私たちは、彼の説明の仕事の​​ためにデニース・マタイアス確認したいと思います。この作品は、NIH T32AI 106704-01A1、オハイオ州立大学の臓器移植、灌流、工学と再生のためのT・フルズチ基金によってサポートされていました。

すべての手順は、施設内動物実験及び実験動物の愛護管理と使用に関する米国学術研究会議・ガイド（IACUC）のガイドラインに従って行ったとオハイオ州立大学IACUC委員会による承認を受けています。 1.初期設定<ol><li>セットアップ手術用顕微鏡と手術室（ 図3、 図4）。麻酔を維持し、バイタルサインを監視するためのものを含むすべての機器の電源をオンにします。電気外科ユニットと温暖化パッドをオンにします。手術台の近くに注入ポンプを配置します。 <ol><li>麻酔注射器に吸入（分子量184.5）のために液体イソフルラン10mLのを描き、麻酔部に配置します。 </li><li>手術台の近くに液体窒素の200mLの容器に、セットアップ及び血液サンプルが処理される遠心分離機の近くにもう。 </li><li>順位外科用器具、4-0及び7-0編み絹縫合糸、滅菌綿棒、4x4の不織布スポンジ、5 mLの注射器、および手術台の近くに27本のゲージのインスリンシリンジをition。 </li></ol></li><li>イソフルランチャンバを準備し、十分なイソフルラン麻酔を誘導送達系に滴下されていることを確認します。 </li></ol>麻酔の誘導2。 <ol><li>手術用マスク、手術用手袋、使い捨てガウン：以下の個人用保護具（PPE）の上に置いたラットを取り扱う前に。 </li><li>ラットを計量し、重量を記録します。 注：SDラットを使用する必要があります。 </li><li>麻酔室にラットを置き、イソフルランと酸素をオンにします。イソフルランチャンバーを用いて麻酔を誘導します。 </li><li>クリーナー露出（ 図5）を可能にするために、電気バリカンを使用して、動物の腹部の毛をクリップ。 </li><li> additioためバックイソフルランチャンバ内に動物を置きNAL 1分。麻酔の深さを確認するために、つま先のピンチを実行します。 </li></ol> 3.手順<ol><li>ノーズコーンと温暖化パッド上の制約やテープで固定化された四肢動物の鼻にラットを置きます。 </li><li> 250グラムを超える計量動物について200〜250 gの4％体重動物について3.6％で麻酔による麻酔送達システム、ノーズコーンとイソフルランを用いて麻酔を続けます。つま先のピンチと皮膚のピンチを実行することにより、麻酔の深さを確認してください。 </li><li>鋭いハサミ（ 図6）を用いて皮膚を介して剣状突起する恥骨から正中腹部切開を行います。 </li><li>剣状突起と膀胱や腸に損傷を与えないように腹部世話を入力するには恥骨から白線に沿って腹膜の切開を行います。肝臓はまた、剣状突起の近くに前方腹膜にこだわっとして、それは前にこのARで腹壁を切開に放出することを確認してくださいEA。 </li><li>肝臓の右葉の下縁のレベルで、皮膚や腹膜を通して横方向の切開を行います。 </li><li>より大きい250gの動物のための200％〜250 gで2計量動物について1.6％に麻酔を断ります。 </li><li>湾曲した蚊のクランプを使用して、剣状突起を後退させます。 </li><li>正中線からできるだけ離れたリブを引く場所リブリトラクタ（ 図7）。偃月形の、横隔膜と胃の靭帯を切りました。湿らせた滅菌綿棒を使用して肝臓を反転します。 </li><li>ポルタへのアクセスを得るために、必要に応じて追加の靭帯を切りました。生理食塩水を湿らせたガーゼ（ 図7）と内臓の回転を行います。 </li><li>シャープまたは鈍的切開を使用してポータル門の上にある疎性結合組織を削除します。門脈の長さを覆う疎性結合組織を削除します。 </li><li>緩い結合トンを押し通すために鉗子を使用して、ウィンドウを作り、左門脈、動脈や胆管に問題の後部とは4-0ポッツ縫合糸を置きますが（ 図8）を押し締めるません。 </li><li>右の腎臓の約レベルで来る門脈に後部ブランチを覆う疎性結合組織オフクリア。この静脈は、カニューレ挿入のために使用されます。 </li><li>インスリン注射器（ 図9）と下大静脈（IVC）から0.5mLの血液を描きます。 、小さなバイアル中で12分間135×gで遠心分離を0.5mLの血液を置き。血清を引き出すしようとします。 <ol><li> 135×gで3分間 - 明確なラインは、赤血球と血清の間には理解できない場合、追加の2ために遠心分離しよう。血清をオフに描画し、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ALT）のためにバイアルに入れます。スナップは、液体窒素の中に直接置くことにより、この試料を凍結します。 </li></ol></li><li>カニューレのために使用される静脈の近くに7-0縫合糸と場所の2枚をカットション。限り内側できるだけこの静脈の周りに最初の7-0のループを置きます。このループを結ぶと曲がった蚊のクランプ（ 図10）を使用して後退するためにそれを使用します。門脈との交差点の近くにカニュレーションのために使用される静脈の2番目7-0のループを置き、1本のネクタイを置くが、ダウン締めるません。 </li><li>試薬3mLで5 mLの注射器で注入ポンプを準備します。プライムチューブ。 </li><li>顕微クランプを使用して、遠位門脈をクランプします。 注：静脈をカニュレーションのために切開されたときにこれが出血を軽減します。 </li><li> 7-0ステー縫合糸と小さな顕微はさみを用いて、門脈との交差点の間に静脈が0.5mmの穴を開け。左門脈系（ 図11、 図12）をカニューレ挿入する27-0カテーテルを使用。左右の門脈の分岐を過ぎてカテーテルを挿入します。 </li><li> infusによってカニューレの配置を確認してください生理食塩水を1ml INGのと白くに肝臓の左側葉および中葉を監視。手動でそのカテーテルを確認し、右門脈の離陸過去ではなく、中葉を供給門脈の離陸を超えています。 </li><li>ポッツ縫合ダウン楽勝と虚血時間を開始します。所定の位置にそれを保持し、遠位門脈からクランプを取り除くために静脈および27-0カテーテルの周りに7-0縫合糸を締めます。 </li><li>注入ポンプを使用してポリエチレングリコール - スーパーオキシドジスムターゼ（PEG-SOD、0.00067グラム/ mL）での注入を開始します。虚血時間の開始にできるだけ近い注入を開始します。 </li></ol> 4.モニタリング<ol><li>点滴を通して動物のバイタルサインを監視し続けます。 15分間にわたって0.9％生理食塩水に溶解し、0.9％生理食塩水またはPEG-SOD（0.00067グラム/ mL）を2mLの2mLのを送達します。 </li></ol> 5.再灌流<ol><li>一時間は私の最初から合格することを許可しますschemic時間。これは暖かい虚血時間の1時間です。 </li><li>ポッツの縫合糸を外します。 27-0カテーテルを削除します。静脈の周りに7-0縫合糸を下に楽勝。時間に注意してください。これは、再灌流の時間をマーク。 </li></ol> 6.継続的なサンプリング<ol><li> 120分後の再灌流にIVCから血液0.5mLのを描きます。赤血球を溶解避けるために、ゆっくりと血液を描画します。ゆっくりとバイアルに血液を滴下します。 IVCからの出血は、各採血後に制御されていることを確認してください。 <ol><li>出血が継続される場合、滅菌綿棒またはガーゼから1cmの部分切断による小さい1センチメートルと穏やかな圧力をかけます。 </li></ol></li><li> 12分間135×gで遠心します。 135×gで3分間 - 十分な分離が達成されない場合、追加の2を試みます。 </li><li> ALTのために後で処理するためにバイアル中で血清の半分を置きます。スナップは、これらの試料を凍結します。 </li></ol> 7.安楽死<ol><li>ラットは、まだ麻酔下IVCとsをカットしている間uperior ヴェナ・キャバ（SVC）と、血流、呼吸や心拍やめるまで監視します。 </li><li>横隔膜を切開し、円形にダイアフラムを切開し、腹膜腔への肝臓を接続のままで追加の結合組織を切開することによって簡単に肝切除を行います。腹膜腔から肝臓を取り出します。 </li><li>肝臓の右葉から肝臓の左葉および中葉から4つのサンプルと4つのサンプルを取ります。試料はできるだけ大きくあるべきであり、そのサイズは、利用可能な肝臓組織の量によって制限されます。小さな標識バイアルにこれらを置き、液体窒素で凍結スナップ。組織アデノシン三リン酸（ADP）、マロンジアルデヒド（MDA）およびグルタチオン（GSH）のために、後の処理のためにこれらを使用してください。 </li></ol> 8.ポスト実験解析<ol><li>診断キットを用いて、グルタチオン（GSH）、マロンジアルデヒド（MDA）およびアラニンアミノトランスフェラーゼ（ALT）肝臓組織における活動および血清サンプルを決定します製造元の指示に従って。 </li><li>溶解緩衝液で肝臓組織をホモジナイズし、Bradfordアッセイを用いて定量化します。切断されたカスパーゼ3およびアクチンに対する抗体を用いて、ドデシル硫酸ナトリウム - ポリアクリルアミドゲル電気泳動およびイムノブロットにより組織ライセートを分析します。公に利用可能なソフトウェアで実行ウェスタンブロットを定量化します。 </li></ol>

