(L),+(Hymenoptera:+Apidae)+colonies+in+Southern+Tasmania.">Observations of successful Bombus terrestris (L), (Hymenoptera: Apidae) colonies in Southern Tasmania.</a> Australian Journal of Entomology. 36, 251-254 (1997).</li><li>Goulson, D., Peat, J., Stout, J. C., Tucker, J., Darvill, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+alloethism+in+workers+of+the+bumblebee,+Bombus+terrestris,+be+explained+in+terms+of+foraging+efficiency.">Can alloethism in workers of the bumblebee, Bombus terrestris, be explained in terms of foraging efficiency.</a> Animal Behaviour. 64 (1), 123-130 (2002).</li><li>Couvillon, M. J., Jandt, J. M., Duong, N. H. I., Dornhaus, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ontogeny+of+worker+body+size+distribution+in+bumble+bee+(Bombus+impatiens)+colonies.">Ontogeny of worker body size distribution in bumble bee (Bombus impatiens) colonies.</a> Ecological Entomology. 35 (4), 424-435 (2010).</li><li>Russell, A. L., Morrison, S. J., Moschonas, E. H., Papaj, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterns+of+pollen+and+nectar+foraging+specialization+by+bumblebees+over+multiple+timescales+using+RFID.">Patterns of pollen and nectar foraging specialization by bumblebees over multiple timescales using RFID.</a> Scientific Reports. 7 (1), 1-13 (2017).</li><li>Hagbery, J., Nieh, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Individual+lifetime+pollen+and+nectar+foraging+preferences+in+bumble+bees.">Individual lifetime pollen and nectar foraging preferences in bumble bees.</a> Naturwissenschaften. 99 (10), 821-832 (2012).</li><li>Baur, A., Strange, J. P., Koch, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Foraging+economics+of+the+Hunt+bumble+bee,+a+viable+pollinator+for+commercial+agriculture.">Foraging economics of the Hunt bumble bee, a viable pollinator for commercial agriculture.</a> Environmental Entomology. 48 (4), 799-806 (2019).</li><li>Winter, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Importation+of+non-native+bumble+bees+into+North+America:+potential+consequences+of+using+Bombus+terrestris+and+other+non-native+bumble+bees+for+greenhouse+crop+pollination+in+Canada,+Mexico,+and+the+United+States.">Importation of non-native bumble bees into North America: potential consequences of using Bombus terrestris and other non-native bumble bees for greenhouse crop pollination in Canada, Mexico, and the United States.</a> San Francisco. 33, (2006).</li><li>Ruz, L., Herrera, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preliminary+observations+on+foraging+activities+of+Bombus+dahlbomii+and+Bombus+terrestris+(Hym:+Apidae)+on+native+and+non-native+vegetation+in+Chile.">Preliminary observations on foraging activities of Bombus dahlbomii and Bombus terrestris (Hym: Apidae) on native and non-native vegetation in Chile.</a> Acta Horticulturae. 561, 165-169 (2001).</li></ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Bombus arısı kolonisi girişlerinden polen toplanması, çeşitli ekolojik ve tarımsal çalışmalara izin verebilir. Bombus arılarının polen topladığı çiçek kaynaklarının belirlenmesi, bir koloninin genel diyetine katkıda bulunan bitkilerin çeşitliliği hakkında değerli bilgiler ve içgörü sağlar19. Polen kaynağının belirlenmesinin hem tarımsal üretim hem de vahşi topraklarda ekosistem hizmetlerinin çalışmaları üzerinde etkileri vardır12,20. Araştırmacılar, karabiküler polen yüklerinin nispeten büyük örnek boyutlarını toplayarak, bombus arılarının konuşlandırıldıkları hedef mahsulü21, bombus arısı diyetinin diğer önemli bileşenleri8ve bir alan içinde belirli türlerin tercih edilen yemlerini7. Polen tuzağı kullanarak bombus arısı kolonilerinden polen toplamanın otomatik hale alınması, bombus arısı arama, beslenme ve pestisit maruziyeti çalışmalarının genişletilmesine izin verecektir.
Bombus arısı polen tercihlerini araştıran çalışmaların çoğunda kullanılan polenlerin arılardan elle çıkarılması, zaman ve emek yoğun10. Buna karşılık, polen kapanı tasarımı kullanılarak pasif polen toplanması, bir haftalık süre boyunca dört koloniden 200'den fazla korbiküler polen yükü topladı. Bu nedenle, bu yöntem araştırmacıların farklı yerlerdeki birden fazla kovandan polen toplamasına izin verir ve gelecekteki çalışmalar için hem örnekleme çabasını hem de istatistiksel sağlamlığı artırır.
Polen filtresi tasarımlarını geliştirmek ve geliştirmek için, tuzak mekanizmasından geçen bombus arısı işçilerinin video kaydı esastı. Bombus arısı dar bir alandan geçtiğinde, arka ayakların karnının arkasına ve altına uzandığını gözlemledik (Şekil 2C\u2012E). Bu davranışın gözlemlenmesi, 3D baskı tasarımında değişikliklere ve polen filtrelerinin deneme yanılma testine neden oldu (Tablo 1). Tuzakları dağıtırken gözlem için video kayıtlarının kullanılması, tuzakların düzgün ve verimli çalıştığından emin olmak için resmi denemenin başlatılmasından önce önerilir, böylece gerekirse değişiklikler yapılabilir. Hem bir kovan içinde hem de kovanlar arasında vücut büyüklüğü farklılıklarını ve çalışmanın hedeflerini hesaba katmak için tuzak giriş boyutu değiştirilebilir. Tuzak girişinin, daha büyük yemliklerin kovandan çıkıp girmesine izin vermek için ayarlanmasının, yemleme faaliyetlerinde minimum bozulma ve korbiküler polen yüklerinin makul verimlilik (%>50) giderilmesi sağladığını gözlemledik. 3D baskılı plastik el aletleri ile kolayca değiştirilebilir ve baskı tasarımları belirli projeler için veya kutu giriş tasarımları değiştikçe manipüle edilebilir18.
Bu yöntemin sınırlamaları, polen filtresi tasarımlarının örneklenmekte olan bombus arısı türlerine özgü olmasıdır. Bu yöntem, teoride, yuvadaki daha büyük bireylerin yiyecek aramasını ve yemlerin örneklenemeyen daha küçük işçileri kısıtlayabilecek tekdüze bir giriş deliği boyutu kullanır; ancak, tasarımımız büyük işçilerin geçmesine izin verdi ve vücut büyüklüğüne göre verimliliği ölçmedik. İndirilebilen tasarım, ortalama B. huntii işçileri (3,22 mm torasik genişlik22)boyutunda tasarlanmıştır ve bu nedenle B. sabırsız (3,38 mm23)veya B. terrestris (4,77 mm24)işçileri için açıklandığı gibi genişletilmesi gerekir. B. terrestriskullanılarak yapılan bir çalışmada, daha büyük bireylerin daha küçük işçilerden daha sık polen topladığı belirtildi25; bununla birlikte, daha sonraki bir çalışmada işçi boyutunda ve Kuzey Amerika bombus arısı B. sabırsızlıkla26 , 27,28polen arama yolculuklarının sıklığında bir korelasyon bulunamadı. Ek olarak, çalışan boyutu sezon12boyunca değişebilir , bu nedenle polen toplamanın verimli bir şekilde gerçekleştiğinden emin olmak için polen filtreleri düzenli olarak denetlenmelidir. İlgi türlerini ve ele alınan özel araştırma sorularını anlamak, bu tuzak tasarımının yararlarını duruma göre değerlendirmede kritik öneme sahip olacaktır.
Foragers'ın nişanlı polen tuzaklarının varlığına geri dönmesiyle sergilenen davranışsal yanıtlar değişkendi. Bunlar şunlardı: (i) yuva ortamına yeniden girmek için gereken ek çabaya alışan işçiler, (ii) filtreden geçmek için birden fazla girişimde bulunan işçiler, (iii) filtre açıklığından atlatmaya çalışan ve bunun yerine tuzak gövde elekten geçmeye çalışan işçiler ve (iv) filtreden kaçınan ve nektar toplamaya geçen ve yuva kutusunun altındaki havalandırma deliklerinden arıları yuvalamaya aktaran işçiler. Kovana alternatif girişler bulmaya çalışan bombus arısı yemlikleri, yuva girişleri engellenmese bile bu tür29'un daha önceki bir çalışmasında gözlemlenmiştir. Bu yanıtlar gözlenirken, tuzak varlığı nedeniyle davranışları değiştiren yemcilerin oranını ölçmediğimiz için yeterince nadirdi, ancak çoğu arı tuzak dağıtımından kısa bir süre sonra tuzaklara alıştı.
Bu yöntemin gelecekteki uygulamaları, mevcut tasarımların, özellikle dünya çapında sera bitkilerinin tozlaşması için kullanılan B. terrestris ve B. sabırsızları olmak üzere, ticari olarak üretilen diğer bombus arısı türleri için uyarlanmasıdır19. Bu polen tuzaklarının kendi doğal aralıklarının dışındaki yerlerde ticari kovanlarda kullanılması, araştırmacıların yerel Bombus türleriyle hangi niş örtüşmelerin ve rekabetçi etkileşimlerin olabileceğini belirlemelerine izin verecektir30,31.

