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試料ホルダーの1建設<ol><li> M3六角ナットで固定されたステンレス鋼製のスペーサ及びM3ステンレス鋼のねじねじ、からの試料ホルダーを構築します。 </li><li>ペンチを使用してスレッド化ねじの頭を外し、糸パターンを維持するために、切断されたセグメントを磨きます。 </li><li>すべての個々のコンポーネントの準備が整ったら、電極ホルダーを組み立てます。各電極ホルダー11.5センチメートルハンドルの結果M3ネジにより接合3のスペーサが含まれています。接続をロックするネジとスペーサーの接合部に六角ナットを配置します。 </li><li>はんだ（40分の60％のSn / Pb）のロッドの端部にねじの上に歯のないワニ口クリップ。これは、後の分析の中に電極を取り付けるためのしっかりとホールド性を確保します。 </li><li>電極ホルダーが組み立てられると、腐食槽に浸漬しながら、腐食からのステンレス鋼棒を防止する立寄ラッカー（電気シーラント）複数のコートを適用します。 <ol><li>コー​​ティングの前にヒュームフードにワニ口クリップに取り付けた試料を用いて、すべての電極ホルダーを配置します。ヒュームフード内に20ミリリットル注射器を置きます。ストップオフラッカーを収集するために注射器を使用してください。 </li><li>ヒュームフードをオンにして、小さなガラスジャーに立寄漆を注ぎます。電極ホルダーの表面シリンジやコートに立寄ラッカーの10ミリリットルを引き出します。腐食のために分析されようとしている試験サンプルを、カバーすることはないことを確認してください。 </li><li>ヒュームフードの各電極ホルダと場所のコートの半分は他の半分をコーティングする前に乾燥させます。これは、被覆される領域に損傷を与えることなく、完全なしっかりと密封されてコートを得るのに役立ちます。これが適用されるコートを台無しにするように乾燥段階の間に、新たにコーティングされた領域は、他の面には触れていないことを確認します。 </li><li>任意の表面に非接触で乾燥時に高い位置に電極ホルダーを配置します。コー​​トによるストップオフラッカーの迅速な凝固を迅速に電極。これは、第1の層を完了します。 </li><li>乾燥した後、全領域に沿って3コートを得るためのプロセスを繰り返します。 </li></ol></li><li>腐食の実行を開始する前に、最終的なコートの完了後24時間乾燥させるためにホルダーを残します。すべてのコーティングプロセスは、それらが/加速する硬化プロセスを減速することができるが、室温で、非加熱または冷却工程が必要とされない起こります。 </li><li> ファラデーケージを作ります <ol><li>すべての側面を覆うようにアルミ箔の4層と同じサイズの2つのプラスチック容器をコーティングすることにより、ファラデーケージを構成します。 </li><li>通過する窒素タンクにポテンショスタットへの電極接続および窒素ラインを可能にするために、上部プラスチック容器の縁に二つの小さな穴をカット。ファラデーケージのスプリット設計は、上のコンポーネントがタンクを収容する下側部分を交換することなく、実行終了時に削除することができます。 </li><li>ファラデーケージに外側のコンパートメント（水室）を取り付け。 LEAV電子腐食容器は（後の手順で）密封されている唯一の下部コンパートメントの上側面及び場所に後半。 </li></ol></li></ol>ガラス製品の2.クリーニング<ol><li>すべての腐食の実行前に、腐食容器（700ミリリットル円筒形フラスコ）を清掃してください。家庭用洗剤で容器を洗浄し、水道水でよくすすぎます。この手順を3回繰り返します。 </li><li>水道水で見つかった潜在的な汚染物質を除去するために脱イオン水（DI）水で腐食槽を3回すすいでください。 </li><li>一回脱イオン水ですすぎが完了した腐食容器に95％エタノール300mlを注ぎ、すべての内部表面に接触するように周りに渦。エタノールを注ぎ、このステップを3回繰り返します。 </li><li>エタノールのすべてが完全に蒸発することを可能にするために30分間ヒュームフードの下で腐食容器のままにしておきます。 </li><li>クリーン、ドライコロージョンの容器を取り、腐食の実行に使用される電解液とそれをすすいでください。 EのACHは、電解液の200mlで腐食容器を充填し、この手順を3回繰り返しすすぎます。この研究のために、リン酸緩衝生理食塩水（PBS）で腐食容器をすすぎます。 PBS全体で使用される（10 L）電解質の化学的構成は、80グラムのNaCl、11.5グラムHPO 4、2gのKCl及び2グラムKHPO 4 2のNaです。 </li><li>リンス後、反応のための準備ができてPBSの必要量と腐食容器を埋めます。 </li></ol>装置の3.セットアップ<ol><li>クランプを使用して、外部区画の側に作り付けの循環システムでヒーターを固定します。外部区画の大きさは約30センチメートル×20センチメートル×20センチとハウジングより小さい腐食容器とヒーターシステムのことができるように、ガラスまたはポリマーのいずれかからなることが必要です。 </li><li>水の水位が腐食容器内の吊り下げ電極の高さよりも高くなるまで水道水で外側のコンパートメントを埋めます。小さいコンパートメント（以前のセクション2で説明）腐食容器です。 </li><li>防水シールを確実にするために、ガラス反応蓋とクランプと腐食容器を密封します。チャンバーの蓋は、実験や測定装置のための6つのエントリポイントを提供します。 </li><li>腐食セル内の温度の読みを提供するために、反応蓋のエントリポイントのいずれかから温度計を中断する。他の3エントリポイントを使用して、蓋からのすべての3つの電極を一時停止します。