Tek fiber Kayıt sinir liflerinin faaliyetlerinin kaydedilmesinde önemli bir rol oynar. Özellikle dorsal kök ganglion nöronlar için alıcı alanlardan periferik hissi ileten faaliyetler. Lif kayıt wavel olarak, doğa uyaranlara yanıtları kaydetmek için kapasite ile süre uzunluğu sağlar, ve daha sonra hücreler arası çevrenin bozulması oldu.
Tek bir fiber kayıt durumunda nötron otomatik durum için iyi gerektirir. Terapist entegre DRG testleri siyatik sinir entegre hazırlanması için gerekliliği çağırır. Demo durumun sonucu iyi, fiziksel çıkartma aşamasında sinirlerin hemen hemen tüm ayrıntıları gösterir.
Ve üçüncü olarak, tüm DRG hazırlık olarak entegre edilmiştir. Bu prosedüre başlamak için ameliyattan önce tüm cerrahi aletleri hazırlayın ve dezenfekte edin. Sonra normal Ringer'S ekstrasellüler çözeltisi bir ila iki litre hazırlamak ve kullanıma kadar dört derece santigrat de saklayın.
Kayıt için siyatik sinir gövdesi ortaya çıkarmak için, ilk, uyluk sırt kısmında anestezi sıçan deri ve kasları açık kesti. Sonra, femoral pazı boyunca künt bir diseksiyon gerçekleştirin. Dikkatle oftalmik makas ve cam ayırma iğnesi kullanarak siyatik sinir gövde izole ve Ringer çözeltisi kullanarak doku nemli tutmak.
Daha sonra, etrafındaki yuvaya deri dikiş tarafından bir ev yapımı metal çember üzerinde hayvan düzeltmek. Sıvı banyosu kurmak için deriyi hafifçe yukarı çekin. Proksimal tarafta siyatik sinir gövdesi bir santimetre maruz.
Açıkça ince sinir gövdesi gözlemlemek için kontrast geliştirmek için sinir gövdesi altında küçük, kahverengi bir platform yerleştirin. Daha sonra, lif yüzeyinin kurumasını önlemek için sinir gövdesinin üstüne bazı sıcak sıvı parafin uygulayın. Sinir gövdesi etrafında bir eksüda varsa sıvı çıkarın.
Kayıt gerçekleştirmek için, kayıt elektrot olarak platin filament seçin. Yemek ve çok sonunda küçük bir kanca oluşturun. Daha sonra elektrodu bir mikromanipülatöre takın.
Banyoda, deri altı dokunun yanına bir referans elektrot yerleştirin. Spinal dura ve Pia mater split ve siyatik sinir elde. %25 büyütmede stereo-mikroskop altında, ince bir fasikül alın ve kayıt elektrotunun kancası üzerindeki aksonun yaklaşık ucunu askıya alın.
Mekanik simulis ve termal uyarıcı kullanarak tek, kavramsal olmayan bir c fiberin alıcı alanını tanımlayın. Sinir lifi ateş mekanik uyaranlara ve sıcak su yanıt veriyorsa, o zaman bir polimoto olarak düşünün, kavramsal olmayan c fiber. Daha sonra, elektriksel uyaranların teslimi için tanımlayıcı alanın derisine iki milimetre aralıklı iki iğne uyarıcı elektrot takın.
Osiloskopta bir eylem potansiyelinin dalga formunu görüntüleyin ve bilgisayara sinyal örnekleme hızı 20 kilohertz olan bir d-board çalıştırın. Daha sonra, veri toplama yazılımı kullanarak ani kayıtları kaydedin ve daha sonra profesyonel yazılım ile analiz edin. İletim arızasını ölçmek için, farklı frekanslarda tekrarlayan elektrot uyaranlarını 60 saniye boyunca c fibere teslim edin.
Uyarıcılar arasında dinlenmek için lif için 10 dakikalık bir aralık sağlar. Daha sonra, teslim tekrarlayan uyarıcı darbelerin sayısına başarısızlık sayısı oranını hesaplamak ve iletim yetmezliği derecesini elde etmek için% 100 ile çarpın. Dorsal kök ganglion ortaya çıkarmak için, ilk l4 l5 segmentinde arka orta hattan açık deri kesti.
