This paper is dedicated to my beloved wife Maren and our little Karl.

소 눈의 1. 준비 <ol><li> 동물이 도살 후 바로 소 눈을 얻습니다. </li><li> &quot;Sickel-솔루션&quot;의 보호 눈을 운반 120 mM의 NaCl을, 2 mM의 KCl을, 0.1 mM의의 MgCl 2, 0.15 mM의 염화칼슘 2, 1.5 mM의의 NaH 2 PO 4, 13.5 mM의 나 2 HPO 4, 5 mM의 포도당에 포함 된 특수 매체 RT. </li><li> 희미한 붉은 빛 어두운 적응 상태에서 망막의 준비를 수행합니다. </li><li> 눈의 앞쪽 부분을 제거합니다. 적도 절개 약을 수행 윤부에 4mm 후방. 그 후 한 조각 각막, 홍채, 모양체와 렌즈를 제거합니다. Sickel-솔루션의 망막을 유지합니다. </li><li> 기계적으로 망막 표면에 유리질 첨부 파일을 풀고 열린 눈 컵에서 유리체를 제거합니다. </li><li> 그 후 네 개의 사분면으로 눈을 분할하고 약의 영역 라운드 펀치 아웃 트레 반을 이용하여 직경 7mm. </li><li> 조심스럽게 망막 분리색소 상피 세포에서와 빛으로부터 보호 상자 안에 기록 장치에 놓습니다. 기록 장치는 중간에 메쉬 플라스틱 테이너 이루어져; 메시에 망막을 배치하고 전극에 직접 플라스틱 링으로 고정 후. 주 : 플라스틱 테이너는 매체의 일정한 흐름을 허용하는 두 개의 채널을 보유하고 있습니다. </li></ol> 2. 녹음 전위도 (ERG) <ol><li> 상기 전위도를 기록 망막의 양쪽에 두 실버 / 실버 클로라이드를 사용하여 전극과 CA의 일정한 속도로 관류 망막 관류하기 위해서 1 ml / 분, 37 ° C의 항온. 산소로 포화 &quot;Sickel-솔루션&quot;를 사용합니다. </li><li> 측정을 시작하기 전에, 어두운 망막 (모든 측정시 빛으로부터 보호) 적응과 다섯 분의 자극 간격을 사용합니다. 망막 표면에서 6.3 MLX로 설정 강도로 자극에 대한 1 Hz에서 단일 흰색 제논 플래시를 사용합니다. </리&gt; <li> 사용 감광 필터와 최적의 응답을 갖기 위해, 타이머에 의해 제어되는 마이크로 초 (10)의 광 자극을 교정. </li><li> 측정 데이터를 처리, ERG를 필터링하고 잔디 RPS312RM 증폭기를 사용하여 (100 Hz에서 고역 통과 필터, 50 Hz에서 노치 필터, 증폭 X 100,000)를 증폭하도록. 신호를 방해 할 수있다 가능 교란 주파수를 필터링보십시오. 데이터를 처리하기 위해서는, 데스크탑 컴퓨터 (PC 호환)에 아날로그 - 디지털 데이터 수집 보드를 사용한다. </li><li> 안정적인 B 파 진폭이 기록 될 때까지 일정한 관류하에 어두운 적응 기간 후, 전기 신호의 진폭을 측정한다. 주 : 다섯 번의 측정이 평균값에 도달하고 10 % 미만을 벗어나는 경우, 진폭은 안정된 것으로 간주된다. 단일 측정의 좋은 예는 그림 1에 제시되어있다. </li><li> 테스트를 시작하려면, 하나 순수한 질소로 순수한 산소를 대체 (단일 실험의 수, N = 5) 저산소증을 테스트250 μm의 글루타메이트 (N = 5). </li><li> 전기 응답 45 분 동안 5 분마다 기록합니다. </li><li> 시험 기간 후, 75 분 동안 산소로 포화 표준 매체와 망막을 관류하고 B 파의 진폭의 변화를 봐주세요. 이는 세척 단계이다. B 파의 피크에 파의 저점에서 B 파의 진폭을 측정합니다. </li><li> 암순응 조건 감광체 전위에 글루타메이트 또는 저산소증의 효과를 조사하기 위해, 양액이 1mm에 추가하여 B 파를 억제. </li><li> 30 분 동안 안정적인 감광체 전위를 기록한 후, 1 mM의 아스파라긴산과 상이한 관개 솔루션 망막 45 분 노출, 이전의 절차를 수행한다. 앞서 언급 한 것과 같은 세척 기간 (단계 2.8)를 사용합니다. </li></ol> 3. 데이터 분석 <ol><li> 통계적 데이터를 평가하기 위해, 콜 모고 로프 - 스 미르 노프 등을 사용하는 모든 데이터에 대한 정규 분포 보장테스트 (15). </li><li> 폭발 전에 마지막 측정에 비해 노광 단계 이후 백분율에서 A- 및 B- 파 진폭의 감소를 계산한다. 45 분 후, ERG - 진폭의 감소를 비교 - ERG 칠하기 전에 측정 - 박람회 기간 말. </li><li> 회복 가능성을 조사하기 전에 해당 박람회 진폭 세척 단계의 끝에 A- 및 B- 파 비교. </li><li> 통계 분석은 소프트웨어 또는 JMP 통계 소프트웨어 SPSS 소프트웨어를 사용한다. 표준 편차 평균 ± 등 전반에 걸쳐 데이터를 계산합니다. 해당 통계 테스트에 의해 의미를 추정. 참고 :이 테스트는 실험 범위에 따라 다를 수 있습니다. 이 설정에서 학생의 쌍 t-test를 사용합니다. </li></ol>

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The authors have nothing to disclose.

