Generazione di organoidi renali in sospensione da cellule staminali pluripotenti indotte

La nostra ricerca presenta un metodo completo ed efficiente per la produzione di organoidi renali da cellule staminali pluripotenti indotte, utilizzando condizioni di coltura in sospensione. Sottolineiamo l'importanza della densità cellulare iniziale e della concentrazione di agonisti WNT durante la fase di induzione, che istruirà nuovi ricercatori di organoidi. Attualmente, è difficile ottenere una singola linea cellulare ad alta densità per le iPSC.

L'impatto del lotto è stato evidente, in particolare in varie linee di iPSC. Gli organoidi renali di ogni lotto possono avere una forma e dimensioni variabili. Sono necessari diversi tentativi per ottenere la migliore densità cellulare iniziale e concentrazione di CHIR per una linea di iPSC.

Abbiamo stabilito che la differenziazione iniziale del metodo intermedio è importante per il successo della formazione di organoidi renali. Il nostro protocollo descrive in dettaglio come scegliere le densità cellulari ottimali e le concentrazioni di CHIR durante il processo perché diverse linee di iPSC hanno mostrato variazioni nella proliferazione cellulare e nella capacità di differenziamento. I ricercatori possono generare rapidamente gli organoidi renali specifici dalle loro iPSC.

Secondo il nostro protocollo, regolando la densità cellulare e la concentrazione di CHIR, è senza dubbio vantaggioso per tutti i nostri ricercatori concentrarsi sulla loro malattia renale. La ricerca futura del nostro laboratorio deve ottimizzare il metodo del protocollo nei modelli di malattia, rigenerare nuovi farmaci e lo screening dei farmaci. Negli ultimi cinque anni, il nostro laboratorio si concentrerà sull'epigenetica e sullo sviluppo di farmaci per argomento cellulare di varie malattie renali ereditarie, sulla base dello sviluppo del paziente, delle iPSC e dei modelli di malattia organizzata del rene.