Name: a fish-feeding laboratory bioassay to assess the antipredatory activity of secondary metabolites from the tissues of marine organisms
Uploaded: 2015-01-11T14:00:00.000+00:00
Duration: 16 min 3 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Fish-feeding Laboratory Bioassay to Assess the Antipredatory Activity of Secondary Metabolites from the Tissues of Marine Organisms at JoVE.com

We thank James Maeda and Aaron Cooke for assistance with the filming and editing of this video. Funding was provided by the National Science Foundation (OCE-0550468, 1029515).

NOT: Bu protokolün 3. Adım omurgalı hayvan denekleri içerir. Prosedür hayvanlar mümkün olan en insancıl tedavi böylece dizayn edilmiştir ve Kuzey Carolina Wilmington Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmıştır. 1) Doku Ekstraksiyon <ol><li> Bu ikincil metabolitlerin hacimsel konsantrasyonunu değiştirecek gibi hidrasyon ve sıkılmış, kurutulmuş-out veya aşırı ıslak doğal haliyle olduğu doku kullanın. Kesilmiş veya 50 ml&#39;lik bir santrifüj tüpü içine sokulabilir parçaları veya dilimleri için doku kıyılır. Not: Taze doku bazı durumlarda kullanılabilir, ancak, cut sıkma tabi değildir dondurulmuş doku, kesme veya kesmek için, genellikle daha iyidir. </li><li> Bir 1 30 ml doku parçaları ekleyin: 40 ml&#39;lik bir son hacme kadar dereceli bir santrifüj tüpüne 1 diklorometan (DKM) ve metanol (MeOH) ulaşılır. Transfer ile ilgili tüm adımları doğru yaptığınızdan emin olunYeterli havalandırma ile bir davlumbaz içinde solvent. </li><li> Tüp kap ve bunu birkaç kez ters, sonra 4 saat çıkarma döneminde art arda çalkalayın. Not: Bu süre içinde, su, MeOH ile birleştirilir ve elde edilen MeOH: su fazı DCM fazı ayrılır. doku alternatif olarak DCM ile MeOH maruz: su bir emülsiyon halinde tüpleri çalkalanır gibidir. </li><li> Yuvarlak tabanlı bir şişeye DCM özü aktarın ve düşük bir ısı kullanılarak bir döner buharlaştırıcı üzerinde kuruluğa kadar buharlaşmasına (&lt;40 ° C). En az bir çözücü kullanılarak, bir 20 mL sintilasyon şişesine kurutularak özü aktarın. Bir döner buharlaştırıcı adaptörü ile şişe yerleştirin ve daha düşük bir ısı kullanılarak bir döner buharlaştırıcı üzerinde kuruluğa kadar buharlaşmasına (&lt;40 ° C). Not: (1) somun (2) yıkayıcı ve (3) palamut somun: Bir sonraki adım, bir dişli çubuğun ucuna sırayla aşağıdaki öğeleri vidalanarak monte edilebilir bir ev yapımı sıkıştırma aracının kullanılmasını gerektirmektedir. yıkayıcı ya delikli olmalı veyabir 50 ml santrifüj tüpüne iç çapından daha küçük olacak şekilde donatılmış olabilir. </li><li> Doku ve MeOH içeren mezun santrifüj tüpüne dönersek: Su özü, sıkıştırma yoluyla doku dışarı çıkarma orta sıkmak. MeOH transfer: Aynı yuvarlak dipli bir şişeye su ekstraktı ve soğutulmuş depolamak (&lt;10 ° C). </li><li> Su ekstraktı: daha sonra, yeni MeOH MeOH ihtiva eden soğutulmuş yuvarlak dipli bir şişeye özü transferi, hemen susuz doku 2-6 saat bir süre için bir ikinci çıkarma için batık kadar dereceli santrifüj tüpüne MeOH ekleyin. Doku tam ekstre edilmediğini herhangi bir endişe varsa, 2 saat 6 MeOH çıkarma tekrarlayın. </li><li> Düşük bir ısı kullanılarak bir döner buharlaştırıcı üzerinde MeOH kurutun (&lt;40 ° C). Yuvarlak tabanlı bir şişeye yıkamak için MeOH, minimal hacim ile yıkandı, kurutuldu polar olmayan özü ihtiva eden sintilasyon şişesine yuvarlak dipli bir şişede kalan Sulu ekstraktı aktarın. </li><li> Ebir vakum yoğunlaştırıcısı düşük ısı (&lt;40 ° C) kullanılarak kuruyana dek Sulu ekstraktı Vaporate. sintilasyon şişesi hemen doku içinde 10 ml toplam kuru ham organik özü içerir. , Oksidasyonunu önlemek için N2 gazı ile şişenin üst boşluğunu tahliye sıkı bir şekilde yapışması ve depolamak dondurulmuş (-20 ° C). </li></ol> 2) Gıda Hazırlama <ol><li> Dondurularak kurutulmuş kalamar manto tozu hazırlayın. Not: Squid manto diğer bentik omurgasız ile karşılaştırılabilir, ve 2.2 aşağıdaki alt-etapları bir terkip maddesi olarak kullanılacak olan bir beslenme kaynağı içerir. <ol><li> Sıcak deiyonize (DI) su kalamar mantonun çözülme dondurulmuş halkaları, daha sonra yüksek hızlı karıştırıcı onları püresi. </li><li> Sığ çerez levha ve dondurularak (-20 ° C) üzerine püre kalamar manto ince bir tabaka dökün, daha sonra küçük parçalar halinde liyofilize edilecek dondurulmuş kalamar püresi sayfasını kırmak. </li><li> Fr işletim prosedürleri takip dondurulmuş kalamar manto püresi lyophilizeeeze-kurutucu. </li><li> Bir toz oluşturmak üzere yüksek hızlı bir karıştırıcı içinde kalamar manto püresi liyofilize parçaları toz haline. </li><li> Bir çeker ocak içinde, bir döner un elek toz halinde kalamar manto dökün ve ince ebatlı tozun bir doku büyük boyutta ayrı eleyin. </li><li> Bir yapışmalı kaba ince toz kalamar manto aktarın. Oksitlenmesini önlemek ve dondurulmuş depolama N2 gazı ile kap üst boşluğunu tahliye (-20 ° C). </li></ol></li><li> Gıda karışımı hazırlayın. Not: Gerekirse birden fazla ardışık deneyleri çalıştırırken, o ~ gıda karışımı 100 ml hazırlamak için pratik, ancak bu tarifi daha küçük birimlere ölçekli olabilir. <ol><li> 150 ml&#39;lik bir cam kap içinde, 3 g alginik asit ve Dİ su, 100 ml 5 g dondurulup kurutulmuş kalamar manto bir toz karışımını bir araya getirin. Toz tamamen hidratlanmış ve karışım homojen olana kadar bir kaç dakika için bir microspatula ile kuvvetli bir şekilde karıştırın. Arzu edildiği takdirde, gıda boyası bu st ilave edilebilir: Notep: daha ziyade ekleyerek özü ile tedavi edilen karışımın rengi maç çalışırken daha (özü ile tedavi edilen karışımda özü doğal pigment maskeleme) hem tedavi ve kontrol karışımları üretecek gıda karışıma boya eklemek için kolay Kontrol karışımına boya. Yeşilimtırak veya kahverengimsi gıda boyası ham ekstre herhangi bir pigment maskelemek için genellikle arzu edilir. </li><li> Bir dereceli enjektöre gıda karışımı tam 10 ml yükleyin. Bu işlem sırasında hava kabarcıklarının oluşumunu önlemek için dikkat edin. </li><li> Dondurucu kuru ham organik ekstre 20 ml sintilasyon flakonu çıkarın. Bir damla ekleme veya MeOH iki, daha sonra bir microspatula homojen bir karışım halinde özü karıştırın. </li><li> 20 mi sintilasyon şişesine içine gıda matris yüklenen 10 ml şırınga çıkarma ve ekstre ile muamele edilmiş gıda karışımı homojenleştirmek için bir microspatula ile karıştırın. R, sonra bu küçük artışlarla (yani şırıngayı çıkarmak için yardımcı olabilir 2 ml çıkarmak ve homojenize:. Not10 ml kadar EPEAT) homojenize edilmiştir. </li></ol></li><li> Tahlil pelet hazırlayın. <ol><li> Bir şırınga içine ekstre karışımı (~ 1 mi) içindeki bir çok küçük bir hacim yük ve 0.25 M CaCI2 çözeltisi içinde bir şırınga ucunu daldırın. Uzun, spagetti benzeri lifi oluşturmak üzere şırınga içeriğini çıkarın. </li><li> Birkaç dakika sonra, daha sonra, bir jilet ile bir cam kesme tahtası üzerinde 4 mm uzunluğunda pelet içine doğrayın, sertleştirilmiş iplikçik kaldırmak deniz suyu ile durulayın. </li><li> Tekrar kontrol pelet yapma doku özü dahil edilmeden 2.3.1 ve 2.3.2 adımları. Çözücü, eşdeğer hacimde kontrol pelet tedavisi için emin olun çözücü ilave kontrol etmek için (adım 2.2.3 tedavi karışımına MeOH ilave bakınız). Negatif kontrol, bu deney, balık besleme vazgeçirtecek teyid 2 mg ml bir konsantrasyonda denatonyum benzoat ilave -1 işlenmemiş gıda karışımına 27 isteniyorsa. </li></ol></li></ol> 3) LezzetBiyoanalizler <ol><li> Vahşi yakalanmış sarı-fazlı bluehead wrasse, Thalassoma bifasciatum ile beslenme deneyleri gerçekleştirmek, laboratuvar akvaryumlarda opak taraflı bölümlerinde üçlü gruplar halinde tutulur. </li><li> Bir lastik ampul ile bir cam pipet kullanarak deniz suyu bir bardağa gıda pelet sunun. Not: Bu şekilde yiyecek almak için balık yetiştirmek için birkaç gün sürebilir. Gıda teslim önündeki bir klima uyaran (akvaryum camına pipet gibi birkaç musluklar) gıda pelet eklenmesini beklemek balık yetiştirmek için yararlı olabilir. </li><li> Pelet Puanlama. Kolayca balık tarafından tüketilen eğer bir pelet kabul düşünün. Onların ağız boşluğuna almak için bir veya daha fazla balık üç girişimleri en az sonra yenen değilse bir pelet reddetti düşünün, pelet yaklaştı ve böyle bir denemeden sonra göz ardı edilir ya da eğer. </li><li> Skor örnekleri. Not: Tahlil prosedürü Şekil 1&#39;de bir akış şeması olarak tasvir edilir yemek reddediyorum balık Grupları.protokolünde herhangi bir aşamada kontrol pelet daha kabul edilmez. Tahlil tek bir vadede iki potansiyel sonuçları vardır: Örnek kabul veya red edilir ya. <ol><li> Balık grubu kooperatif olduğunu doğrulamak için bir kontrol pelet ile başlayın. Tedavi edilen bir pelet teklif. Balık tedavi pelet kabul ederseniz kabul edilen, örnek puan. Balık tedavi pelet reddederseniz, balık besleme durdurdu olup olmadığını belirlemek için bir sonraki kontrol pelet sunuyoruz. Balık sonraki kontrol pelet kabul ederseniz reddedilmiş gibi, örnek puan. </li></ol></li><li> Çoğaltma. Her ekstresi için balık on bağımsız gruplar ile tahlil işlemi tekrarlayın. </li></ol> 4) değerlendirilmesi Önemi <ol><li> Fisher testi 26 değiştirilmiş bir versiyonu ile tedavi pelet vs kontrol tüketimi farklılıkların önemini değerlendirir. Kontrolü için marjinal toplamları ve tedavi pelet sabit böylece testi değiştirinOnlara hem de rastgele örnekler tedavi. Not: Bu p = 0.057 sağlar 7 pelet yemiş zaman; 7 veya daha fazla pelet yenir eğer dolayısıyla, herhangi bir özü 6 veya daha az pelet yenir eğer caydırıcı kabul ve lezzetli olduğunu. </li><li> Ekstrelerinin gruplar arasında nispi lezzetini karşılaştırmak için, her grup içinde yenen pelet ortalama sayısını hesaplamak. Pelet ortalama sayısı + yenirse o kadar çoğaltmak özler bir grup caydırıcı olarak kabul edilir 6 pelet eşiği tutun standart hata (SE) ≤6. Not: temsilcisi sonuçları, grup atama türdür, yani çoğaltmak özler farklı bireylerden gelen ve göreli lezzet türler arasında karşılaştırılabilir. </li></ol>

