この方法は、心筋損傷後の心臓再生の進行など、再生分野の重要な質問に答えるのに役立ちます。この技術の主な利点は、それは、アキソロテルの心機能の高解像、非侵襲的、および反復可能な評価を提供することです。さらに、この方法は、イニュートやキセノプスなどの他の両生類モデル生物にも適用できます。
唇の形をした動物のベッドに麻酔付きのアキソロトル・スピンを配置することから始めます。培地が加えられると、動物が浮かんでしまうので、緩いゴムバンドで固定する必要があります。次に、胸郭が3〜5ミリメートルの深さになるように麻酔薬を含む培地でベッドを満たします。
Bモード、カラードップラーモード、パルス波ドップラーモードデータのみを使用している場合は、この手順に対してアキソロトルを警告することができます。この状況では、動物をハンモックに置き、30〜60分間ストレスから回復させてから進めます。白またはアルビノ動物の場合は、トランスデューサーを配置するのに役立つ冷たい光源を用意してください。
トランスデューサの場合は、動物の質量に応じて40ヘルツまたは50ヘルツモデルを使用します。次いで、トランスデューサ超音波ゲルを調製し、データ収集を進める。超音波トランスデューサを胸部領域の動物の正中線に配置し、その長い軸に平行に配置することから始めます。
胸腔の右側に位置する心室のごく一部は、心室側座にフレーム内に現れるべきである。両方のアトリアの大部分も、静脈内毒症のように見えるはずです。これらの構造は、収縮期または収縮期図で識別可能であるべきである。
次に、トランスデューサを1〜3ミリメートル右に変換し、心室長軸図を得る。最終的には、端収縮性心室の断面積が最大であるとき、正しい位置が達成される。正しい2D超音波測定は、トランスデューサの正しい位置に大きく依存しています。
トランスデューサの配置を細心の注意を払って実践し、オペレータ間解析を行い、主観を最小限に抑えます。今、Bモードでは、少なくとも毎秒50フレームで少なくとも3つの心周期を取得する。一般的な画像モードまたは心臓病モードを使用するかを選択します。
次に、心室の中心が画面の中央になるまで、動物の長軸に沿ってトランスデューサを翻訳します。次に、トランスデューサを時計回りに90度回転させて、中室短軸図を得ます。この位置から、心の長い軸に沿ってトランスデューサを変換して心室の円形を評価する。
次に、トランスデューサを長軸平面に戻し、それを正軸方向に戻して、心房長軸2部屋ビューを得る。正しい位置は、端収縮性心房の断裂領域が最大である場合に達成され、2つのアトリアが左に約45度傾いたときに8番の輪郭を仮定する。次に、Bモード画像を収集します。
続行するには、流出管が表示されるまでトランスデューサを右に移動します。心室端収縮期図は、流出の直径が最大の場合に正しく、そして、中注入の間に、流出の入り口にある2つの半ルミナー弁が見える場合である。このビューから、速度および流量の測定はドップラーのイメージ投射を使用して行うことができる。
色ドップラーモードを適用して、心臓注射中に流出管の血流速度をマッピングします。次に、色ドップラーイメージングとパワードップラーイメージングを適用して、心室ビューで血流を可視化し、心房ビューでも同様に行います。次に、トランスデューサに向かって直接走る流出管の最大の血液速度の位置に向けられた色ドップラーモードを使用する。
流出がトランスデューサに完全に垂直でない場合は、ビーム角度と角度補正を適用して、画像を最大45度補正します。次に、パルス波ドップラーモードで速度時間データを収集します。心臓サイクルの段階の間に、スパイラル弁は流出のビューと重なるべきである。
少なくとも3つの心周期からデータを収集する。次いで、トランスデューサを移動させることなく、少なくとも3つの心周期からBモードでデータを取得する。次に、麻酔動物の場合のみ、動物の右の部分が上向きになるように動物を90度回転させ、トランスデューサーを斜めのパラギルビューに移動します。
このビューは流出路の血流速度の代替測定を提供する。流出路は約45度で下方に走っており、アトリアは注入中に流出管の下に現れるべきである。最後に、パルス波ドップラーモードに切り替え、トランスデューサを配置して、流出管内のトランスデューサから逃げ出す最大の血液速度を表示します。
必要に応じて、最大 45 度のビーム角度と角度補正を使用して、流出をトランスデューサに対して垂直にします。次に、パルス波ドップラーモードとBモードで、以前と同じ位置からデータを収集します。3Dの取得には時間がかかるので、アキソロテルは麻酔をしなければなりません。
唇の形をした動物のベッドにスピンを置きます。ゴムバンドで固定し、麻酔薬を含む超音波媒体の3〜5ミリメートルにその胸部表面を沈めます。3D取得中の動きは、その後の再建に有害です。
3D超音波取得中に動物が移動する場合、手順は最初から繰り返す必要があります。次に、トランスデューサを胸部領域の正中線に配置し、矢状3D記録のために長軸に平行に配置するか、または横3D記録のために長い軸に直交する。次に、トランスデューサを変換して、心臓領域全体が後続の3Dキャプチャで覆われるようにします。
面内寸法と面外寸法の両方で移動します。イメージングモードの場合、動物の心拍数が毎分20〜60拍の場合は、一般的なイメージングモードを選択します。それ以外の場合は、心臓病モードを選択します。
ライトを消します。今、生のBモード画像では、解剖学的構造がほとんど認識できないレベルに2Dゲインを調整します。これにより、最終的な再構築における信号対雑音比が増加します。
次に、Z ステップまたはスライスの厚さのサイズを決定します。さて、トランスデューサを一度に1つのZステップで翻訳し、心臓領域全体が覆われるまで各Zステップで1,000フレームを含む記録を取る。10グラム、10センチメートルのアキソロテルの2D心エコー分析を、記載された技術を用いて行った。
長軸ビューは良い出発点を提供しました。中線面は、正気静脈、心房、心室の一部を示した。心室面を見て、心室は球状で高度に線維化されることを示した。
心房面では、心房はより不規則に見え、かろうじてトラベキュリに見えた。流出管の中心は心室の中心に近い。長軸からのパルス波ドップラーと斜めのパラギル面からの心周期の測定は、いくつかのバックグラウンドノイズを有していた。
このノイズは、速度時間を一体化する際に克服可能でした。カラードップラーおよびパワードップラーイメージングは、心臓室を通るフローパターンを示した。心室、心房、流出路からの眺めが可能であった。
3D心エコー撮影も行った。この心臓のマルチ平面図には、サーフェスとボリュームの再構築、3D モデルのセグメンテーションと生成など、多くの用途があります。このビデオを見た後、あなたはアキソロテルで2Dと3D心エコー検査を行う方法をよく理解しているはずです。
一度習得すると、2D超音波技術は、それが適切に行われる場合、動物あたり5分未満で行うことができますが、3D取得は動物あたり最大1時間かかることがあります。この手順に従って、心臓の構造および解剖学に関連する追加の質問に答えるために、心臓抽出および組織学のような他の方法を行うことができる。