<ol>
	<li>Serracino-Inglott, F., Habib, N. A., Mathie, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+ischemia-reperfusion+injury.">Hepatic ischemia-reperfusion injury.</a> Am J Surg. 181, 160-166 (2001).</li><li>Fondevila, C., Busuttil, R. W., Kupiec-Weglinski, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+ischemia/reperfusion+injury--a+fresh+look.">Hepatic ischemia/reperfusion injury--a fresh look.</a> Exp Mol Pathol. 74, 86-93 (2003).</li><li>Kupiec-Weglinski, J. W., Busuttil, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemia+and+reperfusion+injury+in+liver+transplantation.">Ischemia and reperfusion injury in liver transplantation.</a> Transplant Proc. 37, 1653-1656 (2005).</li><li>OPTN. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Overall by Organ. Current US Waiting List. , (2016).</li><li>OPTN. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Transplants in the US by Recipient ABO. , (2016).</li><li>Tacchini, L., Radice, L., Pogliaghi, G., Bernelli-Zazzera, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+activation+of+heat+shock+and+nuclear+factor+kappaB+transcription+factors+in+postischemic+reperfused+rat+liver.">Differential activation of heat shock and nuclear factor kappaB transcription factors in postischemic reperfused rat liver.</a> Hepatology. 26, 186-191 (1997).</li><li>Palladini, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lobe-specific+heterogeneity+and+matrix+metalloproteinase+activation+after+ischemia/reperfusion+injury+in+rat+livers.">Lobe-specific heterogeneity and matrix metalloproteinase activation after ischemia/reperfusion injury in rat livers.</a> Toxicol Pathol. 40, 722-730 (2012).</li><li>Nakano, H., Kuzume, M., Namatame, K., Yamaguchi, M., Kumada, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+intraportal+injection+of+anti-ICAM-1+monoclonal+antibody+against+liver+cell+injury+following+warm+ischemia+in+the+rat.">Efficacy of intraportal injection of anti-ICAM-1 monoclonal antibody against liver cell injury following warm ischemia in the rat.</a> Am J Surg. 170, 64-66 (1995).</li><li>Centurion, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+ischemic+liver+preconditioning+on+hepatic+ischemia/reperfusion+injury+in+the+rat.">Effects of ischemic liver preconditioning on hepatic ischemia/reperfusion injury in the rat.</a> Transplant Proc. 39, 361-364 (2007).</li><li>Kobayashi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+endogenous+nitric+oxide+in+ischemia-reperfusion+injury+in+rat+liver.">Role of endogenous nitric oxide in ischemia-reperfusion injury in rat liver.</a> J Surg Res. 59, 772-779 (1995).</li><li>Strifler, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhaled+Methane+Limits+the+Mitochondrial+Electron+Transport+Chain+Dysfunction+during+Experimental+Liver+Ischemia-Reperfusion+Injury.">Inhaled Methane Limits the Mitochondrial Electron Transport Chain Dysfunction during Experimental Liver Ischemia-Reperfusion Injury.</a> PLoS One. 11, e0146363 (2016).</li><li>Sarikus, Z., Bedirli, N., Yilmaz, G., Bagriacik, U., Bozkirli, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+epidural+bupivacaine+on+ischemia/reperfusion-induced+liver+injury.">The effects of epidural bupivacaine on ischemia/reperfusion-induced liver injury.</a> Bratisl Lek Listy. 117, 41-46 (2016).</li><li>Guimar&#227;es Filho, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+remote+ischemic+preconditioning+in+the+expression+of+IL-6+and+IL-10+in+a+rat+model+of+liver+ischemia-reperfusion+injury.">Effect of remote ischemic preconditioning in the expression of IL-6 and IL-10 in a rat model of liver ischemia-reperfusion injury.</a> Acta Cir Bras. 30, 452-460 (2015).</li><li>Liu, Q. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Erythropoietin+pretreatment+exerts+anti-inflammatory+effects+in+hepatic+ischemia/reperfusion-injured+rats+via+suppression+of+the+TLR2/NF-&#954;B+pathway.">Erythropoietin pretreatment exerts anti-inflammatory effects in hepatic ischemia/reperfusion-injured rats via suppression of the TLR2/NF-&#954;B pathway.</a> Transplant Proc. 47, 283-289 (2015).</li><li>Montero, E. F., Quireze, C., d'Oliveira, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bile+duct+exclusion+from+selective+vascular+inflow+occlusion+in+rat+liver:+role+of+ischemic+preconditioning+and+N-acetylcysteine+on+hepatic+reperfusion+injury.">Bile duct exclusion from selective vascular inflow occlusion in rat liver: role of ischemic preconditioning and N-acetylcysteine on hepatic reperfusion injury.</a> Transplant Proc. 37, 425-427 (2005).</li><li>T&#225;rtaro, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=No+protective+function+found+in+Wistar+rats+submitted+to+long+ischemia+time+and+reperfusion+after+intermittent+clamping+of+the+total+hepatic+pedicle.">No protective function found in Wistar rats submitted to long ischemia time and reperfusion after intermittent clamping of the total hepatic pedicle.</a> Transplant Proc. 47, 1038-1041 (2015).</li><li>Yeh, D. Y., Yang, Y. C., Wang, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+Warm+Ischemia-Reperfusion-Induced+Increase+in+Pulmonary+Capillary+Filtration+Is+Ameliorated+by+Administration+of+a+Multidrug+Resistance-Associated+Protein+1+Inhibitor+and+Leukotriene+D4+Antagonist+(MK-571)+Through+Reducing+Neutrophil+Infiltration+and+Pulmonary+Inflammation+and+Oxidative+Stress+in+Rats.">Hepatic Warm Ischemia-Reperfusion-Induced Increase in Pulmonary Capillary Filtration Is Ameliorated by Administration of a Multidrug Resistance-Associated Protein 1 Inhibitor and Leukotriene D4 Antagonist (MK-571) Through Reducing Neutrophil Infiltration and Pulmonary Inflammation and Oxidative Stress in Rats.</a> Transplant Proc. 47, 1087-1091 (2015).</li><li>Kilicoglu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrastructural+view+of+a+promising+anti+TNF-&#945;+agent+on+hepatic+ischaemia+reperfusion+injury.">Ultrastructural view of a promising anti TNF-&#945; agent on hepatic ischaemia reperfusion injury.</a> Bratisl Lek Listy. , 601-607 (2015).</li><li>Jim&#233;nez P&#233;rez, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spironolactone+Effect+in+Hepatic+Ischemia/Reperfusion+Injury+in+Wistar+Rats.">Spironolactone Effect in Hepatic Ischemia/Reperfusion Injury in Wistar Rats.</a> Oxid Med Cell Longev. , 3196431 (2016).</li><li>Sano, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+drug+delivery+system+for+liver+sinusoidal+endothelial+cells+for+ischemia-reperfusion+injury.">New drug delivery system for liver sinusoidal endothelial cells for ischemia-reperfusion injury.</a> World J Gastroenterol. 21, 12778-12786 (2015).</li><li>Chang, Y. K., Huang, S. C., Kao, M. C., Huang, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cepharanthine+alleviates+liver+injury+in+a+rodent+model+of+limb+ischemia-reperfusion.">Cepharanthine alleviates liver injury in a rodent model of limb ischemia-reperfusion.</a> Acta Anaesthesiol Taiwan. , (2015).</li><li>Lucas, M. L., Rhoden, C. R., Rhoden, E. L., Zettler, C. G., Mattos, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+L-arginine+and+L-NAME+on+ischemia-reperfusion+in+rat+liver.">Effects of L-arginine and L-NAME on ischemia-reperfusion in rat liver.</a> Acta Cir Bras. 30, 345-352 (2015).</li><li>Yeh, D. Y., Tung, S. P., Fu, Y. H., Yang, Y. C., Wang, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravenous+superoxide+dismutase+administration+reduces+contralateral+lung+injury+induced+by+unilateral+lung+ischemia+and+reperfusion+in+rats+through+suppression+of+activity+and+protein+expression+of+matrix+metalloproteases.">Intravenous superoxide dismutase administration reduces contralateral lung injury induced by unilateral lung ischemia and reperfusion in rats through suppression of activity and protein expression of matrix metalloproteases.</a> Transplant Proc. 47, 1083-1086 (2015).</li><li>Yusen, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Registry+of+the+International+Society+for+Heart+and+Lung+Transplantation:+Thirty-second+Official+Adult+Lung+and+Heart-Lung+Transplantation+Report-2015;+Focus+Theme:+Early+Graft+Failure.">The Registry of the International Society for Heart and Lung Transplantation: Thirty-second Official Adult Lung and Heart-Lung Transplantation Report-2015; Focus Theme: Early Graft Failure.</a> J Heart Lung Transplant. 34, 1264-1277 (2015).</li><li>Held, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> An Introduction to Reactive Oxygen Species: Measurement of ROS in Cells. , 1-14 (2012).</li><li>Gawe&#322;, S., Wardas, M., Niedworok, E., Wardas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malondialdehyde+(MDA)+as+a+lipid+peroxidation+marker.">Malondialdehyde (MDA) as a lipid peroxidation marker.</a> Wiad Lek. 57, 453-455 (2004).</li><li>Beckman, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superoxide+dismutase+and+catalase+conjugated+to+polyethylene+glycol+increases+endothelial+enzyme+activity+and+oxidant+resistance.">Superoxide dismutase and catalase conjugated to polyethylene glycol increases endothelial enzyme activity and oxidant resistance.</a> J Biol Chem. 263, 6884-6892 (1988).</li><li>Carlberg, I., Mannervik, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glutathione+reductase.">Glutathione reductase.</a> Methods Enzymol. 113, 484-490 (1985).</li><li>Nguyen, W. D., Kim, D. H., Alam, H. B., Provido, H. S., Kirkpatrick, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polyethylene+glycol-superoxide+dismutase+inhibits+lipid+peroxidation+in+hepatic+ischemia/reperfusion+injury.">Polyethylene glycol-superoxide dismutase inhibits lipid peroxidation in hepatic ischemia/reperfusion injury.</a> Crit Care. 3, 127-130 (1999).</li></ol>