Bombus arıları(Bombus spp.), dünyanın ılıman, alp ve kutup bölgelerinde bulunan büyük sağlam böceklerdir1. Toplumları dikmek ve ziyaret ettikleri tarımsal ürünler için önemli tozlaşma hizmeti sağlamak içinönemlidirler 2. Birkaç türün bolluğunda ve dağılımında son zamanlarda meydana gelen düşüşler, tozlayıcılar olarak önemini kamuoyunun farkındalığının ön plana çıkardığını3. Araştırmacılar, bombus arılarının4. Hangi bitki türlerinin bombus arılarının yem olduğunu belirlemek, araştırmacıların ve arazi yöneticilerinin bombus arılarının kaynak kullanılabilirliği, rekabet ve antropojenik bozukluklardaki değişikliklere nasıl tepki verdiğini anlamalarını sağlar5,6.
Bombus arılarının polen arama tercihlerini araştıran çalışmalar genellikle araştırmacılar tarafından çiçeklerde yiyecek arayan bireysel arıları yakalar ve daha sonra daha fazla işlem ve tanımlama için numunelerden korbiküler polen yüklerini çıkarır 7,8,9,10. Bu yöntem, bir türün veya bombus arı türlerinin bir montajının bir alandaki kaynakları nasıl kullandığına dair fikirsağlarken 7, zaman yoğundur ve kovanlar arasındaki tercihlerdeki potansiyel farklılıklar, yem arısının köken kolonisini tanımlamak için ek moleküler analizler olmadan ayırt edilemez11.
Dinamiklerin aleni olduğu bazı çalışmalar için, çalışmaların bireysel kolonilerde yürütülmesi arzu edilir; bununla birlikte, yabani bombus arı yuvaları genellikle yeraltında veya zemin seviyesinde bulunur ve12'yibulmalarını zorlaştırır. Ticari olarak üretilen bombus arı kovanları araştırmacılara daha fazla erişim ve daha iyi deneysel kontrol sağlar ve polenlerin işçilerden uzaklaştırılması, kovana geri dönerken yemlikleri yakalayarak ve korbiküler polen yüklerini manuel olarak çıkararak halagerçekleştirilir 13,14. Polenlerin bir arının korbikomundan elle çıkarılması, özellikle polenlerin geri dönme oranının düşük olabileceği kovan girişlerinde saatlik düşük polen verimi ile zaman yoğundur. Ek olarak, polenlerin arılardan manuel olarak çıkarılması, rahatsız işçilerin sokmalarına neden olabilir.
Polen tuzakları on yıllardır bal arılarından polenlerin deneysel olarak uzaklaştırılması için kullanılmaktadır15; ancak, polenleri bombus arılarından çıkarmak için pasif bir yöntem geliştirilmemiştir. Polenleri geri dönen forager bombus arılarından uzaklaştırmak için bir mekanizma geliştirmenin önündeki birincil engel, bombus arı kolonisinde bulunan büyük işçi boyutlarının varyasyonudur16. Bal arısı polen tuzakları büyük ölçüde etkilidir, çünkü bal arısı işçi büyüklüğü çok fazla değişmez. Ek olarak, bu tuzaklar kurulumdan sonra sadece küçük manipülasyonlar gerektirir ve arıların kurban edilmesi gerekmez17. Bu, kovana geri dönen işçilerin arka ayaklarındaki polenleri yerinden çıkan ekranlar veya plastik yüzeyler kullanılarak elde edilir. Bu tuzaklar, polen yüklerinin sadece bir kısmını geri dönen yemliklerden uzaklaştırır ve bunların çeşitli tasarımları polen toplamada çeşitli verimliliklere neden olan çeşitli verimliliklere neden olandır. Polen arı bacaklarından çıkarıldığında, bir ekrandan ve arıların erişemeyeceği bir toplama havzasına düşer, böylece araştırmacı kovana sadece küçük bir rahatsızlıkla çıkarabilir.
Bu çalışmanın amacı, bal arısı kovanlarından polen toplamak için kullanılan teknikleri uyarlamak ve 3D baskılı yapılar kullanarak bombus arı yuvalarına uygulamak ve tuzak tasarımlarını Bombus huntiikolonileri üzerinde test etmektir. Tasarım süreci, tuzakların üretilmesi ucuz olması, çeşitli bombus arısı türlerine uyarlanabilen, arılara minimum zarar veya rahatsızlık vermesi ve polen çıkarma oranının polenlerin el toplamasını aşması gerektiği varsayımlarını takip etti. Üç boyutlu baskı teknolojisi çok yönlüdür, kolayca erişilebilir ve araştırmacıların nesneleri belirli amaçlarla çoğaltmasına ve değiştirmesine izin sağlayan uygun maliyetli bir araçtır18. Burada sunulan teknik, kullanıcıya polen tuzakları oluşturmasını ve bunları ticari olarak mevcut bombus arı kolonilerine takmasını söyler. Tuzaklar vahşi kolonilerle kullanılmak üzere tasarlanmamıştır. Bu tuzaklar, yuva kutularına döndüklerinde bombus arıları taşıyan polenlerin arka ayaklarındaki korbiküler polen yüklerini pasif olarak çıkarır.