본 연구에서는, 45 분의 저산소증 후에 B 파 진폭에 큰 영향이 발견되었다. 이러한 감소는 여전히 세척 단계 후 유의 하였다. 광 수용체 잠재력에 비슷한 효과가 관찰 될 수있다. 결과는 다른 게시 된 데이터 (16) 우리에게 저산소증 후 가능한 신경 보호 효과를 연구 할 수있는 기회를 제공하여 지원됩니다. 250 μM 글루타메이트의 45 분의 박람회 후, 우리는 세척주기의 끝에서 완전히 가역적 B 파의 진폭에 통계적으로 유의 한 영향을 찾을 수 없었다. 광 수용체 전위는 250 μM 글루타메이트에 의해 영향을하지 않았다. 단지 내부 망막 저산소증에 의해 영향을받은 사실은 변경, 따라서 매우 미묘하고 우리는 가능한 신경에 대해 아주 민감하고 표준화 된 지표를 가지고 있음을 나타냅니다. 아스 파르 테이트는 호​​에 구체적으로 감광체로부터 송신 억제따라서 알 또는 바이폴라 세포는 B 파를 억제한다. 이 발견은 250과 500 mm의 농도가 글루타메이트 자신의 B-파도 기록 매체 혼자 17에 비해 시간이 지남에 따라보다 안정적인 것으로 나타났다 녹색 DG와 Kapousta-Bruneau NV,의 연구 결과에 반하는. 설정에서 여러 차이가 고려 될 필요가 모순을 설명하기 : Sickel-용액이 모델은 다른 출판물 사용 링거 - 용액에 사용 하였다. 측정은 배열 한 전극과 다른 출판물과 함께 수행 하였다. 다른 출판물 신선한 쥐의 눈을 설명하면서 도살장에서 소 눈을 사용 하였다. 효과는 높은 글루타메이트 농도에서 일시적인 억제 가역적이었다. 그것은 일반적 글루타메이트의 특정 매우 낮은 양 눈의 좋은 유지 필요하다고하고보다 많은 양의 독성 것으로 알려져있다. 우리는 SL에서 소 눈이를 가정 할 수aughterhouse 더 글루타메이트 글루타메이트 수준이 실험적으로 추가 글루타민산에서 예상보다 다른 존재의 결과로 새로 제조 한 눈에 비교하여 출시되고있다. 전체보다는 주로 망막 세포에 의해 가장 영향을 전극 위에 배열을 사용하여 응답을 측정 인해 낮은 기계적 손상에 더 긴 생존 시간을 초래할 수도있다. 마지막으로, 용지의 조성물이 중요하다. 1960 년대에, 교수 Sickel 무겁게 이러한 측정이 전문 미디어 개발에 투자하고 그는 안정된 망막 응답 13, 14에 대한 글루타메이트 필요없이 최적화 된 미디어를 찾을 수 있었다. 설명 모델은 격리 된 망막이 아닌 전체 동물에 의존한다. 생체 내 시스템에서, 눈은 다른 동물의 장기에서 혈액 망막 장벽에 의해 분리된다. 이 모델의 장점은 마취 등의 연구 동물 매개 변수를 방해또는 전극의 위치는 표준화의 높은 정도를 허​​용하는, 발생하지 않는다. 표준화는 특히 눈 (18)와 직결 된 동물 실험에서 중요한 포인트입니다. 이러한 방법의 한계는 동물 모델이 아니라고, 짧은 시험 기간 및 사실이다. 따라서 우리는 서론에서 언급 한 시험 기간이 더 긴 박람회 및 추적 관찰 기간을 연장 할 수 있습니다 ERG 진폭은 약 8 시간 동안 안정적으로 유지하는 것이 경험을 통해 알고 있지만, 하나는 항상 이상 단일 실험이 확장되는 것을 고려해야한다 가능성이 높은 표준 편차가 발생합니다. 모델의 단점은 더 장기간의 연구가 수행 될 수 있으며, 망막에 조작의 제한된 양이 가능하다는 것을, 따라서,이다. 광범위한 조작 및 등 Dutescu에 기재된 SLO 의해 안내 다중 초점 ERG 같은 특별한 ERG의 옵션. 예를 들면, 생체 내 실험S (19)이 필요하다. 이 모델은 쉽게 눈에서 핵이 제거 된 외식 예 : 인간 망막에 사용될 수있다. 이 민감한 재료를 얻기 위해 복잡하기 때문에, 소 망막에 실험은 더 가능하지만이 점을 염두에 유지 해석되어야한다. 프로토콜의 중요한 단계는 수송과 어두운 적응 조건에서 망막을 준비하고있다. 이는 가능한 최대 응답을 얻는 것이 중요하다. 그것은 때로는 부드럽게 기본 색소 상피 세포에서 망막을 분리하는 데 몇 분 걸릴 수 있습니다. 펀칭 망막의 부드러운 흔들림 때로는이 과정을 용이하게한다. 그물에 망막을 배치하는 동안, 그물에 외부 망막과 망막을 배치하는 것이 중요합니다. trephanization 후 망막의 가장자리 위쪽 망막 층 안쪽의 위치를​​ 나타내는 약간 구부러. 소 망막은 인간의 망막 비교에 더 유사하다때문에 유사한 유리체 렌즈 비율과 인간의 눈 (20)의 하나와 유사한 혈관 구조의 쥐 눈의 망막 D; 이러한 쥐 또는 쥐와 같은 작은 동물 실험이 널리 망막 생체 적합성을 테스트하기 위해 사용되지만, 따라서, 이러한 동물에서 수행 독성 연구는 종종 인간 20 이하 적용 할 수 있습니다. myocilin 유전자의 계통 학적 분석 - 그 변이 형태는 상 염색체 청소년 지배적 인 개방 각 녹내장의 원인에 그 유전자 - 소 유전자가 더 밀접하게 쥐 또는 마우스 (21)보다 인간의 유전자와 관련이 있음을 보여줍니다. Myocilin은 섬유주 세포에서뿐만 아니라, 망막에서 찾을 수있다. 마지막으로 우리는 소와 인간의 고립 된 망막 전위와 ERG 효과 (12) 사이의 상관 관계를 보였다. 우리의 모델에서 아스 파르 테이트는 B 파를 폐지하여 광 수용체 잠재적 인 P III를 마스크를 해제하기 위해 사용 하였다. 이는 연구자에게 차별화 할 수있는 기회를 제공망막 내층 네트워크와 감광체 (22)상의 함수 사이 효과. B 파가 통합 된 기능에 대해서는 훨씬 더 민감 파라미터이지만, 파 진폭 인해 파장 만 광 감광체의 반응을 반영한다는 사실,보다 안정적이고 스트레스에 더 강하다 그것. 반면, B는 파장 셀 간 서로 다른 망막 세포의 상호 작용과 감광체의 활성에 의존한다. 분리 아스파 테이트를 사용하여 단독으로는 감광체 (23)에 조작의 효과를 조사 할 수있다을 파. 본 연구에서는 신경 보호제를 테스트하는 데 사용할 수있는 표준화 된 신경 독성 모델을 평가 하였다. 전망으로는 단백질 생화학 분석 전기 생리 기능의 상관 관계 또는 세포 대사 또는 mRNA의 발현과 기능의 상관 관계를 흥미로운 일이 될 것이다.

