The authors have no acknowledgements.

Uma aprovação isentos (3002-13) para realizar a pesquisa utilizando amostras de tecido de-identificados em conformidade com o Departamento de Saúde e regulamentos Serviços Humanos, 45 CFR 46,101 (b) (4) foi concedido. pele de espessura total é recebido de uma cirurgia eletiva. Neste artigo, a fonte de tecido é de mama mulher caucasiana de 66 anos de idade. 1. Preparação de Lamelas Elastomer Revestido <ol><li> Num frasco de vidro de 20 mL, misturar 0,107 g de agente de Sylgard 184 cura com 5,893 g de base. A massa total da mistura é de 6 g de produto com uma base para a cura da proporção de agente de 55: 1. </li><li> Após a mistura com uma vareta de vidro para assegurar a homogeneidade, colocar o frasco de vidro em uma câmara de vácuo e desgaseifica para remover todas as bolhas. </li><li> Coloque uma lamela de vidro (55 mm x 25 mm) no centro de um revestidor de rotação. Adicionar ~ 1 ml da mistura sobre o centro da tampa-derrapante. Usar uma pipeta de 5000 uL com a extremidade cortada com uma tesoura. Spin revestimento da tampa-derrapante a 2.000 rpm durante 60 s. <ol><li> Repita este pROCESSO para criar 5-6 substratos. </li></ol></li><li> Curar as lamelas num forno durante 12 h a 60 ° C. </li><li> Usar uma lâmina de barbear para remover parcialmente a película de elastómero a partir de um substrato de sacrifício. Use um marcador indelével para marcar o topside do filme elastômero eo vidro exposta. </li><li> Monte a amostra em um microscópio invertido e usar um acessório de foco remoto para gravar a diferença de altura z entre os planos focais das duas marcas. Isto corresponde à espessura do substrato elastómero, h. </li></ol> 2. Preparação do Estrato Córneo <ol><li> Usar um banho de água ou placa de agitação aquecida para aquecer uma proveta de vidro de metade cheio com água desionizada (DW) a 60 ° C. Dentro de uma cabine de segurança biológica, mergulhe a plena pele humana de espessura na água durante 4 min. </li><li> Imediatamente transferir a amostra de pele para uma proveta contendo DW arrefecida a &lt;10 ° C durante 4 min. Metade enchendo o copo minimiza a projecção de salpicos de material de risco biológico. </li><li> Retire a pele do copo, coloque em uma placa de Petri, e gentilmente isolar a epiderme usando um par de pinças de tecido nariz curvado. </li><li> Coloque a epiderme isolado lado basal para baixo em uma placa de Petri forrada com gaze. Assegurar a camada basal está totalmente em contato com a gaze. <ol><li> Embeber o gaze em um 0,25% (peso / vol) de tipo IX-S solução de tripsina de pâncreas de suíno dissolvido em 0,1 M de fosfato de solução salina tamponada durante 6-8 h à temperatura ambiente. Adicionar apenas tripsina suficiente no recipiente para molhar a gaze. </li></ol></li><li> Levante a gaze com uma pinça de tecidos e bóia-lo em um recipiente parcialmente cheio com DW. Puxe cuidadosamente o SC para separá-lo da gaze. </li><li> Lava-se a camada córnea 3-4 vezes em DW para remover o tecido epidérmico residual que permanece ligado ao SC. </li><li> Flutuador da SC isolado numa solução de 0,4% de Glycine max (soja) de inibidor de tripsina em DW. Usar um agitador de placas para agitar o tecido durante 10 min. </li><li> Flutuar SC numa placa de Petri parcialmentepreenchido com DW. Usar um agitador de placas para agitar o tecido durante 10 min. </li><li> Seca-se a folha de SC isolado em uma malha de plástico ultra-fino durante 48 h à temperatura ambiente (25 ° C, 40% de humidade relativa (RH)). </li><li> Separe o SC da malha e cortar amostras circular R = 3 mm de raio individuais usando um furador circular. Marcar o centro da face mais exterior com uma marca de espiral pequenos usando um marcador indelével. Isso proporciona uma sinalização visual para reconhecer a parte de cima do SC. NOTA: A marca indelével deve ser aplicada no centro da amostra, onde as deformações de secagem será menor. Isto vai minimizar o impacto do marcador em perfis de deslocamento de secagem gravados. </li></ol> 3. Amostra Tratamento e Deposição <ol><li> Agitar amostras SC durante 30 minutos em 15 ml de DW contendo 90 uL grânulos marcador fluorescente (505/515 nm, 1 um de diâmetro, carboxilato-modificada). Este depósitos grânulos para a superfície de SC NOTA: Durante a deposição de lnúmeros de Arge de contas sobre a SC pode marginalmente lenta a secagem em relação a amostras sem contas de presente 12, ele irá maximizar a resolução espacial dos campos de deformação no plano que podem ser posteriormente obtidos. A escolha do volume de talão adicionada deve, portanto, ser feita ad hoc. </li><li> Retirar amostras de SC e colocá-los em uma placa de Petri parcialmente preenchido com DW. </li><li> Imergir um substrato parcialmente no DW a um ângulo raso de 15-30 °. </li><li> Fixar um bordo da amostra SC flutuante na linha de contacto entre o substrato e a interface água. Verticalmente retirar o substrato da água vai laminar suavemente a amostra SC para o substrato, sem rugas ou bolhas de ar aprisionadas. </li><li> Repita o passo 3.4 para colocar até 6 amostras de SC em cada substrato. Deixar pelo menos uma folga de 2-3 mm entre as amostras e evitar a laminação amostra perto da borda do substrato. Isso impede a secagem de uma amostra que influenciam deslocamentos de secagem em outro. </li&gt; <li> Secam-se as amostras SC montados em condições de laboratório durante 60 min. Isso permite que a água residual entre o SC e substrato para evaporar e garante a adesão de tecidos completa. NOTA: Nesta fase, as amostras de SC pode ser tratada com um produto químico ou formulações cosméticas 7, 8, colocando os substratos de cabeça para baixo em uma solução desejada por um período de tempo necessário. Repetir o passo 3.6 uma vez que o passo de tratamento é realizado. Após a secagem, a adesão incompleto de amostras de SC para o substrato pode ser verificado através de microscopia de luz transmitida. de bolhas de ar sob a amostra SC ou bordas desagregadas formarão variações claro contraste na amostra com bordas bem definidas. </li><li> Criar uma câmara de humidade por colocação de uma placa de Petri parcialmente preenchida com água para um recipiente hermeticamente selado. </li><li> Coloque substratos para dentro da câmara durante 24 h, para equilibrar a humidade relativa de 99%. Não coloque os substratos para a Petri prato. </li></ol> 4. Controle Ambiental Microscópio <ol><li> Atingir o controlo das condições ambientais através de um sistema de controlo de humidade ligado a uma câmara de perfusão montável microscópio. Detalhes do sistema de controlo de humidade são fornecidos em alemão et ai. (2013) 7 e Liu e alemão (2015) 8. </li><li> Montar o substrato sobre o microscópio, colocar a câmara de perfusão sobre o substrato e selar