<ol>
	<li>Paul, V. J., ed, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Ecological roles of marine natural products. , (1992).</li><li>Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Marine+invertebrate+chemical+defenses.">Marine invertebrate chemical defenses.</a> Chemical Reviews. 93 (5), 1911 (1993).</li><li>Hay, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Marine+chemical+ecology:+what&#39;s+known+and+what&#39;s+next.">Marine chemical ecology: what&#39;s known and what&#39;s next.</a> Journal of Experimental Marine Biology and Ecology. 44 (5), 476-476 (1996).</li><li>McClintock, J. B., Baker, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Marine Chemical Ecology. , (2001).</li><li>Amsler, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Algal Chemical Ecology. , (2008).</li><li>Hay, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Marine+chemical+ecology:+Chemical+signals+and+cues+structure+marine+populations,+communities,+and+ecosystems.">Marine chemical ecology: Chemical signals and cues structure marine populations, communities, and ecosystems.</a> Annual Review of Marine Science. 1, 193-212 (2009).</li><li>Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+chemical+ecology+of+sponges+on+Caribbean+reefs:+Natural+products+shape+natural+systems.">The chemical ecology of sponges on Caribbean reefs: Natural products shape natural systems.</a> BioScience. 61 (11), 888 (2011).</li><li>Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antipredatory+Defensive+Roles+of+Natural+Products+from+Marine+Invertebrates.">Antipredatory Defensive Roles of Natural Products from Marine Invertebrates.</a> Handbook of Marine Natural Products. , 677-710 (2012).</li><li>Pawlik, J. R., Amsler, C. D., Ritson-Williams, R., McClintock, J. B., Baker, B. J., Paul, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Marine+Chemical+Ecology:+A+Science+Born+of+Scuba.+.">Marine Chemical Ecology: A Science Born of Scuba. .</a> Research and Discoveries: The Revolution of Science through Scuba. 39, 53-69 (2013).</li><li>Randall, J. E., Hartman, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sponge-feeding+fishes+of+the+West+Indies.">Sponge-feeding fishes of the West Indies.</a> Marine Biology. 1, 216-225 (1968).</li><li>Bakus, G. J., Green, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxicity+in+sponges+and+holothurians+&#8212;+geographic+pattern.">Toxicity in sponges and holothurians &#8212; geographic pattern.</a> Science. 185, 951-953 (1974).</li><li>Pawlik, J. R., Chanas, B., Toonen, R. J., Fenical, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defenses+of+Caribbean+sponges+against+predatory+reef+fish.+1.+Chemical+deterrency.">Defenses of Caribbean sponges against predatory reef fish. 1. Chemical deterrency.</a> Marine Ecology Progress Series. 127, 183-194 (1995).</li><li>Schulte, B. A., Bakus, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predation+deterrence+in+marine+sponges+&#8212;+laboratory+versus+field+studies.">Predation deterrence in marine sponges &#8212; laboratory versus field studies.</a> Bulletin of Marine Science. 50, 205-211 (1992).</li><li>Jackson, J. B. C., Buss, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allelopathy+and+spatial+competition+among+coral+reef+invertebrates.">Allelopathy and spatial competition among coral reef invertebrates.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 72, 5160-5163 (1975).</li><li>Bakus, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+defense+mechanisms+on+the+great+barrier+reef.">Chemical defense mechanisms on the great barrier reef.</a> Australia. Science. 211, 497-499 (1981).</li><li>Gemballa, S., Schermutzki, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytotoxic+haplosclerid+sponges+preferred:+a+field+study+on+the+diet+of+the+dotted+sea+slug+Peltodoris+atromaculata+(doridoidea:+nudibranchia).">Cytotoxic haplosclerid sponges preferred: a field study on the diet of the dotted sea slug Peltodoris atromaculata (doridoidea: nudibranchia).</a> Marine Biology. 144, 1213-1222 (2004).</li><li>Voogd, N. J., Cleary, D. F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relating+species+traits+to+environmental+variables+in+Indonesian+coral+reef+sponge+assemblages.">Relating species traits to environmental variables in Indonesian coral reef sponge assemblages.</a> Marine and Freshwater Research. 58, 240-249 (2007).</li><li>Mollo, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+promoting+marine+invasions:+a+chemolecological+approach.">Factors promoting marine invasions: a chemolecological approach.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 105, 4582-4586 (2008).</li><li>Randall, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food+habits+of+reef+fishes+of+the+West+Indies.">Food habits of reef fishes of the West Indies.</a> Studies in Tropical Oceanography. 5, 665-847 (1967).</li><li>O'Neal, W., Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+reappraisal+of+the+chemical+and+physical+defenses+of+Caribbean+gorgonian+corals+against+predatory+fishes.">A reappraisal of the chemical and physical defenses of Caribbean gorgonian corals against predatory fishes.</a> Marine Ecology Progress Series. 240, 117-126 (2002).</li><li>Hines, D. E., Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+the+antipredatory+defensive+strategies+of+Caribbean+non-scleractinian+zoantharians+(Cnidaria):+is+the+sting+the+only+thing.">Assessing the antipredatory defensive strategies of Caribbean non-scleractinian zoantharians (Cnidaria): is the sting the only thing.</a> Marine Biology. 159 (2), 389-398 (2012).</li><li>Walters, K. D., Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+there+a+trade-off+between+wound-healing+and+chemical+defenses+among+Caribbean+reef+sponges.">Is there a trade-off between wound-healing and chemical defenses among Caribbean reef sponges.</a> Integrative and Comparative Biology. 45 (2), 352-358 (2005).</li><li>Leong, W., Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+of+a+resource+trade-off+between+growth+and+chemical+defenses+among+Caribbean+coral+reef+sponges.">Evidence of a resource trade-off between growth and chemical defenses among Caribbean coral reef sponges.</a> Marine Ecology Progress Series. 406, 71-78 (2010).</li><li>Leong, W., Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+reproductive+patterns+among+7+Caribbean+sponge+species+does+not+reveal+a+resource+trade-off+with+chemical+defenses.">Comparison of reproductive patterns among 7 Caribbean sponge species does not reveal a resource trade-off with chemical defenses.</a> Journal of Experimental Marine Biology and Ecology. 401 (1-2), 80-84 (2011).</li><li>Pawlik, J. R., Loh, T. -. L., McMurray, S. E., Finelli, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sponge+Communities+on+Caribbean+Coral+Reefs+Are+Structured+by+Factors+That+Are+Top-Down,+Not+Bottom-Up.">Sponge Communities on Caribbean Coral Reefs Are Structured by Factors That Are Top-Down, Not Bottom-Up.</a> PLoS ONE. 8 (5), e62573 (2013).</li><li>Loh, T. -. L., Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+defenses+and+resource+trade-offs+structure+sponge+communities+on+Caribbean+coral+reefs.">Chemical defenses and resource trade-offs structure sponge communities on Caribbean coral reefs.</a> Proceedings of the National Academy of Science. 111, 4151-4156 (2014).</li><li>Miller, A. M., Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Do+coral+reef+fish+learn+to+avoid+unpalatable+prey+using+visual+cues.">Do coral reef fish learn to avoid unpalatable prey using visual cues.</a> Animal Behaviour. 85, 339-347 (2013).</li><li>Pawlik, J. R., Fenical, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+re-evaluation+of+the+ichthyodeterrent+role+of+prostaglandins+in+the+Caribbean+gorgonian+coral,+Plexaura+homomalla.">A re-evaluation of the ichthyodeterrent role of prostaglandins in the Caribbean gorgonian coral, Plexaura homomalla.</a> Marine Ecology Progress Series. 52, 95-98 (1989).</li><li>Fenical, W., Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defensive+properties+of+secondary+metabolites+from+the+Caribbean+gorgonian+coral+Erythropodium+caribaeorum.">Defensive properties of secondary metabolites from the Caribbean gorgonian coral Erythropodium caribaeorum.</a> Marine Ecology Progress Series. 75, 1-8 (1991).</li><li>Pawlik, J. R., Fenical, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+defense+of+Pterogorgia+anceps,+a+Caribbean+gorgonian+coral.">Chemical defense of Pterogorgia anceps, a Caribbean gorgonian coral.</a> Marine Ecology Progress Series. 87, 183-188 (1992).</li><li>Chanas, B., Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+the+skeleton+of+a+sponge+provide+a+defense+against+predatory+reef+fish.">Does the skeleton of a sponge provide a defense against predatory reef fish.</a> Oecologia. 107 (2), 225-231 (1996).</li><li>Chanas, B., Pawlik, J. R., Lindel, T., Fenical, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+defense+of+the+Caribbean+sponge+Agelas+clathrodes+(Schmidt).">Chemical defense of the Caribbean sponge Agelas clathrodes (Schmidt).</a> Journal of Experimental Marine Biology and Ecology. 208 (1-2), 185-196 (1997).</li><li>Wilson, D. M., Puyana, M., Fenical, W., Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+defense+of+the+Caribbean+reef+sponge+Axinella+corrugata+against+predatory+fishes.">Chemical defense of the Caribbean reef sponge Axinella corrugata against predatory fishes.</a> Journal of Chemical Ecology. 25 (12), 2811-2823 (1999).</li><li>Chanas, B., Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defenses+of+Caribbean+sponges+against+predatory+reef+fish+II.+Spicules,+tissue+toughness,+and+nutritional+quality.">Defenses of Caribbean sponges against predatory reef fish II. Spicules, tissue toughness, and nutritional quality.</a> Marine Ecology Progress Series. 127 (1), 195-211 (1995).</li><li>Albrizio, S., Ciminiello, P., Fattorusso, E., Magno, S., Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amphitoxin,+a+new+high+molecular+weight+antifeedant+pyridinium+salt+from+the+Caribbean+sponge+Amphimedon+compressa.">Amphitoxin, a new high molecular weight antifeedant pyridinium salt from the Caribbean sponge Amphimedon compressa.</a> Journal of Natural Products. 58 (5), 647-652 (1995).</li><li>Assmann, M., Lichte, E., Pawlik, J. R., K&#246;ck, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Chemical defenses of the Caribbean sponges Agelas wiedenmayeri and Agelas conifera. Marine Ecology Progress Series. 207, 255-262 (2000).</li><li>Kubanek, J., Fenical, W., Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+antifeedant+triterpene+glycosides+from+the+Caribbean+sponge+Erylus+Formosus.">New antifeedant triterpene glycosides from the Caribbean sponge Erylus Formosus.</a> Natural Product Letters. 15 (4), 275-285 (2001).</li><li>Pawlik, J. R., McFall, G., Zea, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+the+odor+from+sponges+of+the+genus+Ircinia+protect+them+from+fish+predators.">Does the odor from sponges of the genus Ircinia protect them from fish predators.</a> Journal of Chemical Ecology. 28 (6), 1103-1115 (2002).</li><li>Waddell, B., Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defenses+of+Caribbean+sponges+against+invertebrate+predators.+I.+Assays+with+hermit+crabs.">Defenses of Caribbean sponges against invertebrate predators. I. Assays with hermit crabs.</a> Marine Ecology Progress Series. 195, 125-132 (2000).</li><li>Waddell, B., Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defense+of+Caribbean+sponges+against+invertebrate+predators.+II.+Assays+with+sea+stars.">Defense of Caribbean sponges against invertebrate predators. II. Assays with sea stars.</a> Marine Ecology Progress Series. 195, 133-144 (2000).</li><li>Burns, E., Ifrach, I., Carmeli, S., Pawlik, J. R., Ilan, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+anti-predatory+defenses+of+Red+Sea+and+Caribbean+sponges.+I.+Chemical+defense.">Comparison of anti-predatory defenses of Red Sea and Caribbean sponges. I. Chemical defense.</a> Marine Ecology Progress Series. 252, 105-114 (2003).</li><li>Jones, A. C., Blum, J. E., Pawlik, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Testing+for+defensive+synergy+in+Caribbean+sponges:+Bad+taste+or+glass+spicules.">Testing for defensive synergy in Caribbean sponges: Bad taste or glass spicules.</a> Journal of Experimental Marine Biology and Ecology. 322 (1), 67 (2005).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

