Trasplante celular de alta resolución en embriones y larvas de pez cebra

Nuestro laboratorio estudia cómo se modela la conectividad celular en el sistema nervioso durante el desarrollo y la regeneración. Examinamos cómo las señales ambientales influyen en el comportamiento neuronal mediante el uso del trasplante de células para abordar cómo cambia su comportamiento cuando se colocan en diferentes entornos genéticos, espaciales o temporales. Si bien el trasplante es común en los embriones de pez cebra, generalmente se realiza durante las etapas de blástula y gástrula, cuando las células están en gran medida indiferenciadas.

Esto es valioso para generar mosaicos genéticos, pero limita la capacidad de la técnica para interrogar cómo la dinámica de señalización espacio-temporal influye en el desarrollo más allá de estas etapas. Aquí, presentamos un protocolo que permite el trasplante de células, incluyendo neuronas diferenciadas en embriones y larvas hasta al menos siete días después de la fertilización. Podemos trasplantar tan solo una célula con alta resolución espacial y temporal y utilizar el marcaje genético fluorescente para el seguimiento a largo plazo de las células trasplantadas en el animal huésped.

Este protocolo nos permite alterar el entorno genético espacial y temporal de las células en muchas etapas de desarrollo diferentes, lo que abre nuevas oportunidades para examinar los principios de la señalización de estilo durante el desarrollo y la regeneración.