이 문서는 IGA/FT/2017/007 Zlin에서 토마스 Bata 대학 프로젝트의 지원으로 작성 되었습니다.

자원 봉사자는 직원 들과 우리 대학 학생 들 모집 했다. 선택 하는 방법에 따라 실시 되었다 "생명에 대 한 국제 윤리 가이드라인 연구 관계 인간의 과목. 의료 과학, 제네바 (2002 년)의 국제 조직 위원회. " KH 헤어 케어 제품 (샴푸, 컨디셔너, 등)에 사용 되는 일반적인 화장품 성분 이며 따라서 제도적 검토 위원회에서 승인이 필요 하지 않습니다.
1. 프로세스 닭 깃털 KH로
<ol><li>가 금 농장에서 닭 깃털을 수집 합니다.</li>
	<li>불용 성 불순물 및 혈액 잔재 물 (냉) 실행의 충분 한 과잉을 가진 닭 깃털에서 세척 한다. 플랫 플레이트에 깃털을 놓고 50 ° c.에 하룻밤 건조 참고: 프로토콜 수 수 일시 중지 여기.</li>
	<li>또는 최종 입도의 1.0 m m.에 (보통 하드 부드러운 샘플 자료, 및 섬유 재료에 대 한 적합 한) 가공 공장에서 50 g 건조 깃털을 갈기, 더 높은, 하지만 이상 3.0 m m grinded 깃털의 마지막 순수 수 있습니다. 참고: 프로토콜 수 수 일시 중지 여기.</li>
	<li>
깃털을 탈지 하십시오 참고: 가금류 깃털 탈지의 가장 효과적이 고 경제적인 방법 상업 lipolytic 효소를 사용 합니다.<ol>
<li>스테인리스 스틸에서 27 L 보일 러 온도 조절 컨테이너 믹스 물 40 ± 2 ° C에 무게 비율 했다 1: 75까지 preheated 깃털. 추가 lipolytic 효소 (활동 100 KLU/g) 1.5-2.0% (건조 깃털 무게에 관련 된) 하 고 부드럽게 복용량에 5 분에 대 한 오버 헤드 교 반기와 내용을 저 어.</li>
		<li>혼합물 pH 9.0 ± 0.2, lipolytic 효소의 최대 활동 1 %NaOH 또는 1% H3포4 솔루션을 추가 하 여 해당 값을 조정 합니다. 오버 헤드 교 반기로 5 분을 위한 혼합물을 저 어 다음 확인 하 고 다시 실험실 벤치 pH/mV 미터를 사용 하 여 pH 레벨을 조정.</li>
		<li>부드럽게 40 ±에서 24 h에 대 한 오버 헤드 교 반기와 혼합물을 저 어 0.5 ° c. 또는 40 ± 0.5 ° C에 혼합물을 품 어 하 고 외피의 첫 번째 6 h 동안 1 시간 간격으로 콘텐츠를 저 어.</li>
		<li>잘 체 (100 µ m 크기)을 통해 혼합물을 필터링 하 고 민물 (감기) 실행의 흐름을 탈지 깃털을 씻어. 하룻밤 건조 실에서 50 ° C에서 플랫 플레이트에 깃털을 건조. 참고: 프로토콜 수 수 일시 중지 여기.</li>
	</ol>
</li>
	<li>닭 깃털 가수분해의 첫 번째 단계를 수행 합니다. 무게 비율 1시 50분에 0.3% 코 물 솔루션 깃털을 혼합 하 고 60 ± 0.5 ° C 24 시간에 오버 헤드 교 반기와 부드럽게 저 어. 혼합물의 pH는 외피의 시작에서 약 12.5에서 외피의 끝에 약 11.0 감소합니다. 가수분해의 첫 번째 단계를 완료 한 후 해당 분해 효소의 최대 활동 하 1%를 추가 하 여 (이 경우에에 9.0 ± 0.2) 10% H3포4 단계로 혼합물의 pH 조정 NaOH.</li>
	<li>닭 깃털 가수분해의 두 번째 단계를 수행 합니다. 5.0% (깃털 무게-가수분해의 첫 번째 단계의 시작 부분에서의 수량의 건조 문제에 관련 된)의 복용량에 분해 효소 혼합물에 추가 합니다. 부드럽게 60 ± 0.5 ° C 8 h에서 오버 헤드 교 반기로 저 어 고 비등 점 (100 ° C)에 (동일한 스테인리스 27 L 보일 러 컨테이너)에 혼합물을가 열 그리고 효소 비활성화를 10 분 동안 삶아.</li>
	<li>약간의 진공 압력; 부 흐 너 깔때기에 저밀도 필터 종이 통해 필터링 하 여 소화 잔재에서 KH (준비 단계 1.6에서에서)의 솔루션을 분리 또는, 원심 분리기를 사용 하 여. 참고: 프로토콜 일시 중지할 수 있습니다 여기 몇 일 동안 KH의 솔루션 5 ±에 저장 하는 경우 1 ° c.</li>
	<li>플라스틱 양동이 (26 cm 직경 x 26 cm 높이)에서 12 K MWCO 막 작은 펩 티 드 및 소금 제거를 사용 하 여 KH dialyze. 투 석 배관에 KH 솔루션의 400 mL와 증류수 실내 온도;에 80 h의 4 L에 대 한 dialyze 18, 36, 및 60 h 후에 증류수를 변경 합니다.</li>
	<li>에 방지 접착제 (예, 실리콘) KH의 dialyzed 솔루션 500ml 1000 cm2 접시 영역, 진공 건조 40 ± 0.5 ° C에서 박막에 하룻밤, 정밀한 분말 형태로 분쇄 한 desiccator에서 닫힌된 용기에 그것을 유지의 비율에 캐스팅. 참고: 프로토콜 수 수 일시 중지 여기 몇 달 동안 KH 분말 건조 한 장소에 저장 하는 경우.</li>
</ol>2. 준비 KH와 화장품 제형
참고: 테스트를 위해 사용 하는 산부인과 상업 친수성 O/W 크림 베이스 이었고, 아쿠아, 파라핀, 파라핀 액체, cetearyl 알코올, Laureth 4, 수산화 나트륨, carbomer, methylparaben, 및 propylparaben의 구성.
<ol><li>2, 4, 및 6%를 포함 하는 공식 준비 (연 고의 기본 무게) 따라 KH. 폴 리 에틸렌 용기 (7 cm 직경 x 10 cm 높이)에 KH 분말의 양을 무게와 배합의 총 무게를 보장 하는 금액에 산부인과 50 g; 추가 표 1제조 법을 참조 하십시오.</li>
</ol><table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>화장품 배합</td>
			<td colspan="3">기본 연 고 [g]의 무게</td>
			<td colspan="3">각 질의 [g]의 무게</td>
			<td colspan="2">총 중량 [g]</td>
		</tr>
<tr>
<td>기본 연 고</td>
			<td colspan="3">50</td>
			<td colspan="3">0</td>
			<td colspan="2" rowspan="4">50</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 2% KH</td>
			<td colspan="3">49</td>
			<td colspan="3">1</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 4% KH</td>
			<td colspan="3">48</td>
			<td colspan="3">2</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 6% KH</td>
			<td colspan="3">47</td>
			<td colspan="3">3</td>
		</tr>
</tbody></table>표 1: 무게에서 양의 연 고 기지와 각 질의 화장품 제형을 준비 하.
<ol start="2"><li>134.16 x g에서 10 분 동안 3 bladed 실험실 블렌더로 혼합 균질 하 고 기계적인 오버 헤드 교 반기를 사용 하 여 혼합. 준비 공식 5 ± 1 ° C에서 유지 하 고 사용 전에 h 2에 대 한 실내 온도에 그들을 따뜻한. 참고: 뿐만 아니라 비 디지털 활동가 함께 할 수 있습니다 KH와 OB의 혼합 조직. 비 디지털 교 반기에 있다는 대략적인 속도 (rpm)와 비늘 뿐. 잔잔한 감동이이 단계에 대 한 최고의 작동 합니다. 참고: 프로토콜 일시 중지할 수 있습니다 여기까지 5 개월에 대 한 공식은 5 ±에 저장 된 경우 1 ° c.</li>
</ol>3. 피부 수 분 측정, TEWL, pH에 의해 KH의 속성 테스트
참고: 23 ± 2 ° C에서 에어컨된 룸과 56 ± 3%의 상대 습도에서 모든 측정을 수행 합니다.
<ol><li>장소 5 필터 종이의 스트립 (2 x 4 c m 크기) 생리 적인 솔루션으로 (0.90 %NaCl) 솔루션에서 약 1 분 동안 그들을 떠나.</li>
	<li>오른쪽 팔 뚝과 왼쪽된 팔 뚝의 안쪽에 3의 안쪽에 두 개의 스트립을 적용 하 고 접착제 접착 테이프와 함께 4 h에 대 한 수정. 이 단계는 피부 탈지를 가져올 사이트에 피부의 개별 특성을 제거 하는. 4 h 후 스트립을 제거 하 고 영구 펜 영역을 덴마크의 그림 1참조.</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56254/56254fig1.jpg"> 그림 1: 왼쪽 및 오른쪽 위 사지의 팔 뚝에 테스트 공식의 위치에 대 한 방법. <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56254/56254fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<ol start="3"><li>0.1 mL 주사기를 사용 하 여 탈지 팔 뚝 사이트의 각 자리에 테스트 공식의 적용 하 고 표시 된 표면 전체에 걸쳐. 왼쪽된 팔 뚝에 하지 (그것은 컨트롤) 첫 번째 사이트에 아무것도 적용, 적용 하는 두 번째 사이트에 산부인과 및 산부인과 + 2 %KH 세 번째. 적용 산부인과 + 4 %KH 산부인과 + 6% 오른 팔에 KH.</li>
	<li>각 사이트 및 각 간격 (1, 2, 3, 4, 24, 및 48 h)에서 각 샘플을 측정 하 고 피부 수 분, 피부 TEWL, TEWL 측정기 프로브 15 판독 및 피부 pH의 피부 pH 미터 프로브 읽기 1 피부 수 분 측정기 프로브 5 수치를가지고. 자원 봉사자; 테스트 기간 동안 테스트 사이트와 주변 지역 모든 화장품 제품을 적용 하는 허용 하지 않습니다 그들은 간단한 저녁 세척 물 실행이 허용 됩니다. 참고: 프로토콜 수 수 일시 중지 여기.</li>
	<li>스프레드시트 소프트웨어를 사용 하 여 기술 통계의 기본 숫자 특성에 의해 결과 판독을 처리 합니다. 5 수 화 읽기 각 샘플에 대 한 측정에서 가장 낮은 높은 수치를 무시 하 고 계산 하는 산술 평균 및 표준 편차에 대 한 신호는 3. 15 TEWL 읽기 각 샘플에 대 한 측정에서 첫 번째 5을 무시 하 고 계산 하는 산술 평균 및 표준 편차에 대 한 10 읽기.</li>
</ol>