Burada tarif edilen prosedür, deniz organizmalarında antipredatory kimyasal savunma değerlendirmek için nispeten basit ve ekolojik olarak uygun laboratuar protokolü sağlar. Burada yöntemler bu set ile memnun olan önemli kriterleri gözden: (1) Uygun yırtıcı. Bu beslenme deneyi bluehead akya, Thalassoma bifasciatum, Karayipler genelinde mercan resifleri üzerinde en bol balıklar birini kullanır. bluehead bentik omurgasızlar 19 geniş bir ürün yelpazesine örnek bilinen bir kültürlü etobur olduğunu. Genelci yırtıcı resifleri üzerinde yırtıcı balıkların çoğunluğu pratisyen çünkü bu ilk tahliller için en iyi seçimdir, ve savunma aşmak için mekanizmalar evrimleşmiş olabilir uzman predatör aksine antipredatory savunmalar geniş, onlara karşı yönlendirilmiş olacağını beklenir. Tek bir potansiyel yırtıcı kullanılarak kimyasal savunma laboratuvar araştırmaları vardırOn saha koşullarında 28-33 potansiyel yırtıcı tam bir tamamlayıcı yanıtları güveniyor fazla zaman alıcı ve karmaşık alan deneyleri izledi. (2) ekstraksiyon prosedürü., Eşit parça diklorometan (DKM) ve metanol (MeOH), bir çözücü madde karışımı kullanılır hızla membranlar çözündürücü ve hücresel malzemenin suyunun sıkılması, doku nüfuz ilk doku çıkarma aşaması. Doku Bu adımdan sonra susuz olduğunu, bu nedenle sonraki adımlar MeOH tüm kutupları kalan metabolitleri ayıklamak. Tam ekstre edilir doku kapsamlı bir ekstraksiyon prosedürü teşkil kadar MeOH çıkarma tekrarlamak. Bu ekstre düzeni küçük varyasyonlar, örneğin, aynı polaritede bir başka için, bir özütleme çözücüsü ikame olarak kabul edilebilir, ancak uygun olmayan bir çözücü kullanıldığı takdirde, doku çıkarma eksik olabilir. Yanlış doku çıkarma prosedürlerinin potansiyel tuzaklar başka ayrıntılı olarak ele alınmıştır &lt;sup&gt; 8. (3) Deneysel gıda hazırlanması. Yapay gıda matris besin kalitesi ve ikincil metabolitlerin konsantrasyonu hem de hedef organizmanın doku taklit gerekir. Bu yırtıcı besleme-caydırıcı metabolitleri reddetmek için kullandığınız aynı duyusal süreçler de gıdaların besin kalitesi algılamasında rol olasıdır. Düşük besin kalitesi ile Gıdalar kimyasal savunma çok daha düşük seviyelerde reddedilebilir ve bu metabolitler dokuya göre daha besleyici bir yapay gıda sunulmaktadır eğer tersine, sekonder metabolitler, sadece daha yüksek doğal konsantrasyonlarda caydırıcı olabilir hangi Bu elde edilmiştir. Ölçmek kolay, hazır, çünkü Toz, dondurularak kurutulmuş kalamar manto yararlı bir besin yerini tutamaz, ve besin özellikleri zaten 34 tespit edilmiştir. hazırlanmasındaki ikinci husus<html> Deneysel Gıda hacmi değil, kitle bazında yapılmalıdır özü konsantrasyonu, belirlenmesini ilgilidir. Predators ıslak mendil yemek ve deniz organizmalarının dokular su içeriği büyük ölçüde değişmektedir. Bir avcı açısından bakıldığında, bir denizanası ya da deniz anemon bir lokma, bir kalamar ya da deniz salyangozu aynı büyüklükte ısırık daha birim kuru kütle başına önemli ölçüde daha fazla su ihtiva edecektir. Yüksek hidratlı dokuları, birim kuru kütle başına metabolitin konsantrasyonu birim hacmi başına çok daha yüksek olduğu, ancak hacim (sokması) ekolojik açıdan uygun bir ölçüsüdür. Ayrıca, deniz organizmalarının dokular nedeniyle maden iskelet elemanlarının çok farklı yoğunluklarına sahip olabilir. Hacimce metabolit konsantrasyonunun belirlenmesi hem sorunları çözer ve potansiyel avcı tarafından dokusunun tüketimi açısından en uygun ölçüdür. Literatürden örnekler de dahil olmak üzere bu konu, detaylı başka 8 tartışılmıştır. .. İçerik &quot;&gt; (4) Deneysel tasarım ve istatistiksel bir yaklaşım uygun deneysel tasarım ve verilerin istatistiksel analizleri, deneysel sonuçların farklılıkların önemini belirleyen içerir başka bir bilimsel araştırma gibi davranışsal tahliller için önemli olan burada açıklanan analiz basit: farklılıklar modifiye kontenjan tablosu ile belirlenir. yöntem tüm kontrol gıda teklifleri araştırmacı kontrol gıdalar 8 beslenen değil, deneysel yırtıcı kullanarak olmaz çünkü tüketilen gerektirir. Fisher&#39;in kesin testi kullanımı ilk değiştirilmiş olmasına rağmen Pawlik tarafından kullanımı ve ark. 12, yemiş 6 tedavi pelet eşik değeri değişmeden kalır. Yıllar geçtikçe, diğer istatistiksel testler ikame olarak önerilen, ancak işbirlikçi James E. Blum (Matematik ve İstatistik Bölümü UNCW ile görüştükten sonra iptal edildi ). Örneğin, McNemar testi öne sürülmüştür,bu verilerin bir eşleştirilmiş dizi yoksun, ve acil tablonun bir satır 10 kontrol pelet sabit çünkü yemiş hem çünkü, uygun değildir. Bu deney yöntemi oldukça net sonuçlar sağlar bizim deneyim rağmen, yine de bir davranış tepkisi üzerine dayanır. Balık analizden önce bir süre aç bırakıldı, bunlar daha çok muamele edilmiş peletler balık savunma metabolit aktivitesi yakın bir eşik konsantrasyonu tedavi edilen gıda pelet içinde mevcut olan, özellikle çok iyi beslenen halinde elde edileceğinden daha harcayabilir. Bu nedenlerden dolayı, besleme deneylerin sonuçları aşırı yorumlanmamalıdır. Örneğin, yemiş 1/10 9/10 vs pelet iki doku örneklerinin arasında bir fark ilk örnek caydırıcı ve ikinci değil, ancak yemiş 3/10 5/10 vs pelet fark davranışsal değişim nedeniyle olabilir gösterir deneyleri, ilk numune arasındaki mutlaka saniyeden daha fazla caydırıcı değil. Önemli bir ApplicatBu biyo-deney iyon ham ekstre ardışık bölümler besleme-caydırıcı aktivitesi 29,32-33,35-38 sorumlu olan kimyasal bileşikleri izole etmek için balık test edilir, böylece biyo-deney kılavuzlu fraksiyonasyon bölgesi kullanımıdır. Bir kimyasal savunma varlığı tespit edildikten sonra, ham organik özüt kromatografik karışımı oluşturan bileşiklerin küçük alt-grup halinde parçalandı ve bu alt-gruplar aynı besleme deneyinde balık beslenir. Yine, bu doku özü ziyade kitlesel eşdeğer &quot;ml&#39;lik eşdeğer&quot; seçeneğini kullanarak, bir hacimsel olarak yapılmalıdır. 4 × 2 × ve 1 ×: ayırma ilerledikçe, kesirler en iyi doğal hacimsel konsantrasyonuna bir seri seyreltme göreceli olarak analiz edilir. Konsantrasyonlarının, açıklık dikkate iki veya daha fazla kromatografik fraksiyonları üzerinde ya da aktif metabolitler kaybı Throu aktif metabolitleri bölme gelen caydırıcı aktivitesinde olası bir azalma alırgh ayrışma, reaksiyon, veya ek medya kromatografik. Aktif metabolitler bioassay-güdümlü fraksiyonlaşması ile izole edildikten sonra, araştırmacı, standart spektroskopik teknikleri kullanarak bunları tespit edebilir ve aynı zamanda ikincil metabolitleri olabilir inaktif kesirler için aynı şeyi yapmalı. Bu 8 değil hangi metabolitleri bilmek gibi ekolojik ilgili deneylerde aktif ikincil metabolitler hangi bilmek aynı derecede önemlidir. Bu prosedürün elemanları yeni deneysel teknikler tasarlamak için de kullanılabilir. Örneğin, bu biyoanaliz (örn yapısal savunmaları 31,34,42 ve aposematism 27), diğer coğrafi bölgelere 41, (örneğin 39 ve 40 Seastars yengeçler) omurgasız yırtıcılar için uyarlandı, ve hatta diğer araştırma soruları için. Dört kriter bu yöntemin gelecekte uyarlamaları için bir rehber olarak hizmet etmelidir. Özet olarak, bu biyodeney prosedürü PRdeniz organizmalarının dokulardan antipredatory kimyasal savunma değerlendirmek için daha ekolojik ilgili yöntem ovides. Bu yordamı kullanarak çalışmalar Karayip mercan resifleri (örneğin en son, Loh ve Pawlik 26) farmakoloji, biyoteknoloji dahil olmak üzere soruşturma çeşitli alanlarda, ve bilgilendirebilir araştırmalar ve üzerine dağılımını ve deniz omurgasız bereket kontrol faktörleri anlayışımızı gelişmiş evrimsel ekoloji.