<table><tbody><tr><td>MakerBot Replicator+</td><td>MakerBot</td><td>Model PABH65</td><td></td></tr><tr><td>MakerBot Tough Material</td><td>PLA Filament</td><td></td><td>various colors</td></tr><tr><td>Nest Box</td><td>Biobest</td><td></td><td>Not sold publicly without bee purchase</td></tr></tbody></table>

a 3d printed pollen trap for bumble bee (bombus) hive entrances

Polenler için bombus arılarının bulunduğu bitki kaynaklarını doğrulamak için, bireyler analiz için korbiküler polen yüklerini çıkarmak için toplanmalıdır. Bu geleneksel olarak yuva girişlerinde veya çiçeklerde yemlikleri ağlayarak, arıları buzda soğutarak ve daha sonra polen yüklerini korbilyolden forseps veya fırça ile çıkararak yapılmıştır. Bu yöntem zaman ve emek yoğundur, normal arama davranışını değiştirebilir ve görevi gerçekleştiren işçi için batma olaylarına neden olabilir. Bal arısı kovanlarında kullanılanlar gibi polen tuzakları, yuva girişindeki ekranlardan geçerken işçilerin bacaklarından korbiküler polen yüklerini yerinden sökerek polen toplar. Tuzaklar, büyük miktarda poleni en az emekle geri dönen forager arılardan uzaklaştırabilir, ancak bugüne kadar bombus arı kolonilerinde kullanılmak üzere böyle bir tuzak yoktur. Bombus arı kolonisi içindeki işçiler boyut olarak değişebilir, bu da girişlerin boyut seçimini ticari olarak yetiştirilen bombus arı kovanlarına uyarlamayı zorlaştırır. 3D baskı tasarım programlarını kullanarak, dönen bombus arısı yemlerinin bacaklarındaki korbiküler polen yüklerini başarıyla kaldıran bir polen tuzağı oluşturduk. Bu yöntem, koloniye geri dönen bombus arısı yemliklerinden polen toplamak için araştırmacıların gerektirdiği süreyi önemli ölçüde azaltır. Polen giderme verimlilik testlerinin tasarımını, sonuçlarını sunuyoruz ve araştırmacıların tuzakları çeşitli bombus arısı türlerine veya yuva kutusu tasarımlarına uyarlamaları için değişiklik alanları öneriyoruz.

