The authors are solely responsible for the design and conduct of the presented study. Dr. Marbacher was supported by a grant from the Swiss National Science Foundation (PBSKP3-123454). The authors declare no conflict of interests. 
Author contributions to the study and manuscript preparation include the following. Conception and design: SM, JM, JF. Acquisition of data: SM, EA, JF. Analysis and interpretation of data: SM, JF, JM. Drafting the article: SM, JF, JM. Critically revising the article: JH, MN. Statistical analysis: SM, JF. Study supervision: JF, JH, MN.

הערה: חולדות וויסטר, זכר (משקל גוף ממוצע: 356 ± 44 גרם; 10-14 שבועות) שוכנו בחדר של בעלי החיים ב22-24 ° C ו אור שנים עשר שעות ביממה / מחזור כהה עם גישה חופשית לדיאטה גלולה, במים ברז רגילים וגם קיבל טיפול הומני בקנה אחד עם הנחיות מוסדיות. הניסויים היו נבדקו ואושרו על ידי הוועדה לרווחת בעלי החיים באוניברסיטת הלסינקי, פינלנד. הערה: בהפגנה הבאה השיטה כירורגית שלנו היא כדלקמן: להרדים את העכברוש על ידי הזרקה תת עורית מותאמת משקל של hydrochloride medetomidine (0.5 מ&quot;ג / קילוגרם) וזריקת intraperitoneal של קטמין הידרוכלוריד (50 מ&quot;ג / קילוגרם). מבחן לחוסר רפלקס הבוהן קמצוץ כדי לאשר שהעכברוש הוא בהרדמה מלאה. החל המשחה העין, קליפ האתר כירורגית, ולנקות את העור בחומר חיטוי מתאים, למשל כלורהקסידין, או באלכוהול או מים. שטוף את הידיים, לשים על ביגוד מגן, כיסוי ראש ופניםמסכה, וכפפות מנתחים סטרילית. יש לי סיוע עוזר כירורגית בשמירה על תנאי ניתוח ספטית ולתעד את המאפיינים כירורגית (כמפורט בטבלה 1). לפקח על עומק ההרדמה כל 15 דקות במהלך ניתוח על ידי ביצוע קצב נשימה, קצב לב, ותגובה לגירוי מזיק (מבחן קמצוץ הבוהן). הזרקה תת עורית של עצירות (0.03 מ&quot;ג / קילוגרם) ניתנה לשיכוך כאבים לאחר ניתוח וחזרה במידת צורך בכל שעות 12. 1 חומרה, חומרים מתכלים, ומיקום <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשמור את חדר הניתוח של בעלי החיים הקטנים ושקט, בקטריאלית, ולשמור על טמפרטורת החדר ב23 +/- 3 מעלות צלזיוס. כדי לבצע את הניתוח מפרצת הניסיונית הציוד המינימלי הבא הוא הכרחי: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במיקרוסקופ ניתוחי ראש הטבלה באופן אידיאלי מצויד בהיקף עוזר ומצלמה מיקרוסקופ דיגיטלי. השתמש במשטח nonporous לשימוש חוזר תפעולי ומשטח מכשיר cleanable כדי להגן על ספסל המעבדה. </li><li&gt; הכן את חומרים מתכלים כגון חומרי חיטוי עור, מלח פיסיולוגי, ספוגיות גזה קטנות יותר וגדולות יותר וחומר תפר כולל 9-0 מיקרו תפרים, 5-0 לא נספג, ו3-0 תפר נספג. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בכלים הבאים סטנדרטיים כירורגית: מספריים כירורגי, מלקחיים רקמות, מפזר רקמות רך או מפשק שמירה עצמית, ושני חבקים כירורגית נגד יתושים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בערכה בסיסית מייקרו מכשיר הכוללת: בעל microneedle מעוקל, microforceps אחד מעוגל ושני ישר, וmicroscissor ישר או עקום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור את מכשירי מייקרו בצלחת כליות מלאות בתמיסת מלח סטרילית כדי לשמור על המכשיר שאינו דביקים ונקיים במהלך ניתוח. צלחת הכליות מרופדת בשטיח גומי או כפפה כירורגית כדי למנוע נזק לעצות של מיקרו המכשירים. ודא שכל הציוד הוא סטרילי וההליך מבוצע בטכניקת ספטית על פי ההמלצות הנוכחיות לניתוח הישרדות בחיות מעבדה <sup&gt; 8-10. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בנוסף, משתמש במוליך קליפ כלי דם ושלושה מלחציים כלי דם זמניים atraumatic. חשוב שיש לי מלחציים משמשים כוח סגירה נמוך כדי למנוע פגיעה בקיר דק מאוד של אב העורקים החולדה. כמו כן להכין שליט עם ברים מחצית מילימטר בקנה מידה, רפידת גומי צבעונית קטנה, ומחט קהה קצרה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את החולדות במצב שכיבה, לשתק את שני קדמי ואחוריים כפות עם קלטת כירורגית מבלי להחיל מתיחה או דחיסה לעור, ולכופף את הגב שלהם עם סמן עבה או עט כויה על ידי הצבתו תחת האזור בקרשים של הגב. חשוב לקבל כמה שיותר לורדוסה עמוד השדרה המותני ככל האפשר על מנת לשפר את חשיפת retroperitoneal וגישה לאב עורקי infrarenal המאפשר השקה מייקרו. מיצוב זה מומלץ ליצירה מפרצת אב העורקים בבטן, אבל לא הכרחי לקצירת שתל חזה. </li></ol></li></ol> 2 שתל קציר <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Uהרדמה כללית nder, לפתוח את חלל בית החזה (שעת ההתחלה איסכמיה שתל). החל קמצוץ הבוהן רעיל כדי לאשר שהחולדה אינה מגיבה לפני שתמשיך לשלבים הבאים. לחתוך דרך דופן בטן midventral, לזהות את הסרעפת בדיוק מעל הכבד, ולחתוך את רקמות חיבור בחלק התחתון של סרעפת כדי לאפשר גישה לכלוב הצלעות. במספריים גדולים, צד קהה כלפי מטה, חותכים את צלעות רק סנטימטר אחד שמאלה וימינה של קו האמצע כלוב צלעות ולפתוח את חלל בית החזה. הריאות מגויסות לצד הימני של הלב. להקריב את החולדות על ידי מינון יתר עם הזרקת intracardiac של תא מטען hydrochloride.Pulmonary קטמין, וריד subclavian שמאל, וריד נבוב גולגולת עזב, ווריד azygous להפריע למסיק של אב העורקים החזי הפרוקסימלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זנב לורידים הבולטים יש נקודת כניסה טובה להתחיל הנתיחה של אב העורקים החזי יורדים באמצעות מיקרו מספריים וmicroforceps. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עקוב אחר b אב העורקים החזיAck מהקיר הגבי של בית החזה כלפי מעלה לקשת אב העורקים על ידי הכחשה עדינה בוטה ונתיחה עם המהדק כירורגית נגד יתושים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מהדק ולאחר מכן לחתוך את הוורידים עם מספריים. לשמור את ווי התלייה על הוורידים ולהשתמש בו כמפשק כדי לחשוף את קשת אב העורקים הבסיסית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח קשירת משי שאינו נספגת 6-0 בדיוק מעל עורק הצלע הראשון שעזב את אב העורקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותך את אב העורקים היורדים ממש מתחת לעורק subclavian השמאלי ולאחר מכן מתחת למייתר. זמירה ניתן לעשות על מנת לקבל את גיאומטריה מפרצת תקנית בניצב, או במידת צורך, כדי לקבל זווית מסוימת בין הציר של מפרצת אב העורקים ו. מדוד את השתל ברוחב והאורך שלה. הערה: שתלים שנקטפו יכולים גם להיות מושתלים באופן מיידי לחולדות נמען או נוסף מעובד כדי להשיג decellularization של קיר השתל. ניתן לאחסן שתלי decellularized ב-4 מעלות צלסיוס עד מחדש השתלה במועד מאוחר יותר (איור 1). הdecellularization הדואר של הקיר מפרצת הוכח נטיית הפרצה להגדלת 11. </li></ol> .3 השתל Decellularization <ol style="margin-left: 40px;;text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שתלי תורם הקפאה בפוספט שנאגרו מלוחים ב-4 מעלות צלזיוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למחרת, להפשיר את השתלים, לשטוף עם מים מטוהרים וללא יונים בטמפרטורת חדר, ודגירה של 10 שעה על 37 מעלות צלזיוס ב0.1% סולפט dodecyl נתרן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבסוף, לשטוף את השתלים שטופל סולפט dodecyl נתרן שלוש פעמים עם תסיסה עדינה, להקפיא מחדש בופר פוספט, ולשמור ב-4 מעלות צלזיוס עד לשימוש. </li></ol> .4 מפרצת בריאה <ol style="margin-left: 40px;;text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Dissection של אב העורקים בבטן <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחרי החיה כבר מורדמת, קליפ הפרווה מהאתר כירורגית ולנקות את העור בחומר חיטוי מתאים. מבחן לחוסר תגובת הבוהן קמצוץ לפני חתך בעור. התחל הפרוקסימלי 1cm החתך לאיברי המין iעמדת midventral n (שעת התחלת מבצע). להפריד בזהירות את העור מהשרירים הבסיסיים. נתיחת קצה אחד לשני סנטימטרים מתחת לעצם החזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות אך בתקיפות למשוך את שרירי בטן הבסיסיים, כדי למנוע נזק לאיברים שבבסיס. להאריך את חתך אורכי לאורך alba LINEA כלפי מעלה לתהליך xiphoid וסופו של דבר בכיוון זנב ברמה של שלפוחית ​​השתן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות יפעיל לחץ על שלפוחית ​​השתן לרוקן אותו כדי להקל על גישה למרחב retroperitoneal. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזז את המעי הדק וcecum הבולט לימין או מהשמאל. זהה את המעי הגס כלומר המעי הגס היורד בפינה השמאלית התחתונה של חלל הבטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותך את הרצועות שבבין המעי הדק והמעי הגס יורד בכיוון גולגולת כדי לאפשר חשיפה רחבה יותר של קיר גוף הגבי. הנח מפשק שמירה עצמית להחזיק את המעיים לגזרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המיקום האידיאלי של i השקה פרצת קצה לצדs שנמצא ברמה שבין הכליות וורידי iliolumbar. אב העורקים בבטן טמון retroperitoneal המשובץ ברקמת שומן. במהלך הנתיחה לשים לב במיוחד לכמעט השופכנים השקופים המותאמים וכלי אשכים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם יש צורך בנסיגה נוספת של מעיים, להשתמש חילופי גזה גדולים יותר. ורדוסה עמוד השדרה המותני מושרה במהלך מיצוב על ידי הצבת עט כויה או חפץ דומה מתחת לגב התחתון של העכברוש, מפחיתה באופן משמעותי את הצורך של נסיגת מעי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משטח הגחון של קיר גוף גב מכוסה הצפק הקודקודית דק. ברגע שזה נפתח, לדמיין את אב העורקים רק מתחת. במהלך נתיחה חדה ובוטה זהירה של אב העורקים בבטן מורידים גדולים סמוכים לתפוס רק adventitia כדי למנוע נזק לדופן כלי הדם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעתים רחוקות, עורקים המותני קטנים מתעוררים ככלי מגזרי מפני שטח הגב של אב העורקים בבטן ומפריעים להכנה. קשירה וחיתוך של הכלי הוא לביתטוליפ אין כדי למנוע דליפה מדרדר במהלך תפירה מפרצת. שימוש במייקרו מלקחיים מעוקלים יכול להקל על מיקום קשירה בעומק. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סוף לצד Anastomosis <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים רפידת גומי בצבע מתחת לאב העורקים בבטן ולרפד אותו עם ספוגית גזה קטנה. הסר רקמת חיבור רופפת וadventitia ברמה של אתר ההשקה המתוכנן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הצמד את דיסטלי אב העורקים בבטן להשקה ראשון, אז הפרוקסימלי (שעת התחלת הידוק אב העורקים). הדבר מבטיח מילוי איתן של הכלי ומאפשר arteriotomy שלאחר מכן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע arteriotomy או באמצעות מיקרו מספריים ישר או עקום. מיקרו מלקחיים מחזיק את חתיכה קטנה מאוד של קיר הכלי לחתוך את צורה האליפטית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשטוף את העורק ביסודיות עם מי מלח בשני הכיוונים באמצעות מחט קהה שקצו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את שני התפרים הראשונים של השקה קצה לצד זה בקצה הפרוקסימלי והדיסטלי של arteriotomy (שעת התחלת השקה). הימנע מאחיזה של קיר הכלי עם מיקרו מלקחיים בכל ההזדמנות אפשרית. ודא כי כל תפר ממוקם דרך כל השכבות של קיר הכלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע תפירה או כתפרים רציפים או מופרעים. אם תפירה קטעה נבחרה לאחר מכן למקם את תפר o`clock צד האחורי תשע ראשון. ניתן במרווחי תפרים לאחר מתחילים בסמוך לתפר הראשון. לתפוס את adventitia בזהירות. הימנע מכל סחיטה / אחיזה של אינטימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר הקיר האחורי גמור, לבדוק את חלק endoluminal של ההשקה לתפרים שלא במקומה. לבצע אותם ההליכים באותו סדר בצד הקדמי. ודא שהראשון של הסכום כולל של שלושה קשרים לתפר הוא מוצק אך לא הדוק מדי. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עצירת דימום וסגירה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר סיום ההשקה צד הושלם (זמן השקה סוף), לשטוף את האתר עם מי מלח ולהסיר את מהדק דיסטלי הראשון, כדי לאפשר זרימה חוזרת (אב העורקים הסוף מהדק ti איסכמיה זמן ושתל הסוףלי). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם דימום ברור מתרחש מזרימה החוזרת ייתכן שיהיה צורך לתפור נוסף (שעת התחלה של עצירת דימום). במקרה של דליפת קטין, להשיג עצירת דימום עם לחץ עדין על אתר הדימום באמצעות חתיכה קטנה של ספוגית גזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את המהדק של כלי הדם הפרוקסימלי, לשטוף את אתר ההשקה פעם נוסף, ולחתוך את הקצוות הנותרים של המייתר בכיפה מפרצת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאשר patency של מפרצת על ידי תצפית של גידול נפח של מפרצת בגל דופק העורקי שיא. להעריך patency עורק בטן דיסטלי באמצעות &quot;מבחן החליבה&quot; הישיר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את יריעת הפלסטיק וספוגית הגזה הקטנה מתחת. מערבולת הדם הפועמת בתוך הפרצה שנוצרה נראית בבירור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כסה קווי תפר סביב ההשקה עם חתיכות קטנות של רקמת שומן או Spongostan לעצירת דימום נוסף, אם דליפה קטנה עדיין קיימת (זמן סוף עצירת הדימום). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את מטליות מפזר וגזת רקמות רכות.הנח את המעי הדק, cecum, ומסת השומן בחזרה במיקום הנכון שלהם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את שרירי בטן קו האמצע באמצעות 5-0, 4-0, 3-0 או תפרים נספגים או לא נספגים ואחרי סגירת פצע עור באמצעות טכניקת תפר מתמשכת עם 3-0 תפר נספג polyfilament (זמן פעולת סוף). הערה: בחולדות הניסיון שלנו נסבלות תפרי עור נספגים טובים יותר מאשר תפרי monofilament שאינם נספגים. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Bouzeghrane, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+experimental+intracranial+aneurysm+models:+a+systematic+review.">In vivo experimental intracranial aneurysm models: a systematic review.</a> AJNR Am J Neuroradiol. 31, 418-423 (2010).</li><li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+bilobular,+bisaccular,+and+broad-neck+microsurgical+aneurysm+formation+in+the+rabbit+bifurcation+model+for+the+study+of+upcoming+endovascular+techniques.+AJNR.">Complex bilobular, bisaccular, and broad-neck microsurgical aneurysm formation in the rabbit bifurcation model for the study of upcoming endovascular techniques. AJNR.</a> American journal of neuroradiology. 32, 772-777 (2011).</li><li>Frosen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+mural+and+bone+marrow-derived+neointimal+cells+to+thrombus+organization+and+wall+remodeling+in+a+microsurgical+murine+saccular+aneurysm+model.">Contribution of mural and bone marrow-derived neointimal cells to thrombus organization and wall remodeling in a microsurgical murine saccular aneurysm model.</a> Neurosurgery. 58, 936-944 (2006).</li><li>Marjamaa, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mice+with+a+deletion+in+the+first+intron+of+the+Col1a1+gene+develop+dissection+and+rupture+of+aorta+in+the+absence+of+aneurysms:+high-resolution+magnetic+resonance+imaging.">Mice with a deletion in the first intron of the Col1a1 gene develop dissection and rupture of aorta in the absence of aneurysms: high-resolution magnetic resonance imaging.</a> at 4.7 T, of the aorta and cerebral arteries. Magn Reson Med. 55, 592-597 (2006).</li><li>Oyamada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trans-iliac+rat+aorta+stenting:+a+novel+high+throughput+preclinical+stent+model+for+restenosis+and+thrombosis.">Trans-iliac rat aorta stenting: a novel high throughput preclinical stent model for restenosis and thrombosis.