Kimyasal ekoloji kimyagerler ve ekolojist işbirliği ile geliştirdi. Karasal kimyasal ekoloji subdiscipline bir süre için yaklaşık edilmiş olsa da, deniz kimyasal ekoloji sadece bir kaç yıl eski ama deniz organizmalarının 1-8 evrimsel ekoloji ve toplum yapısına önemli bilgiler sağlamıştır. Aletli dalış ve NMR spektroskopisi acil teknolojileri yararlanan, organik kimyacılar hızla 1970&#39;lerde ve 1980&#39;lerde 9 bentik omurgasız deniz ve yosun gelen yeni metabolitleri anlatan yayınların çok sayıda üretti. Sekonder metabolitler ampirik kanıt olmadan yeni bileşikler ekolojik önemli özellikleri atfedilen bu yayınların çoğu bazı amaca hizmet etmelidir varsayarsak. Hakkında aynı zamanda, ekolojistler de dağılımları ve daha önce sağa sola bilinen bentik hayvanların ve bitkilerin zengindi SCUBA dalış gelişiyle yararlanarak ve açıklayan edildiBöyle tarama gibi nispeten etkisiz örnekleme yöntemleri m. Bu araştırmacıların varsayım sesil şey ve yumuşak gövdeli kimyasal avcılardan 10 tarafından tüketimini önlemek için savunulması gerektiğini oldu. Türler bolluk aksi açıklayıcı bir işti ne ampirizmi tanıtmak için bir çaba, bazı ekolojistler toksisite deneyleri 11 kimyasal savunma extrapolating başladı. Çoğu toksisite deneyleri yarım tahlil organizmaları öldürmekten sorumlu özleri kuru kütle konsantrasyonlarının sonraki kararlılıkla, bütün balık veya omurgasız dokuların ham organik özler sulu süspansiyonlar diğer organizmaların poz çıkıyor. Ancak, toksisite deneyleri, potansiyel saldırganları doğal şartlar altında av algıladıkları hangi şekilde taklit değil, ve daha sonraki çalışmalar toksisite ve lezzet 12-13 arasında hiçbir ilişki bulduk. Bu prestijli dergilerde yayınlar çok az ya da hiç Ecologica olan teknikleri kullanılan şaşırtıcıdırl alaka 14-15 ve bu çalışmalar hala yaygın atıf bugün. Bu toksisite verilerine dayalı çalışmalar 16-18 yayınlanmaya devam unutmayın daha da endişe verici olduğunu. Burada açıklanan biyodeney yöntemi antipredatory kimyasal savunma değerlendirmek için deniz kimyasal ekolojistler için bir ekolojik ilgili yaklaşım sağlamak için 1980&#39;lerin sonlarında geliştirilmiştir. yöntem daha ekolojik anlamlı toksisite verilerine göre olan lezzet veri sağlayan, bir beslenme karşılaştırılabilir gıda matrisi içinde doğal bir konsantrasyonda hedef organizmadan bir ham organik özü örnek bir modeli yırtıcı gerektirir. (1) uygun bir kültürlü yırtıcı besleme deneylerinde kullanılabilir olmalıdır, (2) her polarizasyona organik metabolitleri etraflıca dokusundan ekstre edilmelidir: deniz organizmalarının dokuların antipredatory aktivitesinin değerlendirilmesi için genel bir yaklaşım, dört önemli kriterler içerir organizmayı hedef, (3) metabolitleri b gerekirAynı hacimsel konsantrasyonda bir beslenme uygun deneysel gıda içine karışık bir e onlar çıkarıldı, ve (4) deneysel tasarım ve istatistiksel bir yaklaşım anlamlı bir metrik göreceli distastefulness göstermek için sağlaması gerekir hangi organizmada bulunduğu gibi. Aşağıda belirtilen prosedür Karayip deniz omurgasız antipredatory kimyasal savunma değerlendirmek için tasarlanmıştır. Bu tür Karayip mercan resifleri üzerinde yaygındır ve bentik omurgasızlar 19 geniş bir ürün yelpazesine örnek bilinmektedir çünkü bir örnek yırtıcı balık gibi bluehead akya, Thalassoma bifasciatum, istihdam. Hedef organizmadan alınan dokular, ilk önce, ekstre bir gıda karışımı ile bir araya getirilmiş ve son olarak T. gruplarına sunulmaktadır bifasciatum onlar özü ile tedavi edilen gıdalar reddetmek olmadığını gözlemlemek için. Bu yöntemi kullanarak tahlil verileri deniz organizmalarının 12,20-21, l savunma kimya önemli bilgiler sağladıife geçmişi ticaret-off 22-24, ve toplum ekolojisi 25-26.