各接続のシールを確保するために、ポリテトラフルオロエチレン（PTFE）テープを使用してください。 </li><li>参照、カウンタ、および作用電極からなる3電極構成を使用してください。作用電極は、ステンレス鋼ねじ（分析中の試料）です。腐食容器内に電極を挿入する前に、80％エタノールで拭いPBS 100mlを充填したガラスビーカーにワイプと場所浸しました。 </li><li>電極サスペンダー上に電極ホルダーを取り付けるために、接続ピンを使用します。 electrodを取り付け腐食容器の蓋のエントリポイントへの電子サスペンダー。 </li><li>どちらの側から吊り下げられカウンタと参照電極に集中作用電極を配置します。 PTFEテープを用いてガラスのエントリポイントおよび腐食サスペンダーを密封します。 </li><li>基準電極については、標準的な銀/塩化銀を使用します。対極のために、試験（作用電極）の下で試料を包み込むように緩く曲がった白金メッシュを使用します。 </li><li>ピペットを用いて、3 M KClでのAg / AgCl電極を埋めます。広範な使用に続いて、銀のAg / CLを変更して補充します。これを行うには、小さなガラスの回収容器（ビーカー）に流体を空にするため、電極の先端を解放します。すべてのソリューションが削除されると、先端を挿入し、3 M KClで埋めます。 </li><li>全室が密閉されていることを確認するために、すべての接合部にテープを使用してください。 </li><li>チャンバは腐食容器内に配置された全ての電極で密封された後、37℃に温度を設定し、窒素バルブウィットを開きヘクタール150センチメートル3 / minの流量。実行を行う前に60分間実行している温度と窒素を残します。実験の期間実行している窒素を保管してください。 </li></ol> 4.腐食テストの実行します<ol><li> USB制御ポテンショスタットとインタフェースする電気化学的なソフトウェアパッケージを開きます。 </li><li>ポテンショスタットと3電極間の電気接続を行い、その後、ポテンショスタットをオンにします。 </li><li>オープンと腐食環境の可能性と現在の測定値を表示するには、「測定ビュー」を使用します。何のランプ電位はまだ作業（正の電位）とカウンターの間の現在の読み取り値を適用されていない開路電位（OCP）フェーズの間（負）電極が周り（0±0.01）μAです。 PTFEテープでチャンバーの不適切なシールが原因で酸素分子を除去するために窒素ガスを通気されているチャンバーに現在の読みの変動を引き起こす可能性があります。 </li><li>出て平衡腐食血管環境内で安定化させるためにサンプリングします。この時間期間は（1〜6時間）の変動、材料に依存しています。安定化された条件に達しているかどうかを判断するために、測定ビューを使用しての可能性を監視します。安定した状態に達したときに可能性が無い変動に一定となります。 </li><li>安定した状態に達した後、腐食の実行を開始します。しかし、この前に「腐食プログラム」と「サイクリックボルタンメトリー（CV）」分析ソフトウェアが提供するスケルトンテンプレートを使用して条件を記入し、行うことができます。 </li><li>手順タブからセットアップビュー内のサイクリックボルタンメトリーポテンショスタット手順を選択します。 </li><li>腐食の実行のための電極（WE）の可能性、および現在の作業、時間：腐食の実行のためにサンプリングする次のパラメータを有効にします。 </li><li>電流範囲を自動化するためのオプションを選択します。 10ミリアンペアする範囲で最高の電流、およびrで最も低い電流を設定WEのために10 nAになるようにアンジュ。 </li><li>最終的なカットオフ選択はヒステリシスループを完了させるために0.8 mVのに「サイクルバック」パラメータを設定することで、潜在的を介して制御されていることを確認。 </li><li> OCPパラメータテキストボックスに測定ビューからOCPを記録します。記録されたOCP値を下回る開始電位を100mVに設定します。 800 mVの、開始電位と下の頂点電位より100 mVのに停止電位より100 mVのに下頂点に、上側頂点電位を設定します。 0.0024 V /秒に0.001 V /秒とステップ電位にスキャンレートを設定します。今を押して起動します。 </li></ol>腐食ラン完了後の5 注：腐食が完了した後に実行偏光スキャンは、ソフトウェアの分析ビュー内に示されています。各偏光について発表者ビューはOCP、tとログ（ⅰ）対EのプロットであるCV階段対Eのプロットを示しています実行します。 <ol><li>各プロットL以内インクは、内部のデータポイントのろ過、ターフェル外挿、およびプロットオプションを決定します。一括して電気化学的なパラメータを形成し、関心の様々なパラメータを示すために提示され、各リンクを展開します。偏光スキャン（潜在的な対電流密度）、電位（E ピット）の孔食、開路電位を決定し、保護電位（ プロ E）。 </li><li>ターフェル傾斜リンクを使用して、腐食速度の下で陽極および陰極ターフェル定数、腐食速度、腐食電流、腐食電流密度、開始電位、およびエンド電位を集計。 </li></ol> 6.電極ホルダーからのサンプルを削除します<ol><li>ヒュームフードの下でジクロロメタンで50ミリリットルの3小さなjarファイルを準備します。 </li><li>ヒュームフードの内側に30分間ジクロロメタン中のホルダーの下端を浸漬することにより、電極ホルダーから試験されたサンプルを削除してください。 </li><li>切り離されると、次の瓶に試料を配置15分間、ジクロロメタンと残します。サンプルの取付部に余分なコーティングを取り除くために3番目で最後のすすぎでこのプロセスを繰り返します。 </li><li>クリップとサンプルから残りのシーラントを拭き、最後にDI水ですすいでください。 </li></ol>