as bordas da câmara de perfusão para o elastómero usando graxa de vácuo. </li><li> Uma vez montado, o ar interno equilibrar a 99% de humidade relativa antes da experimentação. Isto impede a evaporação de água antes da experimentação. Depois de imagem nas seções 5 ou 7 começou, reduzir a umidade do ar interno para o valor desejado. NOTA: Neste artigo, as amostras de SC são secos a 25% RH </li></ol> 5. Criação de Imagens no plano de secagem Deslocamentos <ol><li> Adquirir imagens de amostras de SC usando um microsco invertidope com lente objetiva 1X. Excite partículas fluorescentes, utilizando um motor de luz com filtro FITC (503-530 nm de banda de emissão). amostras múltiplas podem ser visualizados sequencialmente ao longo de secagem usando um estágio xy automatizado. </li><li> fluorescente registro e imagens de luz transmitida usando uma câmera CCD digital com uma resolução de 1.392 x 1.040 pixels. O campo de visão de cada imagem é 8,98 x 6,71 milímetros, permitindo que uma única imagem para capturar uma amostra SC completo. Captar imagens com uma frequência de 10 min por 16 h. </li></ol> 6. Preparação Substrato para medição de espessura <ol><li> Em uma Cobertura de vapores químicos, coloque 1 mL de silano (3-aminopropiltrietoxissilano; ≥98%) em alguma pequena tampa de plástico. Coloque substratos elastoméricos da seção 1 e a tampa num recipiente selado durante 5 h. Não permitir que substratos para vir directamente em contacto com o silano. </li><li> Adicionam-se 5 mg de EDC (N - (3-dimetilaminopropil) - N-etilcarbodiimida; ≥99%) num tubo de 1,5 mL. Adicionar 500 ul de DW para a EDC. Agitar a solução durante 10 s com um misturador de vórtice. </li><li> Adicionar 0,076 g de tetraborato de sódio e 0,1 g de ácido bórico para 20 ml de DW. Misturar utilizando um agitador magnético a 70 ° C (1 h). Adicionar ácido bórico, até que o pH é 7,4. </li><li> Adicionar 20 ml de tampão de borato a um tubo de centrífuga de 50 mL. Adicionar 60 ul de 1 uM grânulos (535/575 nm, modificadas com carboxilato) para o tampão de borato. Finalmente, adicione 200 mL de solução de EDC a garrafa. Agite o tubo para misturar a solução de contas e, em seguida, despeje em um 10 cm de diâmetro placa de Petri. </li><li> Remover os substratos silanizadas a partir do recipiente e colocá-los lado-elastômero filme para baixo para dentro da solução do grânulo. Fazê-lo lentamente para evitar bolhas de tornar-se preso. Dois substratos vai caber em cada placa de Petri. </li><li> Deixar substratos para flutuar na solução talão durante 45 min. </li><li> Use uma pinça para remover os substratos da solução talão, em seguida, enxaguar em DW para remover contas não ligadas. </li><li> Ar secar os substratos. Soprando ar comprimido maisa superfície da película de elastómero reduz a formação de manchas de água. </li><li> Selar os substratos em uma caixa opaca para evitar a foto-branqueamento das esferas até a deposição amostra SC. </li></ol> 7. Imagens Espessura de SC <ol><li> Amostras de depósito SC sobre a um substrato utilizando seção 3. No entanto, executar a etapa 3.1, sem adição de partículas fluorescentes à DW. Além disso, aplicam-se uma gota de 5 mL de uma solução não diluída marcador fluorescente talão (505/515 nm, de 0,1 um de diâmetro) na superfície de cada amostra SC depositado com uma pipeta antes de completar o passo 3.6. </li><li> Estabelecer medidas de espessura SC usando o microscópio com 40X lente objetiva. Medir a espessura das amostras SC ao longo do tempo utilizando um acessório de focagem remoto para registar a diferença em altura z entre os dois planos focais camada friso localizado na interface substrato-SC e a parte de cima do SC. </li><li> Medir a espessura de 3 regiões de cada amostra SC ao longo de um período de secagem de 3 horas. A espessurade amostras de SC atinge um valor estável dentro desse tempo 8. </li></ol> 8. Quantificação e modelagem Tissue Deformação <ol><li> Use velocimetria por imagem de partículas 13 para obter espacialmente resolvidas no plano deslocamentos de secagem a partir das imagens fluorescentes em cada passo de tempo gravado. </li><li> Use MATLAB para obter perfis radiais e azimutais deslocamento azimutal em média a partir do campo de deslocamento de cada amostra SC radialmente simétrica. NOTA: Um exemplo de conjunto de dados (intitulado «d.mat &#39;) e um código MATLAB (intitulado« PIV-processing.m&#39;), que realiza tanto este passo e passo 8.3 foi fornecida a informação suplementar. </li><li> Fit perfis de deslocamento radial para um modelo de 7, 8, 14, 15, 16 que descreve a secagem SC como circula elástica linear encolhendodisco r de tempo espessura variável, H SC, raio, R, e módulo de elasticidade, E SC, aderiu a um substrato elástico deformável, com o módulo de elasticidade, E. Suponha SC tem um coeficiente de Poisson bem definida e constante, ν SC = 0,4 7 , 8. Obter melhores ajustes usando um mínimo menos abordagem quadrados. NOTA: O modelo utilizado para a montagem descreve deslocamentos radiais em termos de funções de Bessel modificadas são: <img alt="Equação" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq2.jpg" /> (1) com <img alt="Equação" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq3.jpg" /> , <img alt="Equação" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq4.jpg" /> e <img alt="Equação" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq13.jpg" /> O termo <img alt="Equação" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq6.jpg" /> corresponde a uma profundidade de penetração determinada por, <img alt= &quot;Equação&quot; src = &quot;/ files / ftp_upload / 55336 / 55336eq7.jpg&quot; /&gt;. <img alt="Equação" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq8.jpg" /> indica um parâmetro substrato rigidez; válido quando as amostras são muito maiores do que a espessura do substrato. Aqui, os parâmetros, <img alt="Equação" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq9.jpg" /> e <img alt="Equação" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq10.jpg" /> designam respectivamente a espessura do substrato coeficiente de Poisson. Razão entre o substrato de elastómero de silicone 17 de Poisson é ν = 0,5. </li><li> Obter os parâmetros do modelo a e β em cada intervalo de tempo a partir dos mínimos quadrados ajuste da equação (1) para o perfil de deslocamento radial. <ol><li> Empregar o β parâmetro de ajustamento para se obter SC módulo de elasticidade, E SC, utilizando a expressão: <img alt="Equação" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq11.jpg" /></li><li> Use α parâmetro de ajustamento para se obter o tempo de secagem varia contráctil stress, PSC, usando a expressão, <img alt="Equação" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq12.jpg" /></li></ol></li></ol>