<table><tbody><tr><td>Dichloromethane</td><td>Fisher Scientific</td><td>D37-20</td><td></td></tr><tr><td>Methanol</td><td>Fisher Scientific</td><td>A41220</td><td></td></tr><tr><td>Anhydrous Calcium Chloride</td><td>Fisher Scientific</td><td>C614-500</td><td></td></tr><tr><td>Cryocool Heat Transfer Fluid</td><td>Fisher Scientific</td><td>20-548-146</td><td>For vacuum concentrator</td></tr><tr><td>Alginic Acid Sodium Salt High Viscosity</td><td>MP Biomedicals</td><td>154723</td><td></td></tr><tr><td>Squid mantle rings</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Can be purchased at grocery store</td></tr><tr><td>Denatonium benzoate</td><td>Aldrich</td><td>D5765</td><td></td></tr><tr><td>50 ml graduated centrifuge tube</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-432-22</td><td></td></tr><tr><td>20 ml scintillation vial</td><td>Fisher Scientific</td><td>03-337-7</td><td></td></tr><tr><td>Disposable Pasteur pipets</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-678-20D</td><td></td></tr><tr><td>Rubber bulbs for Pasteur pipets</td><td>Fisher Scientific</td><td>03-448-24</td><td></td></tr><tr><td>Red bulbs for pellet delivery</td><td>Fisher Scientific</td><td>03-448-27</td><td></td></tr><tr><td>250 ml round-bottom flask</td><td>Fisher Scientific</td><td>10-067E</td><td></td></tr><tr><td>Scintillation vial adapter for rotavap</td><td>Fisher Scientific</td><td>K747130-1324</td><td></td></tr><tr><td>Weightboats</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-202B</td><td></td></tr><tr><td>Microspatula</td><td>Fisher Scientific</td><td>21-401-10</td><td></td></tr><tr><td>5 ml graduated syringe</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-817-53</td><td></td></tr><tr><td>10 ml graduated syringe</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-817-54</td><td></td></tr><tr><td>Razor blade</td><td>Fisher Scientific</td><td>S17302</td><td></td></tr></tbody></table>

a fish-feeding laboratory bioassay to assess the antipredatory activity of secondary metabolites from the tissues of marine organisms

Marine chemical ecology is a young discipline, having emerged from the collaboration of natural products chemists and marine ecologists in the 1980s with the goal of examining the ecological functions of secondary metabolites from the tissues of marine organisms. The result has been a progression of protocols that have increasingly refined the ecological relevance of the experimental approach. Here we present the most up-to-date version of a fish-feeding laboratory bioassay that enables investigators to assess the antipredatory activity of secondary metabolites from the tissues of marine organisms. Organic metabolites of all polarities are exhaustively extracted from the tissue of the target organism and reconstituted at natural concentrations in a nutritionally appropriate food matrix. Experimental food pellets are presented to a generalist predator in laboratory feeding assays to assess the antipredatory activity of the extract. The procedure described herein uses the bluehead, Thalassoma bifasciatum, to test the palatability of Caribbean marine invertebrates; however, the design may be readily adapted to other systems. Results obtained using this laboratory assay are an important prelude to field experiments that rely on the feeding responses of a full complement of potential predators. Additionally, this bioassay can be used to direct the isolation of feeding-deterrent metabolites through bioassay-guided fractionation. This feeding bioassay has advanced our understanding of the factors that control the distribution and abundance of marine invertebrates on Caribbean coral reefs and may inform investigations in diverse fields of inquiry, including pharmacology, biotechnology, and evolutionary ecology.

