O escopo desta área específica de nossa pesquisa é o fornecimento de modelos animais altamente padronizados e controlados para condições e doenças específicas. Usando este protocolo para nefrectomia subtotal, fornecemos um modelo padronizado para insuficiência renal em ratos. Nosso protocolo oferece a vantagem do eixo intra-abdominal para outros órgãos viscerais.
Isso é especialmente valioso se procedimentos simultâneos em outros órgãos forem necessários para o modelo animal desejado. O desafio experimental atual mais relevante é o fato de que a redução cirúrgica do parênquima renal global em quantidade padronizada não resulta necessariamente no mesmo grau de insuficiência renal. Portanto, pode ser necessária uma certificação pós-operatória adicional por meio de testes de laboratório.
Para começar, organize as ligaduras de polifilamento, alças de vaso de silicone, pinças de revisão romba, tesouras de preparação fina, fórceps, adesivos hemostáticos, aparelhos de exposição, uma almofada de aquecimento e ganchos de preparação cirúrgica na mesa de operação. Ao rato anestesiado, administre oxigênio a 100% através de uma máscara facial neonatal. Raspe a área de acesso desejada e desinfete o local da cirurgia aplicando cotonetes esterilizados em movimentos circulares com esfoliantes alternados de etanol a 70% e iodopovidona.
Para realizar uma minilaparotomia mediana, faça uma incisão cutânea mediana inicial de aproximadamente três centímetros sobre o abdômen, seguida de uma incisão na fáscia ao longo da linha alba. Alcance a exposição cirúrgica do rim posicionando compressas cirúrgicas e ganchos de preparação. Em seguida, toque apenas no parênquima renal com cotonetes umidificados.
Exponha o rim agarrando a gordura perirrenal presa à fáscia da Gerota. Aplique tensão para levantar a fáscia do parênquima renal localmente. Incise e mine a fáscia com a ponta afiada de uma ponta de tesoura e continue com uma dissecção longitudinal da fáscia de Gerota.
Em seguida, execute um desenluvamento rombudo da fáscia de Gerota usando uma tesoura fechada. Gradualmente minar a fáscia ao redor do parênquima e dobrar a cápsula fascial medialmente. Estilingue o hilo renal com uma alça de vaso de silicone para melhor controle vascular.
Coloque a ponta da pinça no espaço retroperitoneal para estabilizar o rim e evitar um escape dorsal do rim durante o processo de corte. Em seguida, usando uma tesoura, execute a colectomia renal de um terço do crânio em um golpe preciso. Obtenha hemostasia aplicando um adesivo hemostático ou usando compressão manual com instrumentos rombos.
Como alternativa, aplique uma pinça YASARGIL hilar para reduzir o fluxo sanguíneo. Realize a colectomia renal de um terço aguda caudal da mesma maneira que a colectomia craniana. Use um plano de dissecção angulado para reter mais parênquima renal no lado hilar e menos no lado lateral para evitar lesão hilar e reduzir o vazamento urinário do sistema pélvico.
Depois de mobilizar o rim, faça um túnel do hilo renal usando pinças de revisão rombas, estilingue no hilo renal com uma ligadura de polifilamento. Coloque um nó deslizante seguro no hilo renal próximo aos vasos abdominais para ocluir o fluxo sanguíneo renal e o ureter. Disseque bem o hilo usando uma tesoura e remova o rim.
Em seguida, controle a hemostasia e corte as extremidades da ligadura. Coloque uma sutura de canto na fáscia abdominal usando uma sutura de polifilamento. Continue suturando a fáscia abdominal com uma sutura contínua, agarrando aproximadamente dois milímetros de tecido por mordida e espaçando cada mordida em quatro milímetros.
Suturar a camada cutânea com pontos únicos, agarrando três milímetros de tecido por mordida e deixando seis milímetros entre cada ponto. Os valores fisiológicos do parênquima renal remanescente apresentaram níveis de oxigenação de aproximadamente 60%, indicando viabilidade após a ressecção. O tecido renal mal perfundido exibiu níveis de oxigenação significativamente mais baixos em 20,9% consistentes com tecido não viável.
Os valores de perfusão indicaram perfusão fisiológica no rim remanescente, reforçando a viabilidade tecidual.