</a> The Journal of surgical research. , 166-191 (2011).</li><li>Lowe, H. C., James, B., Khachigian, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+model+of+in-stent+restenosis:+rat+aortic+stenting.">A novel model of in-stent restenosis: rat aortic stenting.</a> Heart. 91, 393-395 (2005).</li><li>Marjamaa, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Occlusion+of+neck+remnant+in+experimental+rat+aneurysms+after+treatment+with+platinum-+or+polyglycolic-polylactic+acid-coated+coils.">Occlusion of neck remnant in experimental rat aneurysms after treatment with platinum- or polyglycolic-polylactic acid-coated coils.</a> Surg Neurol. 71, 458-465 (2009).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=with+the+support+of+the+NC3Rs.">with the support of the NC3Rs.</a> Aseptic Technique in Rodent Surgery. , (2014).</li><li>Bernal, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+for+rodent+survival+surgery.">Guidelines for rodent survival surgery.</a> Journal of investigative surgery : the official journal of the Academy of Surgical Research. 22, 445-451 (2009).</li><li>Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+rodent+surgery+for+the+new.">Principles of rodent surgery for the new.</a> , (2011).</li><li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+mural+cells+leads+to+wall+degeneration,+aneurysm+growth,+and+eventual+rupture+in+a+rat+aneurysm+model.">Loss of mural cells leads to wall degeneration, aneurysm growth, and eventual rupture in a rat aneurysm model.</a> Stroke. 45, 248-254 (2014).</li><li>Frosen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Remodeling+of+saccular+cerebral+artery+aneurysm+wall+is+associated+with+rupture:+histological+analysis+of+24+unruptured+and+42+ruptured+cases.">Remodeling of saccular cerebral artery aneurysm wall is associated with rupture: histological analysis of 24 unruptured and 42 ruptured cases.</a> Stroke. 35, 2287-2293 (2004).</li><li>Frosen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Saccular+intracranial+aneurysm:+pathology+and+mechanisms.">Saccular intracranial aneurysm: pathology and mechanisms.</a> Acta neuropathologica. , 123-773 (2012).</li><li>Ysuda, R., Strother, C. M., Aagaard-Kienitz, B., Pulfer, K., Consigny, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+large+and+giant+bifurcation+aneurysm+model+in+canines:+proof+of+feasibility.">A large and giant bifurcation aneurysm model in canines: proof of feasibility.</a> AJNR Am J Neuroradiol. 33, 507-512 (2012).</li><li>Sherif, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microsurgical+venous+pouch+arterial-bifurcation+aneurysms+in+the+rabbit+model:+technical+aspects.">Microsurgical venous pouch arterial-bifurcation aneurysms in the rabbit model: technical aspects.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , (2011).</li><li>Marjamaa, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+TOF+MR+angiography+at+4.7+Tesla+for+volumetric+and+morphologic+evaluation+of+coiled+aneurysm+neck+remnants+in+a+rat+model.">High-resolution TOF MR angiography at 4.7 Tesla for volumetric and morphologic evaluation of coiled aneurysm neck remnants in a rat model.</a> Acta Radiol. 52, 340-348 (2011).</li></ol>

אי לנו אינטרס כלכלי או מסחרי בכל אחת מתרופות, חומרים, או הציוד המשמש.