Burada ortak Karayip sünger altı türün (Şekil 2) Bu biyoassay sonuçlarını rapor. Bu veriler başlangıçta Pawlik ark. 12 tarafından 1995 yılında yayınlanan ve ortak meydana takson arasında kimyasal savunma stratejileri farklılıkları araştırmak için bu yaklaşımın gücünü göstermek edildi. Sonuçlar standart hata (SE) her tür için + yemiş gıda pelet ortalama sayısı olarak rapor edilmiştir. Hemen hemen hiç peletler Agelas clathrodes, Amphimedon compressa ve Aplysina cauliformis ham organik ekstraktlar deneylerde yenilmiştir. Buna karşılık, Callyspongia vaginalis, Geodia gibberosa ve Mycale laevis&#39;ten özleri ile yapılan topaklar kolayca tahlil 12 tüketilen bulundu. En az altı pelet ilk üç tür için yemiş, bu yüzden onlar üzerinde önemli caydırıcı edildi. Buna karşılık, ikinci üç tür kontrollerden anlamlı farklı değildi, ve vardılezzetli kabul. <img alt="Şekil 1," src="/files/ftp_upload/52429/52429fig1.jpg" /> Şekil 1:. Tahlil prosedürünün şematik bütün aşamalarında, bir kontrol pelet reddi tahlil balık bu seti yapmayan veya tok ve daha fazla kullanılamaz gösterir. protokol tedavi pelet ardından balık bir kontrol pelet her kümesi sunarak başlar. Kabul edilen Sonraki tedavi pelet kabul edilirse örnek atılırsa. Tedavi pelet reddedilir ancak sonraki kontrol pelet kabul edilirse reddedilmiş gibi, örnek atılırsa. <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/52429/52429fig2.jpg" /> Şekil 2: Gıda pelet Thalassoma bifasciatum tarafından Tüketim ilk Pawlik tarafından 1995 yılında bildirilen doğal konsantrasyonlarda sünger ham organik özler içeren (SE + ortalama) <em&gt; ve ark. 12 Balık tüm durumlarda 10 kontrol pelet tüketilen. Her tür adından sonra, çoğaltmak numune sayısı (her sünger doku coğrafi ayrı numunenin ayrı çıkarılmasından çoğaltmak) belirtilir. Grafikteki noktalı çizgi ile gösterildiği gibi, herhangi bir birey tahlili için, ekstreler yemiş pelet sayısı daha az ya da 6 eşit ise (p = 0.057, Fisher kesinlik testi değiştirilmiş) caydırıcı kabul edildi.

Watch this Scientific Journal Video about A Fish-feeding Laboratory Bioassay to Assess the Antipredatory Activity of Secondary Metabolites from the Tissues of Marine Organisms at JoVE.com

A Fish-feeding Laboratory Bioassay to Assess the Antipredatory Activity of Secondary Metabolites from the Tissues of Marine Organisms

Bu biyo-deney, bir besleyici olarak benzer gıda matris kullanılarak, doğal konsantrasyonlarda deniz organizmalarının dokuların Organik özütlerden besleme-caydırıcı metabolitlerinin varlığını değerlendirmek için bir model yırtıcı balık kullanmaktadır.

Bir Balık-besleme Laboratuvar biyodeneyinde Deniz Organizmaların Dokular Sekonder Metabolitlerin Antipredatory Aktivite değerlendirmek için

Marine chemical ecology is a young discipline, having emerged from the collaboration of natural products chemists and marine ecologists in the 1980s with ...

a-fish-feeding-laboratory-bioassay-to-assess-antipredatory-activity

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Environment

9.4K Görüntüleme.  University of North Carolina Wilmington.  Bu biyo-deney, bir besleyici olarak benzer gıda matris kullanılarak, doğal konsantrasyonlarda deniz organizmalarının dokuların Organik özütlerden besleme-caydırıcı metabolitlerinin varlığını değerlendirmek için bir model yırtıcı balık kullanmaktadır. 

Video: A Fish-feeding Laboratory Bioassay to Assess the Antipredatory Activity of Secondary Metabolites from the Tissues of Marine Organisms

Laboratory Estimation of Net Trophic Transfer Efficiencies of PCB Congeners to Lake Trout (Salvelinus namaycush) from Its Prey

A technique for laboratory estimation of net trophic transfer efficiency (&#947;) of polychlorinated biphenyl (PCB) congeners to piscivorous fish from their prey is described herein. During a 135-day laboratory experiment, we fed bloater (Coregonus hoyi) that had been caught in Lake Michigan to lake trout (Salvelinus namaycush) kept in eight laboratory tanks. Bloater is a natural prey for lake trout. In four of the tanks, a relatively high flow rate was used to ensure relatively high activity by the lake trout, whereas a low flow rate was used in the other four tanks, allowing for low lake trout activity. On a tank-by-tank basis, the amount of food eaten by the lake trout on each day of the experiment was recorded. Each lake trout was weighed at the start and end of the experiment. Four to nine lake trout from each of the eight tanks were sacrificed at the start of the experiment, and all 10 lake trout remaining in each of the tanks were euthanized at the end of the experiment. We determined concentrations of 75 PCB congeners in the lake trout at the start of the experiment, in the lake trout at the end of the experiment, and in bloaters fed to the lake trout during the experiment. Based on these measurements, &#947; was calculated for each of 75 PCB congeners in each of the eight tanks. Mean &#947; was calculated for each of the 75 PCB congeners for both active and inactive lake trout. Because the experiment was replicated in eight tanks, the standard error about mean &#947; could be estimated. Results from this type of experiment are useful in risk assessment models to predict future risk to humans and wildlife eating contaminated fish under various scenarios of environmental contamination.

Laboratory Estimation of Net Trophic Transfer Efficiencies of PCB Congeners to Lake Trout Salvelinus namaycush from Its Prey

A technique for laboratory estimation of net trophic transfer efficiency of polychlorinated biphenyl (PCB) congeners to piscivorous fish from their prey is presented. To maximize applicability of the laboratory results to the field, the piscivorous fish should be fed prey fish that are typically eaten in the field.

Göl Alabalık PCB kongenerinin Net Trofik Transferi Etkinliklerinin Laboratuvarı Tahmini (<em&gt; Salvelinus namaycush</em&gt;) Onun Prey dan

A technique for laboratory estimation of net trophic transfer efficiency (&#947;) of polychlorinated biphenyl (PCB) congeners to piscivorous fish from ...

Çevre

Assaying Predatory Feeding Behaviors in Pristionchus and Other Nematodes

This protocol provides multiple methods for the analysis and quantification of predatory feeding behaviors in nematodes. Many nematode species including Pristionchus pacificus display complex behaviors, the most striking of which is the predation of other nematode larvae. However, as these behaviors are absent in the model organism Caenorhabditis elegans, they have thus far only recently been described in detail along with the development of reliable behavioral assays 1. These predatory behaviors are dependent upon phenotypically plastic but fixed mouth morphs making the correct identification and categorization of these animals essential. In P. pacificus there are two mouth types, the stenostomatous and eurystomatous morphs 2, with only the wide mouthed eurystomatous containing an extra tooth and being capable of killing other nematode larvae. Through the isolation of an abundance of size matched prey larvae and subsequent exposure to predatory nematodes, assays including both "corpse assays" and "bite assays" on correctly identified mouth morph nematodes are possible. These assays provide a means to rapidly quantify predation success rates and provide a detailed behavioral analysis of individual nematodes engaged in predatory feeding activities. In addition, with the use of a high-speed camera, visualization of changes in pharyngeal activity including tooth and pumping dynamics are also possible.

Assaying Predatory Feeding Behaviors in Pristionchus and Other Nematodes

Behavioral assays provide powerful tools for understanding neuronal function. Here we present several protocols for quantifying predatory feeding behavior found in the model nematode Pristionchus pacificus and its relatives. Additionally, we provide methods for analyzing predatory feeding adaptations including mouth structures and teeth.

içinde Yırtıcı Beslenme Davranışları tahlil<em&gt; Pristionchus</em&gt; Ve Diğer Nematodlar

This protocol provides multiple methods for the analysis and quantification of predatory feeding behaviors in nematodes. Many nematode species including ...

Ecotoxicological Method with Marine Bacteria Vibrio anguillarum to Evaluate the Acute Toxicity of Environmental Contaminants

Bacteria are an important component of the ecosystem, and microbial community alterations can have a significant effect on biogeochemical cycling and food webs. Toxicity testing based on microorganisms are widely used because they are relatively quick, reproducible, cheap, and are not associated with ethical issues. Here, we describe an ecotoxicological method to evaluate the biological response of the marine bacterium Vibrio anguillarum. This method assesses the acute toxicity of chemical compounds, including new contaminants such as nanoparticles, as well as environmental samples. The endpoint is the reduction of bacterial culturability (i.e., the capability to replicate and form colonies) due to exposure to a toxicant. This reduction can be generally referred to as mortality. The test allows for the determination of the LC50, the concentration that causes a 50% decrease of bacteria actively replicating and forming colonies, after a 6 h exposure. The culturable bacteria are counted in terms of colony forming units (CFU), and the &#34;mortality&#34; is evaluated and compared to the control. In this work, the toxicity of copper sulphate (CuSO4) was evaluated. A clear dose-response relationship was observed, with a mean LC50 of 1.13 mg/L, after three independent tests. This protocol, compared to existing methods with microorganisms, is applicable in a wider range of salinity and has no limitations for colored/turbid samples. It uses saline solution as the exposure medium, avoiding any possible interferences of growth medium with the investigated contaminants. The LC50 calculation facilitates comparisons with other bioassays commonly applied to ecotoxicological assessments of the marine environment.