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The authors have nothing to disclose.

Neste artigo, descreve-se uma técnica que pode ser utilizada para medir o comportamento dinâmico de secagem e propriedades mecânicas de SC humano. Estudos anteriores demonstraram que esta técnica pode ser utilizada para quantificar os efeitos de condições ambientais e de produtos químicos normalmente utilizados em produtos de limpeza e cosméticos hidratantes no comportamento dinâmico de secagem SC 7, 8. Há uma série de passos-chave no protocolo. Em primeiro lugar, SC incha nomeadamente com a quantidade de água; por conseguinte, a medida da espessura do SC e para a deslocação no plano são essenciais para predizer com precisão o módulo de elasticidade e secagem magnitude das tensões. Em segundo lugar, as amostras devem ser totalmente aderente ao substrato. adesão incompleta, amostras não radialmente simétricos ou amostras com pequenos rasgos ou furos devem ser evitados porque eles vão impactar significativamente a distribuição das deformações de secagem e os perfis de deslocamento radial usard para o modelo adequado. A técnica pode ser utilizado, se um sistema de controlo de humidade não está disponível. Sem controle ambiental, amostras de tecido vai secar em condições de laboratório 12. Como tal, o ambiente de laboratório deve ser continuamente monitorado e mantido, como um comportamento de secagem e a repetibilidade dos resultados será impactado por ambas as variações diurnas e sazonais de temperatura e umidade. Actualmente, a técnica está limitada apenas aos exemplos que podem aderir ao substrato e induzir deformações no interior da película de elastómero. Embora a técnica pode ser prontamente adaptada para análise de amostras que são submetidos a pequenos deslocamentos no plano, através da redução do módulo elástico do substrato 12, os resultados de amostras que simplesmente deslizar sobre o substrato não terá significado. Numerosos in vivo e ex-vivo técnicas que pode avaliar o comportamento de secagem e mecânicapropriedades de SC foram relatados 3, 8, 9, 10, 18, 19, 20, 21. No entanto, in vivo técnicas não é possível distinguir totalmente alterações mecânicas no SC de as camadas epidérmica e dérmica subjacente. Além disso, as técnicas ex-vivo pode tipicamente somente avaliar uma amostra por experimento. O método relatamos neste artigo permite que até 6 amostras do SC para ser avaliado por experimento. O tamanho do substrato e câmara ambiental, porém, poderia ser dimensionado para permitir que mais amostras a serem avaliadas simultaneamente. Nós estimamos para amostras n = 6 SC, num período de ~ é exigido 13 h para a preparação e ensaio, com excepção de cura substrato e de equilíbrio do tecido. Em comparação, estimamos testes tensometry uniaxial exigiria maisde duas vezes nesse período. Significativamente menos tecido SC é também necessária por amostra individual (0,28 cm2), em comparação com as requeridas para tensometry 9 (2,5 cm2). Esta técnica permite ainda mais fisiologicamente relevante de secagem, impedindo a evaporação a partir do lado de baixo do tecido SC. Além de avaliar o comportamento de secagem e mecânica em SC, acreditamos que esta técnica também pode ser aplicado a estudos de sistemas poliméricos ou coloidais que formam um filme aderente, após a secagem.