Sekiz farklı polen filtresi tasarımı, dönen bombus arısı çalışanlarından korbiküler polen yüklerinin giderilmesinde etkinliklerini ve verimliliklerini belirlemek için test edilmiştir. Tüm tasarımlar, geri dönen bir forager'dan en az bir korbiküler polen yükünü çıkarmada başarılı oldu. Bununla birlikte, bazılarının işçilerin kovandan ayrılmasını veya girmesine engel olduğu veya polen yüklerini kaldıramadığı bulunmuştur(Tablo 1). Çeşitli filtrelere sahip polen tuzakları, laboratuvarda yetiştirilen 4 B kolonisi üzerinde ardışık olarak test edildi. huntii Greene, seralarda yetiştirilen Phacelia tanacetifolia'yı 7 günlük dönemde toplanan toplam 138,5 saat ve 229 korbiküler polen yükü(Tablo 1)için aramaktadır (3/2/16\u20123/8/16). Polen tuzakları sahtecilik faaliyeti kaydetmek için devreye girerken, yuva girişlerinin önüne video kameralar yerleştirildi. Tuzak giriş tasarımı, bu süre boyunca deneme yanılma yoluyla devam etti. Test süresi boyunca elli iki saatlik video gözlemi ve 142 korbiküler polen yükü toplanmıştır (Tablo 1). Verimlilikler, toplanan korbiküler polen yüklerinin sayısının bir filtreden geçen gözlenen polen yüklü yemliklerin sayısına bölünmesiyle hesaplandı. Polen filtresi tasarım verimliliği, tam korbiküler polen yüklerinin %2\u201258,9'u arasında değişmektedir. Korbiküler polen yükleri bacaklardan çıkarıldı ve yakalama havzasına yapışkan polen topakları olarak düştü. Korbiküler yüklerin pelet olarak çıkarılma eğilimi nedeniyle, kısmi korbiküler polen yükü kaldırma nadirdir, ancak arı yuvaya girdikten sonra bazı polenlerin korbibülde kaldığını doğrulayamadığımız için bazı kısmi yükler tam olarak çıkarılmış olarak sayılabilir. Dairesel olan genel filtre açıklıkları, işçilerin polen toplamasını ve yuva ortamına hareketini iyileştirdi. Ek olarak, yuva kutusundan uzağa uzanan yapıları yükselten filtre tasarımları, yemliklerin arka ayaklarından polen çıkarılmasını da geliştirdi. Daha önceki bir filtre tasarımı kullanılarak yapılan bir saha çalışmasında, 24 saatlik toplamanın ardından toplanan polenlerin ortalama ağırlığı 11 kovan günü toplama döneminde 1.017 g idi. Her yuvadan toplanan toplam polen kütlesi arasında yüksek varyasyon (günde 0,22\u20122,94 g) vardı. Bu değerler, polenlerin bu yöntem kullanılarak toplanabileceği beklenen bir kütle aralığını temsil eder. İndir polen bindirme baskı dosyasındaki son tasarım, yükseltilmiş kenarlara sahip dairesel bir tuzak girişi olan 8 numaralı tasarımdır.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61500/61500fig1.jpg"> Şekil 1: Polen tuzağı bombus arı kovanına monte edilir. (A) İşçilerin elek boyunca polen filtresine doğru indiği ve seyahat ettiği polen tuzağının ön görünümü. (B) Yakalama havzasının üzerine kaymasını ve takılmasını sağlayan tuzak gövdesinin yivli kenarlarını gösteren monte edilmiş polen tuzağının arka görünümü. (C) Polen filtresinin tuzak gövdesine yerleştirilmesini ve yakalama havzası tarafından sabitlenilmesini sağlayan polen filtresi yarığını gösteren monte edilmiş polen tuzağının yan görünümü. (D) Polen filtresi takılı tuzak gövdesinin alt görünümü, elek korbiküler polen yüklerinin yakalama havzasına düşmesini sağlar ve işçilerin toplanan polenlere erişimini kısıtlar. (E) Bir yuva kutusuna bağlı monte edilmiş polen tuzağının yan görünümü. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/61500/61500fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61500/61500fig2v2.jpg"> Şekil 2: İşçilerin bacaklarından korbiküler polen yüklerinin çıkarıldığı mekanizma. (A) Bir çalışanın yan görünümü ve monte edilmiş polen tuzağına göre boyutu. (B) Polen filtre deliğine yaklaşan işçinin yan görünümü. (C) Polen filtre deliğinden geçen işçinin yan görünümü, korbiküler polen yüklerini karın filtresine ve ventral yüzeyine temas etmeye zorlar. (D) Polen filtre deliğinden geçen işçinin arka görünümü, korbiküler polen yüklerini karın filtresine ve ventral yüzeyine temas etmeye zorlar. (E) Korbiküler polen yükleri korbiküler polen yükünden sıyrılıp elekten geçirilip yakalama havzasına düştükten sonra polen filtre deliğinden geçen işçinin arka görünümü ve (F) korbiküler polen yükleri korbiküler polen yüklerinden sıyrılıp elekten geçirilip yakalama havzasına düştükten sonra polen filtre deliğinden geçen işçinin yan görünümü.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1"><tbody>
<tr>
<td colspan="2"></td>
			<td colspan="3">Kümülatif Toplamlar</td>
			<td colspan="5">Video Gözlemi</td>
		</tr>
<tr>
<td>Tasarım Kimliği</td>
			<td>Giriş Şekli</td>
			<td>Dağıtım (Saat)</td>
			<td>Toplanan Korbiküler Polen Yükleri</td>
			<td>Toplama Oranı (Polen Yükleri/saati)</td>
			<td>Gözlem (Saat)</td>
			<td>Toplanan Korbiküler Polen Yükleri</td>
			<td>Polen Foragers</td>
			<td>Bireysel Verimlilik*</td>
			<td>Toplam Verimlilik**</td>
		</tr>
<tr>
<td>1</td>
			<td>Elmas</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td>9</td>
			<td>0.11</td>
			<td>5.56%</td>
		</tr>
<tr>
<td>2</td>
			<td>Elmas</td>
			<td>3.5</td>
			<td>2</td>
			<td>0.57</td>
			<td>3.5</td>
			<td>2</td>
			<td>50</td>
			<td>0.04</td>
			<td>2.00%</td>
		</tr>
<tr>
<td>3</td>
			<td>Kare</td>
			<td>4.5</td>
			<td>2</td>
			<td>0.44</td>
			<td>4.5</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
			<td>1</td>
			<td>50.00%</td>
		</tr>
<tr>
<td>4</td>
			<td>Daire</td>
			<td>9.5</td>
			<td>7</td>
			<td>0.74</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
<tr>
<td>5</td>
			<td>Daire</td>
			<td>17.5</td>
			<td>10</td>
			<td>0.57</td>
			<td>5.75</td>
			<td>5</td>
			<td>23</td>
			<td>0.22</td>
			<td>10.87%</td>
		</tr>
<tr>
<td>6</td>
			<td>Daire</td>
			<td>18</td>
			<td>36</td>
			<td>2</td>
			<td>13</td>
			<td>35</td>
			<td>54</td>
			<td>0.65</td>
			<td>32.41%</td>
		</tr>
<tr>
<td>7</td>
			<td>Daire</td>
			<td>49.5</td>
			<td>48</td>
			<td>0.97</td>
			<td>6.25</td>
			<td>11</td>
			<td>17</td>
			<td>0.65</td>
			<td>32.35%</td>
		</tr>
<tr>
<td>8</td>
			<td>Daire</td>
			<td>35</td>
			<td>123</td>
			<td>3.51</td>
			<td>18</td>
			<td>86</td>
			<td>73</td>
			<td>1.18</td>
			<td>58.90%</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Toplam</td>
			<td>138.5</td>
			<td>229</td>
			<td>-</td>
			<td>52</td>
			<td>142</td>
			<td>228</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="10">*Geri dönen polen forager'larından toplanan ortalama korbiküler polen yükü sayısı.</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="10">**Geri dönen yemliklerden toplanan toplam korbiküler polen yüklerinin yüzdesi (Bireysel/2).</td>
		</tr>
</tbody></table>Tablo 1: Toplam dağıtım saatlerinin özet tablosu, toplanan korbiküler polen yükleri, saatlerle birlikte toplama oranı, polen yemleyici sayısı, video görüntüleri aracılığıyla doğrulanan bireysel ve toplam verimlilik.

