スリッパリーロック大学が提供する資金。私たちは、彼らの洞察力のためにT・ボロン III（スリッパリーロック大学）とC・ハニー（ペンシルバニア大学）に感謝したいと思います。

ニッケル - シッフ塩基錯体の加水分解1。 <ol><li>室温で250 mLの丸底フラスコに撹拌しながらN、N-ジメチルホルムアミド（DMF）40mLにニッケルPBP-シッフ塩基錯体の1モルを溶解します。 </li><li> 0.2 M水性EDTA溶液、pH4.5中の60ミリリットルを加えます。 </li><li>磁気撹拌棒を使用し、プレートを攪拌、一晩組み合わせたソリューションをかき混ぜます。シッフ塩基錯体が加水分解されるように、色が白に深紅からシフトします。 </li><li>任意赤色着色の欠如によって示されるように反応が完了した後、250mLの分液漏斗に反応を転送します。 </li><li> 、50 mLのジクロロメタンを追加し、分液漏斗をキャップし、混合します。廃棄物のビーカーに有機洗浄液を排出します。 PBPと残留ニッケルPBP-シッフ塩基錯体を除去するために、このプロセスを3回繰り返します。 250mLの丸底フラスコに残った水層を集めます。 </li></ol>加水分解アミノ酸の2のFmoc保護<ol><li&gt;固体の重炭酸ナトリウムを用いてpHを7に上述のステップ1.5から単離し、水層を調整します。定期的にpH試験ストリップを用いてpHをチェックしてください。 </li><li>溶液に168 mgの重炭酸ナトリウム（2.00ミリモル、2当量）を添加し、磁気攪拌棒を用いて撹拌し、プレートを攪拌します。 </li><li> 10mLのバイアル中のジオキサンの最小量（約4または5 mL）中に337ミリグラムのFmoc Nヒドロキシスクシンイミドエステル（1.00ミリモル、1当量）を溶解。水溶液に、このソリューションを移し、一晩撹拌。 </li><li>反応物を一晩撹拌させた後、1 M塩酸でpH 2に、得られた溶液を酸性化します。定期的にpH試験ストリップを用いてpHをチェックしてください。 </li><li> 250mLの分液漏斗に反応を転送し、50mLの酢酸エチルを加えます。分液漏斗をキャップよく混合し、250 mLの三角フラスコに有機層を集めます。有機抽出物を組み合わせ、このプロセスをさらに2回繰り返します。マグネシウムsulfatの約3グラムと一緒にした有機抽出物を乾燥電子。 </li><li>粗製Fmoc-保護アミノ酸を得、ロータリーエバポレーターを使用して、合わせた有機抽出物を濃縮します。 </li></ol>

<ol>
	<li>Wang, J., Shi, T., Deng, G., Jiang, H., Liu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+Enantio-+and+Diastereoselective+Mannich+Reactions+of+Chiral+Ni(II)+Glycinates+with+amino+sulfones.+Efficient+asymmetric+synthesis+of+aromatic+&#945;,&#946;-diamino+acids.">Highly Enantio- and Diastereoselective Mannich Reactions of Chiral Ni(II) Glycinates with amino sulfones. Efficient asymmetric synthesis of aromatic &#945;,&#946;-diamino acids.</a> J. Org. Chem. 73 (21), 8563-8570 (2011).</li><li>Wang, J., Lin, D., Zhou, S., Ding, X., Soloshonok, V. A., Liu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asymmetric+synthesis+of+sterically+and+electronically+demanding+linear+&#969;,-trifluoromethyl+containing+amino+acids+via+alkylation+of+chiral+equivalents+of+nucleophilic+glycine+and+alanine.">Asymmetric synthesis of sterically and electronically demanding linear &#969;,-trifluoromethyl containing amino acids via alkylation of chiral equivalents of nucleophilic glycine and alanine.</a> J. Org. Chem. 76 (2), 684-687 (2011).</li><li>Wang, J., Zhou, S., Lin, D., Ding, X., Jiang, H., Liu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+diastereo-+and+enantioselective+synthesis+of+syn-&#946;,-substituted+tryptophans+via+asymmetric+Michael+addition+of+a+chiral+equivalent+of+nucleophilic+glycine+and+sulfonylindoles.">Highly diastereo- and enantioselective synthesis of syn-&#946;,-substituted tryptophans via asymmetric Michael addition of a chiral equivalent of nucleophilic glycine and sulfonylindoles.</a> Chem. Commun. 47 (29), 8355-8357 (2011).</li><li>Belokon, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+efficient+catalytic+synthesis+of+&#945;,-amino+acids+under+phase-transfer+conditions+with+a+novel+catalyst/substrate+pair.">Highly efficient catalytic synthesis of &#945;,-amino acids under phase-transfer conditions with a novel catalyst/substrate pair.</a> Angew. Chem. Int. Ed. 40 (10), 1948-1951 (2001).</li><li>Zhou, S., Wang, J., Lin, D., Zhao, F., Liu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enantioselective+synthesis+of+2-substituted-tetrahydroisoquinolin-1-yl+glycine+derivatives+via+oxidative+cross-dehydrogenative+coupling+of+tertiary+amines+and+chiral+nickel(II)+glycinate.">Enantioselective synthesis of 2-substituted-tetrahydroisoquinolin-1-yl glycine derivatives via oxidative cross-dehydrogenative coupling of tertiary amines and chiral nickel(II) glycinate.</a> J. Org. Chem. 78 (22), 11204-11212 (2013).</li><li>Belokon, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+&#945;,-amino+acids+via+asymmetric+phase+transfer-catalyzed+alkylation+of+achiral+nickel(II)+complexes+of+glycine-derived+Schiff+bases.">Synthesis of &#945;,-amino acids via asymmetric phase transfer-catalyzed alkylation of achiral nickel(II) complexes of glycine-derived Schiff bases.</a> J. Am. Chem. Soc. 125 (42), 12860-12871 (2003).</li><li>Ueki, H., Ellis, T. K., Martin, C. H., Soloshonok, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+large-scale+synthesis+of+picolinic+acid-derived+nickel(II)+complexes+of+glycine.">Efficient large-scale synthesis of picolinic acid-derived nickel(II) complexes of glycine.</a> Eur. J. Org. Chem. 2003 (10), 1954-1957 (2003).</li><li>Dener, J. M., Fantauzzi, P. P., Kshirsagar, T. A., Kelly, D. E., Wolfe, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large-scale+syntheses+of+Fmoc-protected+non-proteogenic+amino+acids:+useful+building+blocks+for+combinatorial+libraries.">Large-scale syntheses of Fmoc-protected non-proteogenic amino acids: useful building blocks for combinatorial libraries.</a> Org. Process Res. Dev. 5 (4), 445-449 (2001).</li><li>Cruz, L. J., Beteta, N. G., Ewenson, A., Albericio, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=&amp;#34;One-pot&amp;#34;,+preparation+of+N-carbamate+protected+amino+acids+via+the+azide.">&amp;#34;One-pot&amp;#34;, preparation of N-carbamate protected amino acids via the azide.</a> Org Process Res. Dev. 8 (6), 920-924 (2004).</li><li>Hart, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Ullmann's Encyclopedia of Industrial Chemistry. , (2000).</li><li>Adamson, J. G., Blaskovich, M. A., Groenevelt, H., Lajoie, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+and+convenient+synthesis+of+tert-butyl+ethers+of+Fmoc-serine,+Fmoc-threonine,+and+Fmoc-tyrosine.">Simple and convenient synthesis of tert-butyl ethers of Fmoc-serine, Fmoc-threonine, and Fmoc-tyrosine.</a> J. Org. Chem. 56 (10), 3447-3449 (1991).</li><li>Seyfried, M. S., Lauber, B. S., Luedtke, N. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple-turnover+isotopic+labeling+of+Fmoc-+and+Boc-protected+amino+acids+with+oxygen+isotopes.">Multiple-turnover isotopic labeling of Fmoc- and Boc-protected amino acids with oxygen isotopes.</a> Org. Lett. 12 (1), 104-106 (2010).</li><li>Bonke, G., Vedel, L., Witt, M., Jaroszewski, J. W., Olsen, C. A., Franzyk, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dimeric+building+blocks+for+solid-phase+synthesis+of+&#945;,-peptide-&#946;,-peptoid+chimeras.">Dimeric building blocks for solid-phase synthesis of &#945;,-peptide-&#946;,-peptoid chimeras.</a> Synthesis. 2008 (15), 2381-2390 (2008).</li></ol>