すべての著者は、彼らが何の開示を持っていない報告しています。

この一連の実験は、実証されているコントロールと比較して、左にPEG-SODとALTのリリースでは有意な減少につながった中央ローブ、細胞膜の脂質過酸化（MDA）、およびグルタチオンのメンテナンス（GSH）の注入（生理食塩水）。アラニンアミノトランスフェラーゼ（ALT）を含む肝組織トランスアミナーゼは、肝細胞傷害のマーカーを確立しています。左葉をPEG-SODを注入されたALTの減少はPEG-SODの保護効果を示唆しています。増加した組織MDAが増加し、脂質過酸化を示し、酸化ストレスと組織傷害のマーカーと考えられています。活性酸素種の過剰産生は、MDA 26の生産を増加させます。 PEG-SODを注入した動物の左葉および中葉における組織MDAの大幅な減少がPEG-SODの保護効果を示しています。これは、PEG-SODはダメージから細胞を保護することを現在の理解と一致しています部分的に還元活性酸素種27によって引き起こされます。また、活性酸素種の存在下で、グルタチオンジスルフィドはグルタチオン（GSH）28に還元されます。 PEG-SODを注射し、肝臓の左側葉および中葉におけるGSHでメンテナンスがさらにPEG-SODの保護効果を強化します。さらに、虚血 - 再灌流傷害に曝された組織では、切断されたカスパーゼ-3、アポトーシスの積が増加することが実証されています。 PEG-SODで処理した左葉に切断されたカスパーゼ3の減少はPEG-SODは、アポトーシスの減少につながることを示唆しています。 スーパーオキシドジスムターゼ（SOD）は活性酸素種の解毒に重要な酵素です。酵素は、過酸化水素と水に2つのスーパーオキシドアニオンの変換を触媒します。酵素カタラーゼは、プロセス25を完了し 、水及び酸素に過酸化水素に変換します。の半減期ネイティブSODは、共役ポリエチレングリコール - スーパーオキシドジスムターゼ（PEG-SOD）の開発まで、実験モデルにおけるその使用を制限しました。ポリエチレングリコールのSODの結合は、14時間に6分の半減期を増加させます。グエンら。全身送達29を用いて、ラットモデルにおいて肝臓虚血における脂質過酸化を軽減する能力を実証しました。 技術ここで詳しく説明し、いくつかは、以前に文献に記載されているの潜在的な変更の様々なものがあります。モデルによって使用される分子は、吸入11、硬膜外注入12、腹腔内注射17、18、21、22、静脈内投与の10、14、15を用いて送達されています<su周辺上腸間膜静脈8に&gt; P、19、23、24または注射。 このプロトコルにはいくつかの重要なステップがあります。最も重要なのは、門脈のカニューレ挿入です。ケアは、静脈にカット穴が大きすぎないように注意しなければなりません。組織は、非常に弾力性があると穴が独自に拡大します。我々は、顕微はさみで0.5mmである穴を切断することによって起動することをお勧めします。カニューレは、手動で手順のこの部分を実行しようとした場合よりも高い敏捷性を可能にする器具を使用して、穴を介して供給することができます。最初にカニューレを送りながらさらに、静脈の後壁に穴を突っつい避けるために、左と右の門脈の分岐部に向けて直接目的としなければなりません。カニューレ先端が分岐部に到達すると、それは、左静脈特異的に供給することができます味方。カニューレが左と中央ローブの両方を提供し、左門脈に供給されると、その位置は、静脈内、それを感じて、手動で確認することができます。その位置は、また、冷食塩水を少量注入し、肝臓の供給セグメントにブランチング効果を見て確認することができます。 ラットにおける肝門部クランプモデルは、肝臓虚血再灌流傷害を実証するための再現性と安定したプラットフォームを提供します。可変肺門クランプモデルは、抗酸化剤および他の小分子6、7、8、9、10、11、12、13、14の保護効果を研究するために研究者によって使用されてきました。変化のポイントは、クランプされた船舶が含ま<html>胆管が含まれているか否か虚血性作られるセグメントED、および再灌流6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18の期間の長さ、 19、20、21。 このモデルは、分子の投与の経路の投与の影響を研究するために使用される場合、さらに、不均一である8、10、11、「&gt; 12、14、15、17、18、19、21、22、23、24に記載の手法にはいくつかの利点がある。まず、虚血性セグメントへのポータル供給の直接挿管が直接分節肝送達を可能にします研究中の薬理学的物質。これは内部コントロールとして肝臓の他のローブの利用を可能にする。第二に、分節肝臓カニュレーションが検討されて分子に対する分布の容積減少を可能にする。このアプローチは、それによってなど、全身副作用のリスクを減少させます物質は、対象の肝臓セグメントに直接注入される。肝臓セグメントの直接挿管が虚血前、送達されるべき物質を可能にします内、虚血または虚血後。これは、虚血再灌流障害サイクルの任意の時点で、分子の効果の研究が可能になります。虚血時間の長さの増加と利用できるようになる肝臓の再生を研究する傷害追加の機会の増加レベルを持ちます。 このアプローチのいくつかの制限もあります。最初は、起動コストです。手術用顕微鏡の購入はすでに1を所有していないラボのための重要なスタートアップコストである可能性があります。この技術は、顕微鏡なしでは困難または不可能であり得ます。第二は、曲線の時間を学んでいます。この手順は比較的簡単ですが、それにはいくつかの練習が必要ですし、初心者が専門家になるための手続きのかなりの数が必要になる可能性が高いです。 要約すると、このモデルは、肝虚血再灌流障害を研究するために、再現性のあるシンプル、かつ費用対効果の高いプラットフォームが可能になります。プロトコルにポリエチレンGLここに記載されているがycol-スーパーオキシドジスムターゼ、フリーラジカル捕捉剤25、注入されたが、このモデルは、肝臓におけるI / R損傷に及ぼす影響を評価するために、異なる薬理学的物質の多様性を注入するために使用することができます。

流入閉塞、および肝臓移植の主要な肝臓手術は、暖かい虚血の期間、及び虚血/再灌流（I / R）傷害1に至る再灌流の期間を必要とします。肝臓でのI / R損傷の影響は広範囲に1、2、3詳述されています。文献に詳述I / R傷害の結果は、次のとおり、反応性酸素種の生成、好中球の活性化を含む炎症カスケードの開始、クッパー細胞、および内皮細胞、Toll様受容体のヘムオキシゲナーゼ系と活性化の活性化、ANをエンドセリンおよび一酸化窒素、核因子κBの活性化および炎症性サイトカインおよび接着分子の合成1、2、3の促進との間の不均衡。これらの前炎症性のイベントかもしれLアポトーシス、壊死、臓器不全および最終的に臓器不全3にEAD。 I /肝移植宛ての器官におけるR損傷は早期移植片喪失につながると限界臓器が傷害3の影響を受けやすいように、現在のドナー不足に寄与することができます。 2015年5で行った米国4における肝移植の待機中リストに15226人の潜在的な受信者のみ5950肝臓移植は現在ありません。臓器の可用性では、この極端な制限のために、肝I / R傷害を探索研究は、移植片機能や臓器の利用率を最適化するために必要とされています。 肝I / R傷害を研究するために使用される動物モデルはラット肺門クランプモデルおよびラット肝移植モデルが含まれます。現在使用中のラット肝門部クランプモデルの様々なものがあります。最も一般的なのは1つである門脈、肝動脈および胆汁デュCT左側葉および中葉は顕微クリップ6、7、8、9、10、11、60分間の再灌流の30次いで分6、7、10、13、14、および60の期間12を用いてクランプされる供給H 7、9、10、13 24、14が許可されています。ラット肝臓の左側葉および中葉は、肝実質9の約70％を含みます。虚血プレコンディショニングを研究するために設計された一部のプロトコルでは、肺門血管の断続的なクランピングが含ままたは肺門血管9、13をクランプすることにより誘導される虚血のより長い期間に後肢先行。文献に記載されているいくつかの変更もあります。最初の左葉および中葉を供給門脈及び肝動脈をクランプするが、胆管15を排除することです。第二の変形例は、前のそれらの分割16、17、18、19、20に門脈、肝動脈、および胆管をクランプすることによって、総肝臓虚血を誘導することです。第三の変形例は、30〜60分間で8右葉に肺門血管のクランプを含みます。さらなる修飾は、21肝臓13に損傷を誘導するために、1つの後肢における血管束をクランプすることを含みます</suP&gt;。肺門クランプ手順に種々のアプローチが、図1A-Dに示されています。 ラット肝門部クランプモデルは、肝臓I / R上の異なる分子および化合物の影響を研究するために使用されてきました。周辺上腸間膜静脈8内に吸入11、硬膜外注入12、腹腔内注射17、18、21、22、静脈内投与の10、14、15、19、23、24、または注射を用いて送達されてきたこれらの分子は、モデルで使用によって。 このレポートはこちらよりで詳述したラットの肝門部クランプのためのモデル研究中の薬理学的物質の直接分節肝送達を可能にする門脈の側枝を介して虚血性セグメント（ 図2）へのポータルの供給ES直接挿管。我々のアプローチは、研究中の物質の注入、その間、この場合には、PEG化スーパーオキシドジスムターゼ、フリーラジカル捕捉剤25は 、虚血性セグメントに直接注入され、60分間放置葉および中葉における虚血を誘導することです。血液サンプルを前、虚血の誘導および120分後の再灌流に取られます。この時点で、ラットを屠殺して、サンプルは左葉および中葉から取得されます。また、サンプルは、内部コントロールとして機能する右葉から採取されます。 このアプローチには多くの利点があります。まず第一に、研究中の薬理学的物質を直接虚血セグメントに注入することができるボリュームOF分布は、全身循環又は腹腔への注射の分布の容積と比較して非常に低いです。 、全身性副作用の可能性を排除しないが、さらに、このアプローチは、減少させます。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="674">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:288px;">Sprague-Dawley Rat&#160;</td>
			<td style="width:196px;">Harlan Sprague Dawley Inc.&#160;</td>
			<td style="width:128px;">200- 250 grams&#160;</td>
			<td style="width:63px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Surgical Microscope&#160;</td>
			<td>Leica&#160;</td>
			<td>M500-N w/ OHS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Charcoal Canisters</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>SOMNO-2001-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isoflurane Molecular Weight 184.5&#160;</td>
			<td>Piramal Healthcare</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pressure-Lok Precision Analytical Syringe&#160;&#160;</td>
			<td>Valco Instruments Co, Inc.&#160;</td>