신경은 지난 수십 년 동안 안과 연구 조사의 강력한 필드있다. 망막은 산소에 크게 의존와 그 주변 세포의 신진 대사에 의해 강하게 영향을 매우 민감한 신경 세포의 네트워크입니다. 신경 세포 손상과 관련된 주요 안구 병변은 망막 혈관 폐색, 녹내장, 망막 박리 있습니다. 망막 동맥 폐색증, 망막 혈관 폐쇄에 대한 예로서, 내측으로 인해 망막 저산소증 (1)의 시야에의 갑작스런 손실을 이끈다. 그것은 종종 시력이 크게 일을 복구하는 환자의 8 %만이으로, 지속적인 시력 저하 한 일반적인 혈관 병변 2 리드와 연결되어 있습니다. 동맥이 혈전 용해 치료 방법으로 제시되었지만, 이점은 무작위 임상 시험 3에 도시되지 않을 수있다. 녹내장 및 망막 박리모두 4-6 글루타메이트 농도의 증가가있다. 생리적 조건 하에서 글루타메이트는 중추 신경계 전체에 걸쳐 흥분성 송신기 및 내측 망막 7,8로서 발생된다. 상승 된 수준은 글루타메이트 아니라 망막 박리, 녹내장 및 5,6- 에서뿐만 아니라 증식 당뇨 망막 병증 9에서 발견되었다. 글루타메이트의 증가는 아마도, 따라서, 신경 세포의 흥분성을 열 손상에 이르게하고. 망막 박리와 망막 (유리체 절제술)에 증식 당뇨 망막 병증 수술의 경우에 대부분의 경우에 필요하다. 유리체 절제술 기계 조작 동안, 광섬유 또는 긴 작업 중에 관개 솔루션의 높은 유속에 의해 가해지는 전단 응력의 ​​밝은 빛이 망막 (11, 12)에 추가로 스트레스를 발휘. 모든 언급 한 질병 병리 레틴로 지역화되어 공통점혼자는 감각 신경 시스템으로 망막을 보호 할 수있는 방법을 찾기 위해 도전 안과 커뮤니티 포즈. 전위도 (ERG)은 생체 기능 감광체 (표면파) 및 내측 망막 (B 파장)의 함수의 평가를위한 표준 방법이다. ERG는 각막 도입은 전극에 의해 측정되고, 눈은 막대 또는 원뿔 또는 내측 망막 내의 결함을 검출하는 광의 레벨 증가에 의해 자극되고있다. 망막에 다른 결함은 진폭 (응답의 강도) 또는 ERG의 대기 시간 (타임 투 응답 간격)의 변화에​​ 의해 검출 될 수있다. 다른 ERG 프로토콜 및 측정 방법 (패턴 ERG는, 다 초점 망막 전위 또는 시야 ERG)는 결함의 더 차별화 할 수 있습니다. 망막의 격리 기술은 가능한 연구 동물의 예에서 간섭없이 망막에 대한 영향을 평가하기 위해, 최근에 도입 한일반적인 반응 13, 14. 평가 및 superfused 고립 된 망막에 저산소증과 글루타민산 염 스트레스에 대한 정의 및 표준화 된 스트레스 모델을 소개하는이 연구의 목적이었다. 따라서, 우리는 특정 에이전트 또는 인공 관개 솔루션의 신경 보호 효과에 대한 미래 연구를위한 기초를 마련하기를 바라고있다.

<table><tbody><tr><td>120 mM NaCl&amp;nbsp;</td><td>Merck Pharma, Germany</td><td>1,064,041,000</td><td></td></tr><tr><td>2 mM KCl,&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td><td>Merck Pharma, Germany</td><td>1,050,010,250</td><td></td></tr><tr><td>0.1 mM MgCl2,&amp;nbsp;</td><td>Merck Pharma, Germany</td><td>58,330,250</td><td></td></tr><tr><td>0.15 mM CaCl2</td><td>Merck Pharma, Germany</td><td>111 TA106282</td><td></td></tr><tr><td>1.5 mM NaH2PO4/13.5 mM Na2HPO4&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td><td>Merck Pharma, Germany</td><td>1,065,860,500</td><td></td></tr><tr><td>5 mM glucose</td><td>Merck Pharma, Germany</td><td>40,741,000</td><td></td></tr></tbody></table>

glutamate and hypoxia as a stress model for the isolated perfused vertebrate retina

신경은 지난 수십 년 동안 안과 연구 조사의 강한 필드 왔으며 녹내장, 망막 혈관 폐쇄, 망막 박리, 당뇨 망막 병증과 같은 질병에 영향을하고있다. 그것은 미래의 임상 치료 테스트를 위해 표준화 된 스트레스 모델을 소개하는이 연구의 목적이었다. 소 망막을 제조하여, 산소 포화 된 표준 용액으로 관류하고, ERG를 기록하고 있었다. 안정된 B-파도, 저산소증 (순수한 N 2) 또는 글루타민산 염 스트레스 (250 μm의 글루타메이트)을 기록 후 45 분 동안 발휘했다. 단독 감광체 기능에 미치는 영향을 조사하기 위해, 1 mM의 아스파라긴산은 파를 수득 하였다. ERG 복구 75 분 동안 모니터 하였다. 저산소증 들어, 87.0 %의 파 진폭의 감소는 45 분 (p = 휴약 0.03 종료 후 36.5 %의 감소)의 폭발 시간 후에 (p &lt;0.01)를 기록 하였다. 또한, 초기 DECR통계적 유의성에 도달하는, 87.23 %를 기록 하였다 B 파의 진폭에 완화 (페이지 &lt;0.01, 세척의 끝, P = 0.03에서 25.5 %의 감소). 250 μm의 글루탐산, 1.9 % (p&gt; 0.05) 감소 하였다 파 진폭 (p&gt; 0.05) 초기 7.8 % 감축. B 파의 진폭 (P &lt;0.01) 관찰되었다의 83.7 %의 감소; 75 분의 세척 후에 감소는 2.3 % (p = 0.62)이었다. 본 연구에서 표준화 된 응력 모델은 장래에 가능한 신경 보호 효과를 확인하는 데에 유용 할 수도있을 것으로 제시된다.