著者は、開示することは何もありません。

上述のプロトコルは、穏やかなpH条件と2つの重要な工程を経て、この単離されたアミノ酸のその後のFmoc保護の下でのNi-シッフ塩基複合体からのアミノ酸骨格の単離を容易にするその能力において有用です。最初のステップは、複合体からのアミノ酸の放出を容易にするためにEDTAを含有するDMF /水の溶液を攪拌することを含みます。残留錯体または有機副生成物を容易に抽出して除去することができます。このプロトコルの第2段階は、第一工程で抽出することによって分離した後、水層に見出されるアミノ酸のFmoc保護を含みます。我々はいくつかのpH感受性側鎖保護基のために必要であるかもしれない重要な柔軟性を可能にする、4.5から7.5のpH範囲で、この手順を変更する能力を実証しています。 この技術の一つの潜在的な制限は、単離されたアミノ酸のFmoc保護の低い反応濃度です。電子を促進するとして、fficient加水分解が基板にEDTAの相対数当量が必要であり、反応条件は、かなりの量の水性EDTA溶液（1ミリモル規模反応の60 ml）を必要とします。試薬の比較的低い（〜0.015 M）濃度でのFmoc保護結果に溶剤のこのボリュームを使用します。希釈反応条件にもかかわらず、有望な55％の収率で生成物を得、これらの条件を用いて、プルーフ・オブ・コンセプト反応が、増加した立体的なバルクから生じるグリシンに減少nucleophilicty相対有するアミノ酸を利用する場合、この濃度を高くする必要があるかもしれません。 要約すると、我々は通常、UAAのの合成に用いられるニッケル - シッフ塩基錯体の加水分解を促進するためにEDTAの有用性を実証しています。これらの加水分解条件は、酸不安定性側鎖保護基の保持を考慮して、これらの加水分解に対する典型的な強酸性条件を必要としません。今後の実験では、Tを適用するに焦点を当てるべきです非天然アミノ酸の種々の基材への彼の一般的な戦略。この終わりに向かって作業が進行中です。