<ol>
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저자는 공개 없다.

알칼리 성 효소 가수분해의 장점은 KH의 미래 응용 프로그램에 따라 수정할 수 있습니다. 예를 들어 제품의 가볍게 갈색 색상은 장애물이 되지 않습니다-헤어케어 화장품 응용 프로그램에서 더 높은 온도 가수분해에 적용할 수 있습니다 KH의 높은 수익률을 선도. 또한, 기술 절차의 두 단계 더 긴 처리 시간이 크게 영향을 미치는 전체 프로세스 효율성-KH의 수익률 85%로 상승.
수 분 측정 결과 측정 (1-48 h), 2%의 추가 모니터링된 간격 동안 산부인과를 KH는 최적의 이후 발생 11 19% 증가 사우스 캐롤라이나 수 화에서 남자 자원 봉사자, 그리고 12-22%의 증가 대 한 여성 자원 봉사자에 대 한 분명 하 게. KH 추가 된 분자량의 광범위 한 분포를가지고 있습니다. 하는 것이 좋습니다 낮은 분자-무게 분수의 일부 (MW < 20 kDa) 피부에 응용 프로그램을 다음 표 피를 침투. KH 보충 배합 후 피부 증가 수 화 KH 분자와 물 사이 H-브리지의 형성으로 이어지는 SC의 구조에 더 낮은 표 피 층에서 KH 바인딩 물을 통해 설명 된다. 활동의이 기계 장치는 또한 일부 작가30에 의해 수용 됩니다. KH의 보습 효과 기존의 moisturizers (예를 들어, 글리세롤, 요소과 히 알루 론 산) 유제에서 테스트 되었습니다와 공식22를 젤에 대등할.
TEWL 측정 측정 (1-48 h) 남성 자원 봉사자의 관찰에 KH 보충으로 모든 공식 신청 후 거절 TEWL 발생 강조 표시 합니다. 산부인과에 KH의 2% 추가 TEWL 순수 산부인과 비해 11 월 23 일 %의 감소를 발생 산부인과 4%로 보충 되었다 때 KH, TEWL 28-47%; 반면 KH 6%에 대 한 그것은 31-54% 감소. 최고의 옵션을 4 %KH 나타냅니다와 산부인과 보충 하는 것 사우스 캐롤라이나 TEWL 24-44% 감소 여성 자원 봉사자에 대 한 KH 보충 정립 위한 상당히 낮은 TEWL KH는 표 피에 적용 한 번 보호 막을 형성 함으로써 표 피 물 손실을 방지의 높은 분자 무게 분수의 과정에 의해 설명 수 있습니다. 사실, TEWL에 KH의 매우 긍정적인 효과 비교 또는 초과 하더라도, 비교, 위해 TEWL 화장 젤에 대 한 기록 또는 글리세롤의 5-10%와 1-5 %sericin 보충 하는 유화 액의 값. 마찬가지로, 기존의 미네랄 오일과 KH를 비교할 때 KH 약 25-3031여 TEWL을 감소. 또한, KH의 장벽 속성은 요소와 히 알루 론 산22에 대 한 예를 들어 그 보다 더 나은.
피부 표면의 pH:
참고로, pH 3.5에서 4.3 산 성 피부 표면, pH 4.4에서 5.5는이 점에서 중립 이며 pH 5.6 6.5 기본 피부 표면32를 나타냅니다. 우리는 중요 한 변경 테스트 공식의 모든 퍼 팅 후 피부 표면의 pH에서 관찰 되었다 발견 (산부인과 + 2, 4, 및 6 %KH); 4.6-5.0 (남자 지원자), 그리고 5.4에 4.9 (여성 자원 봉사자)의 pH는 정상 피부 표면에 해당합니다. 장기 분석 (2 일 이상) 하지 달성 되었다.
수정 및 문제 해결:
KH로 닭 깃털의 처리 매우 쉽습니다, 그리고 온화한 온도 대기압에서 실행 됩니다. 프로세스는 호의 파일럿 플랜트 규모를 실험실 규모와 산업 규모에서 변환할 수 있습니다. 제 2는 프로토콜은 KH (O/W) 에멀젼을 기본으로 균질 이다, 일부 수정 가능 하다. 산업에서 연습, O/W 및 W/O 유화 액 혼합 하 여 준비 물 (W) 위상 (물 + 화장품 성분 물에 용 해) 및 오일 (O) (오일 + 화장품 성분 오일에 용 해). KH 물, 수용 성 이므로 시스템의 물 단계에 직접 혼합에 유리한입니다.
기술의 한계:
각 자리 수 분 측정 및 TEWL 망치로 압력의 지역화는 비싼 피부 수 분 측정기로 측정 됩니다.
프로토콜 내에서 중요 한 단계는 주로 제 3에 있습니다. 건강 상태, 개인 차, 흡연/비 흡연, 성별, 나이 차이, 생리, 및 정신 상태 측정 피부 수 화와 TEWL을 좌우할 수 있다. 대표적인 결과 취득, 같은 사람 팔 뚝과 측정 수 화와 TEWL 값 테스트 공식을 적용 해야 합니다. 안정적인 온도와 상대 습도 조절된 실에서 모든 측정 수행에 필수적입니다. 24 및 48 h의 간격 값을 측정 시 측정 전에 적어도 30 분 동안 에어컨된 룸에서 자원 봉사자의 순응이 필요 합니다.

