이 기술은 격리 화학에서 천연 제품 추출을 위한 본질적으로 실용적이고 효율적인 전략을 나타냅니다. 그리고 우리는 그것이 유용하고 무료 추출 도구라고 생각합니다. 이것은 급속한 흐름 과정이기 때문에, 추출물은 단기간 동안만 가열되고 종종 정화를 복잡하게 하는 난치성 식물 안료의 추출이 최소화된다.
우리는 이 기술이 자연에서 귀중한 분자를 찾는 바이오 프로스펙팅을 촉진하여 약용 화학 뿐만 아니라 화학 요법 샘플링을 가능하게 하는 데 적합하다고 생각합니다. 이 방법의 시각적 데모는 추출 단계의 샘플 준비가 시각적으로 가장 효과적으로 설명되기 때문에 중요합니다. 이것은 또한 추출의 단순성과 학부 실험실 환경에서의 적절한 사용을 강화합니다.
굵은 갈은 정향 12.5 그램을 250 밀리리터 비커에 넣습니다. 12.5 그램의 모래를 넣고 잘 섞습니다. 다음으로, portafilter를 수집하고 전체 정향과 모래 혼합물바구니를로드합니다.
변조를 사용하여 샘플을 가볍게 압축하여 유체가 흐르지 않도록 너무 많이 압축하지 않도록 합니다. 포르타필터를 에스프레소 기계에 적재하고 250밀리리터 비커를 아래에 놓습니다. 물 탱크에 물에 30 %의 에탄올이 들어있는 용액을 추가하십시오.
에스프레소 기계를 사용하여 추출물 100밀리리터를 수집합니다. 포르타필터가 떨어지는 것을 끝낸 다음 에스프레소 머신에서 제거합니다. 주걱을 사용하여 포타필터에서 정향 분쇄기를 제거하고 고체 폐기물 용기에 버리십시오.
싱크대에 수돗물로 잔류 고형물을 헹구는 다. 정향 추출물이 들어 있는 비커를 얼음 욕조로 옮기고 온도가 섭씨 30도 이상으로 감소할 때까지 식힙니다. 연기 후드에 냉각 된 추출물을 250 밀리리터 분리 깔때기에 붓습니다.
헥산 30밀리리터를 넣고 부드럽게 흔들어 섞습니다. 분리 재포널을 레토르트 스탠드에 장착하고 수성 및 유기 층이 분리되도록 하는 링 클램프에 배치합니다. 레이어를 분리하는 데 최대 10분이 걸릴 수 있으므로 기다리는 동안 TCC의 용매 최적화를 수행하는 것이 좋습니다.
수성 층을 다시 250 밀리리터 비커로 수집합니다. 제품을 포함하는 유기층을 깨끗한 250 밀리리터 원추형 플라스크로 옮기십시오. 그런 다음 수성 얼굴 팩을 분리 깔때기에 붓습니다.
수성 층을 헥산으로 2회 추가로 추출합니다. 매번 30 밀리리터의 헥산을 사용하소서. 유기 층을 각 추출 후 동일한 250 밀리리터 원추형 플라스크에 결합합니다.
세 번째 액체 추출 후 결합된 유기 추출물을 분리 깔때기에 붓습니다. 100 밀리리터의 물을 추가하고 힘차게 흔들어 유기농 추출물을 씻어내라. 유기농 층을 깨끗한 250 밀리리터 원추형 플라스크로 수집합니다.
그리고 황산 마그네슘을 추가하고 소용돌이를 추가하여 건조시다. 유리 깔때기에 들어있는 플루트 필터 용지를 통해 말린 혼합물을 둥근 바닥 플라스크로 필터링합니다. 회전 증발기는 수집된 여과에서 용매를 증발시다.
그런 다음 결과 오일을 포함하는 플라스크의 무게를 측정합니다. 추출물을 함유한 원유 유게놀을 포함하는 둥근 바닥 플라스크에 헥산 10밀리리터를 넣습니다. 결과용 액을 250밀리리터 분리 깔때기에 붓습니다.
둥근 바닥 플라스크를 육산 10 밀리리터의 헥산으로 헹구고 이를 분리 깔때기에 추가합니다. 액체 추출을 통해 3개의 어금다 수성 나트륨을 통해 헥산 용액을 두 번 추출합니다. 각 추출에 대해 25 밀리리터의 수산화 나트륨을 사용하십시오.
각 추출에서 수성 층을 수집하고 250 밀리리터 원추형 플라스크에 결합합니다. 50 밀리리터 원추형 플라스크에서 유기 층을 수집합니다. 그런 다음 플라스크에 황산 마그네슘을 추가하고 소용돌이시켜 말리십시오.