Watch this Scientific Journal Video about A 3D Printed Pollen Trap for Bumble Bee Bombus Hive Entrances at JoVE.com

A 3D Printed Pollen Trap for Bumble Bee Bombus Hive Entrances

Bir kovana geri dönen bombus arısı(Bombus)işçilerinden polen toplamak için ölümcül olmayan ve otomatik bir mekanizma sunuyoruz. Cihazların üretimi, hazırlanması, kurulumu ve kullanılması için talimatlar dahildir. 3D baskılı nesneler kullanılarak, tasarımda değişiklik zamanında, verimli ve test için hızlı dönüş için izin verildi.

Bombus Arısı (Bombus) Kovan Girişleri için 3D Baskılı Polen Tuzağı

To verify the plant sources from which bumble bees forage for pollen, individuals must be collected to remove their corbicular pollen loads for analysis.  ...

a-3d-printed-pollen-trap-for-bumble-bee-bombus-hive-entrances

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Biology

A 3D Printed Pollen Trap for Bumble Bee (Bombus) Hive Entrances

5.1K Görüntüleme.  Utah State University. Bir kovana geri dönen bombus arısı(Bombus)işçilerinden polen toplamak için ölümcül olmayan ve otomatik bir mekanizma sunuyoruz. Cihazların üretimi, hazırlanması, kurulumu ve kullanılması için talimatlar dahildir. 3D baskılı nesneler kullanılarak, tasarımda değişiklik zamanında, verimli ve test için hızlı dönüş için izin verildi.

Video: A 3D Printed Pollen Trap for Bumble Bee Bombus Hive Entrances

Behavioural Pharmacology in Classical Conditioning of the Proboscis Extension Response in Honeybees (Apis mellifera)

Honeybees (Apis mellifera) are well known for their communication and orientation skills and for their impressive learning capability1,2. Because the survival of a honeybee colony depends on the exploitation of food sources, forager bees learn and memorize variable flower sites as well as their profitability. Forager bees can be easily trained in natural settings where they forage at a feeding site and learn the related signals such as odor or color. Appetitive associative learning can also be studied under controlled conditions in the laboratory by conditioning the proboscis extension response (PER) of individually harnessed honeybees3,4. This learning paradigm enables the study of the neuronal and molecular mechanisms that underlie learning and memory formation in a simple and highly reliable way5-12. A behavioral pharmacology approach is used to study molecular mechanisms. Drugs are injected systemically to interfere with the function of specific molecules during or after learning and memory formation13-16.
Here we demonstrate how to train harnessed honeybees in PER conditioning and how to apply drugs systemically by injection into the bee flight muscle.

Behavioural Pharmacology in Classical Conditioning of the Proboscis Extension Response in Honeybees Apis mellifera

We demonstrate how to implement a behavioral pharmacology method in an appetitive olfactory conditioning paradigm in honeybees (Apis mellifera) by systemic application of drugs. This method allows investigation of the mechanisms underlying learning and memory formation in a simple and reliable way.

Bal arısı burnumun Extension Tepki Klasik Koşullanma Davranış Farmakoloji ( Apis mellifera)

Honeybees (Apis mellifera) are well known for their communication and orientation skills and for their impressive learning capability1,2. Because the ...