Slaughterhouses, 식품 산업 및 선탠 산업 매년 엄청난 양의 단단한 각 질 부산물-울, 깃털, bristles, 발 굽, 발톱, 뿔, 그리고 같은 생산. 최신 통계 자료에 따르면 닭, 칠면조, 오리, 및 미국에서 다른 학살된 가금류의 총 라이브 무게는 62.5 십억 파운드 당 년1; 유럽에서는 연간 약 28.7 십억 파운드입니다. 깃털 전체 가금류 무게의 최대 8.5%를 고려 하면, 미국 혼자 매년 약 5.3 십억 파운드 폐기물 깃털2의 생성 합니다.
각 질 때문에 강력 하 게 어려운 그것의 처리를 렌더링 하는 이황화 다리와 교차 연결 된 높은 화학적 저항을 전시 하는 단백질 이다. 수용 성 제품을 얻는 크로스 링크를 고착 하 고 아마도 수 분해 펩 티 드 결합3의 필요 합니다. 이황화 다리의 분열 다음 패턴4,5에 따르면 thiol 음이온의 반응을 통해 진행할 수 있습니다.
S는는- +-SbSc-↔-Sb- +-S는는Sc-
매우 높은 pH 수준의 이황화 다리의 가수분해도 나타납니다, 패턴6 에 따라
-SS- + 오- →-S- -SOH
온화한 조건 (pH 약 8)도 sulfitolysis 일어난 다음 패턴에 따라:
-SS-+ HSO3- →-SH +-SSO3-
각 질을 저하의 가장 경제적인 방법은 미생물 분석, 처리 및 분석 효율 (약 90%)7,8동안 온화한 반응 조건에 의해 특징입니다. Keratinases 토양 및 각 질 폐기물9에서 격리 하는 일부 박테리아에 의해 생산 됩니다. 미생물 keratinases은 견고 하 고 강력 하 게 상호 연결 된 각 질 구조10 및 준비 결과 KH는 수용 성 단백질, 필수 아미노산에 감지에 손실 없이 풍부한11.
화장품 준비 (예를들면, 유화 제, 로션, 그리고 젤)에 단백질 통합 요구 사항을 보장 같은 단백질은 물에 용 해, 주어진된 시스템은 투명 한, 그리고는 펩 티 드의 그 재 집계로 인해 피해 소수 성 상호 작용입니다. 따라서, 일반적인 단백질 hydrolyzed 콜라겐, 엘라 스 틴, 각 질 등의 hydrolysates 적용 됩니다. 화장품 유화 액에 hydrolysates를 추가, 단계는의 처음 물에 용 해 되도록 상태가 됩니다. 경우에 따라 그것은 단백질 (또는 고의)은 알코올 이나 다른 유기 용 제12에 녹는 바람직합니다.
KH는 샴푸, 컨디셔너, 로션, 그리고 영양 세럼, 머리 뿐 아니라 mascaras, 매니큐어, 눈 화장 에이전트 및 일반적으로 특징 이다. 일반적으로 선언 하는 KH 효과 머리를 부드럽게 보호 막을 형성 또는 구조, 발달 된 소성 및 치료 형성, 제품의 일관성을 통제 하 고 거품13 의 형성을 격려의 모양을 못합니다 , 14. 또한 보였다 KH 감소 표면 장력, 따라서 보충 화장품에서 크림 안정화에 추가 하는 유화 제 양을 감소를 촉진할 수 있다. KH 제한 청소 요원 (계면)에 의해 발생 하는 자극의 효과 피부, 눈, 머리카락, 조직 (예, 피부, 경도, 고의 감소 장벽 기능의 탈수에 대리인을 청소의 어떤 잠재적인 부작용 감소 피부)입니다. Hydrolysates의 높은 완충 능력은 또한 화장품;의 pH를 안정 시키기 위해 악용 펩 티 드의 짧은 길이 큰 버퍼링 효과15,16. KHs 머리와 손톱 화장품으로 피부 관리를 위한 제품에 널리 사용 되 고 있는 표준 구성으로 설립 되 고, 비록 KH의 보습 효과 대 한 연구는 현대 문학에 표시 되지 않습니다.
알칼리 성 효소 기술 KH로 각 질 부산물을 처리 하기 위해 개발 되었습니다 및 화장품 첨가제17,18,,1920 수의 효과 대 한 프로세스는 활성 테스트 , 21 , 22. 닭 깃털에 대 한 미생물 프로 테아 제를 사용 하 여 2 단계 알칼리 성 효소 가수분해의 장점은 온화한 반응 조건에서 높은 효율을 달성 하 고 KH의 질은 강한 산에 가수분해 달리 매우 높은 또는 알칼리입니다. 첫 번째 단계에서 깃털은 알을 품는 부분적으로 각 질 구조를 방해 하 고 깃털; 부는 알칼리 성 환경에서 더 높은 온도에서 pH를 조정 후 깃털 두 번째 단계에서 온화한 조건 하에서 분해 효소로 분해 됩니다. Dialyzed KH 높은 콘텐츠의 단백질을가지고 있다.
여기에 설명 된 방법의 목적 가금류 깃털 KH 알칼리 성 효소 가수분해를 통해 처리 되며 O/W 유화 액 화장품에 적용 하는 KH의 보습의 효과 테스트. 보습 속성 vivo에서경 음악 비-침략 적 방법에 의해 조사 됩니다. SC의 피부 보습 및 장벽 기능을 측정 하기 위한 가장 빈번한 방법 피부 (전도성 또는 커패시턴스)의 전기적 특성 측정 포함 됩니다. 사우스 캐롤라이나 수 화 조사에 대 한 다른 방법은 적외선 multispectral 상상 방법 (님), 핵 자기 공명 분광학, 광학 일관성 단층 촬영, 또는 과도 열 전사23근처 포함 합니다. SC의 장벽 기능 SC TEWL에 연결 하 고 통풍이 챔버 방법, unventilated 챔버 방법 및 오픈 챔버 방법24에 의해 측정 된다.
모델 정립의 속성은 세 가지 유형의 프로브와 멀티 프로브 어댑터 MPA 5를 사용 하 여 결정 됩니다. 첫 번째, corneometer CM 825, 피부 표면;의 전기 용량에 변화를 평가 하 여 조치 피부 수 분 측정 커패시터 corneometric 단위로 피부 표면의 커패시턴스의 변화를 보여줍니다. corneometer 피부 수 화25만 상대 평가 제공합니다. TEWL에 대 한 두 번째 프로브, tewameter TM 300은 간접적으로 사용 피부에서 물이 증발 (Fick의 확산 법칙에 따라 오픈 챔버 악기)에서 밀도 그라디언트를 측정 하기 위한 센서 (온도, 상대습도)의 2 개 쌍에 의해 정의 된 영역 및 기간 (g/m2/h) 당 수송 되 고 물의 수량을 나타내는. 이 방법은 피부 장벽 기능26의 사소한 장애도 감지할 수 있습니다. 피부 pH의 배리어 이며 SC27의 항균 기능. 피부 맨 틀의 산 성도 (3) 피부 PH 905 프로브 MPA 5 역에 연결 하 여 측정 했다. 전체 피부 접촉, 평면 장식 유리 전극의 구성이 특별히 설계 된 프로브는 전압계에 연결. 시스템 측정 프로브 맨 반 고체 형태의 매우 얇은 레이어를 둘러싼 수소 양이온의 활동으로 인해 잠재적인 변화를 측정 합니다. 전압의 변화는 pH28로 표시 됩니다.
우리 세 부분으로 나누어 실험을 제시: (1) 준비의 KH 치킨에서 깃털 2 단계 알칼리 성 효소 가수분해와 그것의 정화 투 석 (염과 저 분자 분수)를 제거 하 여 화장품의 준비 (2) 2, 4, 및 6%를 포함 하는 공식 KH, 그리고 (3) 테스트 KH의 속성을 측정 하 여 수 화, TEWL, 피부 및 피부 pH. 테스트 실행 되었다 27.2 년의 평균 연령 가진 10 여자와 26.2 년의 평균 연령 가진 10 남자. 자원 봉사자 및 자체 테스트를 선택 하는 방법은 인간의 과목29;를 활용 하 여 바이오 의료 연구의 국제 윤리 원칙에 따라 실시 했다 모든 사람은 연구에 포함 하기 전에 그들의 동의 주었다. 개시 하기 전에, 자원 봉사자는 그들의 건강 상태에 대 한 설문 조사를 완료 하도록 요청 했다. 하기 전에 24 시간 동안 및 시험 기간; 테스트 사이트와 주변 지역에 모든 화장품 제품을 적용 하지 않도록 하기 위해 노력 자원 봉사자 또한, 그들은 물과 간단한 저녁 세척을 허용 했다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Material or chemicals</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LIPEX 100T</td>
			<td>Novozymes</td>
			<td>LJP30020</td>
			<td>Lipex - enzyme produced by submerged fermentation of a genetically-modified microorganism, activity 100 KLU/g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Savinase Ultra 16L</td>
			<td>Novozymes</td>
			<td>PXN40001</td>
			<td>Savinase - enzyme produced by submerged fermentation of a genetically-modified microorganism, activity 16 KNPU-S/g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium hydroxide, KOH</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>302510289</td>
			<td>Potassium hydroxide, KOH, 97,0 %, Mr 56,11</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphoric acid solution, H3PO4</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>W290017</td>
			<td>Phosphoric acid solution, H3PO4, 85 wt. % concentration in water, Mr 98,00</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride physiological solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>52455</td>
			<td>Tablets of BioUltra NaCl physiological solution; 1 tablet in 1000 mL of water yields 0.9 % NaCl</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide, NaOH</td>
			<td>Penta s.r.o.</td>
			<td>40216</td>
			<td>Sodium hydroxide, NaOH, 97,0 %, Mr 40,00</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AmiFarm (Cremor base-A)</td>
			<td>Fagron</td>
			<td>608425</td>
			<td>Hydrophilic oil in water (O/W) cream base; the composition: aqua, paraffin, paraffin liquid, cetearyl alkohol, Laureth 4, sodium hydroxide, carbomer, methylparaben, propylparaben.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IKA EUROSTAR POWER control-visc stirrers</td>
			<td>IKA-labortechnik</td>
			<td>Z404020</td>
			<td>Digital laboratory stirrer, for tasks up to the high viscosity range, 230V, 1/cs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IKA Propeller stirrer, 3-bladed</td>
			<td>IKA-labortechnik</td>
			<td>R 1381</td>
			<td>Propeller stirrer, 3-bladed, stirrer &#216;: 45 mm, shaft &#216;: 8 mm, shaft length: 350 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dialysis tubing closures</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Z371017-10EA</td>
			<td>Dialysis tubing closures, red, size 110 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dialysis tubing cellulose membrane</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D9402-100FT</td>
			<td>Dialysis tubing cellulose membrane, average flat width 76 mm (3.0 in.)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DOMO Pot with stailess, LCD</td>
			<td>DOMO Elektronic</td>
			<td>DO42325PC</td>
			<td>Preserving boiler stainless steel, 2000 W, 27-L container (diameter 37 cm, height 30 cm), temperature control 30-100 &#176; C, operation LCD display</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hettich zentrifugen Universal 32</td>
			<td>Gemini bv</td>
			<td>2770 GS1R</td>
			<td>Mid bench centrifuge, speed 18000 rpm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LT 3 shaking device</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>6470.0002</td>
			<td>Orbital shaking device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KERN 440-47N</td>
			<td>Kern</td>
			<td>440-47N</td>
			<td>Laboratory balance</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KERN 770</td>
			<td>Kern</td>
			<td>770 -N</td>
			<td>Laboratory analytical balance</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VENTICELL 222 - Komfort</td>
			<td>BMT, MMM Group</td>
			<td>C 131749</td>
			<td>Drying oven, temperature control 30-100 &#176; C, air circulation control</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacucell 55 - EVO</td>
			<td>BMT, MMM Group</td>
			<td>B 050328</td>
			<td>Vacuum drying oven, temperature control 30-100 &#176; C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PULVERISETTE 19</td>
			<td>Fritsch</td>
			<td>19.1030.00</td>
			<td>Universal cutting mill, rotor with V-cutting edges and fixed knives</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi Probe Adapter System MPA 5</td>
			<td>Courage &#38; Kazaka Electronic</td>
			<td>10225237</td>
			<td>MPA 5 Station - equipment for measurement hydratation, TEWL and pH</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Skin pH-meter PH 905 probe</td>
			<td>Courage &#38; Kazaka Electronic</td>
			<td></td>
			<td>Probe to specifically measure the pH on the skin surface or the scalp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corneometer CM 825 probe</td>
			<td>Courage &#38; Kazaka Electronic</td>
			<td></td>
			<td>Probe to determine the hydration level of the skin surface (Stratum corneum).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tewameter TM 300</td>
			<td>Courage &#38; Kazaka Electronic</td>
			<td></td>
			<td>Probe for the assessment of the transepidermal water loss (TEWL)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heidolph RZR 2020</td>
			<td>Heidolph</td>
			<td>13-225-007-03-1</td>
			<td>Overhead stirrer, mechanical speed setting and stepless transmission; speed range 40-2000 rpm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heidolph mechanical stirrer BR 10</td>
			<td>Heidolph</td>
			<td>Z336688-1EA</td>
			<td>Blade impeller crossed stirrer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fagor FS 12</td>
			<td>Fagor</td>
			<td>BTT-138</td>
			<td>Laboratory refrigerator with freezer space</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WTW bench pH/mV meter</td>
			<td>WTW</td>
			<td>Z313165</td>
			<td>High-performance bench pH and pH/conductivity meters for routine and high precision laboratory measurements in research or quality control laboratories</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Container</td>
			<td>RPC Superfos</td>
			<td></td>
			<td>13-L plastic bucket, diameter 26 cm, height 26 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsoft Office 2010</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C+K software</td>
			<td colspan="2">Courage and Khazaka Electronic GmbH</td>
			<td>MPA 5 station operating software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation of keratin hydrolysate from chicken feathers and its application in cosmetics

