中性コメットアッセイによる分裂中のヒト細胞におけるDNA切断の検出

当研究室の主な目的は、ヒト細胞におけるゲノム複製を促進するメカニズムを研究することです。私たちのプロジェクトは、クロマチンリモデラーが複製フォークでどのように作用してDNA合成を促進するかを理解することに焦点を当てています。フォークは、レプリケーションのストレスにさらされると、複数の処理イベントを受けます。

これらの事象は、修復せずに放置すると有毒な破損に変換される可能性のある複製中間体を引き起こします。最近の研究では、新生DNAに一本鎖DNAギャップが存在すると、ゲノムが不安定になり、化学療法感受性の決定因子となることが示されています。私たちの研究は、DNA合成における保存されたヌクレオソームリモデラーであるSNF2Lの役割に取り組んでいます。

SNF2Lはレプリケーションフォークとともに移動しますが、作用機序の特性は十分に解明されていません。コメットアッセイプロトコルを使用することで、SNF2Lが存在しない場合のフォークの安定性への影響を評価することができます。