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The authors have nothing to disclose.

ステンレス鋼試料から生成された偏光スキャンは、信頼性が高く、29再現性の両方でうまく機能して腐食システムを示す文献に見られるスキャンと相関きれい連続プロットを示しました。動電位孔食電位の再現性が悪いが、確率過程29によって特徴づけられる潜在的なビーイング孔食で、数百ミリボルトの普及と識別されます。これは一般的に、温度、ハロゲン化物含有量と電位（V）の変数に起因しています。したがって、実用的なセットアップからE corrの中で得た小さい変動は、プロトコルの指標であると前述の調整は、in vitroでのセットアップを改善しました。 手順における重要なステップは、反応容器内で安定した環境を確立し、ノイズを低減することでした。前各実行に反応容器を洗浄するための具体的な手順を作成し、以下の結果と広報を改善し再現性と信頼性の高い測定値をovided。電解液内の汚染物質は、結果の矛盾を引き起こし、腐食環境と腐食に対する材料の応答を変更することができます。最小限に抑え、これはプロトコルにおける重要なステップであることが見出されました。電極や腐食容器のための場所でのクリーニング手順は、以前に見矛盾する要因だったかもしれない潜在的な不純物を除去します。 手順内の第2の重要なステップは、チャンバ内の任意の金属接触を排除するためにサンプルホルダーに電気シールドを提供することでした。任意の電気伝導度から完全に金属ホルダ遮蔽の重要性は、外部の金属の干渉を防止することでした。金属種の任意の他の形態の被試験金属片を単離することなく、腐食分析は、試験片の正確な測定値を提供することができません。所有者が適切に被覆されていない場合、彼らは腐食します。 corrの場合osionは、検査中の読み取り、分析のために使用することができないれず、別の実行が必要とされる金属成分に見られます。 当初はライブ録音フェーズ中のスキャンは、潜在的に不安定または高いノイズレベルに起因することができます振動を示しました。走行中の振動は不安定性の結果として見られました。これは、潜在的な30個の細胞の制御を維持するためのポテンシオスタットの失敗によるものです。高いノイズレベルに起因する振動は、濾過の程度を必要とする外部ソースからであることができます。トラブルシューティングの鍵は、電解質と対向電極との間にセラミック・ディスク・コンデンサを接続することでした。抑制コンデンサは、一般的に、一般的に、電気/電子機器によって生成される電磁または高周波干渉、並びに還元電気スイッチングノイズを抑制するために、現在のラインフィルタを交互に組み込まれます。セラミックCAPA 4つの異なる大きさcitorsは0.001から1μFの範囲の、分極曲線上でのノイズ抑制効果を分析するために使用しました。 0.1μFのコンデンサを大幅に分極曲線を平滑化。すべてのノイズが抑制されました。元のスキャンで検出されたすべてのスパイクを除去します。実験結果は、インダクタンスが存在する雑音の周波数範囲内で0.1μFに影響を与えない一方、1μFコンデンサのノイズ抑制効果が低下し始めることを示しました。 動電位腐食は、制御された環境での材料のために、インビトロの腐食試験システムを提供します。材料の腐食性は、材料に加えられた操作のいずれかの形態以下に評価することができます。異なるパラメータを制御する能力を有する腐食の分析は、金属材料で腐食変化のさらなる検査および分析を提供します。提案されたプロトコルは、制限と利点の両方を持っています。これの重要性を満たしますHOD他の方法に関連して、洗練された解析1,4,5を実行するために、比較的低コストで迅速なプロセスです。プロトコルを実施する臨床検査の信頼できるソースを提供します。しかしながら、プロトコルの制限は、一点で試験することができる並列サンプルの限られた数です。セットアップは、多数のサンプルのための試験時間を延長するテストごとに1つのサンプルを提供します。