A camada mais externa da epiderme, ou estrato córneo (SC) é constituído por células corneócito coesivas rodeadas por um lípido rico matriz 1, 2. A composição estrutural e integridade do SC é essencial para manter a funcionalidade de barreira correct 3, que impede a invasão de microorganismos e resiste a ambas as forças mecânicas e perda excessiva de água 4. A capacidade dos produtos de cuidados pessoais para manter ou degradar a função de barreira da pele é de grande interesse para saúde da pele e da indústria cosmética 5. A aplicação diária de produtos de cuidado pessoal é conhecida para alterar as propriedades mecânicas do SC 6, 7, 8. Por exemplo, surfactantes contidos em produtos de limpeza cosméticos podem causar aumentos significativos no módulo de elasticidade e uma acumulação detensões de secagem em SC, aumentando a propensão do tecido de crack 7, 9. Glicerol contido em quase todos os hidratantes cosméticos pode suavizar SC e diminuir o acúmulo de tensões de secagem 8, 10, 11, reduzindo a probabilidade de ruptura do tecido. O método descrito neste artigo é capaz de quantificar o comportamento de secagem dinâmico e propriedades mecânicas do SC de secagem em ambientes controlados 7, 8. Anteriormente, esta técnica tem sido demonstrada ser capaz de elucidar o efeito de diferentes produtos cosméticos em alterações do comportamento dinâmico de secagem e propriedades mecânicas do tecido SC. Isto é conseguido através da quantificação contracção induzida por secagem de tecido humano SC aderiu a um substrato de elastómero macio, encaixando deslocamentos de secagem com uma simplesmodelo de contratilidade, e depois extrair o módulo de elasticidade e secagem estresse a partir do perfil equipada. Quando são necessários ensaios de amostras múltiplas SC, este método oferece uma alternativa mais rápida para tensometry uniaxial, utiliza significativamente menos tecido e fornece mais fisiologicamente relevante de secagem, impedindo a evaporação a partir do lado de baixo da amostra.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Silicone elastomer base</td>
			<td>Dow-Corning</td>
			<td>1064291</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone elastomer Curing Agent</td>
			<td>Dow-Corning</td>
			<td>1015311</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FluoSpheres Carboxylate 0.1 &#181;m yellow green fluorescent 505/515&#160;</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>F8803</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FluoSpheres Carboxylate 1 &#181;m yellow green fluorescent 505/515&#160;</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>F8823</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FluoSpheres Carboxylate 1 &#181;m nile red fluorescent 535/575&#160;</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>F8819</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin from porcine pancreas</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T6567</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin inhibitor type II-s</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T9128</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(3-aminopropyl)triethoxysilane</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>440140</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium tetraborate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>221732</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Boric acid</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>B0294</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P7059</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-(3-Dimethylaminopropyl)-N-ethylcarbodiimide hydrochloride&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E7750</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortexer mixer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>58816-123</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6mm diameter hole punch</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Z708860</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SOLA 6-LCR-SB&#160;</td>
			<td>Lummencor light engine</td>
			<td>No.3526</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cfi Plan Achro Uw 1x Objective</td>
			<td>Nikon Plan UW</td>
			<td>MRL00012</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CFI Plan Fluor 40x Oil Objective 1.3 na - 0.20mm wd</td>
			<td>Nikon Plan Fluor</td>
			<td>MRH01401</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon Eclipse Ti-U inverted microscope&#160;</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>MEA53200</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clara-E Camera</td>
			<td>Andor</td>
			<td>DR-328G-C02-SIL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Remote Focus Attachment E-RFA Ergo Design</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>99888</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ti-S-E Motorized Stage</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>MEC56110</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring and modeling contractile drying in human stratum corneum

estrato córneo (SC) é a camada mais superficial da pele. O seu contacto com o ambiente externo significa que esta camada de tecido é sujeito a ambos os agentes de limpeza e variações diárias em humidade ambiente; ambos os quais podem alterar o conteúdo de água do tecido. Reduções do teor de água da disfunção da barreira grave ou ambientes de baixa umidade pode alterar SC rigidez e causar um acúmulo de tensões de secagem. Em condições extremas, estes factores podem causar a ruptura mecânica do tecido. Nós estabelecemos um método de alto rendimento de quantificar as alterações dinâmicas as propriedades mecânicas de SC aquando da secagem. Esta técnica pode ser utilizada para quantificar as mudanças no comportamento de secagem e propriedades mecânicas do SC com cosméticos limpador e hidratante tratamentos. Isto é conseguido medindo as variações dinâmicas da espacialmente resolvidas deslocamentos de secagem em plano de amostras circulares de tecido aderidas a um substrato de elastómero. In-Plane deslocamentos radiais ACQuired durante a secagem são azimutal média e equipado com um perfil baseado em um modelo contratilidade elástica linear. mudanças dinâmicas no estresse de secagem e SC módulo de elasticidade pode então ser extraído a partir dos perfis modelo ajustado.

A Figura 1 (a) mostra uma imagem fluorescente de uma amostra representativa de SC revestido com esferas fluorescentes (secção 3). A imagem da luz transmitida correspondente da amostra é mostrado na Figura 1 (b) revestida com uma trama tremor de deslocamentos de secagem espacialmente resolvidas que se formam após 16 horas de secagem a 25% de HR Devido à simetria circular das amostras, estes deslocamentos podem ser azimutais média. Figura 1 (c) mostra radial (r u, linha vermelha sólida) e azimutal (u θ, tracejada linha azul) perfis de deslocamento plotados contra a posição radial adimensional, r / R. Aqui, R representa o raio significativo SC amostra, R / R = 0 indica o centro da amostra e R / R = 1 indica a borda. Os desvios padrão em cada posição radial são denotados pelas regiões sombreadas em torno da média. Estas variações são causadas, principalmente, pela heterogeneidade estrutural do SC 3 &lt;sup&gt;, 7, 12. Ao longo de secagem, deslocamentos azimutais permanecem pequenas. perfis de deslocamento radial no entanto aumentam monotonamente do centro para fora e crescer em magnitude até que um equilíbrio seja alcançado. <img alt="figura 1" src="/files/ftp_upload/55336/55336fig1.jpg" /> Figura 1: Exemplo SC circular (6,2 mm de diâmetro) aderiu a um substrato de elastómero com módulo de elasticidade E = 16 ± 1 kPa, após secagem durante 15 horas num ambiente de HR 25 ± 1%. (A) imagem fluorescente da amostra SC destacando as contas marcador fluorescente depositados usado para rastrear espacialmente resolvida no plano deslocamentos de secagem. Plot (b) Quiver de espacialmente resolvidos deslocamentos de secagem In-Plane sobrepostas em uma imagem de luz transmitida da amostra SC. (C) azimutal média radial (r u, linha vermelha sólida) eazimutal (u θ, azul linha tracejada) deslocamentos da amostra plotados contra a posição radial adimensional, r / R. Os valores positivos de u R correspondem a contrátil deslocamentos. regiões sombreadas em torno das linhas indicam o desvio padrão em torno da média em cada posição radial. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55336/55336fig1large.jpg" target="_blank">Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a> Os perfis registados em intervalos de 30 min são representados graficamente na Figura 2 (a) e mostram a evolução temporal de deslocamentos no plano. A espessura média SC, H SC, é representada na Figura 2 (b). Diminui de SC durante a secagem, principalmente ocorrer ao longo do primeiro 2 h. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/55336/55336fig2.jpg" /> Figura 2: (a)Sobreposição de perfis de deslocamento radial (u R, linhas vermelhas sólidas) em intervalos de 30 min ao longo de um período de secagem de 15 h em 25% de HR plotados contra adimensional radial posição r / R para uma amostra SC típico. Os valores positivos de u R correspondem a contrátil deslocamentos. (B) a espessura da amostra SC médio, (h SC, n = 3), em função do tempo de secagem. (C) Os perfis de deslocamento radial de (a), cobertas de mínimos quadrados fits menos (linha tracejada azul) da equação (1) para o primeiro e último gravado perfil deslocamento radial. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55336/55336fig2large.jpg" target="_blank">Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a> deslocamento Fitting perfis com o modelo contratilidade elástica linear descrito pela equação (1) fornece mais informações sobre as propriedades mecânicas de secagem SC. Deslocamento perfis de um<html> t cada passo de tempo estão equipados com o modelo que utiliza um mínimo de menos abordagem quadrados, como mostrado na Figura 2 (c). A tensão contráctil secagem, P SC, e módulo de elasticidade, E SC, são subsequentemente extraído a partir do modelo em cada etapa de tempo. Média de alterações nestes parâmetros (com base em 3 amostras individuais SC) são mostradas respectivamente nas Figuras 3 (a) e 3 (b). Ambos os parâmetros de aumentar rapidamente ao longo do primeiro período de 2 h de secagem e atingir um patamar dentro de 5 h. <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/55336/55336fig3.jpg" /> Figura 3: (a) Média de SC módulo de elasticidade, E SC, representada graficamente contra o tempo de secagem ao longo de um período de 15 h. (B) o estresse contrátil médio de secagem, P SC, em função do tempo de secagem ao longo de um período de 15 h.&quot;_blank&quot;&gt; Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

