Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы о стволовых клеток на основе лечения периферических невропатий, особенно для лошадей рецидивирующей ларингальной невропатии. Основными преимуществами этого метода являются то, что урожай стволовых клеток является минимально инвазивным, и что метод инъекции также может быть перенесен на другие периферические невропатии. Последствия этого метода распространяются на другие исследования других типов клеток, так как стволовые клетки могут быть дифференцированы в другие клетки, представляющие интерес до инъекции.
Визуальная демонстрация этого метода имеет решающее значение, так как видео эндоскопический контроль движений ларинги и манипуляции методами стимулятора нерва может быть трудно узнать. Определите место образца в длинной голове мышцы трицепса визуальным осмотром и пальпированием, примерно в средней линии между точкой локтя и точкой плеча. Используйте электрические клиперы, чтобы побрить примерно два на два сантиметра области, и применить хирургический скраб, состоящий из поли-йодид жидкого мыла и спирта компрессы в течение одной минуты на открытой коже.
Используя 25 калибровочных игл, подкожно введать один миллилитр 2%лидокаин раствор в центр дезинфицируемой области. После дезинфекции с чистым антибактериальным мылом руки, и надев стерильные перчатки, поместите полуавтоматический 14 калибровочной биопсии иглы на одноразовые стерильные драпировки, и тянуть на весенний механизм, чтобы вооружить иглу. Соберите канюлю и обтуратор в заблокированном положении, чтобы сформировать trochar, и ввести trochar перпендикулярно через десенсибилизированную кожу, примерно 1,5 сантиметра в подкладной мышечной ткани.
Затем снимите трочар и поместите обтуратор на стерильную драпировку. Ввемите иглу через канюлю. Затем ввемите иглу и канюлю через разрез кожи в мышцу, пока кончик иглы не будет в середине длинной головы мышцы трицепса.
Затем отпустите биопсию иглы, вытащить иглу и канюлю из мышц вместе, и удалить иглу из канюлы. Потяните пружину одной рукой, держа иглу другой рукой, пока образец не станет видимым на кончике иглы биопсии. С помощью помощника откройте образец трубки, содержащей образец среды, и использовать 19-го калибра подкожной иглы для передачи крошечный кусок мышцы из биопсии иглы в среде отбора проб.
Закройте трубку крышкой винта и аккуратно наклоните трубку два раза, чтобы убедиться, что образец плавает в среде. Затем повторно вооружить биопсию иглы и вновь канюли через разрез кожи, чтобы собрать еще два-три образца, пока примерно 20 миллиграммов мышечной ткани была приобретена. Чтобы ввести клетки, после нагрева подвески клетки до комнатной температуры, аспирировать один миллилитр клеток в двухми миллилитр шприц и подтвердить, что лошадь находится в положении головы вниз, что свидетельствует о полной сеяния.
Далее, клип двадцать на десять сантиметров области над левой области ларинги, и применить хирургический скраб из поли-йодидного мыла и алкоголя в открытой области. Поместите гибкий стандартный видеоэндоскоп через левый наре лошади к носоглотки, регулируя положение эндоскопа до полного просмотра как arytenoid хрящи и эпиглоты получается. Подключите иглу стимуляции к отрицательному электроду нервного стимулятора.
Подключите шприц, содержащий подвеску клетки, к линии впрыска и предварительно заполните трубку, чтобы выть воздух из системы. Соедините положительный электрод нервного стимулятора с электродным пластырем, который будет прилипать к области открытой кожи. Загрузите шприц с объемом стерильного солевого раствора, равного заранее заполненному объему трубки, и ввемите иглу стимуляции в сторону дорсолатерального аспекта гортани, начав нервный стимулятор в режиме стимуляции Hertz, с течением в два миллиампера при приближении спинного бокового аспекта гортани.
Аккуратно переместите иглу к рецидивирующему ларинговому нерву. Как только похищение движения левого arytenoid хряща видно, уменьшить ток, пока движение исчезает, сохраняя при этом иглу на месте. При потере двигательной реакции на 0,5 миллиампер наблюдается, поддерживать положение иглы, и вводить один миллилитр аутологичной стволовых клеток, а затем весь объем заранее подготовленного солевого раствора.
Поддерживайте иглу в стабильном положении во время этого процесса, так как расстояние до нервов контролируется течениями, которые производят двигательную реакцию и крошечные движения иглы могут привести к внезапной потере реакции. Затем удалите иглу и эндоскоп, и дайте лошади восстановиться с мониторингом. В предыдущих исследованиях, никаких побочных реакций не наблюдалось во время или после отбора проб, и не было никакого воспаления наблюдается во время или после стимуляции или инъекции стволовых клеток.
Кроме того, не было измерено никаких различий между предиммунной оценкой функций ларинги, и баллами, полученными в первые, семь и 28 дней после инъекции стволовых клеток. При попытке этой процедуры, важно помнить, что процедура сбора стволовых клеток является неинвазивной и позволяет культуры огромное количество аутологичной мезенхимальных стволовых клеток в короткий промежуток времени. После этой процедуры, другие методы, как инъекция предварительно дифференцированных клеток, могут быть выполнены, чтобы ответить на дополнительные вопросы о том, клетки Шванн, скорее всего, внести свой вклад в определение нервов.
После своего развития, этот метод проложил путь для исследователей в регенеративной медицине, чтобы исследовать использование стволовых клеток в лошадиной рецидивирующей ларингальной невропатии.