산소 포화 표준 용액 (도 1A 및 B)와 망막 관류 제제의 1 시간 후 ERG-진폭 안정화 및 단일 진폭 측정 사이의 편차를 적게 보였다. 의 pH, 삼투압, 온도, (저산소증 테스트 제외) PO 2는 모든 시험 일정하게 유지되었다. 망막의 내부 신호로부터 감광체 신호를 분리하려면, 1mM의 아스파라긴산은 B 파장 (도 1a)을 억제 표준 용액에 첨가 하였다. 저산소증의 효과를 테스트하는 동안, 87.0 %의 파 진폭의 저하를 45 분의 시간이 경과 박람회 (p &lt;0.01)를 기록 하였다. 유실의 끝에서, 36.5 %의 감소 (P = 0.03,도 2a)이 통계적으로 유의 한 관찰되었다. 또한, 87.23 %의 B 파 진폭의 초기 감소는 그 동등하게 도달 통계적으로 유의 한 (P &lt;0.01)를 기록했다. 이 25.5 %의 감소를 설정유명했다, 그 (P = 0.03, 그림 2B) 통계적으로 유의했다. 250 μm의 글루타메이트, 진폭이 (p&gt; 0.05) 정의 된 시간 간격 이후에 발견 된 파의 7.8 %가 아닌 상당한 감소와 박람회 후. 이는 1.9 % (p&gt; 0.05,도 3a)의 비에 의해 크게 감소 하였다. 단일 측정은 표 1 및 2에 나타낸다. 83.7 %를 기록 하였다하여 B 파에 관한 통계적으로 유의 한 차이를 보였으 나 그 ERG의 진폭을 감소 하였다 (p &lt;0.01, 그림 3B). 세척이 끝나면, B 파장 회복 표준 용액 (p = 0.62)으로 관류 75 분 2.3 %의 비 상당한 감소의 결과로 관찰되었다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/52270/52270fig1highres.jpg" /> 그림 1 : 고립 관류 소 망막에서 망막 전위도의 측정 예를 들면 (A) 파가 표시됩니다.격리 관류 소 망막의 ERG. B는 파장 양액에 1mM의 아스 파르 테이트를 가산함으로써 억제된다. (B) B-파 암순응 광 조건에서 지배적이다. 6.3 MLX하는 빛의 세기에서 10 밀리 빛 자극이 사용됩니다. <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/52270/52270fig2highres.jpg" /> 도 2 (A)에 45 분의 노출 시간 후에 저산소증의 효과 파와 ERG의 (B) B-웨이브 진폭. 대표적인 약물 시리즈의 평균 (N = 5). 곡선 위의 수평 막대는 저산소증 시간을 표시합니다. 점선 (A)는 감광체 전위에서 마스크를 해제 아스파 1mM이 어플리케이션을 표시한다. 실험의 각 시리즈에 대한 표준 편차는 전과 적용 후뿐만 아니라 재판의 끝에서 직접 제공됩니다. 통계 학적 분석은 표준 편차를 사용하여 시간 포인트에서 수행 하였다 (직접 전과 후 입학 원서(A) 87.0 %의 진폭이 재판의 시작에 비해 45분의 박람회 시간 후에 관찰되었다 파의 감소 : 임상 시험의 종료)에서뿐만 아니라 이온. 시험의 끝에, 36.5 %의 유의 한 감소가 관찰되었다. (B) 87.23 %의 B 파 진폭의 유의 한 감소가 폭발 시간의 끝에서 기록 하였다. 시험의 끝에, 25.5 %의 유의 한 감소가 관찰되었다. <img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/52270/52270fig3highres.jpg" /> 도 3 :. (A)에 45 분간가 250 μM 글루타메이트 파 진폭 및 대표적인 약물 시리즈의 절연 관류 소 망막 평균 ERG의 (B) B-파 진폭의 효과 (N = 5) . 곡선 위의 수평 막대는 글루타메이트의 응용 프로그램을 표시합니다. 점선 (A)는 감광체 전위에서 마스크를 해제 아스파 1mM이 어플리케이션을 표시한다. 역각 실험 시리즈 ndard 편차 전과 적용 후뿐만 아니라 재판의 끝에서 직접 제공됩니다. (A) 250 ㎛의 글루타메이트 표면파의 비 상당한 감소의 노출 시간 후 : 통계 분석 (재판의 끝뿐만 아니라 직접 전과 적용 후) 표준 편차 시간 지점에서 수행 하였다 진폭 (7.8 %) 검출되었다. 시험의 끝에, 1.9 %의 비 현저한 감소가 현저하게 기록 된 83.7 %의 ERG의 진폭을 감소, B 파장에 관하여 (B). 밝혀졌다. 시험의 끝에, 2.3 %의 비 현저한 감소가 관찰되었다. <table border="0"><tbody><tr><td> 시간 [분] </td><td> B 파의 진폭 [μV] </td><td> SD </td><td> 파 진폭 [μV] </td><td> SD </td></tr><tr><td align="right"> 0 </td><td align="right"> 9.2 </td> &lt;TD 정렬 = &quot;오른쪽&quot;&gt; 0.836660027 </td><td align="right"> -10.4 </td><td align="right"> 1.140175425 </td></tr><tr><td align="right"> (5) </td><td align="right"> 9.2 </td><td align="right"> 1.095445115 </td><td align="right"> -10 </td><td align="right"> (1) </td></tr><tr><td align="right"> (10) </td><td align="right"> (10) </td><td align="right"> 0 </td><td align="right"> -10.6 </td><td align="right"> 0.547722558 </td></tr><tr><td align="right"> (15) </td><td align="right"> 9.4 </td><td align="right"> 1.140175425 </td><td align="right"> -9.6 </td><td align="right"> 0.547722558 </td></tr><tr><td align="right"> (20) </td><td align="right"> 9.4 </td><td align="right"> 0.547722558 </td><td align="right"> -10 </td><td align="right"> (1) </td></tr><tr><td align="right"> (25) </td><td align="right"> 9.4 </td><td align="right"> 0.894427191 </td><td align="right"> -10.8 </td><td align="right"> 0.447213595 </td></tr><tr><td aLIGN = &quot;오른쪽&quot;&gt; (30) </td><td align="right"> 4.2 </td><td align="right"> 2.774887385 </td><td align="right"> -6.6 </td><td align="right"> 2.50998008 </td></tr><tr><td align="right"> (35) </td><td align="right"> 4 </td><td align="right"> 2.449489743 </td><td align="right"> -5 </td><td align="right"> 2.236067977 </td></tr><tr><td align="right"> (40) </td><td align="right"> 3.8 </td><td align="right"> 1.788854382 </td><td align="right"> -5 </td><td align="right"> (1) </td></tr><tr><td align="right"> (45) </td><td align="right"> 3.6 </td><td align="right"> 1.341640786 </td><td align="right"> -5 </td><td align="right"> 2.121320344 </td></tr><tr><td align="right"> (50) </td><td align="right"> 2.4 </td><td align="right"> 1.140175425 </td><td align="right"> -4 </td><td align="right"> 1.870828693 </td></tr><tr><td align="right"> (55) </td><td align="right"> 2.2 </td><td align="right"> 0.836660027 </td><td align="right"> -3.4 </TD&gt; <td align="right"> 1.140175425 </td></tr><tr><td align="right"> (60) </td><td align="right"> 2.6 </td><td align="right"> 0.547722558 </td><td align="right"> -3.4 </td><td align="right"> 1.816590212 </td></tr><tr><td align="right"> (65) </td><td align="right"> 1.8 </td><td align="right"> 0.836660027 </td><td align="right"> -2.8 </td><td align="right"> 1.303840481 </td></tr><tr><td align="right"> (70) </td><td align="right"> 1.2 </td><td align="right"> 0.447213595 </td><td align="right"> -1.4 </td><td align="right"> 0.894427191 </td></tr><tr><td align="right"> (75) </td><td align="right"> 4.2 </td><td align="right"> 0.836660027 </td><td align="right"> -5.2 </td><td align="right"> 2.683281573 </td></tr><tr><td align="right"> (80) </td><td align="right"> 5.8 </td><td align="right"> 1.303840481 </td><td align="right"> -6 </td><td align="right"> 2.828427125 </td></tr><tr><td align="right"> (85) </td><td aligN = &quot;오른쪽&quot;&gt; 6.2 </td><td align="right"> 1.095445115 </td><td align="right"> -4.8 </td><td align="right"> 0.836660027 </td></tr><tr><td align="right"> (90) </td><td align="right"> 6.8 </td><td align="right"> 1.095445115 </td><td align="right"> -6.2 </td><td align="right"> 2.387467277 </td></tr><tr><td align="right"> (95) </td><td align="right"> 7.4 </td><td align="right"> 1.816590212 </td><td align="right"> -5.6 </td><td align="right"> 2.302172887 </td></tr><tr><td align="right"> (100) </td><td align="right"> 6.4 </td><td align="right"> 0.547722558 </td><td align="right"> -6.2 </td><td align="right"> 2.863564213 </td></tr><tr><td align="right"> (105) </td><td align="right"> 6.6 </td><td align="right"> 0.894427191 </td><td align="right"> -7.2 </td><td align="right"> 2.049390153 </td></tr><tr><td align="right"> (110) </td><td align="right"> 6.2 </td><td align="right"> 1.643167673 </td><td align="right"> -6.4 </td> &lt;TD 정렬 = &quot;오른쪽&quot;&gt; 2.966479395 </td></tr><tr><td align="right"> (115) </td><td align="right"> 8.8 </td><td align="right"> 3.898717738 </td><td align="right"> -6 </td><td align="right"> 3.16227766 </td></tr><tr><td align="right"> (120) </td><td align="right"> 7.4 </td><td align="right"> 1.516575089 </td><td align="right"> -6 </td><td align="right"> 2.34520788 </td></tr><tr><td align="right"> (125) </td><td align="right"> 6.8 </td><td align="right"> 1.095445115 </td><td align="right"> -6 </td><td align="right"> 2.645751311 </td></tr><tr><td align="right"> (130) </td><td align="right"> 7 </td><td align="right"> (1) </td><td align="right"> -6.6 </td><td align="right"> 1.816590212 </td></tr></tbody></table> 표 1 : 콜 모고 로프 - 스 미르 노프가 발생합니다. <table border="0"><tbody><tr><td> 시간 [분] </td><td> B 파의 진폭 [μV] </td><td> SD </td><td> 파 진폭 [μV] </td&gt; <td> SD </td></tr><tr><td align="right"> 0 </td><td align="right"> 9.25 </td><td align="right"> 0.5 </td><td align="right"> -10 </td><td align="right"> (1) </td></tr><tr><td align="right"> (5) </td><td align="right"> 10.5 </td><td align="right"> 0.577350269 </td><td align="right"> -10 </td><td align="right"> (1) </td></tr><tr><td align="right"> (10) </td><td align="right"> 10.25 </td><td align="right"> 0.5 </td><td align="right"> -10.4 </td><td align="right"> 0.894427191 </td></tr><tr><td align="right"> (15) </td><td align="right"> 10.5 </td><td align="right"> 0.577350269 </td><td align="right"> -9.6 </td><td align="right"> 0.894427191 </td></tr><tr><td align="right"> (20) </td><td align="right"> (10) </td><td align="right"> 0.816496581 </td><td align="right"> -9.6 </td><td align="right"> 0.547722558 </td></tr><tr><td align="right"> (25) </td><td align="right"> 10.75 </td><td align="right"> 0.5 </td><td&gt; = &quot;권리&quot;정렬 - 10.2 </td><td align="right"> 0.836660027 </td></tr><tr><td align="right"> (30) </td><td align="right"> 3 </td><td align="right"> 1.825741858 </td><td align="right"> -8.4 </td><td align="right"> 2.701851217 </td></tr><tr><td align="right"> (35) </td><td align="right"> (6) </td><td align="right"> 3.559026084 </td><td align="right"> -9 </td><td align="right"> (1) </td></tr><tr><td align="right"> (40) </td><td align="right"> 5.25 </td><td align="right"> 2.62995564 </td><td align="right"> -8.4 </td><td align="right"> 2.966479395 </td></tr><tr><td align="right"> (45) </td><td align="right"> 2.75 </td><td align="right"> 2.061552813 </td><td align="right"> -9 </td><td align="right"> 1.414213562 </td></tr><tr><td align="right"> (50) </td><td align="right"> 2.75 </td><td align="right"> 0.957427108 </td><td align="right"> -8 </td><td align="right"> 0.707106781 </td></tr><tr><td align="right"> (55) </td><td= &quot;오른쪽&quot;&gt; 2.5를 정렬 </td><td align="right"> (1) </td><td align="right"> -10.2 </td><td align="right"> 1.095445115 </td></tr><tr><td align="right"> (60) </td><td align="right"> 2.25 </td><td align="right"> 0.957427108 </td><td align="right"> -8.4 </td><td align="right"> 1.816590212 </td></tr><tr><td align="right"> (65) </td><td align="right"> 이 </td><td align="right"> 1.414213562 </td><td align="right"> -8.6 </td><td align="right"> 1.140175425 </td></tr><tr><td align="right"> (70) </td><td align="right"> 1.75 </td><td align="right"> 0.5 </td><td align="right"> -9.4 </td><td align="right"> 2.701851217 </td></tr><tr><td align="right"> (75) </td><td align="right"> 8 </td><td align="right"> 3.464101615 </td><td align="right"> -9.2 </td><td align="right"> 2.28035085 </td></tr><tr><td align="right"> (80) </td><td align="right"> 9.5 </td><td align="right"> 3.696845502 </td><td align="right"> -9 </td><td align="right"> (1) </TD&gt; </tr><tr><td align="right"> (85) </td><td align="right"> 8 </td><td align="right"> 2.160246899 </td><td align="right"> -10.8 </td><td align="right"> 2.48997992 </td></tr><tr><td align="right"> (90) </td><td align="right"> 8.25 </td><td align="right"> 0.957427108 </td><td align="right"> -9.2 </td><td align="right"> 2.167948339 </td></tr><tr><td align="right"> (95) </td><td align="right"> 9.25 </td><td align="right"> 2.872281323 </td><td align="right"> -10 </td><td align="right"> 1.870828693 </td></tr><tr><td align="right"> (100) </td><td align="right"> 9.75 </td><td align="right"> 0.957427108 </td><td align="right"> -9.6 </td><td align="right"> 1.140175425 </td></tr><tr><td align="right"> (105) </td><td align="right"> 13.5 </td><td align="right"> 3.872983346 </td><td align="right"> -9.2 </td><td align="right"> 1.643167673 </td></tr><tr><td align="right"> (110) </td><td align="right"> 11.75 </td><td aligN = &quot;오른쪽&quot;&gt; 2.5 </td><td align="right"> -9.6 </td><td align="right"> 1.140175425 </td></tr><tr><td align="right"> (115) </td><td align="right"> 9 </td><td align="right"> 1.825741858 </td><td align="right"> -10 </td><td align="right"> 1.870828693 </td></tr><tr><td align="right"> (120) </td><td align="right"> (11) </td><td align="right"> 3.366501646 </td><td align="right"> -9.8 </td><td align="right"> 1.303840481 </td></tr><tr><td align="right"> (125) </td><td align="right"> (11) </td><td align="right"> 2.708012802 </td><td align="right"> -10.8 </td><td align="right"> 0.447213595 </td></tr><tr><td align="right"> (130) </td><td align="right"> 10.5 </td><td align="right"> 0.577350269 </td><td align="right"> -10 </td><td align="right"> (1) </td></tr></tbody></table> 표 2 : B 파의 진폭에 대한 저산소증과 파 진폭 대표적인 측정. <table border="0"><tbody><tR&gt; <td></td><td> 파 데이터를 글루타메이트 </td><td> 글루타메이트 B-웨이브 데이터 </td><td> 저산소증 파 데이터 </td><td> 저산소증 B-웨이브 데이터 </td></tr><tr><td> 디 </td><td> 0.103827009 </td><td> 0.17415038 </td><td> 0.195 </td><td> 0.125 </td></tr><tr><td> p- 값 </td><td> 0.928603977 </td><td> 0.375501627 </td><td> 0.250 </td><td> 0.781 </td></tr><tr><td> 알파 </td><td> 0.05 </td><td> 0.05 </td><td> 0.05 </td><td> 0.05 </td></tr></tbody></table> 표 3 : B 파의 진폭 250 μM 글루타메이트 대표적인 측정과 파의 진폭.

