Method Article
Questo articolo descrive come registrare l'attività dell'amigdala con magnetoencefalografia (MEG). Inoltre questo articolo descrive come condurre traccia condizionamento alla paura senza consapevolezza, un compito che attiva l'amigdala. Esso riguarderà tre temi: 1) Progettazione di una traccia condizionata paradigma utilizzando indietro mascheratura per manipolare la consapevolezza. 2) l'attività cerebrale di registrazione durante l'attività utilizzando magnetoencephalography. 3) Utilizzo di immagini sorgente per recuperare il segnale da strutture subcorticali.
Nella traccia di paura condizionata uno stimolo condizionato (CS) predice l'insorgenza dello stimolo incondizionato (UCS), che viene presentato dopo un breve periodo di libera stimolo (intervallo traccia) 1. Poiché il CS e UCS non co-si verificano temporalmente, il soggetto deve mantenere una rappresentazione di quel CS durante l'intervallo traccia. Negli esseri umani, questo tipo di apprendimento richiede consapevolezza delle contingenze stimolo al fine di colmare l'intervallo traccia 2-4. Tuttavia quando un volto viene utilizzato come CS, soggetti possono implicitamente imparare a temere il volto, anche in assenza di una esplicita consapevolezza *. Ciò suggerisce che ci possono essere ulteriori meccanismi neurali capaci di mantenere alcuni tipi di stimoli "biologicamente rilevanti" durante un breve intervallo di traccia. Dato che l'amigdala è coinvolta nel condizionamento traccia, ed è sensibile alle facce, è possibile che questa struttura può mantenere una rappresentazione di un volto CS durante un breve intervallo di traccia.
5. La presentazione della maschera rende il bersaglio invisibile 6-8. Secondo, mascheramento richiede molto rapida e precisa temporizzazione rendendo difficile indagare risposte neurali evocati da stimoli mascherati con molti approcci comuni. Dipende dal livello delle risposte Sangue-ossigenazione (BOLD) si risolvono in un lasso di tempo troppo lento per questo tipo di metodologia, e tecniche di registrazione in tempo reale, come electroencephalography (EEG) e magnetoencefalografia (MEG) presentano difficoltà di recupero del segnale da sorgenti profonde.
Tuttavia, ci sono stati i recenti progressi nei metodi utilizzati per localizzare le sorgenti neurali del segnale MEG 9-11. Con la raccolta di immagini ad alta risoluzione MRI del cervello del soggetto, è possibile creare un modello sorgente basato su anatomia individuale neurale. Utilizzando questo modello di "immagine" sorgenti del segnale MEG, è possibile recuperare il segnale da strutture sottocorticali profonde, come l'amigdala e l'ippocampo *.
Progettazione di una traccia condizionata paradigma utilizzando indietro mascheratura per bloccare la consapevolezza
1. Stimoli di design
2. Programma l'esperimento utilizzando Presentazione
Registrare l'attività del cervello durante l'attività utilizzando magnetoencephalography
3. Installazione delle attrezzature per la formazione a MEG Suite (vedere la figura 2).
4. Attrezzature setup per la prova a risonanza magnetica Suite
5. Setup Oggetto per la formazione a MEG Suite (vedere la figura 3)
6. Shock Workup
7. Dispositivo di risposta
8. Record MEG durante l'allenamento
9. Setup Oggetto di test a risonanza magnetica Suite
10. Record fMRI durante i test
Utilizzando Imaging Source per recuperare il segnale da strutture subcorticali.
11. Analizzare i dati comportamentali e fMRI
12. Pre-elaborazione MRI Volume
13. Pre-elaborazione MEG registrazioni con Brainstorm 11
14. Analizzare le risposte evocate con Brainstorm
15. Eseguire decomposizioni tempo-frequenza su ROI utilizzando Brainstorm
Utilizzando i metodi descritti qui, le nostre indagini hanno portato a due importanti risultati: 1) E 'possibile manipolare la consapevolezza dei CSS visivo durante la traccia condizionata, e ancora mostrare le prove di apprendimento. 2) E 'possibile recuperare i segnali MEG dall'amigdala utilizzando fonte di imaging *.