			<td>SOMNO-10ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Electrosurgical Unit</td>
			<td>Macan&#160;</td>
			<td>MV-7A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Warming Pad</td>
			<td>Braintree Scientific&#160;</td>
			<td>HHP2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SomnoSuite Small Animal Anesthesia System</td>
			<td>Kent Scientific&#160;</td>
			<td>SS-MVG-Module</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PhysioSuite</td>
			<td>Kent Scientific&#160;</td>
			<td>PS-MSTAT-RT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isoflurane chamber&#160;</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>SOMNO-0530LG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SurgiVet</td>
			<td>Isotec</td>
			<td>CDS 9000 Tabletop</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Oxygen&#160;</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>98015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">27-0 Micro-Cannula</td>
			<td>Braintree Scientific&#160;</td>
			<td>MC-28</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rib retractors&#160;</td>
			<td>Kent Scientific&#160;</td>
			<td>INS600240</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyethylene Glycol - Superoxide Dismutase (PEG-SOD)</td>
			<td>Sigma Aldrich&#160;</td>
			<td>S9549 SIGMA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">GenieTouch</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Normal Saline</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>NDC 0338-0048-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">4x4 Non-Woven Sponges&#160;</td>
			<td>Criterion</td>
			<td>104-2411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile Q-Tips</td>
			<td>Henry Schein Animal Health</td>
			<td>1009175</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">U-100 27 Gauge Insulin Syringe</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>22-272328</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">5mL Syringe</td>
			<td>BD&#160;</td>
			<td>REF 309603</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">4-0 Braided Silk Suture</td>
			<td>Deknatel, Inc.</td>
			<td>198737LP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">7-0 Braided Silk Suture</td>
			<td>Teleflex Medical&#160;</td>
			<td>REF 103-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">1.8 mL Arcticle Cryogenic Tube</td>
			<td>USA Scientific&#160;</td>
			<td>1418-7410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microsurgical Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Name</td>
			<td>Company&#160;</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Small Scissors&#160;</td>
			<td>Roboz&#160;</td>
			<td>RS-5610</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Large Scissors</td>
			<td>S&#38;T&#160;</td>
			<td>SAA-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Forceps - Large Angled</td>
			<td>S&#38;T&#160;</td>
			<td>JFCL-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Forceps - Small Angled&#160;</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>FRAS-15 RM-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Clip Applier</td>
			<td>ROBOZ</td>
			<td>RS-5440</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Scissors - non micro</td>
			<td>FST 14958-11</td>
			<td>14958-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Forceps - Straight Tip&#160;</td>
			<td>S&#38;T&#160;</td>
			<td>FRS-15 RM8TC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Large Microsurgical Clip</td>
			<td>Fine Scientific Tools</td>
			<td>18055-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Small Microsurgical Clip</td>
			<td>Fine Scientific Tools</td>
			<td>18055-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Small Microsurgical Clip</td>
			<td>Fine Scientific Tools</td>
			<td>18055-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Small Microsurgical Clip</td>
			<td>Fine Scientific Tools</td>
			<td>18055-03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Other Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Name</td>
			<td>Company&#160;</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Small Mosquito Clamps</td>
			<td>Generic&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Analysis&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Name</td>
			<td>Company&#160;</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Alannine aminotransferase (ALT) assay&#160;</td>
			<td>Biovision</td>
			<td>K752-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Malondialdehye (MDA) assay&#160;</td>
			<td>Abcam&#160;</td>
			<td>ab118970</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glutathione (GSH) assay</td>
			<td>Cayman Chemical</td>
			<td>7030002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Antibodies - Cleaved Caspase-3 and Actin&#160;</td>
			<td>Cell Signaling Tecnology</td>
			<td>Antibody 9661</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ImageJ Software&#160;</td>
			<td>National Institutes of Health&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">RIPA Lysis and Extraction Buffer&#160;</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>10-188</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