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Glutamate and Hypoxia as a Stress Model for the Isolated Perfused Vertebrate Retina

이 연구로, 우리는 미래의 임상 치료 테스트를위한 격리 superfused 소 망막을위한 표준화 된 스트레스 모델을 소개합니다. A- 및 B- 파의 진폭에 의해 표현 망막 함수에 어느 저산소증 (순수한 N 2) 응력 또는 글루타메이트 (250 μM 글루타메이트)의 효과를 평가 하였다.

고립 된 관류 척추 동물의 망막에 대한 스트레스 모델로 글루타민산과 저산소증

Neuroprotection has been a strong field of investigation in ophthalmological research in the past decades and affects diseases such as glaucoma, retinal ...

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Nanyang Technological University

Research

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Assessment of Vascular Regeneration in the CNS Using the Mouse Retina

The rodent retina is perhaps the most accessible mammalian system in which to investigate neurovascular interplay within the central nervous system (CNS). It is increasingly being recognized that several neurodegenerative diseases such as Alzheimer&#8217;s, multiple sclerosis, and amyotrophic lateral sclerosis present elements of vascular compromise. In addition, the most prominent causes of blindness in pediatric and working age populations (retinopathy of prematurity and diabetic retinopathy, respectively) are characterized by vascular degeneration and failure of physiological vascular regrowth. The aim of this technical paper is to provide a detailed protocol to study CNS vascular regeneration in the retina. The method can be employed to elucidate molecular mechanisms that lead to failure of vascular growth after ischemic injury. In addition, potential therapeutic modalities to accelerate and restore healthy vascular plexuses can be explored. Findings obtained using the described approach may provide therapeutic avenues for ischemic retinopathies such as that of diabetes or prematurity and possibly benefit other vascular disorders of the CNS.

The rodent retina has long been recognized as an accessible window to the brain. In this technical paper we provide a protocol that employs the mouse model of oxygen-induced retinopathy to study the mechanisms that lead to failure of vascular regeneration within the central nervous system after ischemic injury. The described system can also be harnessed to explore strategies to promote regrowth of functional blood vessels within the retina and CNS.

마우스 망막을 사용하여 중추 신경계의 혈관 재생의 평가

The rodent retina is perhaps the most accessible mammalian system in which to investigate neurovascular interplay within the central nervous system (CNS). ...

연구

신경과학

The Analysis of Neurovascular Remodeling in Entorhino-hippocampal Organotypic Slice Cultures

Ischemic brain injury is among the most common and devastating conditions compromising proper brain function and often leads to persisting functional deficits in the affected patients. Despite intensive research efforts, there is still no effective treatment option available that reduces neuronal injury and protects neurons in the ischemic areas from delayed secondary death. Research in this area typically involves the use of elaborate and problematic animal models. Entorhino-hippocampal organotypic slice cultures challenged with oxygen and glucose deprivation (OGD) are established in&#160;vitro models which mimic cerebral ischemia. The novel aspect of this study is that changes of the brain blood vessels are studied in addition to neuronal changes and the reaction of both the neuronal compartment and the vascular compartment can be compared and correlated. The methods presented in this protocol substantially broaden the potential applications of the organotypic slice culture approach. The induction of OGD or hypoxia alone can be applied by rather simple means in organotypic slice cultures and leads to reliable and reproducible damage in the neural tissue. This is in stark contrast to the complicated and problematic animal experiments inducing stroke and ischemia in vivo. By broadening the analysis to include the study of the reaction of the vasculature could provide new ways on how to preserve and restore brain functions. The slice culture approach presented here might develop into an attractive and important tool for the study of ischemic brain injury and might be useful for testing potential therapeutic measures aimed at neuroprotection.

A protocol for entorhino-hippocampal organotypic slice cultures, which allows reproducing many aspects of ischemic brain injury, is presented. By studying changes of the neurovasculature in addition to changes in the neurons, this protocol is a versatile tool to study plastic changes in neural tissue after injury.

에서 신경 혈관 리모델링의 분석 Entorhino - 해마 Organotypic 슬라이스 문화

Ischemic brain injury is among the most common and devastating conditions compromising proper brain function and often leads to persisting functional ...

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

Ischemia-Reperfusion (IR) injury is known to contribute significantly to the morbidity and mortality associated with ischemic strokes. Ischemic cerebrovascular accidents account for 80% of all strokes. A common cause of IR injury is the rapid inflow of fluids following an acute/chronic occlusion of blood, nutrients, oxygen to the tissue triggering the formation of free radicals.
Ischemic stroke is followed by blood-brain barrier (BBB) dysfunction and vasogenic brain edema. Structurally, tight junctions (TJs) between the endothelial cells play an important role in maintaining the integrity of the blood-brain barrier (BBB). IR injury is an early secondary injury leading to a non-specific, inflammatory response. Oxidative and metabolic stress following inflammation triggers secondary brain damage including BBB permeability and disruption of tight junction (TJ) integrity.
Our protocol presents an in vitro example of oxygen-glucose deprivation and reoxygenation (OGD-R) on rat brain endothelial cell TJ integrity and stress fiber formation. Currently, several experimental in vivo models are used to study the effects of IR injury; however they have several limitations, such as the technical challenges in performing surgeries, gene dependent molecular influences and difficulty in studying mechanistic relationships. However, in vitro models may aid in overcoming many of those limitations. The presented protocol can be used to study the various molecular mechanisms and mechanistic relationships to provide potential therapeutic strategies. However, the results of in vitro studies may differ from standard in vivo studies and should be interpreted with caution.

