במחקר זה אימצנו שיטת עיבוד נפוצה ורכשנו טכניקת התמדה יציבה ואמינה. התוצאה הראתה כי הרעילות של Epimedii מעובד הופחתה. שיטת משטח התגובה דורשת פחות ניסויים ומחזורים קצרים יותר, אשר לא רק למנוע את הבעיות הקיימות בסטטיסטיקה המתמטית המסורתית, אלא גם לעזור למשתמשים לבחור את התנאים האופטימליים.
שיטה זו יכולה להיות בשימוש נרחב גם בתעשייה הכימית, הנדסה ביולוגית, תעשיית המזון, הכנת רפואה סינית, מיצוי רפואה סינית, וכן הלאה. לאחר הכנת התמיסה וביצוע הכרומטוגרפיה, בחרו את הפרמטרים המרכזיים בעיבוד EF, כגון כמות שמן הכבש, טמפרטורת שמן הכבש וטמפרטורת הטיגון כגורמים משפיעים. השתמש בציונים המקיפים של תוכן icariin, EA, EB, EC ו- BI כאינדקסי הערכה.
השתמש בתוכנת ניתוח משטח התגובה כדי לתכנן את ניסויי משטח התגובה Box-Behnken, לחקור את משטח התגובה הריבועי ולבנות מודל פולינומי מסדר שני. בחר בעיצוב Box-Behnken החדש והגדר את האפשרות גורמים מספריים לשלושה. הגדר את הגורמים A, B ו- C.לחץ על המשך, לאחר מכן הגדר את אפשרות התגובות לאחת, ולחץ על המשך כדי להשלים את העיצוב.
מעבדים את ה-EF לפי הפרמטרים הספציפיים, למשל, לסדר מספר אחת, שבו שמן כבש מזוקק בנפח של 15%, ואז מחממים אותו ל-50 מעלות צלזיוס כדי להמיס אותו. מוסיפים את ה-EF הגולמי לכבש המומס. מערבבים ומטגנים על אש עדינה עד שהיא מבריקה באופן שווה, ואז מוציאים ומקררים את ה-EF. הכן את פתרונות הבדיקה של המוצרים המעובדים, ונתח אותם באמצעות HPLC כמתואר בכתב היד.
רשום את זמני השמירה ואזורי השיא של כל הרכב כימי, וחשב את תכולת האיקרין, EA, EB, EC ו- BI בכל פתרון בדיקה מול עקומת תקן חיצונית. חשב את הציונים המקיפים של 17 קבוצות הניסוי באמצעות נוסחת חישוב הניקוד המקיף. ייבא את תוצאות הניקוד המקיפות עבור 17 קבוצות הניסויים לתוכנת ניתוח הנתונים כדי לנתח את נתוני הניסוי.
תחת פריטי ההערכה, בחר באפשרות סדר התהליך הריבועי ובאפשרות סוג מודל פולינומי. משטח התגובה של כמות שמן הכבש וטמפרטורת הטיגון היה תלול יותר בהשוואה לגורמים האחרים שנבדקו, וקווי המתאר נטו להיות אליפטיים יותר, מה שמצביע על כך שהאינטראקציה בין שני גורמים אלה הייתה משמעותית יותר מהאינטראקציות בין גורמים אחרים. כרומטוגרמה HPLC של חומר הייחוס המעורב, מוצרים גולמיים Epimedii Folium ו- Epimedii Folium מעובדים מדגימים כי תוכן ה- BI ב- EF גולמי נמוך, בעוד שהוא גדל לאחר העיבוד.
הקבוצה הגסה מראה עיוותים ברורים בעמוד השדרה, עקמומיות הגוף, בצקת קרום הלב ועיוות בכבד בריכוז של 150 מיקרוגרם למיליליטר סמים, בעוד ששינויים אלה היו נדירים בדגים צעירים בקבוצה המעובדת. כל דגי הזברה בקבוצת התרופות הגולמיות מתו 24 שעות לאחר מתן תרופות של 200 מיקרוגרם למיליליטר, בעוד שהתמותה בקבוצה המעובדת הייתה רק 6.67% מתן של 200 מיקרוגרם למיליליטר של EF גרם למותם של כל דגי הזברה בקבוצת התרופות הגולמיות לאחר 72 שעות, ואילו בקבוצה המעובדת, 500 מיקרוגרם למיליליטר של EF גרם למותם של כל דגי הזברה. הריכוז החציוני הקטלני של שתי קבוצות הניסוי 72 שעות לאחר ההפריה הראה כי LC 50 היה 151.3 מיקרוגרם למיליליטר בקבוצה הגולמית, ו 219.8 מיקרוגרם למיליליטר בקבוצה המעובדת.
הדבר החשוב ביותר בניסוי הוא בחירת גורמים של שיטת משטח התגובה, ולקבוע את הפרמטרים של גורמים אלה.