天然に見出される20個の天然アミノ酸のものとは異なる非天然アミノ酸（UAAの）軸受側鎖は、アプリケーションの広い範囲で有用性が見出されています。これらUAA年代の合成は、しかしながら、側鎖の構造及びアミノ酸骨格の立体化学に依存して困難であり得ます。ニッケルシッフ塩基錯体の文脈におけるグリシンのCH結合活性化はα、βジアミノ酸1,2または複素環式側鎖にフッ素化UAAのベアリングを含むアミノ酸誘導体の多様を生成するために使用されてきました。 3 非天然側鎖を添加した後、官能UAAのは、典型的には、塩酸4中で還流することによりシッフ塩基複合体から除去され、続いてイオン交換クロマトグラフィーを用いて単離されます。一般的に、効率的なながら、このプロトコルは、生成します固相ペプチド合成（SPPS）における使用には適さないかもしれMINO酸。 SPPSの性質は、酸不安定性側鎖保護基の存在を必要とし、典型的なニッケルシッフ塩基分解条件の強酸性の性質は、無傷のこれらの保護基でUAAの単離を防止することができます。我々の知る限り、唯一の代替的な分解方法が報告されている：高温でエチレンジアミン四酢酸（EDTA）およびヒドラジンの使用を、5つの条件自体は、フタルイミドのようないくつかの側鎖保護基には適さない場合があります。 <img alt="図1" src="/files/ftp_upload/55677/55677fig1.jpg" /> 図1のNi 2+、PBP、及びグリシン（Glyで）からのNi-PBP-Glyでの合成。 <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55677/55677fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> </A&gt; 本明細書において、我々は、Ni-シッフ塩基錯体、ニッケルPBP-Glyを（ 図1）の加水分解のための方法を報告しています。 Ni 2+、グリシン、及びピリジン-2-カルボン酸（2-ベンゾイル-フェニル） -アミド（PBP）、6に由来するこの複合体は、UAAの様々な合成のために有用なプラットフォームであることが実証され、容易にされていますかアクセス可能な二段階の合成経路を使用して。この複合体7つの合成は、文献、先例高収率です。 6以下に説明する本発明者らの結果はUAAの軸受酸不安定性側鎖保護基と共に使用するのに適切な中性pH条件に弱酸性でEDTAを用いた加水分解条件の適用可能性を実証します。加水分解後、得られた水溶液は、Fmoc保護アミノ酸（ 図2）を産出するために標準的なFmoc保護条件に直ちに単離し、供することができます。 図2：加水分解およびNi-PBP-Glyをから分離アミノ酸ののFmoc保護。反応条件：I。 EDTA（12当量）を、pHが4.5、 II。 pH7の酢酸エチル洗浄、調整、 III。 Fmoc-OSuを（1当量）、 炭酸水素ナトリウム（2当量）を加えました。 <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55677/55677fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a>

<table><tbody><tr><td>Ni-PBP-Gly</td><td></td><td></td><td>Synthesized from published protocol</td></tr><tr><td>DMF</td><td>Fisher</td><td>D119-4</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Fisher</td><td>S311-100</td><td></td></tr><tr><td>Dichloromethane</td><td>Acros</td><td>AC610050040</td><td></td></tr><tr><td>Sodium Bicarbonate</td><td>Fisher</td><td>S233-500</td><td></td></tr><tr><td>Fmoc-OSu</td><td>Chem-Impex</td><td>&quot;00147&quot;</td><td></td></tr><tr><td>Dioxane</td><td>Fisher</td><td>D111-500</td><td></td></tr><tr><td>Hydrochloric Acid</td><td>Fisher</td><td>A144-500</td><td></td></tr><tr><td>Ethyl Acetate</td><td>Acros</td><td>AC610060040</td><td></td></tr><tr><td>Magnesium Sulfate</td><td>Fisher</td><td>M65-500</td><td></td></tr><tr><td>ZEOPrep 60ECO Silica Gel</td><td>ZEOChem</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hexanes</td><td>Fisher</td><td>3200250.650.443</td><td></td></tr><tr><td>Chromatography Column</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>pH Test Strips</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rotary Evaporator</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>250 mL Separatory Funnel</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>250 mL Round Bottom Flask</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stir Bar</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stir Plate</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

hydrolysis of a ni-schiff-base complex using conditions suitable for retention of acid-labile protecting groups

非天然アミノ酸は、一般に自然界に見られない側鎖官能基を含むアミノ酸は、ますます合成ペプチド配列に見出されます。いくつかの非天然アミノ酸の合成は、多くの場合、ニッケルカチオンによって安定化シッフ塩基からなる前駆体の使用を含みます。非天然側鎖がこのシッフ塩基複合体に見出されるアミノ酸骨格上にインストールすることができます。得られた非天然アミノ酸は、その後、典型的には、強酸性溶液中で還流を採用することにより、シッフ塩基の加水分解を用いて、この複合体から単離することができます。これらの高度に酸性の条件は、マイクロ波アシスト固相ペプチド合成に使用される非天然アミノ酸のために必要な酸に不安定な側鎖保護基を除去することができます。本研究では、効率的な加水分解およびNi-シッフ塩基複合体から単離されたアミノ酸のその後のFmoc保護を提示します。この作品で提示加水分解条件は、酸に不安定なSの保持に適していますIDE鎖保護基および非天然アミノ酸の種々の基材に適応することができます。

