ゼブラフィッシュの胚および幼生における高分解能細胞移植

私たちの研究室では、発達と再生の過程で神経系で細胞の接続性がどのようにパターン化されるかを研究しています。私たちは、細胞移植を使用して、環境信号が神経行動にどのように影響するかを調べ、さまざまな遺伝的空間的または時間的環境に配置されたときに彼らの行動がどのように変化するかに対処します。移植はゼブラフィッシュの胚によく見られますが、一般的には細胞がほとんど分化していない胞胚期と原腸期に行われます。

これは、遺伝的モザイクを生成するために価値がありますが、空間的な時間的シグナル伝達ダイナミクスがこれらの段階を超えて発達にどのように影響するかを調査する技術の能力を制限します。ここでは、受精後少なくとも7日までの胚や幼虫の分化ニューロンを含む細胞の移植を可能にするプロトコルを紹介します。私たちは、高い空間的および時間的解像度で1つの細胞を移植することができ、宿主動物の移植細胞の長期追跡に遺伝的蛍光標識を使用することができます。

このプロトコルにより、多くの異なる発生段階で細胞の遺伝的空間的および時間的環境を変化させることができ、発生および再生中のスタイルシグナル伝達の原理を調べる新たな機会が開かれます。