Nörobilim

A Push-pull Protocol to Reduce Colonization of Bird Nest Boxes by Honey Bees

Introduction of the invasive Africanized honey bee (AHB) into the Neotropics is a serious problem for many cavity nesting birds, specifically parrots. These bees select cavities that are suitable nest sites for birds, resulting in competition. The difficulty of removing bees and their defensive behavior makes a prevention protocol necessary. Here, we describe a push-pull integrated pest management protocol to deter bees from inhabiting bird boxes by applying a bird safe insecticide, permethrin, to repel bees from nest boxes, while simultaneously attracting them to pheromone-baited swarm traps. Shown here is an example experiment using Barn Owl nest boxes. This protocol successfully reduced colonization of Barn Owl nest boxes by Africanized honey bees. This protocol is flexible, allowing adjustments to accommodate a wide range of bird species and habitats. This protocol could benefit conservation efforts where AHB are located.

Preventing colonization of bird nest boxes by invasive Africanized honey bees is important for conservation efforts of nest-site limited birds. We provide an integrated pest management approach to &#34;push&#34; bees away from nest boxes with a repellant insecticide, permethrin, and &#34;pull&#34; them toward pheromone baited swarm traps.

Bir Push-pull Protokolü Bal Arısı ile kolonizasyon Bird Nest Kutular azaltmak için

Introduction of the invasive Africanized honey bee (AHB) into the Neotropics is a serious problem for many cavity nesting birds, specifically parrots. ...

Çevre

Empirical, Metagenomic, and Computational Techniques Illuminate the Mechanisms by which Fungicides Compromise Bee Health

Growers often use fungicide sprays during bloom to protect crops against disease, which exposes bees to fungicide residues. Although considered &#34;bee-safe,&#34; there is mounting evidence that fungicide residues in pollen are associated with bee declines (for both honey and bumble bee species). While the mechanisms remain relatively unknown, researchers have speculated that bee-microbe symbioses are involved. Microbes play a pivotal role in the preservation and/or processing of pollen, which serves as nutrition for larval bees. By altering the microbial community, it is likely that fungicides disrupt these microbe-mediated services, and thereby compromise bee health. This manuscript describes the protocols used to investigate the indirect mechanism(s) by which fungicides may be causing colony decline. Cage experiments exposing bees to fungicide-treated flowers have already provided the first evidence that fungicides cause profound colony losses in a native bumble bee (Bombus impatiens). Using field-relevant doses of fungicides, a series of experiments have been developed to provide a finer description of microbial community dynamics of fungicide-exposed pollen. Shifts in the structural composition of fungal and bacterial assemblages within the pollen microbiome are investigated by next-generation sequencing and metagenomic analysis. Experiments developed herein have been designed to provide a mechanistic understanding of how fungicides affect the microbiome of pollen-provisions. Ultimately, these findings should shed light on the indirect pathway through which fungicides may be causing colony declines.

Microbial consortia within bumble bee hives enrich and preserve pollen for bee larvae. Using next generation sequencing, along with laboratory and field-based experiments, this manuscript describes protocols used to test the hypothesis that fungicide residues alter the pollen microbiome, and colony demographics, ultimately leading to colony loss.

Ampirik, Metagenomic ve bilgisayar teknikleri mekanizma hangi mantar ilaçları uzlaşma arı sağlık ile aydınlatmak

Growers often use fungicide sprays during bloom to protect crops against disease, which exposes bees to fungicide residues. Although considered ...

Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees

The European honey bee, Apis mellifera L., is an economically and agriculturally important pollinator that generates billions of dollars annually. Honey bee colony numbers have been declining in the United States and many European countries since 1947. A number of factors play a role in this decline, including the unintentional exposure of honey bees to pesticides. The development of new methods and regulations are warranted to reduce pesticide exposures to these pollinators. One approach is the use of repellent chemistries that deter honey bees from a recently pesticide-treated crop. Here, we describe a protocol to discern the deterrence of honey bees exposed to select repellent chemistries. Honey bee foragers are collected and starved overnight in an incubator 15 h prior to testing. Individual honey bees are placed into Petri dishes that have either a sugar-agarose cube (control treatment) or sugar-agarose-compound cube (repellent treatment) placed into the middle of the dish. The Petri dish serves as the arena that is placed under a camera in a light box to record the honey bee locomotor activities using video tracking software. A total of 8 control and 8 repellent treatments were analyzed for a 10 min period with each treatment was duplicated with new honey bees. Here, we demonstrate that honey bees are deterred from the sugar-agarose cubes with a compound treatment whereas honey bees are attracted to the sugar-agarose cubes without an added compound.

The loss of honey bee colonies presents a challenge to crop pollination services. Current pollinator protection practices warrant an alternative approach to minimize the contact of honey bees to harmful pesticides using repellent chemistries. Here, we provide detailed methods for a visual tracking protocol to screen deterrents for bees.

Bal Arıları İçin Ekran Koruma Kimyagerleri için Video İzleme Protokolü

The European honey bee, Apis mellifera L., is an economically and agriculturally important pollinator that generates billions of dollars annually. Honey ...

Identification of Olfactory Volatiles using Gas Chromatography-Multi-unit Recordings (GCMR) in the Insect Antennal Lobe