각 질 hydrolysates (KHs) 머리 화장품 설립된 표준 구성 요소가 있습니다. KH의 보습 효과 이해 하는 것은 피부 관리 화장품을 위한 유리 하다입니다. 프로토콜의 목적은: (1) 알칼리 성 효소 가수분해에 의해 KH로 닭 깃털을 처리 하 고 투 석에 의해 그것을 정화 하 고 (2) 연 고 자료 (OB)로 KH 추가 피부 수 분을 증가 하 고 감소 하 여 피부 장벽 기능을 향상 하는 경우 테스트를 transepidermal 워터 손실 (TEWL)입니다. 알칼리 성 효소 가수분해 동안 깃털은 알칼리 환경에서 그리고, 분해 효소로 분해 하는 온화한 조건 하에서 더 높은 온도에서 인 큐베이 팅 처음. KH의 솔루션 dialyzed 진공 건조, 그리고 정밀한 분말에 가공 된. 화장품 제형 기름 물 에멀젼 (O/W)에 포함 된 2에서에서 구성 된, 4, 및 6 중량 %KH (산부인과의 무게에 따라)의 준비가 되어 있습니다. 10 남자에 실행은 KH의 보습 속성을 테스트 하 고 1, 2, 3, 4, 24, 및 48 h. 테스트 공식의 시간 간격 10 여성 탈지 volar 팔 뚝 사이트에 분산 되어. 지층 corneum (SC)의 피부 수 분은 피부, 가장 세계적인 사용 하 고 간단한 방법 중 하나는의 커패시턴스를 측정 하 여 평가 됩니다. TEWL 정의 된 영역 및 피부에서 시간 당 수송 물의 수량 측정 기반으로 합니다. 두 방법 모두 완벽 하 게 비-침략 적 있습니다. KH은 우수한 폐색; 산부인과에 KH의 추가에 따라 그것은 TEWL 신청 후 30% 감소에 대 한 제공합니다. KH로 휴 멕 턴 트, 사우스 캐롤라이나; 물 표 피의 더 낮은 층에서 바인딩할로 또한 기능 산부인과에서 최적의 KH 추가에 최대 수 화 남자와 22%에서에서 19% 상승 여성의 증가 발생합니다.