電気化学的技術は、材料の電気化学的特性を得るために、迅速かつ比較的安価な方法を提供します。これらの技術は、制御された電気化学的妨害1-5への電荷移動プロセスの応答を観察することにより、金属の腐食を検出する能力に主に基づいています。体内環境内の金属インプラントの腐食が原因で生体適合性材料の完全性6上の有害な影響に重要です。体内でのインプラントの腐食に寄与する主な要因は、金属イオン7-11の放出増加につながる表面酸化物の溶解です。これは、局所的に、しかし、インプラント10,12-28の早期故障につながる可能性の全身性の影響で見つけることができる有害な生物学的反応、になります。 試験片の腐食特性を生成偏光スキャンから予測されますポテンショスタットによります。偏光スキャンは、金属基板の運動と腐食パラメ​​ータの外挿を可能にします。スキャン中に、電気活性種の酸化又は還元は電荷移動および反応物または生成物の移動によって制限することができます。これらの要因はすべて、偏光スキャンによってカプセル化されています。したがって、複数のサイクル全体で信頼性と再現性偏光スキャンを生成するシステムを持つことの重要性は非常に重要です。この原稿の主な焦点は、十分に機能動電位腐食系を得るために取ら原理と手順を特定のプロトコルを提供することです。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="573">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Potentiostat</td>
			<td style="width:71px;">Metrohm</td>
			<td style="width:119px;">PGSTAT101</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Ag/AgCl reference electrode, shielded</td>
			<td style="width:71px;">Metrohm</td>
			<td style="width:119px;">6.0729.100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Electrode shaft</td>
			<td style="width:71px;">Metrohm</td>
			<td style="width:119px;">6.1241.060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Polisher Forcipol 1v</td>
			<td style="width:71px;">Metkon</td>
			<td align="right" style="width:119px;">3602</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Clindrical flask 700mL</td>
			<td style="width:71px;">SciLabware</td>
			<td style="width:119px;">FR700F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Reaction lid</td>
			<td style="width:71px;">SciLabware</td>
			<td style="width:119px;">MAF2/41</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Dichloromethane</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">MKBR7629V</td>
			<td>use under a fumehood. Wear protective clothing</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Thermo / HAAKE D Series Immersion Circulators</td>
			<td style="width:71px;">Haake</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

potentiodynamic corrosion testing

Different metallic materials have different polarization characteristics as dictated by the open circuit potential, breakdown potential, and passivation potential of the material. The detection of these electrochemical parameters identifies the corrosion factors of a material. A reliable and well-functioning corrosion system is required to achieve this.
Corrosion of the samples was achieved via a potentiodynamic polarization technique employing a three-electrode configuration, consisting of reference, counter, and working electrodes. Prior to commencement a baseline potential is obtained. Following the stabilization of the corrosion potential (Ecorr), the applied potential is ramped at a slow rate in the positive direction relative to the reference electrode. The working electrode was a stainless steel screw. The reference electrode was a standard Ag/AgCl. The counter electrode used was a platinum mesh. Having a reliable and well-functioning in vitro corrosion system to test biomaterials provides an in-expensive technique that allows for the systematic characterization of the material by determining the breakdown potential, to further understand the material's response to corrosion. The goal of the protocol is to set up and run an in vitro potentiodynamic corrosion system to analyze pitting corrosion for small metallic medical devices.

手順の終わりにインビトロ腐食システムは、腐食試験を実施するように設定されています。このような腐食容器と、ファラデーケージの清掃のような具体的な手順は、ノイズ性能を改善するために、プロトコルの中に導入しました。良好な偏光スキャンの基本的な概念は、金属材料の腐食感受性を理解するために有益な情報を提供する材料の電気物理的な状態を識別することです。手順およびプロトコルは、信頼性と再現性のある結果を達成するために重要です。最適化は、使用中に発生する可能性がある特定の問題を助けることができる情報を取得し、特定し、現在のプロシージャに追加されます。既存の非キャリブレーションシステムは、偏光スキャン（ 図1）を生成しました。このスキャンは、直接、電気物理的な指揮の決意を許可しない散乱点の集合を示し、検査中の材料のitions。 OCPの識別は実用的ではありませんでしたし、腐食や再不動態化電位は読みにくいです。既存のセットアップで見つかったフォールトは、最大の潜在的に到達しなかった偏光スキャンを含めると、高いノイズレベルに途中で切断しました。第二にライブ録音フェーズ中のスキャンは、潜在的に不安定または高いノイズレベルに起因することができます振動を示しました。走行中の振動は不安定性の結果として見られました。最後に、連続したスキャンは、それが不可能特定の材料の電気物性を決定すること、再現性のある結果を提供しないであろう。 <img alt="図1" src="/files/ftp_upload/54351/54351fig1.jpg" /> 電気力学定電位分極を受けた後Nitanolサンプルの偏光スキャン 1.図 。この図は、ノイズの多いプロット番目を示していますで腐食パラメータの正確な解釈を提供していません。 <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54351/54351fig1large.jpg" target="_blank">この図の元のバージョンを表示するには、こちらをクリックしてください。</a> ノイズ性能の改善は、（ 図2）に示されています。スキャンは、前方の方向を示しており、スキャンを逆にし、保護電位（E プロ ）と孔食電位（E ピット）が観察されるポイントを指定します。プロットは、範囲全体がきれいに観察することができるようになり、全体の掃引全体のノイズのないまたは矛盾ときれいです。ヒステリシスループは、設定された電位で反転保護電位を識別する、陽極曲線をインターセプトに戻ります。偏光スキャンとターフェルプロットが必要な基本的なパラメータを提供出力、です。これらのパラメータは、肝炎従って、偏光スキャンから決定されます。再現性と信頼性の高い高品質なスキャンを提供するシステムをると、外挿することができるパラメータを特定する前に、重要です。 <img alt="図2" src="/files/ftp_upload/54351/54351fig2.jpg" /> 図2. ステンレス鋼316の偏光スキャンこれは明確なプロットでは、目的のパラメータを容易に検出することができる偏光スキャン、次 ​​の腐食に似ている。 <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54351/54351fig2large.jpg" target="_blank">この図の元のバージョンを表示するには、こちらをクリックしてください。</a> 研究は、孔食次金属ねじの表面形状の変化を分析するために行きました。研究から得られた平均E corrの値は（-0.414±0.05）V.ウィットがあったサンプルの平均孔食電位（0.49±0.12）Vでした分極曲線の活性領域をホアヒン。サンプルの保護可能性を意味する（-0.16±0.02）であったV.それぞれが、詳細な地形ピットの形成による変化とピット内の変化を示す巨視的な画像からの所見を確認する面に沿って形成されたローカライズされたピット（ 図ネジ3）。材料の表面トポグラフィの定量化は、材料の粗さは、全体的な表面粗さとして減少したことを示しています。ネジのR（159.9±7.3）μmの（非腐食）及び（124.7±18.3）μmの（腐食）でした。 R aは非腐食に比べて腐食試験片のために（P = 0.02）が有意に低かったです。平均最大高さR Zは（469.3±16.5）μmの（非腐食）及び（683.2±85.8）μmの（腐食）が腐食および非腐食したサンプル間の高さの変動に大きな差（p = 0.04）を識別します。平均最大heigHT（R t）が（592.23±119.7）μmので腐食したネジと比較して（502.61±51.2）μmでの非腐食のために低下しました。 <img alt="図3" src="/files/ftp_upload/54351/54351fig3.jpg" /> 図 のネジ表面に局所的な腐食を示す光学プロフィルから 3 の画像。腐食は表面の谷と谷の両方で検出されています。孔食の目視観察が正常に腐食設定することによって達成された。 <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54351/54351fig3large.jpg" target="_blank">この図の元のバージョンを表示するには、こちらをクリックしてください。</a>