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Measuring and Modeling Contractile Drying in Human Stratum Corneum

Este artigo descreve um método para quantificar o comportamento dinâmico de secagem e propriedades mecânicas do estrato córneo através da medição espacialmente resolvida no plano deslocamentos de secagem de amostras circulares de tecido aderidas a um substrato de elastómero. Esta técnica pode ser utilizada para medir a forma como os diferentes tratamentos químicos Após a secagem dos tecidos e propriedades mecânicas.

Medição e Modelagem contrátil que secam no Estrato Córneo Humano

Stratum corneum (SC) is the most superficial skin layer. Its contact with the external environment means that this tissue layer is subjected to both ...

measuring-and-modeling-contractile-drying-in-human-stratum-corneum

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Bioengineering

6.5K visualizações.  Binghamton University.  Este artigo descreve um método para quantificar o comportamento dinâmico de secagem e propriedades mecânicas do estrato córneo através da medição espacialmente resolvida no plano deslocamentos de secagem de amostras circulares de tecido aderidas a um substrato de elastómero. Esta técnica pode ser utilizada para medir a forma como os diferentes tratamentos químicos Após a secagem dos tecidos e propriedades mecânicas. 

Vídeo: Measuring and Modeling Contractile Drying in Human Stratum Corneum

Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice

Blood pressure increases significantly during embryonic and postnatal development in vertebrate animals. In the mouse, blood flow is first detectable around embryonic day (E) 8.51. Systolic left ventricular (LV) pressure is 2 mmHg at E9.5 and 11 mmHg at E14.52. At these mid-embryonic stages, the LV is clearly visible through the chest wall for invasive pressure measurements because the ribs and skin are not fully developed. Between E14.5 and birth (approximately E21) imaging methods must be used to view the LV. After birth, mean arterial pressure increases from 30 - 70 mmHg from postnatal day (P) 2 - 353. Beyond P20, arterial pressure can be measured with solid-state catheters (i.e. Millar or Scisense). Before P20, these catheters are too big for developing mouse arteries and arterial pressure must be measured with custom pulled plastic catheters attached to fluid-filled pressure transducers3 or glass micropipettes attached to servo null pressure transducers4.
Our recent work has shown that the greatest increase in blood pressure occurs during the late embryonic to early postnatal period in mice5-7. This large increase in blood pressure may influence smooth muscle cell (SMC) phenotype in developing arteries and trigger important mechanotransduction events. In human disease, where the mechanical properties of developing arteries are compromised by defects in extracellular matrix proteins (i.e. Marfan's Syndrome8 and Supravalvular Aortic Stenosis9) the rapid changes in blood pressure during this period may contribute to disease phenotype and severity through alterations in mechanotransduction signals. Therefore, it is important to be able to measure blood pressure changes during late embryonic and neonatal periods in mouse models of human disease.
We describe a method for measuring LV pressure in late embryonic (E18) and early postnatal (P1 - 20) mice. A needle attached to a fluid-filled pressure transducer is inserted into the LV under ultrasound guidance. Care is taken to maintain normal cardiac function during the experimental protocol, especially for the embryonic mice. Representative data are presented and limitations of the protocol are discussed.

Measuring left ventricular pressure (LV) in embryonic and neonatal mice is described. Pressure is measured by inserting a needle connected to a fluid-filled transducer into the LV under ultrasound guidance. Care must be taken to maintain normal cardiac function during the experimental protocol.

Pressão Ventricular Esquerda de medição no final de Ratos embrionárias e Neonatal

Blood pressure increases significantly during embryonic and postnatal development in vertebrate animals. In the mouse, blood flow is first detectable ...