method of direct segmental intra-hepatic delivery using a rat liver hilar clamp model

流入閉塞、および肝移植と主な肝臓の手術は、暖かい虚血の期間、及び虚血/再灌流（I / R）無数の負の影響を持つ怪我につながる再灌流の期間を必要とします。肝移植宛ての限界臓器における潜在的なI / R損傷は減少した臓器の利用率への二次電流ドナー不足に貢献しています。重要な必要性は、移植における移植片機能への影響を仲介するために、肝I / R損傷を探索するために存在します。ラット肝門部クランプモデルは、肝臓I / R損傷における異なる分子の影響を調査するために使用されます。モデルによっては、これらの分子は、周辺上腸間膜静脈に吸入、硬膜外注入、腹腔内注射、静脈内投与または注射を使用して配信されています。ラット肝門部クランプモデルは、I / R傷害の改善に薬理学的分子の影響を研究に使用するために開発されました。 describラット肝門部クランプ用EDモデルは直接セグメント肝送達を可能にする、門脈の側枝を介して虚血性肝セグメントへのポータル供給の直接挿管を含みます。我々のアプローチは、研究対象の物質が注入され、その間に60分間放置葉および中葉に虚血を誘導することです。この場合、ペグ化、スーパーオキシドジスムターゼ（PEG-SOD）、フリーラジカル捕捉剤は、虚血性セグメントに直接注入されます。この一連の実験は、PEG-SODの注入は肝臓I / R傷害に対する保護であることを示しています。このアプローチの利点は、全身性の副作用における分布と減少量の結果として減少に虚血セグメントへの分子の直接注射が含まれます。