Ecotoxicological Method with Marine Bacteria Vibrio anguillarum to Evaluate the Acute Toxicity of Environmental Contaminants

This work describes a new protocol to assess the ecotoxicity of pollutants, including emerging contaminants such as nanomaterials, using the marine bacterium Vibrio anguillarum. This method allows for the determination of the LC50, or mortality, the concentration that causes a 50% decrease in bacteria culturability, after a 6 h exposure.

Deniz Bakterileri ile Ekotoksikolojik Yöntem<emVibrio anguillarum</em&gt; Çevresel Kirleticilerin Akut Zehirliliğini Değerlendirmek

Bacteria are an important component of the ecosystem, and microbial community alterations can have a significant effect on biogeochemical cycling and food ...

The Identification of Sea Lamprey Pheromones Using Bioassay-Guided Fractionation

Bioassay-guided fractionation is an iterative approach that uses the results of physiological and behavioral bioassays to guide the isolation and identification of an active pheromone compound. This method has resulted in the successful characterization of the chemical signals that function as pheromones in a wide range of animal species. Sea lampreys rely on olfaction to detect pheromones that mediate behavioral or physiological responses. We use this knowledge of fish biology to posit functions of putative pheromones and to guide the isolation and identification of active pheromone components. Chromatography is used to extract, concentrate, and separate compounds from the conditioned water. Electro-olfactogram (EOG) recordings are conducted to determine which fractions elicit olfactory responses. Two-choice maze behavioral assays are then used to determine if any of the odorous fractions are also behaviorally active and induce a preference. Spectrometric and spectroscopic methods provide the molecular weight and structural information to assist with the structure elucidation. The bioactivity of the pure compounds is confirmed with EOG and behavioral assays. The behavioral responses observed in the maze should ultimately be validated in a field setting to confirm their function in a natural stream setting. These bioassays play a dual role to 1) guide the fractionation process and 2) confirm and further define the bioactivity of isolated components. Here, we report the representative results of a sea lamprey pheromone identification that exemplify the utility of the bioassay-guided fractionation approach. The identification of sea lamprey pheromones is particularly important because a modulation of its pheromone communication system is among the options considered to control the invasive sea lamprey in the Laurentian Great Lakes. This method can be readily adapted to characterize the chemical communication in a broad array of taxa and shed light on waterborne chemical ecology.

Here, we present a protocol to isolate and characterize the structure, olfactory potency, and behavioral response of putative pheromone compounds of sea lampreys.

Bioassay-güdümlü ayırma kullanarak deniz taşemen Feromonlar tanımlaması

Bioassay-guided fractionation is an iterative approach that uses the results of physiological and behavioral bioassays to guide the isolation and ...

Biyokimya

Experimental Protocol for Examining Behavioral Response Profiles in Larval Fish: Application to the Neuro-stimulant Caffeine

Fish models and behaviors are increasingly used in the biomedical sciences; however, fish have long been the subject of ecological, physiological and toxicological studies. Using automated digital tracking platforms, recent efforts in neuropharmacology are leveraging larval fish locomotor behaviors to identify potential therapeutic targets for novel small molecules. Similar to these efforts, research in the environmental sciences and comparative pharmacology and toxicology is examining various behaviors of fish models as diagnostic tools in tiered evaluation of contaminants and real-time monitoring of surface waters for contaminant threats. Whereas the zebrafish is a popular larval fish model in the biomedical sciences, the fathead minnow is a common larval fish model in ecotoxicology. Unfortunately, fathead minnow larvae have received considerably less attention in behavioral studies. Here, we develop and demonstrate a behavioral profile protocol using caffeine as a model neurostimulant. Though photomotor responses of fathead minnows were occasionally affected by caffeine, zebrafish&#160;were markedly more sensitive for photomotor and locomotor endpoints, which responded at environmentally relevant levels. Future studies are needed to understand comparative behavioral sensitivity differences among fish with age and time of day, and to determine whether similar behavioral effects would occur in nature and be indicative of adverse outcomes at the individual or population levels of biological organization.

Here, we present a protocol to examine larval zebrafish and fathead minnow locomotor activities and photomotor responses (PMR) using an automated tracking software. When incorporated in common toxicology bioassays, analyses of these behaviors provide a diagnostic tool to examine chemical bioactivity. This protocol is described using caffeine, a model neurostimulant.

Davranışsal yanıt profilleri larva balık incelenmesi için deneysel protokol: nöro-uyarıcı kafein uygulamaya

Fish models and behaviors are increasingly used in the biomedical sciences; however, fish have long been the subject of ecological, physiological and ...

Identification of Hemolytic and Phospholipase Activity in Crude Extracts from Sea Anemones by Straightforward Bioassays

Sea anemone venom composition includes polypeptide and non-proteins molecules. Cytolytic components have a high biotechnological and biomedical potential for designing new molecular tools. Sea anemone venom locates in glandular cells from ectoderm and sub-cellular structures called nematocysts, both of which are distributed throughout the sea anemone body. This characteristic implies challenges because the cells and nematocyst must be lysed to release the venom components with other non-toxic molecules. Therefore, first, the venom is derived from a crude extract (mixture of different and diverse molecules and tissue debris). The next step is to detect polypeptides with specific bioactivities. Here, we describe an efficient strategy to obtain the sea anemone crude extract and bioassay to identify the presence of cytolysins. The first step involves inexpensive and straightforward techniques (stirred and freeze-thaw cycle) to release cytolysins. We obtained the highest cytolytic activity and protein (~500 mg of protein from 20 g of dry weight). Next, the polypeptide complexity of the extract was analyzed by SDS-PAGE gel detecting proteins with molecular weights between 10 kDa and 250 kDa. In the hemolytic assay, we used sheep red blood cells and determined HU50 (11.1 &plusmn; 0.3 &#181;g/mL). In contrast, the presence of phospholipases in the crude extract was determined using egg yolk as a substrate in a solid medium with agarose. Overall, this study uses an efficient and inexpensive protocol to prepare the crude extract and applies replicable bioassays to identify cytolysins, molecules with biotechnological and biomedical interests.

Here, we describe a protocol to obtain crude venom extract from sea anemone and detect its hemolytic and phospholipase activity.

Deniz Anemonlardan Elde Edilen Ham Ekstraktlarda Hemolitik ve Fosfolipaz Aktivitesinin Basit Biyotahlillerle Tanımlanması

Sea anemone venom composition includes polypeptide and non-proteins molecules. Cytolytic components have a high biotechnological and biomedical potential ...

Lethality Bioassay Using Artemia salina L.

Natural products have been used since ancient times to produce medicines. Nowadays, there are plenty of chemotherapeutic drugs obtained from natural sources and used against a plethora of diseases. Unfortunately, most of these compounds often display systemic toxicity and adverse effects. In order to better evaluate the tolerability of selected potentially bioactive samples, brine shrimp (Artemia salina) is generally used as a model in lethality studies. The A. salina test is based on the ability of the studied bioactive compounds to kill the microcrustaceans in their larval stage (nauplii). This method represents a convenient starting point for cytotoxicity studies, as well as for the general toxicity screening of synthetic, semisynthetic, and natural products. It can be considered a simple, quick, and low-cost assay, compared to many other assays (in vitro cells or yeast strains, zebrafish, rodents) generally suitable for the aforementioned purposes; moreover, it can be easily performed even without any specific training. Overall, A. salina assay represents a useful tool for the preliminary toxicity evaluation of selected compounds and the bio-guided fractionation of natural product extracts.

Lethality Bioassay Using Artemia salina L.

This work aims to evaluate and review the Artemia salina lethality bioassay procedure, also identified as brine shrimp lethality assay. This simple and cheap method gives information about the general toxicity (considered as a preliminary toxicity evaluation) of samples, namely, natural products.