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Potentiodynamic Corrosion Testing

Here, we present a protocol to set up and run an in vitro potentiodynamic corrosion system to analyze pitting corrosion for small metallic medical devices.

動電位腐食試験

Different metallic materials have different polarization characteristics as dictated by the open circuit potential, breakdown potential, and passivation ...

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Environment

17.5K ビュー.  Prince of Wales Clinical School. Here, we present a protocol to set up and run an in vitro potentiodynamic corrosion system to analyze pitting corrosion for small metallic medical devices. 

ビデオ: Potentiodynamic Corrosion Testing

Preparation and Testing of Plant Seed Meal-based Wood Adhesives

Recently, the interest in plant seed meal-based products as wood adhesives has steadily increased, as these plant raw materials are considered renewable and environment-friendly. These natural products may serve as alternatives to petroleum-based adhesives to ease environmental and sustainability concerns. This work demonstrates the preparation and testing of the plant seed-based wood adhesives using cottonseed and soy meal as raw materials. In addition to untreated meals, water washed meals and protein isolates are prepared and tested. Adhesive slurries are prepared by mixing a freeze-dried meal product with deionized water (3:25 w/w) for 2 hr. Each adhesive preparation is applied to one end of 2 wood veneer strips using a brush. The tacky adhesive coated areas of the wood veneer strips are lapped and glued by hot-pressing. Adhesive strength is reported as the shear strength of the bonded wood specimen at break. Water resistance of the adhesives is measured by the change in shear strength of the bonded wood specimens at break after water soaking. This protocol allows one to assess plant seed-based agricultural products as suitable candidates for substitution of synthetic-based wood adhesives. Adjustments to the adhesive formulation with or without additives and bonding conditions could optimize their adhesive properties for various practical applications.

To facilitate the effort in seeking more economic and environment-friendly formulations of natural product-based wood adhesives, this work demonstrates the preparation and testing of plant seed-based wood adhesives. This protocol allows one to assess plant seed-based agricultural products as suitable candidates for the substitution of synthetic-based wood adhesives.

植物種子ミールベースの​​木材接着剤の調製および試験

Recently, the interest in plant seed meal-based products as wood adhesives has steadily increased, as these plant raw materials are considered renewable ...

環境学

Protocols for Robust Herbicide Resistance Testing in Different Weed Species

Robust protocols to test putative herbicide resistant weed populations at whole plant level are essential to confirm the resistance status. The presented protocols, based on whole-plant bioassays performed in a greenhouse, can be readily adapted to a wide range of weed species and herbicides through appropriate variants. Seed samples from plants that survived a field herbicide treatment are collected and stored dry at low temperature until used. Germination methods differ according to weed species and seed dormancy type. Seedlings at similar growth stage are transplanted and maintained in the greenhouse under appropriate conditions until plants have reached the right growth stage for herbicide treatment. Accuracy is required to prepare the herbicide solution to avoid unverifiable mistakes. Other critical steps such as the application volume and spray speed are also evaluated. The advantages of this protocol, compared to others based on whole plant bioassays using one herbicide dose, are related to the higher reliability and the possibility of inferring the resistance level. Quicker and less expensive in vivo or in vitro diagnostic screening tests have been proposed (Petri dish bioassays, spectrophotometric tests), but they provide only qualitative information and their widespread use is hindered by the laborious set-up that some species may require. For routine resistance testing, the proposed whole plant bioassay can be applied at only one herbicide dose, so reducing the costs.