Bioengenharia

CometChip: A High-throughput 96-Well Platform for Measuring DNA Damage in Microarrayed Human Cells

DNA damaging agents can promote aging, disease and cancer and they are ubiquitous in the environment and produced within human cells as normal cellular metabolites. Ironically, at high doses DNA damaging agents are also used to treat cancer. The ability to quantify DNA damage responses is thus critical in the public health, pharmaceutical and clinical domains. Here, we describe a novel platform that exploits microfabrication techniques to pattern cells in a fixed microarray. The &#8216;CometChip&#8217; is based upon the well-established single cell gel electrophoresis assay (a.k.a. the comet assay), which estimates the level of DNA damage by evaluating the extent of DNA migration through a matrix in an electrical field. The type of damage measured by this assay includes abasic sites, crosslinks, and strand breaks. Instead of being randomly dispersed in agarose in the traditional assay, cells are captured into an agarose microwell array by gravity. The platform also expands from the size of a standard microscope slide to a 96-well format, enabling parallel processing. Here we describe the protocols of using the chip to evaluate DNA damage caused by known genotoxic agents and the cellular repair response followed after exposure. Through the integration of biological and engineering principles, this method potentiates robust and sensitive measurements of DNA damage in human cells and provides the necessary throughput for genotoxicity testing, drug development, epidemiological studies and clinical assays.

We describe here a platform that allows comet assay detection of DNA damage with unprecedented throughput. The device patterns mammalian cells into a microarray and enables parallel processing of 96 samples. The approach facilitates analysis of base level DNA damage, exposure-induced DNA damage and DNA repair kinetics.

CometChip: A alta taxa de transferência de plataforma 96-Bem, para avaliação dos danos causados ​​no DNA em células Microarrayed Humanos

DNA damaging agents can promote aging, disease and cancer and they are ubiquitous in the environment and produced within human cells as normal cellular ...

Quantification of Global Diastolic Function by Kinematic Modeling-based Analysis of Transmitral Flow via the Parametrized Diastolic Filling Formalism

Quantitative cardiac function assessment remains a challenge for physiologists and clinicians.&#160;Although historically invasive methods have comprised the only means available, the development of noninvasive imaging modalities (echocardiography, MRI, CT) having high temporal and spatial resolution provide a new window for quantitative diastolic function assessment. Echocardiography is the agreed upon standard for diastolic function assessment, but indexes in current clinical use merely utilize selected features of chamber dimension (M-mode) or blood/tissue motion (Doppler) waveforms without incorporating the physiologic causal determinants of the motion itself.&#160;The recognition that all left ventricles (LV) initiate filling by serving as mechanical suction pumps allows global diastolic function to be assessed based on laws of motion that apply to all chambers. What differentiates one heart from another are the parameters of the equation of motion that governs filling. Accordingly, development of the Parametrized Diastolic Filling (PDF) formalism&#160;has shown that the entire range of clinically observed early transmitral flow (Doppler E-wave) patterns are extremely well fit by the laws of damped oscillatory motion.&#160;This permits analysis of individual E-waves in accordance with a causal mechanism (recoil-initiated suction) that yields three (numerically) unique lumped parameters whose physiologic analogues are chamber stiffness (k), viscoelasticity/relaxation (c), and load (xo).&#160;The recording of transmitral flow (Doppler E-waves) is standard practice in clinical cardiology and, therefore, the echocardiographic recording method is only briefly reviewed. Our focus is on determination of the PDF parameters from routinely recorded E-wave data.&#160;As the highlighted results indicate, once the PDF parameters have been obtained from a suitable number of load varying E-waves, the investigator is free to use the parameters or construct indexes from the parameters (such as stored energy 1/2kxo2, maximum A-V pressure gradient kxo, load independent index of diastolic function, etc.) and select the aspect of physiology or pathophysiology to be quantified.

Accurate, causality-based quantification of global diastolic function has been achieved by kinematic modeling-based analysis of transmitral flow via the Parametrized Diastolic Filling (PDF) formalism. PDF generates unique stiffness, relaxation,&#160;and load parameters and elucidates &#39;new&#39; physiology while providing sensitive and specific indexes of dysfunction.

Quantificação da função global diastólica por análise baseada em Modelagem cinemática de transmitral fluxo através do formalismo de enchimento parametrizada diastólica

Quantitative cardiac function assessment remains a challenge for physiologists and clinicians.&#160;Although historically invasive methods have comprised ...

Utilization of Microscale Silicon Cantilevers to Assess Cellular Contractile Function In Vitro

The development of more predictive and biologically relevant in vitro assays is predicated on the advancement of versatile cell culture systems which facilitate the functional assessment of the seeded cells. To that end, microscale cantilever technology offers a platform with which to measure the contractile functionality of a range of cell types, including skeletal, cardiac, and smooth muscle cells, through assessment of contraction induced substrate bending. Application of multiplexed cantilever arrays provides the means to develop moderate to high-throughput protocols for assessing drug efficacy and toxicity, disease phenotype and progression, as well as neuromuscular and other cell-cell interactions. This manuscript provides the details for fabricating reliable cantilever arrays for this purpose, and the methods required to successfully culture cells on these surfaces. Further description is provided on the steps necessary to perform functional analysis of contractile cell types maintained on such arrays using a novel laser and photo-detector system. The representative data provided highlights the precision and reproducible nature of the analysis of contractile function possible using this system, as well as the wide range of studies to which such technology can be applied. Successful widespread adoption of this system could provide investigators with the means to perform rapid, low cost functional studies in vitro, leading to more accurate predictions of tissue performance, disease development and response to novel therapeutic treatment.

Utilization of Microscale Silicon Cantilevers to Assess Cellular Contractile Function In Vitro

This protocol describes the use of microscale silicon cantilevers as pliable culture surfaces for measuring the contractility of muscle cells in vitro. Cellular contraction causes cantilever bending, which can be measured, recorded, and converted into readouts of force, providing a non-invasive and scalable system for measuring contractile function in vitro.

Utilização de microscópicos de silício Cantilevers para avaliar a função celular contrátil<em&gt; In Vitro</em

The development of more predictive and biologically relevant in vitro assays is predicated on the advancement of versatile cell culture systems which ...

