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Este vídeo demonstra como usar um modelo pré-clínicos de baixo custo e confiável para o estudo de processos Pathobiological e fisiopatológicos da intra-stent desenvolvimento de reestenose. Longitudinal monitorização in vivo utilizando OCT (Optical Coherence Tomography) e análise de imagens de outubro também são demonstrados.
Modelos pré-clínicos de reestenose são essenciais para desvendar os processos fisiopatológicos que levam a reestenose intra-stent e otimizar existentes e futuras stents farmacológicos.
Uma variedade de anticorpos e cepas de transgênicos e knockout estão disponíveis em ratos. Conseqüentemente, um modelo de reestenose no rato seria conveniente para estudos Pathobiological ea fisiopatológicos.
Neste vídeo, apresentamos o procedimento completo e pit-quedas de um modelo de rato stent adequados para a investigação de alto rendimento stent. Nós vamos mostrar o procedimento cirúrgico de implantação do stent, ea avaliação da reestenose intra-stent utilizando a técnica mais elegante de outubro (Tomografia de Coerência Óptica). Esta técnica proporciona alta precisão na avaliação CSAs placa (áreas de seção transversal) e se correlaciona bem com cortes histológicos, que exigem técnicas especiais e tempo consumindo incorporação e de corte. Outubro de imagem ainda permite o monitoramento longitudinal do desenvolvimento da reestenose intra-stent dentro do mesmo animal em comparação com um tempo de instantâneos utilizando histologia.
Implantação de stent de aorta
Tomografia de Coerência Óptica (OCT) Imaging
Imagens outubro são obtidos com o sistema de outubro M2 imagem (LightLab Imaging, Inc., Westford, MA, EUA). ImageWire é uma sonda de imagem para fornecer a luz para o tecido e recolher os sinais. O ImageWire consiste de 0,006 "(0,15 mm) de fibra ótica do núcleo, dentro de uma bainha com um OD máximo de 0,019" (0,48 mm).
Análise de imagens outubro
Medições de outubro são realizadas utilizando o software de imagem LightLab outubro de propriedade com uma interface baseada em ratos.
Validação da técnica outubro
Resultados outubro correlaciona bem com a histopatologia (Figura 1). CSAs placa histológicos são calculados como descrito acima. Histologia revela hiperplasia intimal com alta densidade de células fusiformes e apenas poucas células mononucleares da inflamação. Após 6 semanas, os stents são completamente cobertas com tecido de granulação neointimal eo CSA placa medidas 1,3 ± 0,4 mm 2 em um stent de 2,5 mm.
Figura 1: OCT (A) e histológico (B; ampliação de 16x) imagens do stent seis semanas após a implantação. Resultados obtidos a partir de placas CSA imagens outubro correlaciona bem com histopatologia. Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada da figura 1.
Embora a artéria ilíaca coelho eo porco modelos da artéria coronária são os mais freqüentemente utilizados para a colocação de stent 1, uma combinação de equipamentos radiológicos e cirúrgico é necessário, a capacidade de alojamento dos animais é limitada, e os custos de aquisição são elevados. Limitações do modelo de ratos stent é necessário o uso de stents projetado especificamente para ratos, a relação de metal para artéria, resultando em lesão vascular mais dois, ea incidência de trombose artificialmente elevado 3.
O modelo de implante de stent rato é um modelo de 4 simples, barata, rápida e precisa pré-clínicos. Após o relatório inicial de implante direto do stent da aorta de ratos por Lowe et al. 5 de viabilidade e adequação deste modelo para a avaliação da fisiopatologia da reestenose intra-stent foi exaustivamente demonstrado 5,6. O diâmetro da aorta de ratos é adequada para permitir a expansão de stents comercialmente disponíveis, sem interrupção da arquitetura navio fisiológico. Tem sido demonstrado que os mecanismos fisiopatológicos, tais como a formação de trombos, inflamação e proliferação SMC, desenvolver nestes modelos de ratos como o fazem no coelho e porco. Portanto, esses modelos são representações bem do próprio processo de reestenose.
A outubro de alta resolução tecnologia de imagem é útil para avaliar a hiperplasia intimal. A profundidade de penetração é apenas 1,5-2 milímetros, mas sua resolução é uma ordem de magnitude maior do que a ultra-sonografia intravascular (IVUS) 7,8. Vários estudos comparando com outubro IVUS concluir que outubro é atualmente a técnica preferida para avaliar hiperplasia neointimal após implante de stent 80-10. Especialmente em animais de pequeno porte, com diâmetros de pequenos vasos, a alta resolução de outubro torna a modalidade melhor imagem para a avaliação de reestenose.
Em resumo, este vídeo mostra que (1) implante de stent de aorta de ratos é facilmente viável, (2) de ratos stent aorta abdominal é adequado para testes stents comercialmente fabricados e (3) outubro de imagens é uma técnica precisa e elegante para acompanhamento longitudinal de intra-stent reestenose.
Todos os ratos foram alojados nas instalações de cuidados de animais em Stanford University Medical Center (Stanford, Ca), sob condições normais de temperatura, umidade e condições de iluminação, e receberam ração e água ad libitum. A investigação conformados com o Guia para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório publicado pelo National Institutes of Health EUA (NIH Publication No. 85-23, revista em 1996). O protocolo do estudo foi aprovado pela Junta Administrativa de Laboratório Animal Care, Stanford University.
Financiamento
O presente estudo foi apoiado pelo Fundo de Investigação Falk para o Departamento de Cirurgia Cardiotorácica da Universidade de Stanford School of Medicine, Stanford, CA, EUA. Tobias Deuse foi financiado por uma bolsa de pesquisa da Sociedade Alemã Cardíaca. Sonja Schrepfer recebeu uma bolsa de pesquisa do Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992/2-1).
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