במחקרי פרמקוקינטיקה וטוקסיקוקינטיקה, אנו צריכים לאסוף כמות מסוימת של דם בנקודות זמן ספציפיות בחולדות כדי לזהות חשיפה לתרופות. מחקר זה מתאר שיטה פשוטה ויעילה לאיסוף דם מהווריד הסובקלבי בחולדות בפרוטוקול זה. טכניקה זו מאפשרת דגימה חוזרת, מהירה וקלה לזיהוי ללא הרדמה, ומשיגה דם באיכות גבוהה באמצעות איסוף דגימות חוזר.
אתה צריך לדעת את האנטומיה של הווריד subclavian, ריסון חולדה מסוגל ואת נקודת המחט. השיטה מסוכנת, והיא דורשת איש מקצוע מוסמך. כדי להתחיל, למצוא את הנקודה הנמוכה ביותר של fossa משולש subclavian בין הצוואר ואת הגפה הקדמית בחולדה.
לנוע כשניים עד שלושה מילימטרים לכיוון הראש ולהגיע לנקודת המחט באתר איסוף הדם. הסירו את השיער באמצעות מכונת גילוח חשמלית. כדי לשמור על הראש, הצוואר והשד של החולדה זקופים, אחזו בעור העורף ביד אחת וחשפו את מקום ההזרקה.
יישרו את הגפה הקדמית בצד אתר ההזרקה כדי לשמור על רמתה. שמור את המזרק במקביל לראש החולדה ביד השנייה והטה את המזרק כלפי חוץ חמש עד 10 מעלות, כך שהקצה מוטה לכיוון הגחון. הכנס את המחט במלואה לחלל הקדמי.
משוך לאחור את המזרק כדי לשמור על לחץ שלילי עם הצינור. הזיזו באיטיות את המחט מעומק לרדוד וחזרו באותו נתיב. כאשר הדם נכנס למחט המזרק, לתקן את המיקום של המחט.
בהתאם למשקל ולבריאות החולדות, יש לעקוב אחר כמות הדם המרבית שיש לשאוב בהתאם לסטנדרטים שנקבעו על ידי הוועדה לטיפול ושימוש בבעלי חיים של המוסד. בהיעדר דרישות אחרות, אין להסיר יותר מ -20% מנפח הדם הכולל של בעל החיים תוך 24 שעות. כאשר דגימת דם מספקת נאספת, מיד למשוך את המזרק, ולהתכונן לטיפול בדם.
יש ללחוץ על אתר ההזרקה של החולדה למשך דקה עד שתיים כדי לעצור את הדימום. מאז אתר האיסוף הוא בחלק התחתון של הצוואר, לצבוט את העור של הווריד subclavian כדי לעצור את הדימום על ידי לחיצה על זה. הסר את המחט מהמזרק, והשליך אותה במיכל הכלים החד.
לאט להעביר את הדם מן המזרק לצינור 1.5 מיליליטר. לחץ את המזרק על הקיר כדי למנוע היווצרות בועות. סגור את מכסה צינור המיקרוצנטריפוגה וסובב אותו בעדינות.
מערבבים את הדם עם נוגד הקרישה ביסודיות על ידי הפיכתו לפחות חמש פעמים. בתוך 120 דקות לאחר איסוף הפלזמה, צנטריפוגה את כל דגימת הדם ב 2, 000 RCF במשך 10 עד 15 דקות בטמפרטורת החדר. השתמש באקדח פיפטה כדי להעביר את הפלזמה העליונה לתוך צינור מיקרוצנטריפוגה טרי.
אין לגעת בראש פיפטה עם הדם השלם התחתון. יש להיפטר או לבצע צנטריפוגות מחדש של הפלזמה המזוהמת בכדוריות הדם האדומות. דגימות פלזמה שנאספו במדויק מהווריד הסובקלאבי היו שקופות בצבע צהוב בהיר.
איסוף דם לא תקין, או מניפולציה גרמו להמוליזה. במהלך הדגימה הראשונה, משקל הגוף של החיה הזכרית היה בין 268 ל -297 גרם, וכ -214 עד 239 גרם עבור הנקבות. במהלך הדגימה האחרונה, משקל הגוף של החיה הזכרית היה בין 376 ל 462 גרם, וכ 254 עד 300 גרם עבור הנקבות.
היה פער של 28 ימים בין איסוף הדם הרעיל. משקל הגוף של החיה עלה בהתמדה מדי שבוע, והתצפית הקלינית הייתה תקינה. שיטת החדרת המחט המדויקת והזווית יכולה להבטיח איסוף דם חלק ולהימנע מסיכונים.
פעולה זו דורשת תרגול חוזר.