私たちは、Ni-PBP-Glyを複合体からのニッケル2+の除去は厳しいpH条件を必要とせずにシッフ塩基の効率的な水加水分解される可能性がありという仮説を立てました。 EDTAは、安価でよく研究キレート剤であるように、10は、我々は、Ni-PBP-Glyでの溶液にEDTAの添加は、それによって複合体の加水分解を促進すること、のNi 2+イオンのキレート化を容易にするであろうという仮説を立てました。 単独のEDTAが効果的に複合体の加水分解を促進することができると私たちの理論をテストするために、我々は、pHが4.5水溶液、EDTA二ナトリウム塩溶液の未調整のpHをEDTAの当量を増やすに室温でDMF中のNi-PBP-Glyをのソリューションを受けます。加水分解反応の進行は、溶液の色を観察することによりモニターすることができます。 PBPは、単離されている間、溶液中の未反応のNi-PBP-Glyでは、深い赤色を表示しますこの複合体から白です。我々は、白（ 表1）に赤色からの溶液の色の変化を監視することにより加水分解反応の進行を追跡しました。 8当量より少ないが関与する反応は、白に赤から着色のいくつかの遷移を示したが、反応は、それぞれの場合に不完全でした。色の変化は、EDTAなしの条件については明らかではなかったです。 加水分解に対するpHの影響も同様に評価しました。室温で一晩のpHを変化させEDTAの12当量を用いて加水分解条件に対するNi-PBP-Glyを複合体の服従は、複合体の成功した加水分解が4.5から7.5の範囲のpH条件下で発生示しました。これは、EDTA加水分解の柔軟性を示しています。 pHは、より多くの酸感受性側鎖保護基を説明するために増加させることができます。 <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>調子</td><tD&gt;当量（EDTA：ニッケルPBP-Glyで） </td><td> EDTA溶液のpH </td><td>一晩完了</td></tr><tr><td> 1 </td><td> 0 </td><td> 4.5 </td><td>なし</td></tr><tr><td> 2 </td><td> 2 </td><td> 4.5 </td><td>部分的</td></tr><tr><td> 3 </td><td> 4 </td><td> 4.5 </td><td>部分的</td></tr><tr><td> 4 </td><td> 6 </td><td> 4.5 </td><td>部分的</td></tr><tr><td> 5 </td><td> 8 </td><td> 4.5 </td><td>いっぱい</td></tr><tr><td> 6 </td><td> 10 </td><td> 4.5 </td><td>いっぱい</td></tr><tr><td> 7 </td><td> 12 </td><td> 4.5 </td><td>いっぱい</td></tr><tr><td> 8 </td><td> 12 </td><td> 5.0 </td><td>いっぱい</td></tr><tr><td> 9 </td><td> 12 </td><td> 5.5 </td><td>いっぱい</td></tr><tr><td> 10 </td><td> 12 </td><td> 6.0 </td><td>いっぱい</td></tr><tr><td> 11 </td><td> 12 </td><td> 6.5 </td><td>いっぱい</td></tr><tr><td> 12 </td><td> 12 </td><td> 7.0 </td><td>いっぱい</td></tr><tr><td> 13 </td><td> 12 </td><td> 7.5 </td><td>いっぱい</td></tr><tr><td> 14 </td><td> 12 </td><td> 8.0 </td><td>部分的</td></tr></tbody></table> 表1：ニッケルPBP-Glyを加水分解条件。 図7に示すように、その加水分解は、最も効率的な条件を使用して完了した検証するために、我々は、結合、ジクロロメタンで3回反応を抽出し、有機層を乾燥し、核磁気共鳴分光法（NMR）を使用して得られた残留物を分析しました。 NMRスペクトルは、試料中のNi-PBP-Glyでの証拠を示しませんでした。スペクトルで見つかった唯一の共振は、複合体の完全な加水分解を示唆し、PBPの文献報告と一致しました。 私たちは、アミノ酸との最適な加水分解条件の可能性が含まれている検討しました側鎖保護基の範囲をする。試料のFmoc-L-グルタミン酸5- tert-ブチルエステル（BU TのFmoc-Gluの（）-OH）のFmoc-O - tert-ブチル -L-スレオニンのFmoc（BU TのFmoc-Thrの（）-OH）、 - O - tert-ブチル -L-チロシン（BU TのFmoc-Tyrの（）-OH）、及びN（IN）-Boc- Nα-Fmoc-L-トリプトファン（のFmoc-Trpを（BOC）-OH）を溶解させましたDMFおよびpH4.5のEDTAの12当量を用いて室温で加水分解に付します。一晩撹拌した後、溶液をジクロロメタンで抽出し、NMRによって分析しました。代表的なNMRはのFmoc-Gluの（TBU）-OH（ 図3）のために含まれています。各場合において、スペクトルデータは、側鎖保護基の完全な保持を示しました。 11、12、13 <img alt="図3" src="/files/ftp_upload/55677/55677fig3.jpg" /> 図3：加水分解条件に付す後保護基、酸に不安定な側鎖ベアリングのFmoc-モノマーの代表的なNMR。 酸不安定性側鎖保護基は、青色のボックスで強調表示されています。この化合物のプロトンシグナルのための丸みを帯びた積分値を括弧内に含まれています。 <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55677/55677fig3large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> 加水分解し、有機抽出の後、残った水層は、残留EDTAおよびNi 2+イオンと一緒に遊離アミノ酸を含有します。これらの物質の存在は、遊離アミノ酸のその後のFmoc保護を妨害しないことを確実にするために、我々は、加水分解・エントリ7 Wと同様の濃度でEDTAおよびNi 2+イオンを含有する水溶液中でグリシンを溶解することによって試験反応を行いましたeはその後、標準的な水性のFmoc保護にこのソリューションを行いました。 図8は、反応の完了及び後処理の後、我々は、Fmoc保護グリシンの収率25％を得た反応を決定しました。この％の収率は、反応の希釈濃度を考慮すると驚くべきことではないとNi 2+イオンとEDTAの存在は、標準的なFmoc保護反応を妨害しないことを示唆しています。 私たちの方法論（加水分解、遊離アミノ酸の分離、およびFmoc保護）の各コンポーネントが実行可能であることを裏付ける証拠により、我々は、Ni-PBP-Glyをを使用して、概念実証実験を行いました。我々は、合理的な収率でFmoc保護アミノ酸を得、標準的なプロトコル8を用いて上述の加水分解条件およびその後のFmoc保護の生存率を評価しました。室温で40mLのDMF中のNi-PBP-Glyを（404ミリグラム、0.971ミリモル、1当量）の撹拌溶液にeratureは、pH 4.5（65ミリリットル、13ミリモル、13当量）に、0.2M EDTA溶液を添加しました。反応物を一晩撹拌し、次いで、ジクロロメタンで4回洗浄しました。次いで、水層を固体炭酸水素ナトリウムを用いてpHを7に調整しました。水層にジオキサン中の最小量に溶解し、炭酸水素ナトリウム（163ミリグラム、1.93ミリモル、2当量）およびFmoc-OSuを（327ミリグラム、0.971ミリモル、1当量）を加えました。反応物を一晩撹拌し、次いで1M塩酸で酸性化し、酢酸エチルで3回抽出しました。有機抽出物を合わせ、食塩水で6回洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮し、未反応のFmoc-OSuを及びFmoc-Glyを-OH（160mgの、0.540ミリモル、収率54％）の混合物を真空下で乾燥させました。スペクトルデータは、のFmoc-Glyを-OHのために以前に発表されたスペクトルと一致しました。 9この最後の実験では、Ni-PBP-Glyを複合体から自由にグリシンを単離し、そののFmoc-protのを楽しみにそれを運ぶために実現可能であることを示し、ectedフォーム。