All organisms inhabit a world full of sensory stimuli that determine their behavioral and physiological response to their environment. Olfaction is especially important in insects, which use their olfactory systems to respond to, and discriminate amongst, complex odor stimuli. These odors elicit behaviors that mediate processes such as reproduction and habitat selection1-3. Additionally, chemical sensing by insects mediates behaviors that are highly significant for agriculture and human health, including pollination4-6, herbivory of food crops7, and transmission of disease8,9. Identification of olfactory signals and their role in insect behavior is thus important for understanding both ecological processes and human food resources and well-being.
	To date, the identification of volatiles that drive insect behavior has been difficult and often tedious. Current techniques include gas chromatography-coupled electroantennogram recording (GC-EAG), and gas chromatography-coupled single sensillum recordings (GC-SSR)10-12. These techniques proved to be vital in the identification of bioactive compounds. We have developed a method that uses gas chromatography coupled to multi-channel electrophysiological recordings (termed 'GCMR') from neurons in the antennal lobe (AL; the insect's primary olfactory center)13,14. This state-of-the-art technique allows us to probe how odor information is represented in the insect brain. Moreover, because neural responses to odors at this level of olfactory processing are highly sensitive owing to the degree of convergence of the antenna's receptor neurons into AL neurons, AL recordings will allow the detection of active constituents of natural odors efficiently and with high sensitivity. Here we describe GCMR and give an example of its use.
	Several general steps are involved in the detection of bioactive volatiles and insect response. Volatiles first need to be collected from sources of interest (in this example we use flowers from the genus Mimulus (Phyrmaceae)) and characterized as needed using standard GC-MS techniques14-16. Insects are prepared for study using minimal dissection, after which a recording electrode is inserted into the antennal lobe and multi-channel neural recording begins. Post-processing of the neural data then reveals which particular odorants cause significant neural responses by the insect nervous system.
	Although the example we present here is specific to pollination studies, GCMR can be expanded to a wide range of study organisms and volatile sources. For instance, this method can be used in the identification of odorants attracting or repelling vector insects and crop pests. Moreover, GCMR can also be used to identify attractants for beneficial insects, such as pollinators. The technique may be expanded to non-insect subjects as well.

Identification of Olfactory Volatiles using Gas Chromatography-Multi-unit Recordings GCMR in the Insect Antennal Lobe

Olfactory cues mediate many different behaviors in insects, and are often complex mixtures comprised of tens to hundreds of volatile compounds. Using gas chromatography with multi-channel recording in the insect antennal lobe, we describe a method for the identification of bioactive compounds.

Böcek antennal Lob Gaz Kromatografisi-Multi-ünite Recordings (GCMR) kullanarak Olfaktör Uçuculuk tanımlanması

All  organisms inhabit a world full of sensory stimuli that determine their  behavioral and physiological response to their environment. Olfaction is ...

Tactile Conditioning And Movement Analysis Of Antennal Sampling Strategies In Honey Bees (Apis mellifera L.)

Honey bees (Apis mellifera L.) are eusocial insects and well known for their complex division of labor and associative learning capability1, 2. The worker bees spend the first half of their life inside the dark hive, where they are nursing the larvae or building the regular hexagonal combs for food (e.g. pollen or nectar) and brood3. The antennae are extraordinary multisensory feelers and play a pivotal role in various tactile mediated tasks4, including hive building5 and pattern recognition6. Later in life, each single bee leaves the hive to forage for food. Then a bee has to learn to discriminate profitable food sources, memorize their location, and communicate it to its nest mates7. Bees use different floral signals like colors or odors7, 8, but also tactile cues from the petal surface9 to form multisensory memories of the food source. Under laboratory conditions, bees can be trained in an appetitive learning paradigm to discriminate tactile object features, such as edges or grooves with their antennae10, 11, 12, 13. This learning paradigm is closely related to the classical olfactory conditioning of the proboscis extension response (PER) in harnessed bees14. The advantage of the tactile learning paradigm in the laboratory is the possibility of combining behavioral experiments on learning with various physiological measurements, including the analysis of the antennal movement pattern.

Tactile Conditioning And Movement Analysis Of Antennal Sampling Strategies In Honey Bees Apis mellifera L.

In this protocol we show how to condition harnessed honey bees to tactile stimuli and introduce a 2D motion capture technique for analyzing the kinematics of fine-scale antennal sampling pattern.

Dokunsal İklimlendirme Ve Bal Arısı yılında antennal Örnekleme Stratejileri Hareket Analizi (<em&gt; Apis mellifera</em&gt; L.)

Honey bees (Apis mellifera L.) are eusocial insects and well known for their complex division of labor and associative learning capability1, 2. The worker ...

A Proboscis Extension Response Protocol for Investigating Behavioral Plasticity in Insects: Application to Basic, Biomedical, and Agricultural Research

Insects modify their responses to stimuli through experience of associating those stimuli with events important for survival (e.g., food, mates, threats). There are several behavioral mechanisms through which an insect learns salient associations and relates them to these events. It is important to understand this behavioral plasticity for programs aimed toward assisting insects that are beneficial for agriculture. This understanding can also be used for discovering solutions to biomedical and agricultural problems created by insects that act as disease vectors and pests. The Proboscis Extension Response (PER) conditioning protocol was developed for honey bees (Apis mellifera) over 50 years ago to study how they perceive and learn about floral odors, which signal the nectar and pollen resources a colony needs for survival. The PER procedure provides a robust and easy-to-employ framework for studying several different ecologically relevant mechanisms of behavioral plasticity. It is easily adaptable for use with several other insect species and other behavioral reflexes. These protocols can be readily employed in conjunction with various means for monitoring neural activity in the CNS via electrophysiology or bioimaging, or for manipulating targeted neuromodulatory pathways. It is a robust assay for rapidly detecting sub-lethal effects on behavior caused by environmental stressors, toxins or pesticides.
We show how the PER protocol is straightforward to implement using two procedures. One is suitable as a laboratory exercise for students or for quick assays of the effect of an experimental treatment. The other provides more thorough control of variables, which is important for studies of behavioral conditioning. We show how several measures for the behavioral response ranging from binary yes/no to more continuous variable like latency and duration of proboscis extension can be used to test hypotheses. And, we discuss some pitfalls that researchers commonly encounter when they use the procedure for the first time.

The Proboscis Extension Response (PER) conditioning protocol, developed for the honey bee (Apis mellifera), provides an ecologically-relevant and easily quantifiable means for studying several different mechanisms of learning in many insect species.

Bir burnumun Extension Tepki Böcekler Davranış Plastisitesi incelenmesi için protokol: Basic, Biyomedikal Uygulama ve Tarımsal Araştırma

Insects modify their responses to stimuli through experience of associating those stimuli with events important for survival (e.g., food, mates, threats). ...