A robust and flexible approach to confirm herbicide resistance in weed populations is presented. This protocol allows the herbicide resistance levels to be inferred and applied to a wide range of weed species and herbicides with minor adaptations.

別の雑草種の堅牢な除草剤抵抗性試験のためのプロトコル

Robust protocols to test putative herbicide resistant weed populations at whole plant level are essential to confirm the resistance status. The presented ...

A CO2 Concentration Gradient Facility for Testing CO2 Enrichment and Soil Effects on Grassland Ecosystem Function

Continuing increases in atmospheric carbon dioxide concentrations (CA) mandate techniques for examining impacts on terrestrial ecosystems. Most experiments examine only two or a few levels of CA concentration and a single soil type, but if CA can be varied as a gradient from subambient to superambient concentrations on multiple soils, we can discern whether past ecosystem responses may continue linearly in the future and whether responses may vary across the landscape. The Lysimeter Carbon Dioxide Gradient Facility applies a 250 to 500 &#181;l L-1 CA gradient to Blackland prairie plant communities established on lysimeters containing clay, silty clay, and sandy soils. The gradient is created as photosynthesis by vegetation enclosed in in temperature-controlled chambers progressively depletes carbon dioxide from air flowing directionally through the chambers. Maintaining proper air flow rate, adequate photosynthetic capacity, and temperature control are critical to overcome the main limitations of the system, which are declining photosynthetic rates and increased water stress during summer. The facility is an economical alternative to other techniques of CA enrichment, successfully discerns the shape of ecosystem responses to subambient to superambient CA enrichment, and can be adapted to test for interactions of carbon dioxide with other greenhouse gases such as methane or ozone.

A CO2 Concentration Gradient Facility for Testing CO2 Enrichment and Soil Effects on Grassland Ecosystem Function

The Lysimeter Carbon Dioxide Gradient Facility creates a 250 to 500 &#181;l L-1 linear carbon dioxide gradient in temperature-controlled chambers housing grassland plant communities on clay, silty clay, and sandy soil monoliths. The facility is used to determine how past and future carbon dioxide levels affect grassland carbon cycling.

CO<sub&gt; 2</subテスト用のCO&gt;濃度勾配施設<sub&gt; 2</sub&gt;濃縮および草地生態系の機能に及ぼす土壌の影響

Continuing increases in atmospheric carbon dioxide concentrations (CA) mandate techniques for examining impacts on terrestrial ecosystems. Most ...

Preparation and Testing of Impedance-based Fluidic Biochips with RTgill-W1 Cells for Rapid Evaluation of Drinking Water Samples for Toxicity

This manuscript describes how to prepare fluidic biochips with Rainbow trout gill epithelial (RTgill-W1) cells for use in a field portable water toxicity sensor. A monolayer of RTgill-W1 cells forms on the sensing electrodes enclosed within the biochips. The biochips are then used for testing in a field portable electric cell-substrate impedance sensing (ECIS) device designed for rapid toxicity testing of drinking water. The manuscript further describes how to run a toxicity test using the prepared biochips. A control water sample and the test water sample are mixed with pre-measured powdered media and injected into separate channels of the biochip. Impedance readings from the sensing electrodes in each of the biochip channels are measured and compared by an automated statistical software program. The screen on the ECIS instrument will indicate either "Contamination Detected" or "No Contamination Detected" within an hour of sample injection. Advantages are ease of use and rapid response to a broad spectrum of inorganic and organic chemicals at concentrations that are relevant to human health concerns, as well as the long-term stability of stored biochips in a ready state for testing. Limitations are the requirement for cold storage of the biochips and limited sensitivity to cholinesterase-inhibiting pesticides. Applications for this toxicity detector are for rapid field-portable testing of drinking water supplies by Army Preventative Medicine personnel or for use at municipal water treatment facilities.

This manuscript describes how to prepare fluidic biochips with Rainbow trout gill epithelial cells for use in a field portable electric cell-substrate impedance sensor. The protocol for running a rapid drinking water toxicity test with the sensor is also described.

毒性のための飲料水試料の迅速な評価のためのRTgill-W1細胞とのインピーダンスベースの流体バイオチップの製造および試験

This manuscript describes how to prepare fluidic biochips with Rainbow trout gill epithelial (RTgill-W1) cells for use in a field portable water toxicity ...

