Direcionamento de tióis cisteína para in Vitro site-specific glicosilação de proteínas recombinantes

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11:25 min

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October 4th, 2017

DOI :

10.3791/56302-v

October 4th, 2017

•

Yoo Jung Choi*¹, Jinhui Zhu*¹, Steve Chung*¹, Naveed Siddiqui*¹, Qingping Feng¹, Peter B. Stathopulos¹

¹Department of Physiology and Pharmacology, Schulich School of Medicine and Dentistry, University of Western Ontario

Resumo

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modifica o de tiol de ciste na

estromais intera o mol cula 1

EFSAM

espectroscopia de resson ncia magn tica nuclear de solu o

espectrometria de massa

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0:05

Title

1:09

Polymerase Chain Reaction (PCR)-mediated Site-directed Mutagenesis

3:44

Uniform ¹⁵N-labeled Protein Expression in BL21 ΔE3 E. coli

5:24

Purification of Recombinant Protein from E. coli

7:50

Chemical Attachment of Glucose-5-MTS to Protein by Dialysis

8:48

Results: Site-selective Cys Mutation Followed by In Vitro Glycosylation in STIM1 EF-SAM Protein

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Conclusion

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