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Hydrolysis of a Ni-Schiff-Base Complex Using Conditions Suitable for Retention of Acid-labile Protecting Groups

ここで、我々は、効率的な加水分解およびNi-シッフ塩基複合体から単離されたアミノ酸のその後のFmoc保護を提示します。酸不安定性側鎖保護基の保持が必要な場合、ここに提示加水分解条件は、使用するのに適しています。この技術は、非天然アミノ酸の種々の基材に適応することができます。

酸に不安定な保護基を保持するのに適したNi-シッフ塩基錯体の使用条件の加水分解

Unnatural amino acids, amino acids containing side-chain functionalities not commonly seen in nature, are increasingly found in synthetic peptide ...

hydrolysis-ni-schiff-base-complex-using-conditions-suitable-for

Nanyang Technological University

Research

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Biochemistry

9.6K ビュー.  Slippery Rock University. ここで、我々は、効率的な加水分解およびNi-シッフ塩基複合体から単離されたアミノ酸のその後のFmoc保護を提示します。酸不安定性側鎖保護基の保持が必要な場合、ここに提示加水分解条件は、使用するのに適しています。この技術は、非天然アミノ酸の種々の基材に適応することができます。 

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A Facile and Efficient Approach for the Production of Reversible Disulfide Cross-linked Micelles

Nanomedicine is an emerging form of therapy that harnesses the unique properties of particles that are nanometers in scale for biomedical application. Improving drug delivery to maximize therapeutic outcomes and to reduce drug-associated side effects are some of the cornerstones of present-day nanomedicine. Nanoparticles in particular have found a wide application in cancer treatment. Nanoparticles that offer a high degree of flexibility in design, application, and production based on the tumor microenvironment are projected to be more effective with rapid translation into clinical practice. The polymeric micellar nano-carrier is a popular choice for drug delivery applications.
In this article, we describe a simple and effective protocol for synthesizing drug-loaded, disulfide cross-linked micelles based on the self-assembly of a well-defined amphiphilic linear-dendritic copolymer (telodendrimer, TD). TD is composed of polyethylene glycol (PEG) as the hydrophilic segment and a thiolated cholic acid cluster as the core-forming hydrophobic moiety attached stepwise to an amine-terminated PEG using solution-based peptide chemistry. Chemotherapy drugs, such as paclitaxel (PTX), can be loaded using a standard solvent evaporation method. The O2-mediated oxidation was previously utilized to form intra-micellar disulfide cross-links from free thiol groups on the TDs. However, the reaction was slow and not feasible for large-scale production. Recently, an H2O2-mediated oxidation method was explored as a more feasible and efficient approach, and it was 96 times faster than the previously reported method. Using this approach, 50 g of PTX-loaded, disulfide cross-linked nanoparticles have been successfully produced with narrow particle size distribution and high drug loading efficiency. The stability of the resulting micelle solution is analyzed using disrupting conditions such as co-incubation with a detergent, sodium dodecyl sulfate, with or without a reducing agent. The drug-loaded, disulfide cross-linked micelles demonstrated less hemolytic activity when compared to their non-cross-linked counterparts.

To deliver cancer drugs to tumor sites with high specificity and reduced side effects, new methods based on nanoparticles are required. Here, we describe disulfide cross-linked micelles that can be easily prepared by hydrogen peroxide-mediated oxidation and are able to dissociate efficiently under a reducing tumor environment to release payloads.

リバーシブルジスルフィド架橋ミセルの生産のための簡便かつ効率的なアプローチ

Nanomedicine is an emerging form of therapy that harnesses the unique properties of particles that are nanometers in scale for biomedical application. ...

生化学

Separation of Aldehydes and Reactive Ketones from Mixtures Using a Bisulfite Extraction Protocol

The purification of organic compounds is an essential component of routine synthetic operations. The ability to remove contaminants into an aqueous layer by generating a charged structure provides an opportunity to use extraction as a simple purification technique. By combining the use of a miscible organic solvent with saturated sodium bisulfite, aldehydes and reactive ketones can be successfully transformed into charged bisulfite adducts that can then be separated from other organic components of a mixture by the introduction of an immiscible organic layer. Here, we describe a simple protocol for the removal of aldehydes, including sterically-hindered neopentyl aldehydes and some ketones, from chemical mixtures. Ketones can be separated if they are sterically unhindered cyclic or methyl ketones. For aliphatic aldehydes and ketones, dimethylformamide is used as the miscible solvent to improve removal rates. The bisulfite addition reaction can be reversed by basification of the aqueous layer, allowing for the re-isolation of the reactive carbonyl component of a mixture.

Here, we present a protocol to remove aldehydes and reactive ketones from mixtures by a liquid-liquid extraction protocol directly with saturated sodium bisulfite in a miscible solvent. This combined protocol is rapid and facile to perform. The aldehyde or ketone can be re-isolated by the basification of the aqueous layer.

アルデヒドおよびケトン類の反応性の重亜硫酸塩の抽出のプロトコルを使用して混合物からの分離

The purification of organic compounds is an essential component of routine synthetic operations. The ability to remove contaminants into an aqueous layer ...