この実験は、nの2つの群= 3匹のラットそれぞれを用いて行きました。三人のラットの肝臓を15分間かけて注入ポンプの通常の生理食塩水（NS）の2mLの注射しました。三人のラットの肝臓を15分間かけて注入ポンプを用いてPEG化スーパーオキシドジスムターゼ（PEG-SOD、0.00067グラム/ mL）で混合した生理食塩水の2ミリリットル（NS）を注射しました。上記のプロトコールに記載されているように、血液サンプルを予め肺門クランプおよび120分間の再灌流後に採取しました。さらに、再灌流の120分の4つの肝臓組織サンプルの完了後、左及び中央値葉から採取した四の肝臓試料は、ラット肝臓の右葉から採取しました。 血清アラニンアミノトランスフェラーゼ（ALT）が予め肺門クランプ及び120分の制御におけるポスト再灌流（NS）および（PEG-SOD）実験動物で測定しました。コントロールのALTレベルとの間に有意な差があった（NS）動物プレ肺門クランプ及び120分後の再灌流時。 ALTコントロールのレベル（NS）および実験動物（PEG-SOD）120分で（ 図13A）との間に有意な差がありました。組織マロンアルデヒド（MDA）は、対照（NS）と実験（PEG-SOD）肝臓の右と左の葉の両方の動物について測定しました。制御注入（NS）および実験注射（PEG-SOD）と右葉（非肺門クランプ）における組織MDAは有意差を示しませんでした。対照注射と左葉（ポスト肺門クランプおよび再灌流）組織MDA（NS）は、右葉（非肺門クランプ）p &lt;0.001よりも有意に異なっています。左葉（ポスト肺門クランプおよび再灌流）は、実験噴射対対照注射（NS）（PEG-SOD）p &lt;0.005（ 図13B）で組織MDAの著しく異なるレベルを有します。組織グルタチオン（GSH）は、制御注入（NS）Aと右葉（非肺門クランプ）で測定し、組織グルタチオンましたND実験インジェクション（PEG-SOD）は有意な差を示しませんでした。対照注射と左葉（ポスト肺門クランプおよび再灌流）組織GSH（NS）は、制御注入（NS）は、p &lt;0.05と右葉（非肺門クランプ）よりも有意に異なっています。左葉（ポスト肺門クランプおよび再灌流）が実験的注入（PEG-SOD）p &lt;0.005（ 図13C）に対する制御注入（NS）を有する組織グルタチオンの著しく異なるレベルを有します。ウェスタンブロットは、対照動物の右および左葉を比較行い、肺門クランプおよび再灌流（ 図13D）の後左葉に切断されたカスパーゼ-3の増加を実証します。第二のウェスタンブロットを対照とし、PEG-SOD（ 図13E）で処置した動物の左葉を比較して行きました。これは、PEG-SODで治療した動物の肝臓組織に切断されたカスパーゼ3を減少を示しています。デンシトメトリーもdemonstraを行いました。肝臓組織で切断カスパーゼ3のレベルは、対照動物の右葉（ 図13F）に対する左に増加することをティン。 PEG-SODを注入した実験動物の左葉の肝組織、および生理食塩水を注入した対照動物の左葉の肝組織を、比較では、デンシトメトリーは、動物と比較してPEG-SODで処置した動物で切断カスパーゼ-3を有意に減少を示しコントロール（ 図13G）で処理しました。 <img alt="図1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig1.jpg" /> 図1： 解剖イラスト。ラット肝臓のA.解剖図。 B.ラット肝臓の解剖図。肝臓の左葉および中葉へのポータル茎がクランプされています。左と中央ローブは虚血性です。 C.解剖ラットの肝臓のイラスト。左葉へのポータル茎がクランプされています。左葉が虚血性です。ラットの肝臓のD.解剖イラスト。右葉へのポータル茎がクランプされ、右葉が虚血性です。 <img alt="図2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig2.jpg" /> 図2： 解剖イラスト。側枝を経由してカニューレを挿入門脈とラットの肝臓の解剖図。肝臓の左葉および中葉へのポータル茎は、縫合糸に囲まれ、微小血管クランプは、維管束の周りに締め付けるために使用されてきました。左と中央ローブは虚血性です。 <img alt="図3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig3.jpg" /> 図3： 機器設定アップ。この図は、目を実証します<html>電子機器のセットアップ。 <img alt="図4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig4.jpg" /> 図4： オペレーティングルームセットアップ。この図は、手術室のセットアップを示しています。 <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54729/54729fig4large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig5.jpg" /> 図5： 腹部の毛のトリミング。この図は、腹部の毛のトリミングを示しています。 <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54729/54729fig5large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> ロード/ 54729 / 54729fig6.jpg」/&gt; 図6： 固定化し、皮膚切開。この図は、ラットおよび皮膚切開の固定化を示しています。 <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54729/54729fig6large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig7.jpg" /> 図7： リブリトラクタの配置と内臓摘出。この図は、リブリトラクタの配置や内臓摘出を示しています。 <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54729/54729fig7large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig8.jpg" /> 図8： 場所<html>縫合糸のMENT。この図は、縫合糸の配置を示しています。 <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54729/54729fig8large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図9" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig9.jpg" /> 図9： 下大静脈から採血。この図は、下大静脈から採血を示しています。 <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54729/54729fig9large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図10" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig10.jpg" /> 図10： 静脈支店縛りと後退。この図は、縛りと後退静脈枝を示しています。<html> ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54729/54729fig10large.jpg」ターゲット= 『_空白』&gt;この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。 <img alt="図11" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig11.jpg" /> 図11： カニューレ挿入のプロセス。この図は、カニューレ挿入のプロセスを示しています。 <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54729/54729fig11large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図12" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig12.jpg" /> 図12： カニューレ挿入。この図は、カニュレーションを示しています。 <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54729/54729fig12large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> コンテンツ」FO：キープtogether.withinページ= &quot;1&quot;&gt; <img alt="図13" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig13.jpg" /> 図13： 代表的な結果：ラット肝門部クランプモデルを使用してPEG化スーパーオキシドジスムターゼの直接分節肝内配達。 NS =通常の生理食塩水。 PEG-SOD =ペグ化、スーパーオキシドジスムターゼ、ALT =アラニンアミノトランスフェラーゼ、MDAは=マロンジアルデヒド。 A.血清アラニンアミノトランスフェラーゼ（ALT、μ/ mL）を予め肺門クランプ及び120分後の再灌流の間で比較しました。対照（NS）プレ肺門クランプおよび制御120分後の再灌流時（NS）（P &lt;0.001）との間に有意な差があります。 120分後の再灌流（P &lt;0.05）で対照（NS）と実験群（PEG-SOD）との間に有意な差があります。スチューデントのt検定を用いました。エラーバーは標準偏差を表します。制御注入（NS）ANと右葉（非肺門クランプ）におけるB.組織マロンジアルデヒドD実験インジェクション（PEG-SOD）は有意な差を示しませんでした。制御注入（NS）と左葉（ポスト肺門クランプおよび再灌流）組織マロンジアルデヒドは、右葉（非肺門クランプ）p &lt;0.001よりも有意に異なっています。左葉（ポスト肺門クランプおよび再灌流）が実験的注入（PEG-SOD）p &lt;0.005対対照注射（NS）と組織マロンアルデヒドの著しく異なるレベルを有します。スチューデントのt検定を用いました。エラーバーは標準偏差を表します。制御注入（NS）および実験注射（PEG-SOD）とC.右葉（非肺門クランプ）における組織グルタチオンは有意差を示しませんでした。制御注入（NS）と左葉（ポスト肺門クランプおよび再灌流）組織グルタチオンは、制御注入（NS）は、p &lt;0.05と右葉（非肺門クランプ）よりも有意に異なっています。左葉（ポスト肺門クランプおよび再灌流）を対照と組織グルタチオンの著しく異なるレベルを有するinjectio実験注射（PEG-SOD）P &lt;0.005対N（NS）。スチューデントのt検定を用いました。エラーバーは標準偏差を表します。 D.ウェスタンブロットは、対照動物の右葉（非肺門クランプ）に対する左葉（ポスト肺門クランプおよび再灌流）（生理食塩水）の肝臓組織で切断カスパーゼ-3の増加が実証されました。 E.ウエスタンブロット実証は、コントロール（生理食塩水）で処置した動物と比較して、PEG-SODで処置した動物の肝臓組織で切断カスパーゼ-3を減少させました。切断されたカスパーゼ3の肝臓組織でのF.レベルが有意後肺門クランプおよび再灌流動物（p &lt;0.05）に増加されます。スチューデントのt検定を用いました。エラーバーは標準偏差を表します。 G.は （PEG-SODを注入）実験動物の左葉の肝臓組織及び（生理食塩水を注入した）対照動物の左葉の肝組織を比較すると、中に切断されたカスパーゼ-3が著しく減少されますコントロール（生理食塩水）で処置した動物と比較して、PEG-SODで処理imals。スチューデントのt検定を用いました。エラーバーは標準偏差を表します。

Watch this Scientific Journal Video about Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model at JoVE.com

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

ユニークなラット肝門部クランプモデルは虚血再灌流障害を改善するのに薬理学的分子の影響を研究するために開発されました。このモデルは、直接肝臓送達を可能にする、門脈の分岐を介して虚血性肝セグメントにポータル供給の直接挿管を含みます。