여기에 제시 된 절차에 따라 준비 하는 KH ( 그림 2참조)은 노란색 색상, 높은 단백질 콘텐츠 물에 쉽게 용 해 (무기 고체 대표 < 2.0%); KH의 1.0% 해결책의 pH 5.3, 고 대 한 요구 사항을 충족 화장품 등급 hydrolysates입니다. 50 g 원료에서 KH의 비중은 약 30%입니다. KH의 분자량 분포는 SDS 페이지에 의해 결정 되었다 하 고 그림 3에 표시 됩니다.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56254/56254fig2.jpg"> 그림 2: 각 질의 대표 그림. <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56254/56254fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56254/56254fig3.jpg"> 그림 3: 각 질의 및 단백질 기준의 SDS 페이지. 레인 1: 낮은 범위 분자량 마커 (3.5-26.6 kDa)입니다. 2, 3, 및 4 차선: 각 질 hydrolysates 3 일괄에서 준비. 120 µ g 20 µ L 로드 버퍼에 다시 중단 KH 각 우물에 로드 되었습니다. 레인 5: 다양 한 분자량 마커 (6.5-200 kDa)
수 화와 TEWL 값 다른 자원 봉사자, delineated 했다 따라서 서로 비교 하지 않을 수 있습니다. 따라서 값 1, 2, 3, 4, 24, 및 48 h의 측정에 대 한 간격 공식은, 후자 포함 2, 4, 및 6% 추가 KH의 취급 하는 사이트에 산부인과 비해 %에서 변화로 표현 됩니다. 피부에 대 한 pH 값은 모든 자원 봉사자에 대 한 피부 pH의 기록된 값 들의 산술 평균으로 표시 됩니다. 10 남자에 대 한 표 2 및 표 3 10 여성 자원 봉사자 수 화에서 변경 및 %, 산부인과, 상대적인 TEWL와 피부의 pH 수준에 대 한 결과 제공 됩니다.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td colspan="7">남자</td>
		</tr>
<tr>
<td>시간</td>
			<td>1 h</td>
			<td>2 h</td>
			<td>3 h</td>
			<td>4 h</td>
			<td>24 h</td>
			<td>48 h</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td colspan="6">수 화 (Oitment 자료 대 % 변경) ± SD</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 2% KH</td>
			<td>+ 16 ± 15</td>
			<td>+ 14 같은</td>
			<td>+ 12 ±9</td>
			<td>+ 19 ±14</td>
			<td>+  11</td>
			<td>+ 15 ±9</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 4% KH</td>
			<td>+ 6 ±19</td>
			<td>+ 1 </td>
			<td>+ 5 ± 10</td>
			<td>+ 7 같은</td>
			<td>+ 11 ±9</td>
			<td>+ 14 ± 15</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 6% KH</td>
			<td>-3 ± 25</td>
			<td>-4 ±14</td>
			<td>-7 </td>
			<td>-4 ±17</td>
			<td>+ 11 ±14</td>
			<td>-17 ±14</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td colspan="6">TEWL (Oitment 자료 대 % 변경) ± SD</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 2% KH</td>
			<td>-20 ± 15</td>
			<td>-20 ±22</td>
			<td>-11 기능이</td>
			<td>-20 기능이</td>
			<td>-23 ± 20</td>
			<td>-21±17</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 4% KH</td>
			<td>-28 ± 12</td>
			<td>-29 ± 20</td>
			<td>-28 ± 20</td>
			<td>-28 전류용</td>
			<td>-± 20 47</td>
			<td>-36 ± 20</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 6% KH</td>
			<td>-36 같은</td>
			<td>-41 기능이</td>
			<td>-31 ±17</td>
			<td>-36 ±17</td>
			<td>-53 ± 20</td>
			<td>-54 ±17</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td colspan="6">pH</td>
		</tr>
<tr>
<td>제어</td>
			<td>4.7 ± 0.5</td>
			<td>5.1 ±0.4</td>
			<td>4.9 ±0.4</td>
			<td>5.1 ± 0.3</td>
			<td>4.6 ± 0.5</td>
			<td>4.8 ±0.7</td>
		</tr>
<tr>
<td>기본 연 고</td>
			<td>4.8 ± 0.5</td>
			<td>5.1 ± 0.3</td>
			<td>4.9 ± 0.3</td>
			<td>5.0 ±0.4</td>
			<td>4.6 ±0.4</td>
			<td>5.0 0.6</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 2% KH</td>
			<td>5.0 0.6</td>
			<td>4.8 ±0.4</td>
			<td>4.9 ± 0.5</td>
			<td>4.9 ± 0.5</td>
			<td>4.7 ± 0.3</td>
			<td>5.0 0.6</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 4% KH</td>
			<td>4.8 ± 0.5</td>
			<td>4.9 ± 0.3</td>
			<td>4.8 ±0.4</td>
			<td>4.8 ± 0.3</td>
			<td>4.7 ± 0.5</td>
			<td>4.8 ± 0.5</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 6% KH</td>
			<td>4.7 ± 0.5</td>
			<td>5.0 ± 0.2</td>
			<td>4.9 ±0.4</td>
			<td>4.8 ±0.4</td>
			<td>4.8 0.6</td>
			<td>5.0 0.6</td>
		</tr>
</tbody></table>표 2: 대 한 결과 1, 2, 3, 4, 24, 및 48 h의 측정으로 수 화, TEWL, 및 10 명의 자원 봉사자 들의 피부의 pH에 변경합니다.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td colspan="7">여자</td>
		</tr>
<tr>
<td>시간</td>
			<td>1 h</td>
			<td>2 h</td>
			<td>3 h</td>
			<td>4 h</td>
			<td>24 h</td>
			<td>48 h</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td colspan="6">수 화 (Oitment 자료 대 % 변경) ± SD</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 2% KH</td>
			<td>+ 22 ±7</td>
			<td>+ 15 ± 6</td>
			<td>+ 15 ± 8</td>
			<td>+ 12 ±9</td>
			<td>+ 14 ±14</td>
			<td>+ 18 ±9</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 4% KH</td>
			<td>0 ± 4</td>
			<td>-6 ± 5</td>
			<td>-2 ± 5</td>
			<td>+ 1 ±7</td>
			<td>+ 10 ±13</td>