Artemia salina L. Kullanarak Öldürücülük Biyotahlili

Natural products have been used since ancient times to produce medicines. Nowadays, there are plenty of chemotherapeutic drugs obtained from natural ...

Kimya

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana

Our research activities target the use of biological methods for the evaluation of environmental quality, with particular reference to saltwater/brackish water and sediment. The choice of biological indicators must be based on reliable scientific knowledge and, possibly, on the availability of standardized procedures. In this article, we present a standardized protocol that used the marine crustacean Artemia to evaluate the toxicity of chemicals and/or of marine environmental matrices. Scientists propose that the brine shrimp (Artemia) is a suitable candidate for the development of a standard bioassay for worldwide utilization. A number of papers have been published on the toxic effects of various chemicals and toxicants on brine shrimp (Artemia). The major advantage of this crustacean for toxicity studies is the overall availability of the dry cysts; these can be immediately used in testing and difficult cultivation is not demanded1,2. Cyst-based toxicity assays are cheap, continuously available, simple and reliable and are thus an important answer to routine needs of toxicity screening, for industrial monitoring requirements or for regulatory purposes3. The proposed method involves the mortality as an endpoint. The numbers of survivors were counted and percentage of deaths were calculated. Larvae were considered dead if they did not exhibit any internal or external movement during several seconds of observation4. This procedure was standardized testing a reference substance (Sodium Dodecyl Sulfate); some results are reported in this work. This article accompanies a video that describes the performance of procedural toxicity testing, showing all the steps related to the protocol.

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana

This study concerns the development and standardization of a valuable methodological protocol to determine long-term (14 days) lethal toxicity exerted by chemical substances, industrial wastewater or sewage and liquid environmental samples on the saltwater crustacean, Artemia franciscana.

Kabuklu uzun vadeli Lethal Toksisite Testi Artemia Franciscana</em

Our research activities target the use of biological methods for the evaluation of environmental quality, with particular reference to saltwater/brackish ...

Biyoloji

Avidity-based Extracellular Interaction Screening (AVEXIS) for the Scalable Detection of Low-affinity Extracellular Receptor-Ligand Interactions

Extracellular protein:protein interactions between secreted or membrane-tethered proteins are critical for both initiating intercellular communication and ensuring cohesion within multicellular organisms. Proteins predicted to form extracellular interactions are encoded by approximately a quarter of human genes1, but despite their importance and abundance, the majority of these proteins have no documented binding partner. Primarily, this is due to their biochemical intractability: membrane-embedded proteins are difficult to solubilise in their native conformation and contain structurally-important posttranslational modifications. Also, the interaction affinities between receptor proteins are often characterised by extremely low interaction strengths (half-lives &lt; 1 second) precluding their detection with many commonly-used high throughput methods2. 
Here, we describe an assay, AVEXIS (AVidity-based EXtracellular Interaction Screen) that overcomes these technical challenges enabling the detection of very weak protein interactions (t1/2 &le; 0.1 sec) with a low false positive rate3. The assay is usually implemented in a high throughput format to enable the systematic screening of many thousands of interactions in a convenient microtitre plate format (Fig. 1). It relies on the production of soluble recombinant protein libraries that contain the ectodomain fragments of cell surface receptors or secreted proteins within which to screen for interactions; therefore, this approach is suitable for type I, type II, GPI-linked cell surface receptors and secreted proteins but not for multipass membrane proteins such as ion channels or transporters.
The recombinant protein libraries are produced using a convenient and high-level mammalian expression system4, to ensure that important posttranslational modifications such as glycosylation and disulphide bonds are added. Expressed recombinant proteins are secreted into the medium and produced in two forms: a biotinylated bait which can be captured on a streptavidin-coated solid phase suitable for screening, and a pentamerised enzyme-tagged (&beta;-lactamase) prey. The bait and prey proteins are presented to each other in a binary fashion to detect direct interactions between them, similar to a conventional ELISA (Fig. 1). The pentamerisation of the proteins in the prey is achieved through a peptide sequence from the cartilage oligomeric matrix protein (COMP) and increases the local concentration of the ectodomains thereby providing significant avidity gains to enable even very transient interactions to be detected. By normalising the activities of both the bait and prey to predetermined levels prior to screening, we have shown that interactions having monomeric half-lives of 0.1 sec can be detected with low false positive rates3.

Avidity-based Extracellular Interaction Screening AVEXIS for the Scalable Detection of Low-affinity Extracellular Receptor-Ligand Interactions

AVEXIS is a high throughput protein interaction assay developed to systematically screen for novel extracellular receptor-ligand pairs involved in cellular recognition processes. It is specifically designed to detect transient protein interactions that are difficult to identify using other high throughput approaches.

Düşük afiniteli Ekstrasellüler Reseptör-ligand Etkileşimlerinin Ölçeklenebilir Algılama için Avidite tabanlı Ekstrasellüler Etkileşim Gösterimi (AVEXIS)

Extracellular protein:protein interactions between secreted or membrane-tethered proteins are critical for both initiating intercellular communication and ...

Yetişkin Zebra Balıklarında Nörotoksik Etkileri Değerlendirmek için Davranışsal Test Bataryası

Neurotoxicity Assessment in Adult Danio rerio using a Battery of Behavioral Tests in a Single Tank

The presence of neuropathological effects proved to be, for many years, the main endpoint for assessing the neurotoxicity of a chemical substance. However, in the last 50 years, the effects of chemicals on the behavior of model species have been actively investigated. Progressively, behavioral endpoints were incorporated into neurotoxicological screening protocols, and these functional outcomes are now routinely used to identify and determine the potential neurotoxicity of chemicals. Behavioral assays in adult zebrafish provide a standardized and reliable means to study a wide range of behaviors, including anxiety, social interaction, learning, memory, and addiction. Behavioral assays in adult zebrafish typically involve placing the fish in an experimental arena and recording and analyzing their behavior using video tracking software. Fish can be exposed to various stimuli, and their behavior can be quantified using a variety of metrics. The novel tank test is one of the most accepted and widely used tests to study anxiety-like behavior in fish. The shoaling and social preference tests are useful in studying the social behavior of zebrafish. This assay is particularly interesting since the behavior of the entire shoal is studied. These assays have proven to be highly reproducible and sensitive to pharmacological and genetic manipulations, making them valuable tools for studying the neural circuits and molecular mechanisms underlying behavior. Additionally, these assays can be used in drug screening to identify compounds that may be potential modulators of behavior.
We will show in this work how to apply behavioral tools in fish neurotoxicology, analyzing the effect of methamphetamine, a recreational drug, and glyphosate, an environmental pollutant. The results demonstrate the significant contribution of behavioral assays in adult zebrafish to the understanding of the neurotoxicological effects of environmental pollutants and drugs, in addition to providing insights into the molecular mechanisms that may alter neuronal function.

Yazar Spotlight: Yetişkin Zebra Balıklarında Çevresel ve İlaca Bağlı Davranış Değişikliklerinin Değerlendirilmesi 

Here, we present a comprehensive behavioral test battery, including the novel tank, Shoaling, and social preference tests, to effectively determine the potential neurotoxic effects of chemicals (e.g., methamphetamine and glyphosate) on adult zebrafish using a single tank. This method is relevant to neurotoxicity and environmental research.

Bir Balık-besleme Laboratuvar biyodeneyinde Deniz Organizmaların Dokular Sekonder Metabolitlerin Antipredatory Aktivite değerlendirmek için

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Göl Alabalık PCB kongenerinin Net Trofik Transferi Etkinliklerinin Laboratuvarı Tahmini (

içinde Yırtıcı Beslenme Davranışları tahlil

Deniz Bakterileri ile Ekotoksikolojik Yöntem

Bioassay-güdümlü ayırma kullanarak deniz taşemen Feromonlar tanımlaması

Davranışsal yanıt profilleri larva balık incelenmesi için deneysel protokol: nöro-uyarıcı kafein uygulamaya

Deniz Anemonlardan Elde Edilen Ham Ekstraktlarda Hemolitik ve Fosfolipaz Aktivitesinin Basit Biyotahlillerle Tanımlanması

Artemia salina L. Kullanarak Öldürücülük Biyotahlili

Kabuklu uzun vadeli Lethal Toksisite Testi Artemia Franciscana

Düşük afiniteli Ekstrasellüler Reseptör-ligand Etkileşimlerinin Ölçeklenebilir Algılama için Avidite tabanlı Ekstrasellüler Etkileşim Gösterimi (AVEXIS)

Tek Bir Tankta Davranış Testleri Bataryası Kullanılarak Yetişkin Danio rerio'da Nörotoksisite Değerlendirmesi