化学

Imine Metathesis by Silica-Supported Catalysts Using the Methodology of Surface Organometallic Chemistry

With this protocol, a well-defined singlesite silica-supported heterogeneous catalyst [(&#8801;Si-O-)Hf(=NMe)(&#951;1-NMe2)] is designed and prepared according to the methodology developed by surface organometallic chemistry (SOMC). In this framework, catalytic cycles can be determined by isolating crucial intermediates. All air-sensitive materials are handled under inert atmosphere (using gloveboxes or a Schlenk line) or high vacuum lines (HVLs, &#60;10-5 mbar). The preparation of SiO2-700 (silica dehydroxylated at 700 &#176;C) and subsequent applications (the grafting of complexes and catalytic runs) requires the use of HVLs and double-Schlenk techniques. Several well-known characterization methods are used, such as Fourier-transform infrared spectroscopy (FTIR), elemental microanalysis, solid-state nuclear magnetic resonance spectroscopy (SSNMR), and state-of-the-art dynamic nuclear polarization surface enhanced NMR spectroscopy (DNP-SENS). FTIR and elemental microanalysis permit scientists to establish the grafting and its stoichiometry. 1H and 13C SSNMR allows the structural determination of the hydrocarbon ligands coordination sphere. DNP SENS is an emerging powerful technique in solid characterization for the detection of poorly sensitive nuclei (15N, in our case). SiO2-700 is treated with about one equivalent of the metal precursor compared to the amount of surface silanol (0.30 mmol&#183;g-1) in pentane at room temperature. Then, volatiles are removed, and the powder samples are dried under dynamic high vacuum to afford the desired materials [(&#8801;Si-O-)Hf(&#951;2&#960;-MeNCH2)(&#951;1-NMe2)(&#951;1-HNMe2)]. After a thermal treatment under high vacuum, the grafted complex is converted into metal imido silica complex [(&#8801;Si-O-)Hf(=NMe)(&#951;1-NMe2)]. [(&#8801;Si-O-)Hf(=NMe)(&#951;1-NMe2)] effectively promotes the metathesis of imines, using the combination of two imine substrates, N-(4-phenylbenzylidene)benzylamine, or N-(4-fluorobenzylidene)-4-fluoroaniline, with N-benzylidenetert-butylamine as substrates. A significantly lower conversion is observed with the blank runs; thus, the presence of the imido group in [(&#8801;Si-O-)Hf(=NMe)(&#951;1-NMe2)] is correlated to the catalytic performance.

A new group IV metal catalyst for imine metathesis is prepared by grafting amine metal complex onto dehydroxylated silica. Surface metal fragments are characterized using FT-IR, elemental microanalysis, and solid-state NMR spectroscopy. Further dynamic nuclear polarization surface enhanced NMR spectroscopy experiments complement the determination of the coordination sphere.

表面有機金属化学の方法論を用いてシリカ支持触媒によるイミンメタセシス

With this protocol, a well-defined singlesite silica-supported heterogeneous catalyst [(&#8801;Si-O-)Hf(=NMe)(&#951;1-NMe2)] is designed and prepared ...

Preparation of SNS Cobalt(II) Pincer Model Complexes of Liver Alcohol Dehydrogenase

Chemical model complexes are prepared to represent the active site of an enzyme. In this protocol, a family of tridentate pincer ligand precursors (each possessing two sulfur and one nitrogen donor atom functionalities (SNS) and based on bis-imidazole or bis-triazole compounds) are metallated with CoCl2&#183;6H2O to afford tridentate SNS pincer cobalt(II) complexes. Preparation of the cobalt(II) model complexes for liver alcohol dehydrogenase is facile. Based on a quick color change upon adding the CoCl2&#183;6H2O to acetonitrile solution that contains the ligand precursor, the complex forms rapidly. Formation of the metal complex is complete after allowing the solution to reflux overnight. These cobalt(II) complexes serve as models for the zinc active site in liver alcohol dehydrogenase (LADH). The complexes are characterized using single crystal X-ray diffraction, electrospray mass spectrometry, ultra-violet visible spectroscopy, and elemental analysis. To accurately determine the structure of the complex, its single crystal structure must be determined. Single crystals of the complexes that are suitable for X-ray diffraction are then grown via slow vapor diffusion of diethyl ether into an acetonitrile solution that contains the cobalt(II) complex. For high quality crystals, recrystallization typically takes place over a 1 week period, or longer. The method can be applied to the preparation of other model coordination complexes and can be used in undergraduate teaching laboratories. Finally, it is believed that others may find this recrystallization method to obtain single crystals beneficial to their research.

Preparation of SNS CobaltII Pincer Model Complexes of Liver Alcohol Dehydrogenase

The preparation of SNS pincer cobalt(II) model complexes of liver alcohol dehydrogenase is presented here. The complexes can be prepared by reacting the ligand precursor with CoCl2&#183;6H2O and can then be recrystallized by allowing diethyl ether to slowly diffuse into an acetonitrile solution that contains the cobalt complex.

SNSコバルト(II)の製造用肝アルコール脱水素酵素のピンサーモデル複合体

Chemical model complexes are prepared to represent the active site of an enzyme. In this protocol, a family of tridentate pincer ligand precursors (each ...