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

Ischemia-Reperfusion (IR) injury is associated with a high rate of morbidity and mortality. The goal of the in vitro model of oxygen-glucose deprivation and reoxygenation (OGD-R) described here is to assess the effects of ischemia reperfusion injury on a variety of cells, particularly in blood-brain barrier (BBB) endothelial cells.

같은 산소 포도당 박탈과 재산 소화<em&gt; 체외</em&gt; 허혈 - 재관류 손상 모델 공부 뇌 혈관 장벽 부전

Ischemia-Reperfusion (IR) injury is known to contribute significantly to the morbidity and mortality associated with ischemic strokes. Ischemic ...

의학

Methodology for Biomimetic Chemical Neuromodulation of Rat Retinas with the Neurotransmitter Glutamate In Vitro

Photoreceptor degenerative diseases cause irreparable blindness through the progressive loss of photoreceptor cells in the retina. Retinal prostheses are an emerging treatment for photoreceptor degenerative diseases that seek to restore vision by artificially stimulating the surviving retinal neurons in the hope of eliciting comprehensible visual perception in patients. Current retinal prostheses have demonstrated success in restoring limited vision to patients using an array of electrodes to electrically stimulate the retina but face substantial physical barriers in restoring high acuity, natural vision to patients. Chemical neurostimulation using native neurotransmitters is a biomimetic alternative to electrical stimulation and could bypass the fundamental limitations associated with retinal prostheses using electrical neurostimulation. Specifically, chemical neurostimulation has the potential to restore more natural vision with comparable or better visual acuities to patients by injecting very small quantities of neurotransmitters, the same natural agents of communication used by retinal chemical synapses, at much finer resolution than current electrical prostheses. However, as a relatively unexplored stimulation paradigm, there is no established protocol for achieving chemical stimulation of the retina in vitro. The purpose of this work is to provide a detailed framework for accomplishing chemical stimulation of the retina for investigators who wish to study the potential of chemical neuromodulation of the retina or similar neural tissues in vitro. In this work, we describe the experimental setup and methodology for eliciting retinal ganglion cell (RGC) spike responses similar to visual light responses in wild-type and photoreceptor-degenerated wholemount rat retinas by injecting controlled volumes of the neurotransmitter glutamate into the subretinal space using glass micropipettes and a custom multiport microfluidic device. This methodology and protocol are general enough to be adapted for neuromodulation using other neurotransmitters or even other neural tissues.

Methodology for Biomimetic Chemical Neuromodulation of Rat Retinas with the Neurotransmitter Glutamate In Vitro

This protocol describes a novel method for investigating a form of chemical neurostimulation of wholemount rat retinas in vitro with the neurotransmitter glutamate. Chemical neurostimulation is a promising alternative to the conventional electrical neurostimulation of retinal neurons for treating irreversible blindness caused by photoreceptor degenerative diseases.

쥐 망막 신경 전달 물질 글루타민 산 염에 체 외에서 의 생체 모방 화학 Neuromodulation 위한 방법론

Photoreceptor degenerative diseases cause irreparable blindness through the progressive loss of photoreceptor cells in the retina. Retinal prostheses are ...

생체공학

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoma is a disease of the central nervous system affecting retinal ganglion cells (RGCs). RGC axons making up the optic nerve carry visual input to the brain for visual perception. Damage to RGCs and their axons leads to vision loss and/or blindness. Although the specific cause of glaucoma is unknown, the primary risk factor for the disease is an elevated intraocular pressure. Glaucoma-inducing procedures in animal models are a valuable tool to researchers studying the mechanism of RGC death. Such information can lead to the development of effective neuroprotective treatments that could aid in the prevention of vision loss. The protocol in this paper describes a method of inducing glaucoma - like conditions in an in vivo rat model where 50 &#181;l of 2 M hypertonic saline is injected into the episcleral venous plexus. Blanching of the vessels indicates successful injection. This procedure causes loss of RGCs to simulate glaucoma. One month following injection, animals are sacrificed and eyes are removed. Next, the cornea, lens, and vitreous are removed to make an eyecup. The retina is then peeled from the back of the eye and pinned onto sylgard dishes using cactus needles. At this point, neurons in the retina can be stained for analysis. Results from this lab show that approximately 25% of RGCs are lost within one month of the procedure when compared to internal controls. This procedure allows for quantitative analysis of retinal ganglion cell death in an in vivo rat glaucoma model.

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoma is characterized by damage to retinal ganglion cells. Inducing glaucoma in animal models can provide insight into the study of this disease. Here, we outline a procedure that induces loss of RGCs in an in vivo rat model and demonstrates the preparation of whole-mount retinas for analysis.

녹내장 유도 절차<em&gt; 생체</em&gt; 쥐 모델 및 전체 마운트 망막 준비

Glaucoma is a disease of the central nervous system affecting retinal ganglion cells (RGCs). RGC axons making up the optic nerve carry visual input to the ...

Monitoring Astrocyte Reactivity and Proliferation in Vitro Under Ischemic-Like Conditions

Ischemic stroke is a complex brain injury caused by a thrombus or embolus obstructing blood flow to parts of the brain. This leads to deprivation of oxygen and glucose, which causes energy failure and neuronal death. After an ischemic stroke insult, astrocytes become reactive and proliferate around the injury site as it develops. Under this scenario, it is difficult to study the specific contribution of astrocytes to the brain region exposed to ischemia. Therefore, this article introduces a methodology to study primary astrocyte reactivity and proliferation under an in vitro model of an ischemia-like environment, called oxygen glucose deprivation (OGD). Astrocytes were isolated from 1-4 day-old neonatal rats and the number of non-specific astrocytic cells was assessed using astrocyte selective marker Glial Fibrillary Acidic Protein (GFAP) and nuclear staining. The period in which astrocytes are subjected to the OGD condition can be customized, as well as the percentage of oxygen they are exposed to. This flexibility allows scientists to characterize the duration of the ischemic-like condition in different groups of cells in vitro. This article discusses the timeframes of OGD that induce astrocyte reactivity, hypertrophic morphology, and proliferation as measured by immunofluorescence using Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA). Besides proliferation, astrocytes undergo energy and oxidative stress, and respond to OGD by releasing soluble factors into the cell medium. This medium can be collected and used to analyze the effects of molecules released by astrocytes in primary neuronal cultures without cell-to-cell interaction. In summary, this primary cell culture model can be efficiently used to understand the role of isolated astrocytes upon injury.

Monitoring Astrocyte Reactivity and Proliferation in Vitro Under Ischemic-Like Conditions

Ischemic stroke is a complex event in which the specific contribution of astrocytes to the affected brain region exposed to oxygen glucose deprivation (OGD) is difficult to study. This article introduces a methodology to obtain isolated astrocytes and study their reactivity and proliferation under OGD conditions.