ラット肝臓肝門部クランプモデルを用いたダイレクトセグメント別肝臓内送達方法

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

method-direct-segmental-intra-hepatic-delivery-using-rat-liver-hilar

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

14.0K ビュー.  The Ohio State University Wexner Medical Center. ユニークなラット肝門部クランプモデルは虚血再灌流障害を改善するのに薬理学的分子の影響を研究するために開発されました。このモデルは、直接肝臓送達を可能にする、門脈の分岐を介して虚血性肝セグメントにポータル供給の直接挿管を含みます。 

ビデオ: Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

Hyperinsulinemic-Euglycemic Clamp in the Conscious Rat

Type 2 diabetes (T2D) is rapidly rising in prevalence. Characterized by either inadequate insulin production or the inability to utilize insulin produced, T2D results in elevated blood glucose levels. The "gold-standard" in assessing insulin sensitivity is a hyperinsulinemic-euglycemic clamp or insulin clamp. In this procedure, insulin is infused at a constant rate resulting in a drop in blood glucose. To maintain blood glucose at a constant level, exogenous glucose (D50) is infused into the venous circulation. The amount of glucose infused to maintain homeostasis is indicative of insulin sensitivity. Here, we show the basic clamp procedure in the chronically catheterized, unrestrained, conscious rat. This model allows blood to be collected with minimal stress to the animal. Following the induction of anesthesia, a midline incision is made and the left common carotid artery and right jugular vein are catheterized. Inserted catheters are flushed with heparinized saline, then exteriorized and secured. Animals are allowed to recover for 4-5 days prior to experiments, with weight gain monitored daily. Only those animals who regain weight to pre-surgery levels are used for experiments. On the day of the experiment, rats are fasted and connected to pumps containing insulin and D50. Baseline glucose is assessed from the arterial line and used a benchmark throughout the experiment (euglycemia). Following this, insulin is infused at a constant rate into the venous circulation. To match the drop in blood glucose, D50 is infused. If the rate of D50 infusion is greater than the rate of uptake, a rise in glucose will occur. Similarly, if the rate is insufficient to match whole body glucose uptake, a drop will occur. Titration of glucose continues until stable glucose readings are achieved. Glucose levels and glucose infusion rates during this stable period are recorded and reported. Results provide an index of whole body insulin sensitivity. The technique can be refined to meet specific experimental requirements. It is further enhanced by the use of radioactive tracers that can determine tissue specific insulin-stimulated glucose uptake as well as whole body glucose turnover.

The hyperinsulinemic-euglycemic clamp is the "gold standard" for the assessment of insulin action. Insulin is infused at a constant rate stimulating glucose uptake. The amount of exogenous glucose infused to counter this drop is indicative of insulin sensitivity. Here the procedure is performed on a conscious, unrestrained rat.

覚醒ラットにおける高インスリン血症、正常血糖クランプ

Type 2 diabetes (T2D) is rapidly rising in prevalence. Characterized by either inadequate insulin production or the inability to utilize insulin produced, ...

医学

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as studies on graft preservation and ischemia-reperfusion injury 1,2, immunological responses 3,4, hemodynamics 5,6, and small-for-size syndrome 7. The rat OLT is among the most difficult animal models in experimental surgery and demands advanced microsurgical skills that take a long time to learn. Consequently, the use of this model has been limited. Since the reliability and reproducibility of results are key components of the experiments in which such complex animal models are used, it is essential for surgeons who are involved in rat OLT to be trained in well-standardized and sophisticated procedures for this model.
While various techniques and modifications of OLT in rats have been reported 8 since the first model was described by Lee et al. 9 in 1973, the elimination of the hepatic arterial reconstruction 10 and the introduction of the cuff anastomosis technique by Kamada et al. 11 were a major advancement in this model, because they simplified the reconstruction procedures to a great degree. In the model by Kamada et al., the hepatic rearterialization was also eliminated. Since rats could survive without hepatic arterial flow after liver transplantation, there was considerable controversy over the value of hepatic arterialization. However, the physiological superiority of the arterialized model has been increasingly acknowledged, especially in terms of preserving the bile duct system 8,12 and the liver integrity 8,13,14.
In this article, we present detailed surgical procedures for a rat model of OLT with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft after ex vivo liver resection. The reconstruction procedures for each vessel and the bile duct are performed by the following methods: a 7-0 polypropylene continuous suture for the supra- and infrahepatic vena cava; a cuff technique for the portal vein; and a stent technique for the hepatic artery and the bile duct.

Orthotopic liver transplantation in rats is an indispensable experimental model for biomedical research. Here we present our surgical procedures for orthotopic rat liver transplantation with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft.

肝動脈再建を用いた部分同所性肝移植のラットモデルのための外科的処置

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed lung transplantation in humans to become more readily available by enabling the ability to assess organs and expand the donor pool. As this technology expands and improves, the ability to potentially evaluate and improve the quality of substandard lungs prior to transplant is a critical need. In order to more rigorously evaluate these approaches, a reproducible animal model needs to be established that would allow for testing of improved techniques and management of the donated lungs as well as to the lung-transplant recipient. In addition, an EVLP animal model of associated pathologies, e.g., ventilation induced lung injury (VILI), would provide a novel method to evaluate treatments for these pathologies. Here, we describe the development of a rat EVLP lung program and refinements to this method that allow for a reproducible model for future expansion. We also describe the application of this EVLP system to model VILI in rat lungs. The goal is to provide the research community with key information and &#8220;pearls of wisdom&#8221;/techniques that arose from trial and error and are critical to establishing an EVLP system that is robust and reproducible.

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed lung transplantation in humans to become more readily available by enabling the ability to assess organs and expand the donor pool. Here, we describe the development of a rat EVLP program and refinements that allow for a reproducible model for future expansion.

孤立の方法<em&gt;エクスビボ</emラットモデルにおける&gt;肺灌流：ラットEVLPプログラムの開発の教訓

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

The Dimethylnitrosamine Induced Liver Fibrosis Model in the Rat

Four to six week old, male Wistar rats were used to produce animal models of liver fibrosis. The process requires four weeks of administration of 10 mg/kg dimethylnitrosamine (DMN), given intraperitoneally for three consecutive days per week. Intraperitoneal injections were performed in the fume hood as DMN is a known hepatoxin and carcinogen. The model has several advantages. Firstly, liver changes can be studied sequentially or at particular stages of interest. Secondly, the stage of liver disease can be monitored by measurement of serum alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) enzymes. Thirdly, the severity of liver damage at different stages can be confirmed by sacrifice of animals at designated time points, followed by histological examination of Masson&#39;s Trichome stained liver tissues. After four weeks of DMN dosing, the typical fibrosis score is 5 to 6 on the Ishak scale. The model can be reproduced consistently and has been widely used to assess the efficacy of potential anti-fibrotic agents.

We describe a method to produce an animal model of liver fibrosis in the rat, and assess the degree of fibrosis by histological examination of the liver. The model can be used to study the development of liver disease as well as to test the efficacy of potential anti-fibrotic agents.

ラットにおけるジメチルニトロソアミン誘発性肝線維症モデル

Four to six week old, male Wistar rats were used to produce animal models of liver fibrosis. The process requires four weeks of administration of 10 mg/kg ...

Intravascular Delivery of Biologics to the Rat Kidney

The renal microvascular compartment plays an important role in the progression of kidney disease and hypertension, leading to the development of End Stage Renal Disease with high risk of death for cardiovascular events. Moreover, recent clinical studies have shown that renovascular structure and function may have a great impact on functional renal recovery after surgery. Here, we describe a protocol for the delivery of drugs into the renal artery of rats. This procedure offers significant advantages over the frequently used systemic administration as it may allow a more localized therapeutic effect. In addition, the use of rodents in pharmacodynamic analysis of preclinical studies may be cost effective, paving the way for the design of translational experiments in larger animal models. Using this technique, infusion of rat recombinant Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) protein in rats has induced activation of VEGF signaling as shown by increased expression of FLK1, pAKT/AKT, pERK/ERK. In summary, we established a protocol for the intrarenal delivery of drugs in rats, which is simple and highly reproducible.