Radio Frequency Identification and Motion-sensitive Video Efficiently Automate Recording of Unrewarded Choice Behavior by Bumblebees

We present two methods for observing bumblebee choice behavior in an enclosed testing space. The first method consists of Radio Frequency Identification (RFID) readers built into artificial flowers that display various visual cues, and RFID tags (i.e., passive transponders) glued to the thorax of bumblebee workers. The novelty in our implementation is that RFID readers are built directly into artificial flowers that are capable of displaying several distinct visual properties such as color, pattern type, spatial frequency (i.e., &#8220;busyness&#8221; of the pattern), and symmetry (spatial frequency and symmetry were not manipulated in this experiment). Additionally, these visual displays in conjunction with the automated systems are capable of recording unrewarded and untrained choice behavior. The second method consists of recording choice behavior at artificial flowers using motion-sensitive high-definition camcorders. Bumblebees have number tags glued to their thoraces for unique identification. The advantage in this implementation over RFID is that in addition to observing landing behavior, alternate measures of preference such as hovering and antennation may also be observed. Both automation methods increase experimental control, and internal validity by allowing larger scale studies that take into account individual differences. External validity is also improved because bees can freely enter and exit the testing environment without constraints such as the availability of a research assistant on-site. Compared to human observation in real time, the automated methods are more cost-effective and possibly less error-prone.

This video describes Radio-Frequency Identification (RFID) and motion-sensitive video recording methods to monitor choice behavior by bumblebees.

Radyo Frekansı ile Tanımlama ve Verimli Hareket duyarlı video Bumblebees tarafından karşılıksız seçim davranışının Kayıt otomatikleştirin

We present two methods for observing bumblebee choice behavior in an enclosed testing space. The first method consists of Radio Frequency Identification ...

A Novel Behavioral Assay to Investigate Gustatory Responses of Individual, Freely-moving Bumble Bees (Bombus terrestris)

Generalist pollinators like the buff-tailed bumble bee, Bombus terrestris, encounter both nutrients and toxins in the floral nectar they collect from flowering plants. Only a few studies have described the gustatory responses of bees toward toxins in food, and these experiments have mainly used the proboscis extension response on restrained honey bees. Here, a new behavioral assay is presented for measuring the feeding responses of freely-moving, individual worker bumble bees to nutrients and toxins. This assay measures the amount of solution ingested by each bumble bee and identifies how tastants in food influence the microstructure of the feeding behavior.
The solutions are presented in a microcapillary tube to individual bumble bees that have been previously starved for 2-4 hr. The behavior is captured on digital video. The fine structure of the feeding behavior is analyzed by continuously scoring the position of the proboscis (mouthparts) from video recordings using event logging software. The position of the proboscis is defined by three different behavioral categories: (1) proboscis is extended and in contact with the solution, (2) proboscis is extended but not in contact with the solution and (3) proboscis is stowed under the head. Furthermore the speed of the proboscis retracting away from the solution is also estimated.
In the present assay the volume of solution consumed, the number of feeding bouts, the duration of the feeding bouts and the speed of the proboscis retraction after the first contact is used to evaluate the phagostimulatory or the deterrent activity of the compounds tested.
This new taste assay will allow researchers to measure how compounds found in nectar influence the feeding behavior of bees and will also be useful to pollination biologists, toxicologists and neuroethologists studying the bumble bee&#39;s taste system.

A Novel Behavioral Assay to Investigate Gustatory Responses of Individual, Freely-moving Bumble Bees Bombus terrestris

A novel behavioral assay is described for investigating the short term gustatory responses of the mouthparts of freely-moving bumble bees (Bombus terrestris) toward nutrients and toxins in solution.

A Novel Davranış Testi (Bumble Bees Serbestçe hareket eden Bireyin Tat Cevapları, Araştırma<em&gt; Bombus terrestris</em&gt;)

Generalist pollinators like the buff-tailed bumble bee, Bombus terrestris, encounter both nutrients and toxins in the floral nectar they collect from ...

Collection and Identification of Pollen from Honey Bee Colonies

Researchers often collect and analyze corbicular pollen from honey bees to identify the plant sources on which they forage for pollen or to estimate pesticide exposure of bees via pollen. Described herein is an effective pollen-trapping method for collecting corbicular pollen from honey bees returning to their hives. This collection method results in large quantities of corbicular pollen that can be used for research purposes. Honey bees collect pollen from many plant species, but typically visit one species during each collection trip. Therefore, each corbicular pollen pellet predominantly represents one plant species, and each pollen pellet can be described by color. This allows the sorting of samples of corbicular pollen by color to segregate plant sources. Researchers can further classify corbicular pollen by analyzing the morphology of acetolyzed pollen grains for taxonomic identification. These methods are commonly used in studies related to pollinators such as pollination efficiency, pollinator foraging dynamics, diet quality, and diversity. Detailed methodologies are presented for collecting corbicular pollen using pollen traps, sorting pollen by color, and acetolyzing pollen grains. Also presented are results pertaining to the frequency of pellet colors and taxa of corbicular pollen collected from honey bees in five different cropping systems.

We describe methods for collecting corbicular pollen from honey bees as well as protocols for color sorting, acetolysis, and microscope slide preparation of pollen for taxonomic identification. In addition, we present pellet color and taxonomic diversity of corbicular pollen collected from five cropping systems using pollen traps.

Bal Arısı Kolonilerinden Polenlerin Toplanması ve Tanımlanması

Researchers often collect and analyze corbicular pollen from honey bees to identify the plant sources on which they forage for pollen or to estimate ...

Bombus Arısı (Bombus) Kovan Girişleri için 3D Baskılı Polen Tuzağı

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler