JoVE Journal

Genetics

This content is Open Access.

Dissezione della funzione Enhancer usando Multiplex basati su CRISPR Enhancer interferenze nelle linee cellulari

Questo protocollo descrive i passaggi necessari per progettare e realizzare targeting multiplex di esaltatori con la proteina di fusione disattivazione SID4X-dCas9-KRAB, noto anche come interferenza di enhancer (Enhancer-i). Questo protocollo consente l'identificazione dei rinforzatori che regolano l'espressione genica e facilita la dissezione delle relazioni tra esaltatori di un gene bersaglio comune di regolazione.

Capitoli in questo video

0:05

Title

0:37

Guide RNA Design

3:37

Guide RNA Cloning

6:27

Transfection of Enhancer-I, Cell Harvest, and RNA Extraction

8:21

Results: Guide RNA Design/Cloning and Evaluation of Gene Expression in Response to Enhancer-i

9:23

Conclusion

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