Dispersion of Nanomaterials in Aqueous Media: Towards Protocol Optimization

The sonication process is commonly used for de-agglomerating and dispersing nanomaterials in aqueous based media, necessary to improve homogeneity and stability of the suspension. In this study, a systematic step-wise approach is carried out to identify optimal sonication conditions in order to achieve a stable dispersion. This approach has been adopted and shown to be suitable for several nanomaterials (cerium oxide, zinc oxide, and carbon nanotubes) dispersed in deionized (DI) water. However, with any change in either the nanomaterial type or dispersing medium, there needs to be optimization of the basic protocol by adjusting various factors such as sonication time, power, and sonicator type as well as temperature rise during the process. The approach records the dispersion process in detail. This is necessary to identify the time points as well as other above-mentioned conditions during the sonication process in which there may be undesirable changes, such as damage to the particle surface thus affecting surface properties. Our goal is to offer a harmonized approach that can control the quality of the final, produced dispersion. Such a guideline is instrumental in ensuring dispersion quality repeatability in the nanoscience community, particularly in the field of nanotoxicology.

Here, we present a step-wise protocol for the dispersion of nanomaterials in aqueous media with real-time characterization to identify the optimal sonication conditions, intensity, and duration for improved stability and uniformity of nanoparticle dispersions without impacting the sample integrity.

水溶液中におけるナノ材料の分散: プロトコルの最適化に向けて

The sonication process is commonly used for de-agglomerating and dispersing nanomaterials in aqueous based media, necessary to improve homogeneity and ...

On the Preparation and Testing of Fuel Cell Catalysts Using the Thin Film Rotating Disk Electrode Method

We present a step-by-step tutorial to prepare proton exchange membrane fuel cell (PEMFC) catalysts, consisting of Pt nanoparticles (NPs) supported on a high surface area carbon, and to test their performance in thin film rotating disk electrode (TF-RDE) measurements. The TF-RDE methodology is widely used for catalyst screening; nevertheless, the measured performance sometimes considerably differs among research groups. These uncertainties impede the advancement of new catalyst materials and, consequently, several authors discussed possible best practice methods and the importance of benchmarking.
The visual tutorial highlights possible pitfalls in the TF-RDE testing of Pt/C catalysts. A synthesis and testing protocol to assess standard Pt/C catalysts is introduced that can be used together with polycrystalline Pt disks as benchmark catalysts. In particular, this study highlights how the properties of the catalyst film on the glassy carbon (GC) electrode influence the measured performance in TF-RDE testing. To obtain thin, homogeneous catalyst films, not only the catalyst preparation, but also the ink deposition and drying procedures are essential. It is demonstrated that an adjustment of the ink&#39;s pH might be necessary, and how simple control measurements can be used to check film quality. Once reproducible TF-RDE measurements are obtained, determining the Pt loading on the catalyst support (expressed as Pt wt%) and the electrochemical surface area is necessary to normalize the determined reaction rates to either surface area or Pt mass. For the surface area determination, so-called CO stripping, or the determination of the hydrogen underpotential deposition (Hupd) charge, are standard. For the determination of the Pt loading, a straightforward and cheap procedure using digestion in aqua regia with subsequent conversion of Pt(IV) to Pt(II) and UV-vis measurements is introduced.

Preparing and testing Pt/C fuel cell catalysts is subject to continuous discussion in the scientific community with respect to reproducibility and best practice. With the presented work, we intend to present a step-by-step tutorial to make and test Pt/C catalysts, which can serve as benchmark for novel catalyst systems.

準備および薄膜回転ディスク電極法を用いた燃料電池触媒のテストに

We present a step-by-step tutorial to prepare proton exchange membrane fuel cell (PEMFC) catalysts, consisting of Pt nanoparticles (NPs) supported on a ...

Protocol for Acute and Chronic Ecotoxicity Testing of the Turquoise Killifish Nothobranchius furzeri

The killifish Nothobranchius furzeri is an emerging model organism in the field of ecotoxicology and its applicability in acute and chronic ecotoxicity testing has been demonstrated. Overall, the sensitivity of the species to toxic compounds is in the range with, or higher than, that of other model species.
This work describes protocols for acute, chronic, and multigenerational bioassays of single and combined stressor effects on N. furzeri. Due to its short maturation time and life-cycle, this vertebrate model allows the study of endpoints such as maturation time and fecundity within four months. Transgenerational full life-cycle exposure trials can be performed in as little as 8 months. Since this species produces eggs that are drought-resistant and remain viable for years, the on-site culture of the species is not needed but individuals can be recruited when required. The protocols are designed to measure life-history traits (mortality, growth, fecundity, weight) and critical thermal maximum.

Protocol for Acute and Chronic Ecotoxicity Testing of the Turquoise Killifish Nothobranchius furzeri

In this work, we describe an acute, chronic and multigenerational bioassay to study the effects of single and combined stressors on the Turquoise killifish Nothobranchius furzeri. This protocol is designed to study life-history traits (mortality, growth, fecundity, weight) and critical thermal maximum.

急性および慢性毒性試験ターコイズ メダカによる furzeriのためのプロトコル

The killifish Nothobranchius furzeri is an emerging model organism in the field of ecotoxicology and its applicability in acute and chronic ecotoxicity ...