유리 깔때기에 포함된 플루트 필터 용지를 통해 솔루션을 미리 계량된 100 밀리리터 라운드 하단 플라스크로 필터링합니다. 고체 잔류물을 버린 다음 회전 증발기를 사용하여 용매를 제거합니다. 이 후 지금 상단 팬 균형에 결과 오일을 포함하는 둥근 바닥 플라스크의 무게.
다음으로 결합된 수성 층을 포함하는 원추형 플라스크를 얼음 수조에 넣습니다. 흰 에멀젼이 형성될 때까지 10개의 해자를 천천히 추가하면서 플라스크를 소용돌이치십시오. 파이펫을 사용하여 이 솔루션 한 방울을 콩고 붉은 종이에 전달하여 산도를 테스트합니다.
용지가 파란색으로 바뀌어야 합니다. 이 후 밀키 수성 에멀젼을 플라스크를 분리하는 250 밀리리터로 옮기. 에멀젼이 실온에 있는지 확인한 다음 추출당 30밀리리터의 헥산리터를 사용하여 액체 추출을 두 번 수행하십시오.
두 헥산 추출물을 깨끗한 100 밀리리터 원추형 플라스크에 결합합니다. 황산 마그네슘을 추가하여 용액을 건조시다. 유리 깔때기에 포함된 플루트 필터 용지를 통해 솔루션을 미리 계량된 100 밀리리터 라운드 하단 플라스크로 필터링합니다.
그런 다음 회전 증발기를 사용하여 용매를 제거합니다. 이 후 지금 상단 팬 균형에 결과 오일을 포함하는 둥근 바닥 플라스크의 무게. 전기 향신료 분쇄기를 사용하여 코레아 반사의 10 그램을 20 ~ 30 초 동안 분쇄합니다.
지상 식물 재료를 250 밀리리터 비커로 옮기. 약 2그램의 거친 모래를 넣습니다. 모래와 식물 재료를 함께 섞은 다음 포르타필터 바구니에 옮습니다.
변조를 사용하여 샘플을 가볍게 압축하여 너무 많이 압축하지 않도록 합니다. 에스프레소 기계 탱크에 물에 35 %의 에탄올의 약 300 밀리리터를 추가합니다. 포르타필터를 에스프레소 기계에 적재하고 250밀리리터 비커를 아래에 놓습니다.
그런 다음 약 100 밀리리터의 추출물을 수집합니다. 약 1 분 동안 기다린 다음 추출물의 또 다른 100 밀리리터를 수집합니다. 이 혼합물을 얼음 욕조로 옮기고 식힙니다.
에탄올을 증발시키기 위해 수조 온도가 섭씨 40도인 회전 증발기를 사용하십시오. 다음으로 수성 추출물을 분리 깔때기로 옮기다. 추출당 50밀리리터의 에틸 아세테이트를 사용하여 에틸 아세테이트로 용액을 두 번 추출합니다.
유기농 추출물을 결합합니다. 황산 마그네슘을 넣고 플라스크를 소용돌이어 용액을 건조시다. 그런 다음 중앙 유리 깔때기를 사용하여 용액을 필터링하고 회전 증발기를 사용하여 원유 추출물을 얻습니다.
이 절차에서 학생들은 아세톤과 사이클로헥산의 TLC 용매 비율을 할당하고 유게놀과 아세틸 -eugenol의 순수한 기준을 제공합니다. TLC 분석이 수행되고 용매 조성이 보존 계수에 미치는 영향이 고려된다. 최적 용매 조성물은 전형적으로 5~20% 아세톤 사이클로헥산 사이의 범위로 볼 수 있다.
델타 보존 계수0.1 ~ 0.2. 두 가지 주요 유기 분자의 다른 산 기반 특성은 액체 액체 추출에 의해 분리하기 위해 악용됩니다. 일반적으로 eugenol은 원유 추출물의 45~65%의 수율로 격리되었으며 아세틸-유게놀은 5~10%의 수율로 격리되었다.
그런 다음 학생들은 최적화된 용출제를 사용하여 추출물을 TLC의 순수 기준 샘플과 비교하여 액체 액체 추출의 성공을 결정했습니다. 그런 다음 고급 학생들은 고립된 원유의 절반을 섬광 열 크로마토그래피를 주제로 합니다. 아세틸-유게놀에서 유게놀의 완전한 분리는 거의 그들의 가까운 보존 요인으로 인해 달성되지 않지만, 순수한 eugenol을 포함하는 몇몇 분획은 일반적으로 수집됩니다.
이 절차에 따라 핵 자기 공명 분광법 및 가스 크로마토그래피 질량 분광과 같은 방법은 격리 된 화합물을 특징으로 수행 할 수 있습니다. 뜨거운 액체, 상대적으로 높은 압력 및 부식성 액체로 작업하는 것은 위험할 수 있으므로 개인 보호 장비를 착용하는 것과 같은 예방 조치를 취해야합니다.