Production, Characterization and Potential Uses of a 3D Tissue-engineered Human Esophageal Mucosal Model

The incidence of both esophageal adenocarcinoma and its precursor, Barrett&#8217;s Metaplasia, are rising rapidly in the western world. Furthermore esophageal adenocarcinoma generally has a poor prognosis, with little improvement in survival rates in recent years. These are difficult conditions to study and there has been a lack of suitable experimental platforms to investigate disorders of the esophageal mucosa.
A model of the human esophageal mucosa has been developed in the MacNeil laboratory which, unlike conventional 2D cell culture systems, recapitulates the cell-cell and cell-matrix interactions present in vivo and produces a mature, stratified epithelium similar to that of the normal human esophagus. Briefly, the model utilizes non-transformed normal primary human esophageal fibroblasts and epithelial cells grown within a porcine-derived acellular esophageal scaffold. Immunohistochemical characterization of this model by CK4, CK14, Ki67 and involucrin staining demonstrates appropriate recapitulation of the histology of the normal human esophageal mucosa.
This model provides a robust, biologically relevant experimental model of the human esophageal mucosa. It can easily be manipulated to investigate a number of research questions including the effectiveness of pharmacological agents and the impact of exposure to environmental factors such as alcohol, toxins, high temperature or gastro-esophageal refluxate components. The model also facilitates extended culture periods not achievable with conventional 2D cell culture, enabling, inter alia, the study of the impact of repeated exposure of a mature epithelium to the agent of interest for up to 20 days. Furthermore, a variety of cell lines, such as those derived from esophageal tumors or Barrett&#8217;s Metaplasia, can be incorporated into the model to investigate processes such as tumor invasion and drug responsiveness in a more biologically relevant environment.

This manuscript describes the production, characterization and potential uses of a tissue engineered 3D esophageal construct prepared from normal primary human esophageal fibroblast and squamous epithelial cells seeded within a de-cellularized porcine scaffold. The results demonstrate the formation of a mature stratified epithelium similar to the normal human esophagus.

Produção, Caracterização e usos potenciais de uma mucosa esofágica Modelo 3D Human Tissue-engenharia

The incidence of both esophageal adenocarcinoma and its precursor, Barrett&#8217;s Metaplasia, are rising rapidly in the western world. Furthermore ...

Methods for the Self-integration of Megamolecular Biopolymers on the Drying Air-LC Interface

Living organisms that use water are always prone to drying in the environment. Their activities are driven by biopolymer-based micro- and macro-structures, as seen in the cases of moving water in vascular bundles and moisturizing water in skin layers. In this study, we developed a method for assessing the effect of aqueous liquid crystalline (LC) solutions composed of biopolymers on drying. As LC biopolymers have megamolecular weight, we chose to study polysaccharides, cytoskeletal proteins, and DNA. The observation of biopolymer solutions during drying under polarized light reveals milliscale self-integration starting from the unstable air-LC interface. The dynamics of the aqueous LC biopolymer solutions can be monitored by evaporating water from a one-side-open cell. By analyzing the images taken using cross-polarized light, it is possible to recognize the spatio-temporal changes in the orientational order parameter. This method can be useful for the characterization of not only artificial materials in various fields, but also natural living tissues. We believe that it will provide an evaluation method for soft materials in the biomedical and environmental fields.

A method for the drying-induced self-integration of megamolecular biopolymers on the air-liquid crystalline interface is provided here. This methodology will be useful not only for understanding the macroscopic potentials of biopolymers, but also as an evaluation method for soft materials in biomedical and environmental fields.

Os métodos para a auto-integração da Megamolecular Biopolímeros na secagem ao ar-LC interface

Living organisms that use water are always prone to drying in the environment. Their activities are driven by biopolymer-based micro- and ...

Microhoneycomb Monoliths Prepared by the Unidirectional Freeze-drying of Cellulose Nanofiber Based Sols: Method and Extensions

Monolithic honeycomb structures have been attractive to multidisciplinary fields due to their high strength-to-weight ratio. Particularly, microhoneycomb monoliths (MHMs) with micrometer-scale channels are expected as efficient platforms for reactions and separations because of their large surface areas. Up to now, MHMs have been prepared by a unidirectional freeze-drying (UDF) method only from very limited precursors. Herein, we report a protocol from which a series of MHMs consisting of different components can be obtained. Recently, we found that cellulose nanofibers function as a distinct structure-directing agent towards the formation of MHMs through the UDF process. By mixing the cellulose nanofibers with water soluble substances which do not yield MHMs, a variety of composite MHMs can be prepared. This significantly enriches the chemical constitution of MHMs towards versatile applications.

Here, we present a general protocol to prepare a variety of microhoneycomb monoliths (MHMs) in which fluid can pass through with an extremely low pressure drop. MHMs obtained are expected to be used as filters, catalyst supports, flow-type electrodes, sensors and scaffolds for biomaterials.

Monólitos de Microhoneycomb preparados pela liofilização unidirecional de nanofibras de celulose com base Sols: método e extensões

Monolithic honeycomb structures have been attractive to multidisciplinary fields due to their high strength-to-weight ratio. Particularly, microhoneycomb ...

Measuring Global Cellular Matrix Metalloproteinase and Metabolic Activity in 3D Hydrogels

Three-dimensional (3D) cell culture systems often more closely recapitulate in vivo cellular responses and functions than traditional two-dimensional (2D) culture systems. However, measurement of cell function in 3D culture is often more challenging. Many biological assays require retrieval of cellular material which can be difficult in 3D cultures. One way to address this challenge is to develop new materials that enable measurement of cell function within the material. Here, a method is presented for measurement of cellular matrix metalloproteinase (MMP) activity in 3D hydrogels in a 96-well format. In this system, a poly(ethylene glycol) (PEG) hydrogel is functionalized with a fluorogenic MMP cleavable sensor. Cellular MMP activity is proportional to fluorescence intensity and can be measured with a standard microplate reader. Miniaturization of this assay to a 96-well format reduced the time required for experimental set up by 50% and reagent usage by 80% per condition as compared to the previous 24-well version of the assay. This assay is also compatible with other measurements of cellular function. For example, a metabolic activity assay is demonstrated here, which can be conducted simultaneously with MMP activity measurements within the same hydrogel. The assay is demonstrated with human melanoma cells encapsulated across a range of cell seeding densities to determine the appropriate encapsulation density for the working range of the assay. After 24 h of cell encapsulation, MMP and metabolic activity readouts were proportional to cell seeding density. While the assay is demonstrated here with one fluorogenic degradable substrate, the assay and methodology could be adapted for a wide variety of hydrogel systems and other fluorescent sensors. Such an assay provides a practical, efficient and easily accessible 3D culturing platform for a wide variety of applications.