사이토 반응성 및 확산에서 체 외에 허 혈 성 같은 조건 모니터링

Ischemic stroke is a complex brain injury caused by a thrombus or embolus obstructing blood flow to parts of the brain. This leads to deprivation of ...

A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, diabetic retinopathy, and retinal vascular occlusions. Rodent models of I/R injury are providing significant insights into mechanisms and treatment strategies for human I/R injury, especially with regard to neurodegenerative damage in the retinal neurovascular unit. Presented here is a protocol for inducing retinal I/R injury in mice through elevation of intraocular pressure (IOP). In this protocol, the ocular anterior chamber is cannulated with a needle, through which flows the drip of an elevated saline reservoir. Using this drip to raise IOP above systolic arterial blood pressure, a practitioner temporarily halts inner retinal blood flow (ischemia). When circulation is reinstated (reperfusion) by removal of the cannula, severe cellular damage ensues, resulting ultimately in retinal neurodegeneration. Recent studies demonstrate inflammation, vascular permeability, and capillary degeneration as additional elements of this model. Compared to alternative retinal I/R methodologies, such as retinal arterial ligation, retinal I/R injury by elevated IOP offers advantages in its&#160;anatomical specificity, experimental tractability, and technical accessibility, presenting itself as a valuable tool for examining neuronal pathogenesis and therapy in the retinal neurovascular unit.

This article describes a procedure for inducing retinal ischemia-reperfusion injury by elevated intraocular pressure in mice. Retinal ischemia-reperfusion injury by elevated intraocular pressure serves to model human pathologies characterized by compromised oxygen and nutrient delivery in the retina, enabling researchers to examine potential cellular mechanisms and treatments for human diseases of the retinal neurovascular unit.

안압 상승을 통해 망막 허혈 - 재관류 손상의 마우스 모델

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, ...

An Acute Retinal Model for Evaluating Blood Retinal Barrier Breach and Potential Drugs for Treatment

A low-cost, easy-to-use and powerful model system is established to evaluate potential treatments that could ameliorate blood retinal barrier breach. An inflammatory factor, histamine, is demonstrated to compromise vessel integrity in the cultured retina through positive staining of IgG outside of the blood vessels. The effects of histamine itself and those of candidate drugs for potential treatments, such as lipoxin A4, are assessed using three parameters: blood vessel leakage via IgG immunostaining, activation of M&#252;ller cells via GFAP staining and change in neuronal dendrites through staining for MAP2. Furthermore, the layered organization of the retina allows a detailed analysis of the processes of M&#252;ller and ganglion cells, such as changes in width and continuity. While the data presented is with swine retinal culture, the system is applicable to multiple species. Thus, the model provides a reliable tool to investigate the early effects of compromised retinal vessel integrity on different cell types and also to evaluate potential drug candidates for treatment.

A low-cost, easy-to-use and powerful system is established to evaluate potential treatments that could ameliorate blood retinal barrier breach induced by histamine. Blood vessel leakage, M&#252;ller cell activation and the continuity of neuronal processes are utilized to assess the damage response and its reversal with a potential drug, lipoxin A4.

치료를 위해 혈액 망막 장벽 위반 및 잠재적 인 마약을 평가하는 급성 망막 모델

A low-cost, easy-to-use and powerful model system is established to evaluate potential treatments that could ameliorate blood retinal barrier breach. An ...

A Murine Model of Ischemic Retinal Injury Induced by Transient Bilateral Common Carotid Artery Occlusion

Diverse vascular diseases such as diabetic retinopathy, occlusion of retinal veins or arteries and ocular ischemic syndrome can lead to retinal ischemia. To investigate pathological mechanisms of retinal ischemia, relevant experimental models need to be developed. Anatomically, a main retinal blood supplying vessel is the ophthalmic artery (OpA) and OpA originates from the internal carotid artery of the common carotid artery (CCA). Thus, disruption of CCA could effectively cause retinal ischemia. Here, we established a mouse model of retinal ischemia by transient bilateral common carotid artery occlusion (tBCCAO) to tie the right CCA with 6-0 silk sutures and to occlude the left CCA transiently for 2 seconds via a clamp, and showed that tBCCAO could induce acute retinal ischemia leading to retinal dysfunction. The current method reduces reliance on surgical instruments by only using surgical needles and a clamp, shortens occlusion time to minimize unexpected animal death, which is often seen in mouse models of middle cerebral artery occlusion, and maintains reproducibility of common retinal ischemic findings. The model can be utilized to investigate the pathophysiology of ischemic retinopathies in mice and further can be used for in vivo drug screening.

Here, we describe a mouse model of retinal ischemia by transient bilateral common carotid artery occlusion using simple sutures and a clamp. This model can be useful for understanding the pathological mechanisms of retinal ischemia caused by cardiovascular abnormalities.

과도 양측 공통 경동맥 폐색에 의해 유도된 허혈성 망막 손상의 뮤린 모델

Diverse vascular diseases such as diabetic retinopathy, occlusion of retinal veins or arteries and ocular ischemic syndrome can lead to retinal ischemia. ...

Retinal Explant of the Adult Mouse Retina as an Ex Vivo Model for Studying Retinal Neurovascular Diseases

One of the challenges in retina research is studying the cross-talk between different retinal cells such as retinal neurons, glial cells, and vascular cells. Isolating, culturing, and sustaining retinal neurons in vitro have technical and biological limitations. Culturing retinal explants may overcome these limitations and offer a unique ex vivo model to study the cross-talk between various retinal cells with well-controlled biochemical parameters and independent of the vascular system. Moreover, retinal explants are an effective screening tool for studying novel pharmacological interventions in various retinal vascular and neurodegenerative diseases such as diabetic retinopathy. Here, we describe a detailed protocol for retinal explants' isolation and culture for an extended period. The manuscript also presents some of the technical problems during this procedure that may affect the desired outcomes and reproducibility of the retinal explant culture. The immunostaining of the retinal vessels, glial cells, and neurons demonstrated intact retinal capillaries and neuroglial cells after 2 weeks from the beginning of the retinal explant culture. This establishes retinal explants as a reliable tool for studying changes in the retinal vasculature and neuroglial cells under conditions that mimic retinal diseases such as diabetic retinopathy.

Retinal Explant of the Adult Mouse Retina as an Ex Vivo Model for Studying Retinal Neurovascular Diseases

This protocol presents and describes steps for the isolation, dissection, culturing, and staining of retinal explants obtained from an adult mouse. This method is beneficial as an ex vivo model for studying different retinal neurovascular diseases such as diabetic retinopathy.

망막 신경혈관 질환 연구를 위한 생체 외 모델로서의 성인 마우스 망막의 망막 외 이식편

One of the challenges in retina research is studying the cross-talk between different retinal cells such as retinal neurons, glial cells, and vascular ...

고립 된 관류 척추 동물의 망막에 대한 스트레스 모델로 글루타민산과 저산소증

요약

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