			<td>+ 15 ± 10</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 6% KH</td>
			<td>-12 ± 5</td>
			<td>-14 ± 2</td>
			<td>-9 ±7</td>
			<td>-5 ±9</td>
			<td>+ 8 ± 12</td>
			<td>+ 10 ±9</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td colspan="6">TEWL (Oitment 자료 대 % 변경) ± SD</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 2% KH</td>
			<td>-32 ±1.6</td>
			<td>-16 ± 3.0</td>
			<td>-12 ±1.3</td>
			<td>-20 ±0.9</td>
			<td>-35 ±1.9</td>
			<td>-38 ±1.6</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 4% KH</td>
			<td>-41 ±1.1</td>
			<td>-37 ±2.7</td>
			<td>-24 ±0.8</td>
			<td>-34 ±0.9</td>
			<td>-44 ± 1.5</td>
			<td>-38 ±1.9</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 6% KH</td>
			<td>-50 ±1.4</td>
			<td>-39 ±2.2</td>
			<td>-29 ±0.7</td>
			<td>-39 ±0.9</td>
			<td>-16 ±2.4</td>
			<td>-33 ±2.1</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td colspan="6">pH</td>
		</tr>
<tr>
<td>제어</td>
			<td>5.0 ±0.7</td>
			<td>5.3 ± 0.3</td>
			<td>4.9 ±0.7</td>
			<td>5.0 ± 0.5</td>
			<td>5.0 ±0.8</td>
			<td>4.7 ±0.7</td>
		</tr>
<tr>
<td>기본 연 고</td>
			<td>5.2 0.6</td>
			<td>5.3 ± 0.3</td>
			<td>5.2 ±0.7</td>
			<td>5.0 ±0.4</td>
			<td>5.1 ±0.8</td>
			<td>4.8 ±0.7</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 2% KH</td>
			<td>5.4 ±0.7</td>
			<td>5.1 ±0.4</td>
			<td>4.9 ±0.4</td>
			<td>5.1 ±0.7</td>
			<td>4.9 ±0.7</td>
			<td>5.0 ± 1.0</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 4% KH</td>
			<td>5.2 ±0.7</td>
			<td>5.1 ± 0.3</td>
			<td>5.0 ±0.4</td>
			<td>4.9 ±0.4</td>
			<td>5.1 0.6</td>
			<td>5.1 ± 0.2</td>
		</tr>
<tr>
<td>연 고 기본 + 6% KH</td>
			<td>5.2 ±07</td>
			<td>5.2 ± 0.2</td>
			<td>5.0 ±0.4</td>
			<td>5.0 ± 0.3</td>
			<td>5.4 0.6</td>
			<td>5.2 ±0.4</td>
		</tr>
</tbody></table>표 3:에 대 한 결과 1, 2, 3, 4, 24, 및 48 h의 측정으로 수 화, TEWL, 및 10 여성 자원 봉사자의 피부의 pH에 변경합니다.
남성 자원 봉사자에 대 한 SC의 수 분:
짧은 간격 측정 (1-4 h), 피부 (12-19%)의 수 화에 가장 높은 증가 KH의 2%와 함께 산부인과 보충 하는 공식 기록, 4%의 추가 KH 보였다 수 분에 더 작은 상승 (1-7%). 반대로, 6%에 KH 사우스 캐롤라이나 수 화 (3-7%의 감소)에 대 한 값에 부정적으로 반영 됩니다. 측정의 24 시간 후 사우스 캐롤라이나 수 화에서 11%의 증가 테스트 산부인과에 KH의 모든 추가 대 한 분별 했다. 아직도 남아 있는 수 분에 약간의 증가 함께 다음 48 h 후에 계속 같은 추세: 2%, KH, 4% 추가와 KH 6%에서 17%의 드롭 14%의 상승에 KH에 대 한 15% 증가.
여성 자원 봉사자에 대 한 SC의 수 분:
그것은 관찰을 보충 2 %KH 하면 대략 22%와 함께 산부인과 산부인과 혼자, 이르면 측정; 1 h에서 상대적인 사우스 캐롤라이나 수 분 증가 산부인과에 KH의 4% 추가, 사실, 수 화;에 영향을 주지 않습니다. 반면, 반대로, 산부인과에 KH 순수 산부인과 비슷한 비교로 수 분에 대략 12% 감소에 반영 되어 6% 추가 경향을 볼 수 있습니다 후 2, 3, 및 측정, 보충 2 %12-15%는 수 분 증가에서 4 h KH; KH의 큰 추가 수 화 동일 하 게 유지 하거나 감소 한다. 측정의 24 시간 후는 수 분으로 모든 테스트 KH 추가; 산부인과 대 한 보다 높은 기록 했다 KH, 낮은 증가 (8%) 하면서 보였다 KH의 6%에 보충에 대 한 2%의 추가 대 한 수 화에 가장 큰 증가 (14%)가 발생 했습니다. 유사한 결과 어떤 점에서 순수한 산부인과 대 한 보다 큰 수 화 KH;의 추가 가진 모든 샘플에 대 한 기록 된 측정의 48 h 후 달성 수 화에 가장 큰 상승 (18%) (10%)의 낮은 증가 6 %KH 보완에 대 한 지적 했다 하는 동안 2 %KH 추가 대 한 발생 했습니다.
TEWL 남자 자원 봉사자에 대 한:
TEWL 확인 결과 공식 KH와 보충 분명히 감소 TEWL, 순수 산부인과 비해 피부에 적용 될 때 KH 높아 양의 TEWL의 낮은 값에 긍정적인 영향을 끼쳤다. 공식은 적용 후 1 시간 후 TEWL 기록 했다 순수한 산부인과 대 한 보다 낮은 20%로 2% 정립에 관한 KH; 반면 4% KH TEWL;에서 28% 감소 반면 극적인 36%에서 6 %KH 결과 TEWL 감소. 실제로, 저하 TEWL 값도 2, 3, 및 4 h KH 보충 정립 위한 측정에서 관찰 되었다. 24 48 시간 후에, TEWL KH 공식으로 취급 하는 사이트에도 크게 인하 했다. 24 시간 후 TEWL 피부에 관찰 했다 23% 순수한 산부인과;에 대 한 사이트에서 보다 KH의 2% 추가 함께 산부인과 대 한 낮은 KH 약 47%로 4%에서 6 %KH 동안 TEWL TEWL 53%가 트리거됩니다. 48 h: 피부 TEWL 산부인과로 치료 후에 비슷한 추세는 분명 2% 들어 있는 KH 했다 순수한 산부인과;에 대 한 사이트에서 보다 낮은 21% 4 %KH 보였다는 TEWL 36% 낮은; 그리고 6% KH 54%의 하락에 대 한.
TEWL 여성 자원 봉사자에 대 한:
남성 자원 봉사자에서 보듯이 그 산부인과에 KH의 모든 모니터링된 추가 감소 TEWL에 반영 한다 분명 하다. 응용 프로그램에서 1 시간 후 TEWL 상당한 감소 KH;의 모든 추가 포함 하는 산부인과 샘플 기록 했다 32%에 대해 TEWL에서 감소 한 41% 감소 4에 대 한 주위 KH, 2% 추가 대 한 보였다 %KH, 그리고 심지어는 50% 드롭 TEWL KH의 6% 보충에 대 한. 다음 2, 3, 그리고 4 h 측정 간격, 비슷한 상황 유지, 즉, 같은 시간 간격; TEWL 감소가 있다 TEWL 최소 드롭 2% 발생 KH, 최고의 6% 볼 KH. 2 시간 후는 TEWL 감소 16 %KH 대 한 2%에서 4%와 6%에서 39% KH KH 37%. 3 h, TEWL 줄어들 더 KH KH 4%, 24%, KH 6%에서 29%로 2%에서 12%. 4 h, TEWL 추가 2 %20% 감소 KH, 4에 대 한 34 %%KH, 및 6 %39 %KH. 24 시간 후 TEWL (16%)에서 최소한 감소 발생 KH, 6% 추가 대 한 최고의 (44%) KH;의 4% 보충에 대 한 보였다 동안 KH 2%에서 관찰 되었다 TEWL 35% 감소를 일으키는 원인이 되기 위하여. 48 h에 결과 남아 유사 하 고 비교적 균형, KH, 4%에 대 한 가장 큰 (38%)의 6% 추가 TEWL (33%)에서 최소한 감소와 KH와 2 %KH.