Here, a protocol is presented for encapsulating and culturing cells in poly(ethylene glycol) (PEG) hydrogels functionalized with a fluorogenic matrix metalloproteinase (MMP)-degradable peptide. Cellular MMP and metabolic activity are measured directly from the hydrogel cultures using a standard microplate reader.

Medição de metaloproteinase matriz celular Global e atividade metabólica em hidrogel 3D

Three-dimensional (3D) cell culture systems often more closely recapitulate in vivo cellular responses and functions than traditional two-dimensional (2D) ...

Electric and Magnetic Field Devices for Stimulation of Biological Tissues

Electric fields (EFs) and magnetic fields (MFs) have been widely used by tissue engineering to improve cell dynamics such as proliferation, migration, differentiation, morphology, and molecular synthesis. However, variables such stimuli strength and stimulation times need to be considered when stimulating either cells, tissues or scaffolds. Given that EFs and MFs vary according to cellular response, it remains unclear how to build devices that generate adequate biophysical stimuli to stimulate biological samples. In fact, there is a lack of evidence regarding the calculation and distribution when biophysical stimuli are applied. This protocol is focused on the design and manufacture of devices to generate EFs and MFs and implementation of a computational methodology to predict biophysical stimuli distribution inside and outside of biological samples. The EF device was composed of two parallel stainless-steel electrodes located at the top and bottom of biological cultures. Electrodes were connected to an oscillator to generate voltages (50, 100, 150 and 200 Vp-p) at 60 kHz. The MF device was composed of a coil, which was energized with a transformer to generate a current (1 A) and voltage (6 V) at 60 Hz. A polymethyl methacrylate support was built to locate the biological cultures in the middle of the coil. The computational simulation elucidated the homogeneous distribution of EFs and MFs inside and outside of biological tissues. This computational model is a promising tool that can modify parameters such as voltages, frequencies, tissue morphologies, well plate types, electrodes and coil size to estimate the EFs and MFs to achieve a cellular response.

This protocol describes the step-by-step process to build both electrical and magnetic stimulators used to stimulate biological tissues. The protocol includes a guideline to simulate computationally electric and magnetic fields and manufacture of stimulator devices.

Dispositivos de campo elétrico e magnético para estimulação de tecidos biológicos

Electric fields (EFs) and magnetic fields (MFs) have been widely used by tissue engineering to improve cell dynamics such as proliferation, migration, ...

Creation of Patient-Specific Silicone Cardiac Models with Applications in Pre-surgical Plans and Hands-on Training

Three dimensional&#160;models can be a valuable tool for surgeons as they develop surgical plans and medical fellows as they learn about complex cases. In particular, 3D models can play an important role in the field of cardiology, where complex congenital heart diseases occur. While many 3D printers can provide anatomically correct and detailed models, existing 3D printing materials fail to replicate myocardial tissue properties and can be extremely costly. This protocol aims to develop a process for the creation of patient-specific models of complex congenital heart defects using a low-cost silicone that more closely matches cardiac muscle properties. With improved model fidelity, actual surgical procedural training could occur in advance of the procedure. Successful creation of cardiac models begins with the segmentation of radiologic images to generate a virtual blood pool (blood that fills the chambers of the heart) and myocardial tissue mold. The blood pool and myocardial mold are 3D printed in acrylonitrile butadiene styrene (ABS), a plastic dissolvable in acetone. The mold is assembled around the blood pool, creating a negative space simulating the myocardium. Silicone with a shore hardness of 2A is poured into the negative space and allowed to cure. The myocardial mold is removed, and the remaining silicone/blood pool model is submerged in acetone. The described process results in a physical model in which all cardiac features, including intra-cardiac defects, are represented with more realistic tissue properties and are more closely approximated than a direct 3D printing approach. The successful surgical correction of a model with a ventricular septal defect (VSD) using a GORE-TEX patch (standard surgical intervention for defect) demonstrates the utility of the method.

Patient-specific models improve surgeon and fellow confidence when developing or learning surgical plans. Three-dimensional (3D) printers generate adequate detail for surgical preparation, but fail to replicate tissue haptic fidelity. A protocol is presented detailing the creation of patient-specific, silicone cardiac models, combining 3D printing precision with simulated silicone tissue.

Criação de modelos cardíacos de silicone específicos do paciente com aplicações em planos pré-cirúrgicos e treinamento prático

Three dimensional&#160;models can be a valuable tool for surgeons as they develop surgical plans and medical fellows as they learn about complex cases. In ...

Medição e Modelagem contrátil que secam no Estrato Córneo Humano

Resumo

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Capítulos neste vídeo

Pressão Ventricular Esquerda de medição no final de Ratos embrionárias e Neonatal

CometChip: A alta taxa de transferência de plataforma 96-Bem, para avaliação dos danos causados no DNA em células Microarrayed Humanos

Quantificação da função global diastólica por análise baseada em Modelagem cinemática de transmitral fluxo através do formalismo de enchimento parametrizada diastólica

Utilização de microscópicos de silício Cantilevers para avaliar a função celular contrátil

Produção, Caracterização e usos potenciais de uma mucosa esofágica Modelo 3D Human Tissue-engenharia

Os métodos para a auto-integração da Megamolecular Biopolímeros na secagem ao ar-LC interface

Monólitos de Microhoneycomb preparados pela liofilização unidirecional de nanofibras de celulose com base Sols: método e extensões

Medição de metaloproteinase matriz celular Global e atividade metabólica em hidrogel 3D

Dispositivos de campo elétrico e magnético para estimulação de tecidos biológicos

Criação de modelos cardíacos de silicone específicos do paciente com aplicações em planos pré-cirúrgicos e treinamento prático

Medição e Modelagem contrátil que secam no Estrato Córneo Humano

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