Protection of Alcohols

This lesson delves into the concept of protection and deprotection of a functional group fundamental to synthetic organic chemistry. These phenomena are explained in the context of aliphatic and aromatic alcohols.
<h4>Protection</h4>
It defines a protecting group as the masking agent to make the more reactive species inert to a given set of conditions. This concept is depicted via the illustration of liquid flow through different outlets in an assembly of pipes. The analogy helps to understand the role of a protecting group in reaction selectivity, as in the case of the organolithium alkylation of a halide in the presence of a competing acidic alcohol group. The example shows how protection of the alcohol group helps to achieve the alkylation of the halide. Popular protecting groups for alcohols include the trialkylsilyl family for nucleophiles or carbon and nitrogen bases and the tetrahydropyranyl (THP) group for strong bases. In the former example, the halide of the trialkylsilyl derivative reacts with the alcohol in the presence of a nucleophilic catalyst to generate a trialkylsilyl ether.
<h4>Deprotection</h4>
Every protection is followed by deprotection after the intended reaction. The deprotection restores the system to its native state. In protection with trialkylsilyl groups, deprotection is achieved using fluoride salts like tetra-n-butylammonium fluoride (TBAF) that are soluble in organic solvents. Here, the re-protonation of the oxygen regenerates the native alcohol. In the case of protection with THP, deprotection is achieved using acid hydrolysis.
<h4>Principle of design</h4>
The lesson also elucidates the principles behind the design of a protecting group using an illustration of a house under varying external weather conditions. It demonstrates the selectivity offered by a protecting group in a specific environment. For instance, THP protects alcohol from strong bases. The acetal formed in this case is stable towards bases but susceptible to acid hydrolysis.
Apart from the reaction conditions, the reactivity of the molecule to be protected also plays a key role in designing a suitable protecting group. For example, methyl ethers&#8217; ability to protect phenols is found inappropriate for aliphatic alcohols. Here, the stability of the corresponding leaving groups during deprotection plays a key role. For example, the alkoxides, unlike phenoxides, are poor leaving groups for deprotection with hydrogen bromide.
The following table summarizes the various protection/deprotection groups for different types of alcohols and related conditions:
<table style="margin-left: auto; margin-right: auto;">
	<tbody style="border: 1px solid black;">
		<tr>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">Protecting group</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">Structure</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">Protects</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">From</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">Protection</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">Deprotection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">Trialkylsilyl (R3Si&#8211;), 
			e.g., TBDMS</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">Me3Si&#8211;OR 
			(Me3C)Me2Si&#8211;OR</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">Alcohols 
			(OH in general)</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">Nucleophiles, 
			C or N bases</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">R3SiCl, 
			base</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">H+, H2O, 
			or F&#8722;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">Tetrahydropyranyl 
			(THP)</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;"><img alt="Figure1" src="/files/ftp_upload/11927/Figure_1-11927.svg" style="text-align: center; height: 50px;" /></td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">Alcohols 
			(OH in general)</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">Strong bases</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">3,4-Dihydropyran, 
			H+</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">H+, H2O</td>
		</tr>
		<tr>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">Benzyl ether 
			(OBn)</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;"><img alt="Figure2" src="/files/ftp_upload/11927/Figure_2-11927.svg" style="text-align: center; height: 50px;" /></td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">Alcohols 
			(OH in general)</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">Almost everything</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">NaH, BnBr</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">H2, Pd/C, 
			or HBr</td>
		</tr>
		<tr>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">Methyl ether 
			(ArOMe)</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;"><img alt="Figure3" src="/files/ftp_upload/11927/Figure_3-11927.svg" style="text-align: center; height: 50px;" /></td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">Phenols 
			(ArOH)</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">Bases</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">NaH, MeI, or 
			(MeO)2SO2</td>
			<td style="color: black; border: 1px solid black; text-align: center;">BBr3, HBr, HI, 
			Me3SiI</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

Protection and Deprotection of Alcohols and Phenols

アルコールの保護

This lesson delves into the concept of protection and deprotection of a functional group fundamental to synthetic organic chemistry. These phenomena are ...

Education

JoVE Core

有機化学

ユニット １

アルコール類とフェノール類

KEY TERMS AND CONCEPTS

Preparation of Carboxylic Acids: Hydrolysis of Nitriles

Nitriles (R&#8211;CN) can be converted into carboxylic acids (R&#8211;COOH) upon treatment with aqueous acids, i.e., upon hydrolysis of nitriles. Under base-catalyzed conditions, carboxylate anions (R&#8211;COO&#8722;) are formed.
<img alt="Figure1" src="/files/ftp_upload/13085/13085_PT_Figure_1.svg" style="text-align: center; height: 56px;" />
The reaction facilitates a two-step conversion of haloalkanes to carboxylic acids. Here, haloalkanes are first converted to nitriles using sodium cyanide via an SN2 reaction. The resultant nitrile is then hydrolyzed to yield carboxylic acids bearing one more carbon than the haloalkane used. The reaction uses dimethyl sulfoxide, alcohols, or water as solvents. As the process involves the SN2 mechanism, tertiary alkyl halides are seldom used.
<img alt="Figure2" src="/files/ftp_upload/13085/13085_PT_Figure_2.svg" style="text-align: center; height: 46px;" />

カルボン酸の調製:ニトリルの加水分解

Nitriles (R&#8211;CN) can be converted into carboxylic acids (R&#8211;COOH) upon treatment with aqueous acids, i.e., upon hydrolysis of nitriles. Under ...

カルボン酸

Acid Halides to Carboxylic Acids: Hydrolysis

Hydrolysis of acid halides is a nucleophilic acyl substitution reaction in which acid halides react with water to give carboxylic acids. The reaction occurs readily and does not require acid or a base catalyst.
As shown below, the mechanism involves a nucleophilic attack by water at the carbonyl carbon to form a tetrahedral intermediate. This is followed by the reformation of the carbon&#8211;oxygen &#960; bond along with the departure of a halide ion. A final proton transfer step yields carboxylic acid as the substitution product.&#160;
<img alt="Figure1" src="/files/ftp_upload/12361/12361_PT_Figure_1_.svg" style="text-align: center; height: 200px;" />
The reaction produces a very strong acid, HCl, as a by-product. Therefore, a base such as pyridine is used in the reaction, which reacts with HCl to form pyridinium chloride. This process neutralizes the acid and prevents undesired side reactions.

酸性ハロゲン化物からカルボン酸へ:加水分解

Hydrolysis of acid halides is a nucleophilic acyl substitution reaction in which acid halides react with water to give carboxylic acids. The reaction ...