Nella sezione 2, abbiamo descritto come manipolare la consapevolezza di CSS visivo con mascheramento all'indietro. Se esposto ad uno stimolo mascherato che viene visualizzata per ~ 30 msec, i soggetti sono generalmente inconsapevoli della presentazione dello stimolo 5,6,8 *. Un modo per verificare il successo di questa manipolazione è misurare la capacità dei soggetti di prevedere il verificarsi del UCS. Se la manipolazione mascheramento riesce, discipline deve essere in grado di prevedere con precisione il verificarsi del UCS base al tipo CS (vedere Figura 4).
Ma il calendario in questo tipo di formazione rende difficile da misurare direttamente levviso durante la sessione di allenamento. E 'possibile misurare indirettamente apprendimento esponendoli a una successiva sessione di test riacquisizione smascherato con stimoli nuovi e vecchi 5 *. Se i soggetti sono in grado di conoscere i rischi durante la fase di formazione, dovrebbero mostrare maggiore differenziale di magnitudo (CS +> CS-) SCR per i vecchi stimoli relativi ai nuovi stimoli. Questo effetto è evidente nel gruppo non filtrati quando guardiamo testare studi di fase dopo che i soggetti sono stati ri-esposto al CS-UCS contingenze (cioè Trials 2-5; vedi Figura 4).
Nella sezione 8, abbiamo descritto come registrare MEG durante la sessione di condizionamento traccia mascherato. Utilizzo di immagini sorgente per elaborare queste registrazioni, è possibile recuperare il segnale MEG da strutture sottocorticali come l'amigdala 18 *. I soggetti indicati faccia non filtrata (N = 9) CS esibiscono grandi amigdala risposte (Figura 5) e le gamMás oscillazioni (Figura 6) che soggetti visualizzati facce filtrati passa-alto (n = 9). Inoltre, questi soggetti mostrano anche grandi risposte in una rete di regioni faccia di elaborazione come la zona occipitale faccia (Figura 7 e Video supplementare).
Figura 1. Schema raffigurante una sessione di allenamento tipico. Presenti 60 studi di un CS + e 60 prove di un CS, in modo pseudo-casuale, tale che ci sono 4 blocchi di 15 prove ciascuna. Presentare il CSS per 30 msec, immediatamente seguito da un 970 msec maschera che coterminates con lo shock UCS su CS + prove.
Figura 2. Schema depicting le attrezzature utilizzate in un tipico esperimento di condizionamento Questa configurazione consente di: 1.) stimoli visivi presenti tramite il software di presentazione, 2) somministrare una stimolazione elettrica UCS tramite l'hardware Psylab (SAM), 3) record di UCS aspettativa utilizzando un asse dispositivo (dial) collegato al computer presentazione, e 4) sincronizzare le presentazioni di stimolo e le risposte con le registrazioni MEG tramite l'interfaccia del sistema di acquisizione MEG.
Figura 3. Illustrazione che mostra la posizione di ciascuno dei sensori e dei punti fiduciali descritte nel capitolo 5. Punti con le linee allegate corrispondono ai sensori etichettati e conduce. Le frecce blu rappresentano i punti fiduciali utilizzati per registrare le registrazioni MEG con il volume anatomico MRI. Punto di violas rappresentano punti del cuoio capelluto digitalizzati utilizzate per affinare ulteriormente la coregistrazione MEG-MRI.
Figura 4. Risultati comportamentali di un tipico studio di condizionamento. Il grafico a sinistra mostra UCS aspettativa di tutta la sessione di allenamento, è crollato di tutti i gruppi non filtrata e non filtrata. Si noti che i soggetti mostrano livelli simili di UCS aspettativa per il CS + e CS-60 attraverso le prove, suggerendo che la procedura di mascheramento bloccato la loro capacità di discriminare tra i CS (F (1,17) = 2,19, p = 0,16). Il grafico a destra mostra gli SCR differenziali durante la sessione di test. Si noti che il filtrato, ma non il gruppo filtrata sembra mostrare SCR differenziali più grandi per i vecchi stimoli che i nuovi stimoli (non filtrata Nuovo / Old x CS + / CS-interazione: F (1,7) = 5.94, p = 0,045; filtrata New / Old x CS + / CS-interazione: F (1,7) = 1,13, p = 0,32), suggerendo che la formazione porta ad una migliore riacquisizione delle associazioni CS-UCS per questi soggetti. (* P <0,05).
Figura 5. MEG risultati di un tipico esperimento di condizionamento. La figura a sinistra mostra i modelli 3D di dell'amigdala (arancione), ippocampo (verde), e la corteccia cerebrale usato per modellare le sorgenti del segnale MEG. Il grafico a destra rappresenta l'attività da un cluster amigdala modellato dalle registrazioni MEG. La linea di colore chiaro rappresenta l'attività evocata da volti senza filtro, mentre la linea di colore scuro rappresenta l'attività evocata da volti filtrati. Vertical sezioni in grigio rappresentano gli intervalli di tempo in cui volti non filtrate evocano risposte significativamente più grandi di volti filtrati (F (1,17)> 3,44, p <0,05). Clicca qui per ingrandire la figura .
Figura 6. Amigdala tempo di frequenza i risultati di un tipico esperimento di condizionamento. La figura a sinistra mostra i modelli 3D di dell'amigdala (arancione), ippocampo (verde), e la corteccia cerebrale usato per modellare le sorgenti del segnale MEG. Il grafico a destra rappresenta il segnale MEG registrato dall'amigdala suddivisi per tempo e frequenza. Colori caldi rappresentano regioni del spettrografo che mostrano significativamente più potenza per unfiltered facce che per i volti filtrati. Colori freddi rappresentano il contrario. Le regioni con la sovrapposizione di strisce rappresentano le differenze significative tra i gruppi. Clicca qui per ingrandire la figura .
Figura 7. Figura che mostra attivazione zona occipitale faccia in un tipico esperimento di condizionamento. Colori rappresentano l'ampiezza del t-test non filtrato> filtrata al corrispondente dipolo. Colori caldi rappresentano grandi risposte a facce non filtrati rispetto alle facce filtrati. Colori freddi rappresentano grandi risposte ai volti filtrati rispetto alle facce non filtrati.
Supplemental Video. Video che mostra le risposte corticali in un tipico Conditidicazioni esperimento. Colori rappresentano l'ampiezza del t-test non filtrato> filtrata al corrispondente dipolo. Colori caldi rappresentano grandi risposte a facce non filtrati rispetto alle facce filtrati. Colori freddi rappresentano grandi risposte ai volti filtrati rispetto alle facce non filtrate. Clicca qui per visualizzare filmati supplementare .
In questo articolo descriviamo metodi 1) per manipolare la consapevolezza del bersaglio CS soggetti nel corso di una traccia di paura condizionata paradigma. 2) e per recuperare il segnale MEG dall'amigdala durante traccia paura condizionamento senza consapevolezza. Utilizzando queste metodologie, siamo stati in grado di dimostrare che traccia condizionata senza consapevolezza è possibile quando i volti sono utilizzati per prevedere l'UCS. Questo risultato suggerisce che ricevono facce elaborazione speciale anche quando presentato sotto della soglia di rilevazione percettiva *. Coerentemente con questa conclusione abbiamo scoperto che ampio spettro affronta evocare forti risposte dell'amigdala e scoppi di oscillazioni gamma durante l'intervallo traccia. Questo risultato suggerisce che l'amigdala è capace di mantenere una rappresentazione di un volto CS durante un breve intervallo di traccia.
Anche se presentato insieme, questi due metodi possono essere usati indipendentemente. Ad esempio è possibile utilizzare all'indietro mascheratura per manipolare bersaglio visibilitàlità in altri paradigmi cui comportamento può essere influenzato da stimoli emotivi elaborati di sotto del livello di consapevolezza cosciente 5,6,8 *. Inoltre, utilizzando il metodo di immagini sorgente qui descritta è possibile creare modelli 3d di altre strutture sottocorticali, e può essere possibile recuperare il segnale da queste strutture durante altri compiti specifici per regione. Per esempio, mediante imaging fonte di modellare l'attività dell'ippocampo, può essere possibile recuperare segnale MEG da fonti ippocampali durante operazioni come la navigazione spaziale.
I metodi descritti qui sono stati progettati con due obiettivi in mente: 1) blocco consapevolezza degli stimoli bersaglio, 2) e massimizzare la capacità di rilevare stimoli evocati risposte dell'amigdala con MEG. Questi vincoli di progettazione rendono difficile misurare la conoscenza implicita delle contingenze stimolo dei soggetti. Per esempio, SCR risolvono nel corso di diversi secondi 5,13, tuttavia, i CS sono rappresentati soloper ~ 30 msec durante l'allenamento, e la scossa è presentato poco dopo (~ 900 msec). Dati questi vincoli di tempo, espressione CR sarà inevitabilmente confuso con espressione UCR durante l'allenamento. A causa di questo colinearità, è necessario verificare la conoscenza dei soggetti delle contingenze stimolo con una successiva sessione di test smascherato. Tuttavia una sessione di test alla fine dell'esperimento non è ottimale in quanto tendono a SCR abituare nel corso dell'esperimento 1. Dato il numero di prove necessarie per dimostrare risposte evocate affidabili con MEG, questo SCR assuefazione diminuirà notevolmente il potere di rilevare un effetto comportamentale della formazione. Studi futuri dovrebbero concentrarsi sulla ricerca di modi migliori per indice di apprendimento implicito durante paura condizionata con mascherato CS. Questo potrebbe essere fatto o trovando un indice alternativo di paura durante l'allenamento (cioè la dilatazione della pupilla 19,20) o trovare una misura più sensibile della paura che può essere ammistrata dopo la sessione di allenamento.
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Questo studio è stato sostenuto dal National Institute of Mental Health (MH060668 e MH069558).
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Software | |||
Matlab | Mathworks | mathworks.com/products/matlab | |
Presentation | Neurobehavioral Systems | neurobs.com | |
Psylab | Contact Precision Instruments | psychlab.com | |
AFNI | NIMH - Scientific and Statistical Computing Core | afni.nimh.nih.gov/afni | |
Freesurfer | Martinos Center for Biomedical Imaging | surfer.nmr.mgh.harvard.edu/fswiki | |
MNE | Martinos Center for Biomedical Imaging | nmr.mgh.harvard.edu/martinos/userInfo/data/sofMNE.php | |
Brainstorm | open-source collaboration | neuroimage.usc.edu/brainstorm | |
3d Slicer | open-source collaboration | slicer.org | |
Paraview | Kitware | paraview.org | |
Table 1. Software used Software used. | |||
Equipment | |||
Physiological Monitoring System | |||
Psylab stand alone monitor (x2) | Contact Precision Instruments | SAM | |
Skin conductance amplifier | Contact Precision Instruments | SC5 | |
Shock stimulator (x2) | Contact Precision Instruments | SHK1 | |
Additional Components | |||
8-bit synchronization cable (x2) | Contact Precision Instruments | Included with SAM | |
8-bit to 2-bit isolation adapter | N/A | Custom | |
DB25 ribbon cable (x2) | N/A | Standard | |
Shielded extension cable (x3) | Contact Precision Instruments | CL41 | |
Radiotranslucent cup electrodes for SCR and shock (x6) | Biopac | EL258-RT | |
Signa Gel | Parker Laboratories | 15-250 | |
Response Device | |||
Rotary dial with gameport connector (x2) | N/A | Custom | |
Gameport-to-gameport/BNC splitter | N/A | Custom | |
BNC cable | N/A | Standard | |
Gameport-to-USB adapter (x2) | Rockfire | RM203U | |
Additional Components for MEG Setup | |||
HPI coils and wiring harness | N/A | Custom | |
HPI positioning system | Inition | Polhemus Isotrak | |
Table 2. Equipment used. |
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