Prélèvement sanguin répétitif dans la veine sous-clavière d’un rat conscient

Dans les études pharmacocinétiques et toxicocinétiques, nous devons prélever une certaine quantité de sang à des moments précis chez les rats pour détecter l’exposition aux médicaments. Cette étude décrit une méthode simple et efficace pour prélever du sang de la veine sous-clavière chez le rat dans ce protocole. Cette technique permet un prélèvement répété, opportun et facilement identifiable sans anesthésie, et permet d’obtenir du sang de haute qualité grâce à des prélèvements répétitifs d’échantillons.

Vous devez connaître l’anatomie de la veine sous-clavière, la contention du rat capable et le point de l’aiguille. La méthode est risquée et nécessite un professionnel qualifié. Pour commencer, trouvez le point le plus bas de la fosse triangulaire sous-clavière entre le cou et le membre antérieur chez un rat.

Déplacez-vous d’environ deux à trois millimètres vers la tête et atteignez le point d’aiguille au site de prélèvement sanguin. Enlevez les poils à l’aide d’un rasoir électrique. Pour garder la tête, le cou et la poitrine du rat debout, saisissez la peau à l’arrière du cou d’une main et exposez le site d’injection.

Redressez le membre antérieur sur le côté du site d’injection pour maintenir son niveau. Gardez la seringue parallèle à la tête du rat avec l’autre main et inclinez la seringue vers l’extérieur de cinq à 10 degrés, de sorte que l’extrémité soit inclinée vers la direction ventrale. Insérez complètement l’aiguille dans la cavité antérieure.

Retirez la seringue pour maintenir une pression négative avec le tube. Déplacez lentement l’aiguille de profonde à peu profonde et remontez le même chemin. Lorsque du sang est entré dans l’aiguille de la seringue, fixez la position de l’aiguille.

Selon le poids et la santé des rats, surveiller la quantité maximale de sang à prélever conformément aux normes établies par le comité de soin et d’utilisation des animaux de l’établissement. En l’absence d’autres exigences, ne prélevez pas plus de 20 % du volume sanguin total de l’animal dans les 24 heures. Lorsque suffisamment d’échantillons de sang sont prélevés, retirez immédiatement la seringue et préparez-vous au traitement sanguin.

Pressurisez le site d’injection du rat pendant une à deux minutes pour arrêter le saignement. Puisque le site de prélèvement se trouve dans la partie inférieure du cou, pincez la peau de la veine sous-clavière pour arrêter le saignement en appuyant dessus. Retirez l’aiguille de la seringue et jetez-la dans le récipient à outils tranchant.

Transférez lentement le sang de la seringue vers un tube de 1,5 millilitre. Pressez la seringue contre le mur pour éviter la formation de bulles. Fermez le couvercle du tube de microcentrifugeuse et effleurez-le doucement.

Mélangez soigneusement le sang avec l’anticoagulant en le retournant au moins cinq fois. Dans les 120 minutes suivant le prélèvement du plasma, centrifuger l’échantillon de sang total à 2 000 RCF pendant 10 à 15 minutes à température ambiante. Utilisez un pistolet à pipette pour transférer le plasma supérieur dans un tube microcentrifuge frais.

Ne touchez pas la tête de la pipette avec le sang total inférieur. Éliminer ou recentrifuger le plasma contaminé par les globules rouges. Les échantillons de plasma prélevés avec précision dans la veine sous-clavière étaient jaune pâle translucides.

Une mauvaise collecte de sang ou une manipulation inadéquate a entraîné une hémolyse. Lors du premier échantillonnage, le poids corporel de l’animal mâle était compris entre 268 et 297 grammes, et environ 214 à 239 grammes pour les femelles. Lors du dernier échantillonnage, le poids corporel de l’animal mâle était compris entre 376 et 462 grammes, et environ 254 à 300 grammes pour les femelles.

Il y avait un intervalle de 28 jours entre le prélèvement sanguin toxicocinétique. Le poids corporel de l’animal augmentait régulièrement chaque semaine et l’observation clinique était normale. La méthode précise d’insertion de l’aiguille et l’angle peuvent assurer une collecte de sang fluide et éviter les risques.

Cette opération nécessite une pratique répétée.