Daha sonra, kasları omurga süreci vertebral bor ve bir kemik rongeur kullanarak enine süreci kaldırmak ve omurilik NDRG vücut ortaya çıkarmak. Kapak maruz omurilik, NDRG, pamuk nöral aktiviteyi korumak için normal Ringer's ekstrasellüler çözeltisi ile ıslatılmış ile. Kanamayı durdurun ve gerektiği gibi kanı çıkarın.
Daha sonra, oftalmik makas kullanarak, DRG ve bağlı spinal sinir ortaya çıkarmak için vertebraforamen üzerinde s1 kemik yapısı l4 kaldırmak. Orta uyluk siyatik sinir ortaya çıkarmak için deri üzerinde bir kesim olun. Ayrı ve kas içinde gider sinirin distal ucundan siyatik sinir kesmek.
Ve kesmeden önce sinirin ucunda cerrahi hat ile sinir gövdesi nierde. Daha sonra, sinir ligasyon noktasını kaldırarak altta yatan bağ dokusundan siyatik sinir ayırın. Omurilikten dura için çıkarın ve siyatik sinirin bitişik kısmına ulaşana kadar altta yatan bağ dokusundan DRG ayırın.
Böylece, bağlı bir siyatik sinir ile DRG tüm hazırlık izole. DRG yüzeyini temizlemek için, 4x büyütme, dikkatle cımbız kullanarak l4 l6 DRG yüzeyinde spinal dura kaldırın. Karışık enzimlerin bir mililitre içeren bir cam tüp bağlı siyatik sinir ile DRG yerleştirin.
15 dakika boyunca 37 derece santigrat su banyosunda sindirin. 15 dakika sonra, cerrahi hattın ucunu kaldırın ve enzimi temizlemek için normal Ringer'ın hücre dışı çözeltisi ile dolu bir çanağa preparat taşıyın. Daha sonra, sindirilmiş DRG'yi kayıt için oksijenli Ringer'ın hücre dışı çözeltisi ile dolu bir konteynere aktarın.
Kayıt yapmak için hücre içi çözeltihazırlayın ve kullanıma kadar sıfır derecede saklayın. Bir dilim çapa kullanarak, ganglia stabilize ve bir emme uyarıcı elektrot sinir ucunu bağlayın. 40x büyütme, görselleştirmek ve bir su emersion amacı ile bir DRG nöron seçin.
Kat bir elektrot ve hücre içi çözelti ile doldurun. Tutucuelektrot takın ve dört ila yedi megaohms son bir direnç ile pipet pozitif basınç uygulayın. Sonra, elektrot hücre yüzeyine getirin.
Daha sonra, bir mühür oluşturmak için pipet negatif basınç uygulayın. Bir gigaohm mührü ulaşıldıktan sonra, membran potansiyelini eksi 60 milivolt olarak ayarlayın ve tüm hücre kayıt modunu kurun. Daha sonra, iletken başarısızlık için ekrana emme elektrot yoluyla siyatik sinir 5 ila 50 hertz tekrarlayan uyaranların teslim.
AHP'nin genliğini taban çizgisinden tepeye ve %80 AHP süresine kadar ölçün. Bu rakam, 10 hertz elektrikstimülasyonyanıt olarak sıçanlardan tek c5 yeniden ateşleme orijinal ardışık kayıtları gösterir. Her yirminci süpürme gösterilir ve yukarıdan aşağıya görüntülenir.
Ekleme temsili bir eylem potansiyeli gösterir. Burada CFA enjekte sıçanlar önceki panel ile aynı uyarılma yanıt olarak tek c lifleri kayıtları vardır. Bu rakam, kontrol koşulları altında beş hertz stimülasyon anormal yanıtları serisi ateş yanıtları sürekli kayıtları gösterir, ya da CFA dereceli sıçanlardan küçük çaplı DRG nöron ZD7288 farklı konsantrasyon yönetimi.
Insets belirtilen kayıt dönemleri için genişletilmiş izlemeleri gösterir. Koyu noktalar başak hatalarını temsil eder. AHP kontrol daha büyük bir yükselen eğim gösterdi.
ZD7288 uygulamasında 125 mikromolar dan sonra daha küçük bir yükselen eğim gözlenmiştir. Ne zaman tek bir beşlik kayıt, ben lif kesmek için önemli olduğunu düşünüyorum hayvanların bakımı iyi herhangi bir güvenlik durumudur. Ve nötronun etrafındaki mikro çevre.
Tek lif kayıt ve siyatik sinir ile bağlı bozulmamış DRG uygulaması kombinasyonu, ağrı ile ilgili periferik sinir sistemi anlayışımızı geliştirdi.