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Preparation of Keratin Hydrolysate from Chicken Feathers and Its Application in Cosmetics

각 질의 닭 깃털 및 화장품에의 응용에서의 준비

프로토콜의 목표는 알칼리 성 효소 가수분해에 의해 각 질의 닭 깃털에서 준비 하 고 기본 화장품 연 고로 각 질의 피부 장벽 기능 개선 추가 테스트 (수 화를 고조 하 고 점감 transepidermal 물 손실). 테스트 남자와 여자에 실시 하는 자원 봉사자.

Keratin hydrolysates (KHs) are established standard components in hair cosmetics. Understanding the moisturizing effects of KH is advantageous for ...

preparation-keratin-hydrolysate-from-chicken-feathers-its-application

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Biochemistry

19.3K 조회수.  Tomas Bata University in Zlín. 프로토콜의 목표는 알칼리 성 효소 가수분해에 의해 각 질의 닭 깃털에서 준비 하 고 기본 화장품 연 고로 각 질의 피부 장벽 기능 개선 추가 테스트 (수 화를 고조 하 고 점감 transepidermal 물 손실). 테스트 남자와 여자에 실시 하는 자원 봉사자.

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Preparation and Delivery of Protein Microcrystals in Lipidic Cubic Phase for Serial Femtosecond Crystallography

Membrane proteins (MPs) are essential components of cellular membranes and primary drug targets. Rational drug design relies on precise structural information, typically obtained by crystallography; however MPs are difficult to crystallize. Recent progress in MP structural determination has benefited greatly from the development of lipidic cubic phase (LCP) crystallization methods, which typically yield well-diffracting, but often small crystals that suffer from radiation damage during traditional crystallographic data collection at synchrotron sources. The development of new-generation X-ray free-electron laser (XFEL) sources that produce extremely bright femtosecond pulses has enabled room temperature data collection from microcrystals with no or negligible radiation damage. Our recent efforts in combining LCP technology with serial femtosecond crystallography (LCP-SFX) have resulted in high-resolution structures of several human G protein-coupled receptors, which represent a notoriously difficult target for structure determination. In the LCP-SFX technique, LCP is recruited as a matrix for both growth and delivery of MP microcrystals to the intersection of the injector stream with an XFEL beam for crystallographic data collection. It has been demonstrated that LCP-SFX can substantially improve the diffraction resolution when only sub-10 &#181;m crystals are available, or when the use of smaller crystals at room temperature can overcome various problems associated with larger cryocooled crystals, such as accumulation of defects, high mosaicity and cryocooling artifacts. Future advancements in X-ray sources and detector technologies should make serial crystallography highly attractive and practicable for implementation not only at XFELs, but also at more accessible synchrotron beamlines. Here we present detailed visual protocols for the preparation, characterization and delivery of microcrystals in LCP for serial crystallography experiments. These protocols include methods for conducting crystallization experiments in syringes, detecting and characterizing the crystal samples, optimizing crystal density, loading microcrystal laden LCP into the injector device and delivering the sample to the beam for data collection.

We describe procedures for the preparation and delivery of membrane protein microcrystals in lipidic cubic phase for serial crystallography at X-ray free-electron lasers and synchrotron sources. These protocols can also be applied for incorporation and delivery of soluble protein microcrystals, leading to substantially reduced sample consumption compared to liquid injection.

준비 및 직렬 펨토초 결정학에 대한 지질 큐빅 단계에서 단백질 미세 배달

Membrane proteins (MPs) are essential components of cellular membranes and primary drug targets. Rational drug design relies on precise structural ...

연구

생화학

Preparation and In Vivo Use of an Activity-based Probe for N-acylethanolamine Acid Amidase

Activity-based protein profiling (ABPP) is a method for the identification of an enzyme of interest in a complex proteome through the use of a chemical probe that targets the enzyme&#39;s active sites. A reporter tag introduced into the probe allows for the detection of the labeled enzyme by in-gel fluorescence scanning, protein blot, fluorescence microscopy, or liquid chromatography-mass spectrometry. Here, we describe the preparation and use of the compound ARN14686, a click chemistry activity-based probe (CC-ABP) that selectively recognizes the enzyme N-acylethanolamine acid amidase (NAAA). NAAA is a cysteine hydrolase that promotes inflammation by deactivating endogenous peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR)-alpha agonists such as palmitoylethanolamide (PEA) and oleoylethanolamide (OEA). NAAA is synthesized as an inactive full-length proenzyme, which is activated by autoproteolysis in the acidic pH of the lysosome. Localization studies have shown that NAAA is predominantly expressed in macrophages and other monocyte-derived cells, as well as in B-lymphocytes. We provide examples of how ARN14686 can be used to detect and quantify active NAAA ex vivo in rodent tissues by protein blot and fluorescence microscopy.

Preparation and In Vivo Use of an Activity-based Probe for N-acylethanolamine Acid Amidase

Here, we describe the preparation and use of an activity-based probe (ARN14686, undec-10-ynyl-N-[(3S)-2-oxoazetidin-3-yl]carbamate) that allows for the detection and quantification of the active form of the proinflammatory enzyme N-acylethanolamine acid amidase (NAAA), both in vitro and ex vivo.

준비 및<em&gt; 생체</em&gt; 액티비티 기반 프로브의 사용을위한<em&gt; N</em&gt; -acylethanolamine 산 아미 다제

Activity-based protein profiling (ABPP) is a method for the identification of an enzyme of interest in a complex proteome through the use of a chemical ...

Preparation of Giant Vesicles Encapsulating Microspheres by Centrifugation of a Water-in-oil Emulsion

The constructive biology and the synthetic biology approach to creating artificial life involve the bottom-up assembly of biological or nonbiological materials. Such approaches have received considerable attention in research on the boundary between living and nonliving matter and have been used to construct artificial cells over the past two decades. In particular, Giant Vesicles (GVs) have often been used as artificial cell membranes. In this paper, we describe the preparation of GVs encapsulating highly packed microspheres as a model of cells containing highly condensed biomolecules. The GVs were prepared by means of a simple water-in-oil emulsion centrifugation method. Specifically, a homogenizer was used to emulsify an aqueous solution containing the materials to be encapsulated and an oil containing dissolved phospholipids, and the resulting emulsion was layered carefully on the surface of another aqueous solution. The layered system was then centrifuged to generate the GVs. This powerful method was used to encapsulate materials ranging from small molecules to microspheres.

Giant vesicles containing highly packed micrometer-sized components are useful cell models. The water-in-oil emulsion centrifugation method is a simple, powerful tool for the preparation of giant vesicles with encapsulated materials.

유 중수 에멀젼의 원심 분리에 의해 거 소포 캡슐화 미소 구의 제조

The constructive biology and the synthetic biology approach to creating artificial life involve the bottom-up assembly of biological or nonbiological ...

Sample Preparation for Mass Spectrometry-based Identification of RNA-binding Regions

Noncoding RNAs play important roles in several nuclear processes, including regulating gene expression, chromatin structure, and DNA repair. In most cases, the action of noncoding RNAs is mediated by proteins whose functions are in turn regulated by these interactions with noncoding RNAs. Consistent with this, a growing number of proteins involved in nuclear functions have been reported to bind RNA and in a few cases the RNA-binding regions of these proteins have been mapped, often through laborious, candidate-based methods.
Here, we report a detailed protocol to perform a high-throughput, proteome-wide unbiased identification of RNA-binding proteins and their RNA-binding regions. The methodology relies on the incorporation of a photoreactive uridine analog in the cellular RNA, followed by UV-mediated protein-RNA crosslinking, and mass spectrometry analyses to reveal RNA-crosslinked peptides within the proteome. Although we describe the procedure for mouse embryonic stem cells, the protocol should be easily adapted to a variety of cultured cells.

We describe a protocol to identify RNA-binding proteins and map their RNA-binding regions in live cells using UV-mediated photocrosslinking and mass spectrometry.

질량 분석 기반 식별 RNA 바인딩 영역에 대 한 샘플 준비

Noncoding RNAs play important roles in several nuclear processes, including regulating gene expression, chromatin structure, and DNA repair. In most ...

Isolation and Respiratory Measurements of Mitochondria from Arabidopsis thaliana

Mitochondria are essential organelles involved in numerous metabolic pathways in plants, most notably the production of adenosine triphosphate (ATP) from the oxidation of reduced compounds such as nicotinamide adenine dinucleotide (NADH) and flavin adenine dinucleotide (FADH2). The complete annotation of the Arabidopsis thaliana genome has established it as the most widely used plant model system, and thus the need to purify mitochondria from a variety of organs (leaf, root, or flower) is necessary to fully utilize the tools that are now available for Arabidopsis to study mitochondrial biology. Mitochondria are isolated by homogenization of the tissue using a variety of approaches, followed by a series of differential centrifugation steps producing a crude mitochondrial pellet that is further purified using continuous colloidal density gradient centrifugation. The colloidal density material is subsequently removed by multiple centrifugation steps. Starting from 100 g of fresh leaf tissue, 2 - 3 mg of mitochondria can be routinely obtained. Respiratory experiments on these mitochondria display typical rates of 100 - 250 nmol O2 min-1 mg total mitochondrial protein-1 (NADH-dependent rate) with the ability to use various substrates and inhibitors to determine which substrates are being oxidized and the capacity of the alternative and cytochrome terminal oxidases. This protocol describes an isolation method of mitochondria from Arabidopsis thaliana leaves using continuous colloidal density gradients and an efficient respiratory measurements of purified plant mitochondria.

Isolation and Respiratory Measurements of Mitochondria from Arabidopsis thaliana

As mitochondria are only a small percentage of the plant cell, they need to be purified for a range of studies. Mitochondria can be isolated from a variety of plant organs by homogenization, followed by differential and density gradient centrifugation to obtain a highly purified mitochondrial fraction.

절연 및 호흡 측정의 미토 콘 드리 아 애기 thaliana 에서

Mitochondria are essential organelles involved in numerous metabolic pathways in plants, most notably the production of adenosine triphosphate (ATP) from ...

