ラットの固定化誘発膝屈曲収縮を研究するための小型侵襲的内部固定技術

このシンプルで効果的な筋肉ギャップ分離モデルの技術は、ミニ浸潤法の方法を組み合わせた、私たちのラット膝関節収縮モデルで最高の内部固定です。この技術の主な利点は、それが再現可能であり、動物の膝関節の収縮を誘発する低侵襲の代替手段である。この手順のデモンストレーションは、私の研究室の大学院生である椎海江とフェイ・ザンです。

足指ピンチに対する応答の欠如を確認した後、2つの後肢を含む麻酔ラットの下半身を剃る。露出した皮膚をポビドネヨウ素のチンキを2回、75%エタノールで3回消毒する。動物の目に軟膏を塗布し、ラットを後肢1本と股関節露出した外科的ドレープの下に横に置きます。

追加のポビドネヨウ素で手術領域を消毒します。大腿骨大きなトロシャンターの遠位端で、皮膚切開の方向を示すために、大腿部の筋と上腕二頭筋の間の筋肉のギャップの体表面突起に沿って線を引く。次に、線に沿って表皮に1.5センチメートルの切開を行います。

大腿骨シャフトの約1センチメートルが露出するまで、組織鉗子を使用して、大腿二頭筋との間の筋肉のギャップをぶっきらぼうに解剖する。筋の隙間の連続的な分離を容易にするためにレトラクターを使用してください。脛骨前と遠位下肢の脛骨長と脛骨長間の筋肉のギャップの体表面突起に沿って表皮に1センチメートルの切開を行う。

脛部の約1センチが露出するまで、筋肉の隙間をぶっきらぼうに解剖する。リトラクターと滑らかな鉗子を使用して、柔らかい組織を分離します。ドリルを骨に垂直に保持し、直径1ミリメートルの穴を大腿骨シャフトに1ミリメートル、毎分500回転、大きなトロシャンターの下端から約8ミリメートル下にドリルします。

傷口を素早く押して出血を止め、脛骨融像の縁から約4ミリメートル下の脛骨に直径0.9ミリメートルの穴を開けます。まっすぐな蚊型止血クランプを使用して脛骨穴から大腿骨の穴まで筋下のコースを形成し、脛骨端の胃腸の下を通過し、大腿骨端の上腕二頭筋大腿骨の下の大腿骨のメディウスの上を通過する。次に、1 m1.4 を 8 ミリメートルのスチールネジで使用して、近位大腿骨のプラスチックプレートの一方の端を固定します。

遠位脛骨のプラスチック板の別の端を固定するために、1つのm1.2を6ミリメートルの鋼ネジで使用してください。プレートが固定されたら、4-0吸収性縫合糸を使用して、筋膜、深い筋膜、皮下組織を閉じます。シルク縫合糸で肌を閉じます。

X線イメージングは、大腿骨または脛骨内の鋼ねじの正しい配置を明らかにする。高解像度のマイクロコンピュータ断層撮影スキャン後の3次元再構成解析は、近位大腿骨の大トロシャンターの下端から約8ミリメートル下、遠位脛骨融合の端より約4ミリメートル下のねじの横配置を示す。関節形成性欠損は、時間依存的な方法で固定化中に運動の範囲が増加する。

56日間の固定化で対照膝関節と比較して固定化膝関節について測定された高い平均関節形成欠損によって示されるように。1日目の固定化では、後方上の膝関節カプセルを固定化または反対側の膝関節で大腿骨の後上側関節との関節空間で弾性染色しても接着は認められない。しかし、28日間の固定化によって、フィブロード組織沈着物および接着は固定化された膝の関節空間に発達する。

56日間の固定化の後、繊維組織は部分的に堆積物に置き換えられ、このタイプの接着は反側膝関節では観察されない。この方法は、オタワ大学のTrudel教授と同僚が使用した方法から変更されます。手術中に筋肉の隙間を識別し、分離することが重要です。

異なる固定化技術に従って膝関節カプセルの培養などの他の実験プロセスを、基礎となる分子機構を研究することができる。