Bioindication Testing of Stream Environment Suitability for Young Freshwater Pearl Mussels Using In Situ Exposure Methods

Knowledge of habitat suitability for freshwater mussels is an important step in the conservation of this endangered species group. We describe a protocol for performing in situ juvenile exposure tests within oligotrophic river catchments over one-month and three-month periods. Two methods (in both modifications) are presented to evaluate the juvenile growth and survival rate. The methods and modifications differ in value for the locality bioindication and each has its benefits as well as limitations. The sandy cage method works with a large set of individuals, but only some of the individuals are measured and the results are evaluated in bulk. In the mesh cage method, the individuals are kept and measured separately, but a low individual number is evaluated. The open water exposure modification is relatively easy to apply; it shows the juvenile growth potential of sites and can also be effective for water toxicity testing. The within-bed exposure modification needs a high workload but is closer to the conditions of a natural juvenile environment and it is better for reporting the real suitability of localities. On the other hand, more replications are needed in this modification due to its high-hyporheic environment variability.

Bioindication Testing of Stream Environment Suitability for Young Freshwater Pearl Mussels Using In Situ Exposure Methods

In situ bioindications enable determination of the suitability of an environment for endangered mussel species. We describe two methods based on the juvenile exposure of freshwater pearl mussels in cages to oligotrophic river habitats. Both methods are implemented in variants for open water and hyporheic water environments.

若い淡水パール ムール貝原露出メソッドを使用して Bioindication ストリーム環境適合性のテスト

Knowledge of habitat suitability for freshwater mussels is an important step in the conservation of this endangered species group. We describe a protocol ...

Metal Corrosion and the Efficiency of Corrosion Inhibitors in Less Conductive Media

Material corrosion can be a limiting factor for different materials in many applications. Thus, it is necessary to better understand corrosion processes, prevent them and minimize the damages associated with them. One of the most important characteristics of corrosion processes is the corrosion rate. The measurement of corrosion rates is often very difficult or even impossible especially in less conductive, non-aqueous environments such as biofuels. Here, we present five different methods for the determination of corrosion rates and the efficiency of anti-corrosion protection in biofuels: (i) a static test, (ii) a dynamic test, (iii) a static test with a reflux cooler and electrochemical measurements (iv) in a two-electrode arrangement and (v) in a three-electrode arrangement. The static test is advantageous due to its low demands on material and instrumental equipment. The dynamic test allows for the testing of corrosion rates of metallic materials at more severe conditions. The static test with a reflux cooler allows for the testing in environments with higher viscosity (e.g., engine oils) at higher temperatures in the presence of oxidation or an inert atmosphere. The electrochemical measurements provide a more comprehensive view on corrosion processes. The presented cell geometries and arrangements (the two-electrode and three-electrode systems) make it possible to perform measurements in biofuel environments without base electrolytes that could have a negative impact on the results and load them with measurement errors. The presented methods make it possible to study the corrosion aggressiveness of an environment, the corrosion resistance of metallic materials, and the efficiency of corrosion inhibitors with representative and reproducible results. The results obtained using these methods can help to understand corrosion processes in more detail to minimize the damages caused by corrosion.

The testing of processes associated with material corrosion can often be difficult especially in non-aqueous environments. Here, we present different methods for short-term and long-term testing of corrosion behavior of non-aqueous environments such as biofuels, especially those containing bioethanol.

金属の腐食と腐食抑制剤より少なく伝導性媒体の効率

Material corrosion can be a limiting factor for different materials in many applications. Thus, it is necessary to better understand corrosion processes, ...

A Small-Scale Setup for Algal Toxicity Testing of Nanomaterials and Other Difficult Substances

Ecotoxicity data is a requirement for pre- and post-market registration of chemicals by European and international regulations (e.g., REACH). The algal toxicity test is frequently used in regulatory risk assessment of chemicals. In order to achieve high reliability and reproducibility the development of standardized guidelines is vital. For algal toxicity testing, the guidelines require stable and uniform conditions of parameters such as pH, temperature, carbon dioxide levels and light intensity. Nanomaterials and other so-called difficult substances can interfere with light causing a large variation in results obtained hampering their regulatory acceptance. To address these challenges, we have developed LEVITATT (LED Vertical Illumination Table for Algal Toxicity Tests). The setup utilizes LED illumination from below allowing for a homogenous light distribution and temperature control while also minimizing intra-sample shading. The setup optimizes the sample volume for biomass quantification and does at the same time ensure a sufficient influx of CO2 to support exponential growth of the algae. Additionally, the material of the test containers can be tailored to minimize adsorption and volatilization. When testing colored substances or particle suspensions, the use of LED lights also allows for increasing the light intensity without additional heat generation. The compact design and minimal equipment requirements increase the possibilities for implementation of the LEVITATT in a wide range of laboratories. While compliant with standardized ISO and OECD guidelines for algal toxicity testing, LEVITATT also showed a lower inter-sample variability for two reference substances (3,5-Dicholorophenol and K2Cr2O7) and three nanomaterials (ZnO, CeO2, and BaSO4) compared to Erlenmeyer flasks and microtiter plates.

We demonstrate algal toxicity testing for difficult substances (e.g., colored substances or nanomaterials) using a setup illuminated vertically with an LED.

ナノ材料やその他の難しい物質の藻類毒性試験のための小規模なセットアップ

Ecotoxicity data is a requirement for pre- and post-market registration of chemicals by European and international regulations (e.g., REACH). The algal ...