The administration of drugs for recovery of kidney function requires control of the localization and distribution of the therapeutic compound. Here, we describe in detail a simple technique for intrarenal delivery of drugs in rats. This procedure may be easily performed with no mortality and high reproducibility.

ラット腎臓への生物製剤の血管内デリバリー

The renal microvascular compartment plays an important role in the progression of kidney disease and hypertension, leading to the development of End Stage ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep learning curve. The introduction of the cuff technique for anastomosis of the portal vein (PV) and infrahepatic vena cava (IHVC) has significantly simplified the transplant procedure in rats. However, due to the short anterior wall of the recipients' suprahepatic vena cava (SHVC), the cuff technique is very difficult to use for the reconstruction of the SHVC. Most researchers in this field still use the hand-suture technique for SHVC reconstruction, which makes it the bottleneck step in rat orthotopic liver transplantation. The magnetic anastomosis technique (i.e., magnamosis) is a method of connecting two vessels using the attractive force between two magnets. Our recent study has shown that the magnetic anastomosis technique is superior to the hand-suture technique for SHVC reconstruction in rats. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using the novel magnetic anastomosis technique. In this model, the reconstruction of the PV and IHVC was performed by the standard cuff technique, while the reconstruction of the bile duct (BD) was performed by a stent technique. The hepatic re-arterialization was not performed. The magnetic anastomosis technique made SHVC reconstruction much easier and significantly shortened the anphepatic phase. After a reasonable learning curve, even researchers without advanced microsurgical skills can produce reliable and reproducible results using this rat model of OLT.

The reconstruction of the suprahepatic vena cava (SHVC) remains a difficult step in rat orthotopic liver transplantation. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using a novel magnetic anastomosis technique.

同所性同種のモデルラット Suprahepatic 上大静脈再建のため新規磁気吻合法を用いた肝移植

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

ワイヤー図法を使用してマウスの腸間膜動脈の等尺性収縮力測定

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Generation of a Rat Model of Acute Liver Failure by Combining 70% Partial Hepatectomy and Acetaminophen

Acute liver failure (ALF) is a clinical condition caused by various etiologies resulting in the loss of metabolic, biochemical, synthesizing, and detoxifying functions of the liver. In most irreversible liver damage cases, orthotropic liver transplant (OLT) remains the only available treatment. To study the therapeutic potential of a treatment for ALF, its prior testing in an animal model of ALF is essential. In the current study, an ALF model in rats was developed by combining 70% partial hepatectomy (PHx) and injections of acetaminophen (APAP) that provides a therapeutic window of 48 h. The median and left lateral lobes of the liver were removed to excise 70% of the liver mass and APAP was given 24 h postsurgically for 2 days. Survival in ALF-induced animals was found to be severely decreased. The development of ALF was confirmed by altered serum levels of the enzymes alanine amino transferase (ALT), aspartate amino transferase (AST), alkaline phosphatase (ALP); changes in prothrombin time (PT); and assessment of the international normalized ratio (INR). Study of the gene expression profile by qPCR revealed an increase in expression levels of genes involved in apoptosis, inflammation, and in the progression of liver injury. Diffused degeneration of hepatocytes and infiltration of immune cells was observed by histological evaluation. The reversibility of ALF was confirmed by the restoration of survival and serum levels of ALT, AST, and ALP after intrasplenic transplantation of syngeneic healthy rat hepatocytes. This model presents a reliable alternative to the available ALF animal models to study the pathophysiology of ALF as well as to evaluate the potential of a novel therapy for ALF. The use of two different approaches also makes it possible to study the combined effect of physical and drug-induced liver injury. The reproducibility and feasibility of current procedure is an added benefit of the model.

The acute liver failure animal model developed in the current study presents a feasible alternative for the study of potential therapies. The current model employs the combined effect of physical and drug-induced hepatic injury and provides a suitable time window to study the potential of novel therapies.

70%部分肝切除術とアセトアミノフェンを組み合わせた急性肝不全ラットモデルの生成

Acute liver failure (ALF) is a clinical condition caused by various etiologies resulting in the loss of metabolic, biochemical, synthesizing, and ...

A Rat Carotid Artery Pressure-Controlled Segmental Balloon Injury with Periadventitial Therapeutic Application

Cardiovascular disease remains the leading cause of death and disability worldwide, in part due to atherosclerosis. Atherosclerotic plaque narrows the luminal surface area in arteries thereby reducing adequate blood flow to organs and distal tissues. Clinically, revascularization procedures such as balloon angioplasty with or without stent placement aim to restore blood flow. Although these procedures reestablish blood flow by reducing plaque burden, they damage the vessel wall, which initiates the arterial healing response. The prolonged healing response causes arterial restenosis, or re-narrowing, ultimately limiting the long-term success of these revascularization procedures. Therefore, preclinical animal models are integral for analyzing the pathophysiological mechanisms driving restenosis, and provide the opportunity to test novel therapeutic strategies. Murine models are cheaper and easier to operate on than large animal models. Balloon or wire injury are the two commonly accepted injury modalities used in murine models. Balloon injury models in particular mimic the clinical angioplasty procedure and cause adequate damage to the artery for the development of restenosis. Herein we describe the surgical details for performing and histologically analyzing the modified, pressure-controlled rat carotid artery balloon injury model. Additionally, this protocol highlights how local periadventitial application of therapeutics can be used to inhibit neointimal hyperplasia. Lastly, we present light sheet fluorescence microscopy as a novel approach for imaging and visualizing the arterial injury in three-dimensions.

The rat carotid artery balloon injury mimics the clinical angioplasty procedure performed to restore blood flow in atherosclerotic vessels. This model induces the arterial injury response by distending the arterial wall, and denuding the intimal layer of endothelial cells, ultimately causing remodeling and an intimal hyperplastic response.

過期治療アプリケーションを用いてラット頸動脈圧制御区分バルーン損傷

Cardiovascular disease remains the leading cause of death and disability worldwide, in part due to atherosclerosis. Atherosclerotic plaque narrows the ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation of human liver transplantation due to the absence of arterial reconnection. Described here is a modified transplantation procedure that includes the incorporation of hepatic artery (HA) reconnection, leading to a marked improvement in transplant outcomes. With a mean anhepatic time of 12 min and 14 s, HA reconnection results in improved perfusion of the transplanted liver and an increase in long-term recipient survival from 37.5% to 88.2%. This protocol includes the use of 3D-printed cuffs and holders to connect the portal vein and infrahepatic inferior vena cava. It can be implemented for studying multiple aspects of liver transplantation, from immune response and infection to technical aspects of the procedure. By incorporating a simple and practical method for arterial reconnection using a microvascular technique, this modified rat OLT protocol closely mimics aspects of human liver transplantation and will serve as a valuable and clinically relevant research model.

The goal of this study is to modify the rat orthotopic liver transplant model to better represent human liver transplantation and improve recipient survival. The presented method reestablishes hepatic arterial inflow by connecting the donor liver&#39;s common hepatic artery to the recipient liver&#39;s proper hepatic artery.

ラット型異形肝移植モデルにおける動脈リコネクション後の合併症の減少

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...