カルボン酸誘導体

Protecting Groups for Aldehydes and Ketones: Introduction

Protecting groups are compounds that can bind to a specific functional group in the presence of other functional groups to protect them from undesired chemical reactions. These compounds can selectively bind to particular functional groups and advance chemoselective reactions in polyfunctional systems (Figure 1). After the functional group has served its purpose, it is removed by reacting it with specific compounds.
<img alt="Figure1" src="/files/ftp_upload/12844/12844_PT_Figure_1.svg" style="text-align: center; height: 60px;" />
The aldehydes and ketones can be selectively protected in the presence of other carbonyl groups such as esters or acids based upon their reactivity. This is important for the manipulation of one functional group over the other.
For instance, when carrying out a reduction reaction in the presence of an ester and a ketone, the ketone will always be preferentially reduced to alcohol. In order to achieve the selective reduction of an ester to an alcohol while keeping the ketone unaffected, the ketone group needs to be protected (Figure 2, first step). After the ketone is protected, the ester is reduced to an alcohol using LiAlH4 (Figure 2, second step). Finally, the ketone is regenerated by removing the protecting group (Figure 2, third step).
<img alt="Figure2" src="/files/ftp_upload/12844/12844_PT_Figure_2.svg" style="text-align: center; height: 215px;" />
Acetals and thioacetals are the most commonly used protecting groups for aldehydes and ketones and can be easily removed. In addition, they are resistant to chemical species such as nucleophiles, or reducing and oxidizing agents.

アルデヒドおよびケトンの保護基:はじめに

Protecting groups are compounds that can bind to a specific functional group in the presence of other functional groups to protect them from undesired ...

アルデヒドとケトン

Acetals and Thioacetals as Protecting Groups for Aldehydes and Ketones

Acetals are formed by reacting two equivalents of alcohol with carbonyl compounds like aldehydes or ketones. Acetals are unaffected by bases, nucleophiles, oxidizing agents, and reducing agents. They serve as protecting groups for aldehydes and ketones. Acetals can be easily formed and also easily removed via mild acid hydrolysis.
In the presence of multiple functional groups, when selective reduction of one group over the other is desired, groups like aldehydes and ketones that form acetals readily can be protected from undergoing undesirable reactions. For instance, if a compound contains a ketone and an ester group, the ketone can be protected by converting it into acetal. On the other hand, the ester does not form acetal; hence it can be subjected to the desired reaction, and in&#160;the end, the ketone can be deprotected.
<img alt="Figure1" src="/files/ftp_upload/12333/12333_Figure_1.svg" style="opacity: 0.9; text-align: center; height: 200px;" />
The sulfur-containing analogs of acetals are called thioacetals that&#160;can act as an efficient protecting group for aldehydes and ketones. The thioacetals are stable in acidic conditions. Due to this, they cannot be deprotected by acid hydrolysis. Instead, mercuric chloride in aqueous acetonitrile is used for its deprotection.
<img alt="Figure2" src="/files/ftp_upload/12333/12333_Figure_2.svg" style="text-align: center; height: 55px;" />
Apart from acting as protecting groups, thioacetals also play a major role in organic synthesis, especially in reduction reactions. Thioacetals can undergo desulfurization in the presence of Raney nickel and hydrogen to form hydrocarbons.
<img alt="Figure3" src="/files/ftp_upload/12333/12333_Figure_3.svg" style="text-align: center; height: 55px;" />

アルデヒドとケトンの保護基としてのアセタールとチオアセタール

Acetals are formed by reacting two equivalents of alcohol with carbonyl compounds like aldehydes or ketones. Acetals are unaffected by bases, ...

Amides to Carboxylic Acids: Hydrolysis

Amides can undergo either acid-catalyzed hydrolysis or base-promoted hydrolysis through a typical nucleophilic acyl substitution. Each hydrolysis requires severe conditions.
Acid-catalyzed hydrolysis:
Hydrolysis of amides under acidic conditions yields carboxylic acids. Since the reaction occurs slowly, hydrolysis requires the conditions of heat.
The mechanism begins with the protonation of the carbonyl oxygen by the acid catalyst. The protonation makes the amide carbonyl carbon more electrophilic. Next, water acts as a nucleophile and attacks the carbonyl carbon to form a tetrahedral intermediate. Further, deprotonation of the tetrahedral intermediate gives a neutral tetrahedral addition intermediate. Subsequent protonation of the amino nitrogen converts the amino group into a better leaving group. In the next step, the carbonyl group is re-formed with the departure of ammonia as a leaving group. A final deprotonation step yields a carboxylic acid.
<img alt="Figure1" src="/files/ftp_upload/12372/12372_PT_Figure_1_.svg" style="text-align: center; height: 225px;" />
The formation of ammonium ion drives the equilibrium favoring the product formation.
Base-promoted hydrolysis: 
Base-promoted hydrolysis is another nucleophilic acyl substitution reaction, where hydroxide acts as a nucleophile. Amides undergo hydrolysis when heated under basic aqueous solutions to produce carboxylic acid.
The base-promoted mechanism involves a nucleophilic attack by the hydroxide ion at the amide carbonyl carbon to form a tetrahedral intermediate. In the second step, the carbonyl group is reconstructed with the departure of an amide ion as a leaving group. Next, deprotonation yields a carboxylate ion and ammonia. This step drives the reaction to completion, which pushes the equilibrium towards the product. A final step involves acidification of the carboxylate ion to give free acid.
<img alt="Figure2" src="/files/ftp_upload/12372/12372_PT_Figure_2.svg" style="text-align: center; height: 200px;" />

アミドからカルボン酸への:加水分解

Amides can undergo either acid-catalyzed hydrolysis or base-promoted hydrolysis through a typical nucleophilic acyl substitution. Each hydrolysis requires ...