Genetic Incorporation of Biosynthesized L-dihydroxyphenylalanine (DOPA) and Its Application to Protein Conjugation

L-dihydroxyphenylalanine (DOPA) is an amino acid found in the biosynthesis of catecholamines in animals and plants. Because of its particular biochemical properties, the amino acid has multiple uses in biochemical applications. This report describes a protocol for the genetic incorporation of biosynthesized DOPA and its application to protein conjugation. DOPA is biosynthesized by a tyrosine phenol-lyase (TPL) from catechol, pyruvate, and ammonia, and the amino acid is directly incorporated into proteins by the genetic incorporation method using an evolved aminoacyl-tRNA and aminoacyl-tRNA synthetase pair. This direct incorporation system efficiently incorporates DOPA with little incorporation of other natural amino acids and with better protein yield than the previous genetic incorporation system for DOPA. Protein conjugation with DOPA-containing proteins is efficient and site-specific and shows its usefulness for various applications. This protocol provides protein scientists with detailed procedures for the efficient biosynthesis of mutant proteins containing DOPA at desired sites and their conjugation for industrial and pharmaceutical applications.

Genetic Incorporation of Biosynthesized L-dihydroxyphenylalanine DOPA and Its Application to Protein Conjugation

Here, we present a protocol for the genetic incorporation of L-dihydroxyphenylalanine biosynthesized from simple starting materials and its application to protein conjugation.

Biosynthesized L-dihydroxyphenylalanine (DOPA) 및 단백질 활용의 응용의 유전 결합

L-dihydroxyphenylalanine (DOPA) is an amino acid found in the biosynthesis of catecholamines in animals and plants. Because of its particular biochemical ...

Isolation of Lipoprotein Particles from Chicken Egg Yolk for the Study of Bacterial Pathogen Fatty Acid Incorporation into Membrane Phospholipids

Staphylococcus aureus and other Gram-positive pathogens incorporate fatty acids from the environment into membrane phospholipids. During infection, the majority of exogenous fatty acids are present within host lipoprotein particles. Uncertainty remains as to the reservoirs of host fatty acids and the mechanisms by which bacteria extract fatty acids from the lipoprotein particles. In this work, we describe protocols for enrichment of low-density lipoprotein (LDL) particles from chicken egg yolk and determining whether LDLs serve as fatty acid reservoirs for S. aureus. This method exploits unbiased lipidomic analysis and chicken LDLs, an effective and economical model for the exploration of interactions between LDLs and bacteria. The analysis of S. aureus integration of exogenous fatty acids from LDLs is performed using high-resolution/accurate mass spectrometry and tandem mass spectrometry, enabling the characterization of the fatty acid composition of the bacterial membrane and unbiased identification of novel combinations of fatty acids that arise in bacterial membrane lipids upon exposure to LDLs. These advanced mass spectrometry techniques offer an unparalleled perspective of fatty acid incorporation by revealing the specific exogenous fatty acids incorporated into the phospholipids. The methods outlined here are adaptable to the study of other bacterial pathogens and alternative sources of complex fatty acids.

This method provides a framework for studying incorporation of exogenous fatty acids from complex host sources into bacterial membranes, particularly Staphylococcus aureus. To achieve this, protocols for the enrichment of lipoprotein particles from chicken egg yolk and subsequent fatty acid profiling of bacterial phospholipids utilizing mass spectrometry are described.

세균성 병원체 지방산 을 막 인지질로 통합하는 연구를 위해 닭 계란 노른자에서 지단백질 입자의 분리

Staphylococcus aureus and other Gram-positive pathogens incorporate fatty acids from the environment into membrane phospholipids. During infection, the ...

Application of Biolayer Interferometry (BLI) for Studying Protein-Protein Interactions in Transcription

A transcription factor&#160;(TF) is a protein that regulates gene expression by interacting with the RNA polymerase, another TF, and/or template DNA. GrgA is a novel transcription activator found specifically in the obligate intracellular bacterial pathogen Chlamydia. Protein pulldown assays using affinity beads have revealed that GrgA binds two &#963; factors, namely &#963;66 and &#963;28, which recognize different sets of promoters for genes whose products are differentially required at developmental stages. We have used BLI to confirm and further characterize the interactions. BLI demonstrates several advantages over pulldown: 1) It reveals real-time association and dissociation between binding partners, 2) It generates quantitative kinetic parameters, and 3) It can detect bindings that pulldown assays often fail to detect. These characteristics have enabled us to deduce the physiological roles of GrgA in gene expression regulation in Chlamydia, and possible detailed interaction mechanisms. We envision that this relatively affordable technology can be extremely useful for studying transcription and other biological processes.

Application of Biolayer Interferometry BLI for Studying Protein-Protein Interactions in Transcription

Interactions of transcription factors (TFs) with the RNA polymerase are usually studied using pulldown assays. We apply a Biolayer Interferometry (BLI) technology to characterize the interaction of GrgA with the chlamydial RNA polymerase. Compared to pulldown assays, BLI detects real-time association and dissociation, offers higher sensitivity, and is highly quantitative.

전사에서 단백질-단백질 상호 작용을 연구하기 위한 생체층 간섭측정기(BLI) 적용

A transcription factor&#160;(TF) is a protein that regulates gene expression by interacting with the RNA polymerase, another TF, and/or template DNA. GrgA ...

Preparation of High-Quality Fermented Fish Product

This protocol provides a method for preparation of industrialized fermented fish product with sturgeon (Aquilaria sinensis) meat product. The procedures were: (1) pretreatment of farmed sturgeon including decapitation, evisceration, skinning-off, cleaning and cutting; (2) marinating fish cubes in 6-12% (w/v) salt solution (1:1, fish cube mass to solution volume); (3) drying fish cubes to a water content of 50-60% by hot air (40-60 &#176;C) or by vacuum; (4) fermentation involving inoculating fish cubes with 0.4-1.6% (w/w) S. cerevisiae in flavor solution to fish cubes and fermenting at 25-35 &#176;C for 6-10 h; (5) sealing fish cubes in vacuum packages with marinating and fermenting solutions; (6) sterilizing at 115-121 &#176;C for 10-20 min. The sturgeon meat product prepared by this method has delicious taste which is mellow and thick, has various types and large amounts of volatile flavor compounds such as alcohols and esters which could mask musty and unpleasant odor from fish, has moderate salt content but good texture properties such as high springiness, gumminess and chewiness, and has bright russet color and attractive appearance. This new technique could also be applied in the processing of other fish to provide convenient fish snack foods which could be stored at room temperature. It is appropriate for both marine and freshwater fish.

The goal of the protocol is to provide an industrialized fish fermentation technique based on inoculation of Saccharomyces cerevisiae.

고품질 발효 생선 제품 준비

This protocol provides a method for preparation of industrialized fermented fish product with sturgeon (Aquilaria sinensis) meat product. The procedures ...

JUMPn: A Streamlined Application for Protein Co-Expression Clustering and Network Analysis in Proteomics

With recent advances in mass spectrometry-based proteomics technologies, deep profiling of hundreds of proteomes has become increasingly feasible. However, deriving biological insights from such valuable datasets is challenging. Here we introduce a systems biology-based software JUMPn, and its associated protocol to organize the proteome into protein co-expression clusters across samples and protein-protein interaction (PPI) networks connected by modules (e.g., protein complexes). Using the R/Shiny platform, the JUMPn software streamlines the analysis of co-expression clustering, pathway enrichment, and PPI module detection, with integrated data visualization and a user-friendly interface. The main steps of the protocol include installation of the JUMPn software, the definition of differentially expressed proteins or the (dys)regulated proteome, determination of meaningful co-expression clusters and PPI modules, and result visualization. While the protocol is demonstrated using an isobaric labeling-based proteome profile, JUMPn is generally applicable to a wide range of quantitative datasets (e.g., label-free proteomics). The JUMPn software and protocol thus provide a powerful tool to facilitate biological interpretation in quantitative proteomics.

We present a systems biology tool JUMPn to perform and visualize network analysis for quantitative proteomics data, with a detailed protocol including data pre-processing, co-expression clustering, pathway enrichment, and protein-protein interaction network analysis.