התקדמות בהבנה של הביולוגיה המורכבת של מפרצת עורק מוח saccular שלנו תלויה בניתוח של נתונים אפידמיולוגיים וקליניים, כהשלמה מחקרי מעבדה בדגימות מטופל ועבודה ניסויית במודלים של בעלי חיים 3,12,13. בעלי חיים קטנים כמו החולדות קשורים מיסודו עם עלויות נמוכות יותר של ניסויים ודיור, והפחיתו את הצורך של ציוד מיוחד. זמן פעולה ממוצע כולל של פחות מ 60 דקות ליצירת מייקרו של מפרצת דפנות בחולדות הוא הרבה יותר קצר מהזמן משמש ליצירה של מפרצת מורכבת יותר מייקרו ורידי עורקי כיס הסתעפות בארנבים וכלבים 2,14,15. היתרונות של עלויות נמוכות ושיטות מהירות יותר של יצירה מפרצת עשויים להקל הולכה של מחקרים עם מספר גדול יותר של ניסויים ועוצמה סטטיסטית מוגבר שלאחר מכן. בנוסף, מודלים עכבריים הנוכחיים יושמו בהצלחה לענות researc<html> שאלות h צורך מתודולוגיה מעבדה מתוחכמת יותר, כולל בעלי חיים מהונדסים 3,4. בעת שימוש בעכברים ליצירת מפרצות דפנות, אחד צריך לזכור כי הצורך קטע 11-0 התפרים דורשים מיומנויות מייקרו נוספות. ביצועים של המודל מפרצת שהוצג בעכברים קשורים גם עם שיעורי תמותה גבוהים יותר (30%; בעיקר בשל סיבוכים במאזן נוזלים והרדמה וקוטר קטן יותר (0.5-1 מ&quot;מ) של אב העורקים בעכבר) 3. עקרונות יסוד של המודל מפרצת העכברוש ניתן לשלוט בפרק זמן קצר. קורס מבוא במייקרו מכרסם מומלץ לאלה שנמנים חוקרים בביצוע ניתוחים וטכניקות תפר מתחת למיקרוסקופ. שלבים עיקריים מודגשים בפרוטוקול שהוצג יהיו עוד יותר לפשט את ההליך. זהירות מיוחדת צריכה להיות למימוש במהלך הנתיחה של אב העורקים בבטן מורידים גדולים סמוכים. ntent &quot;&gt; בקוטר כלי הדם ההיקפי הקטן של חולדה בגודל בינונית עושה טרנס תרדמה ופריסת מכשיר endovascular טרנס הכסל קשה 5,6. עם זאת, יכולים גם להיות ממוקמים מכשירים באמצעות החדרה ישירה בטן אב העורקים או מיקום ישיר לפרצה הניסיונית לפני הסוף -כדי אתר ההשקה 7,16. שינויי נפח בשרידי צוואר וגיאומטריה מפרצת יכולה להיות מעקב עם אולטרסאונד סדרתי ולא פולשנית בתדירות גבוהה, מיקרו-CT, או אנגיוגרפיה תהודה מגנטית ברזולוציה גבוהה 16. הניסויים קודמים גילו גבוהים הכולל שיעורי patency של 92.5% בחציון מעקב של שישה שבועות לאחר יצירה ללא peri- או 3,7,16 נוגדי קרישה וantiaggregation התוך פרוצדורליים. למעט צמיחת מקרה אחד משמעותית או הרחבה של מפרצת הניסוי לא נצפו ואף אחד מהם מקרע 3. עם זאת, אם את השתלים שנקצרו decellularized מפרצות demonstrate דפוס הטרוגנית של פקקת, recanalization, צמיחה, וקרע סופי 11. מפרצת הולכת וגובר במחקר האחרון הראתה סיסטיק הניכר adventitial ודלקת, קיר שיבוש מוחלט, והגדילה את הצטברות נויטרופילים בפקיק intraluminal לא מאורגן. בדרך זו המודל מאפשר ללמוד צמיחה מפרצת וקרע ועלול לשמש כדי להעריך את התגובות ביולוגיות הנגרמות על ידי מכשירי אמבוליזציה בגידול ופרצות קרע נוטה. אף אחד מהדגמים מפרצת הזמינים שניתן embolized באופן אידיאלי מייצג מפרצת של עורק אנושי saccular מוחית או לשכפל pathobiology מאחורי היווצרות מפרצת או קרע המדויק. זה נשאר עניין של ויכוח באיזו מידת הבחירה של שתל (נרתיק ורידים או עורקים) ובחירה של angioarchitecture (דפנות או מבנה הסתעפות) להשפיע על התרגום של תוצאות לתוך פרקטיקה קלינית. בהחלט דגמים שונים הם אופטימליים לשונהמטרות, ויכולות להיות מותאמות לרמה גבוהה מאוד במוסדות מסוימים. המודל שהוצג לא יעשה מודלים אחרים מיושנים. הוא יישאר הכרחי לחוקר לבחור מתוך מגוון רחב של דגמים שונים טכניים ובעלי חיים אחד שמתאים הטוב ביותר את מטרות ניסוי, שיקולים מעשיים, וסביבת מעבדה. עם זאת, צריכים באופן אידיאלי להתבצע כמה ניסויים באותו מודל סטנדרטי במוסדות ובמעבדות שונים, על מנת לאפשר השוואה טובה יותר של נתונים ושל מכשירים או טיפולים. נכון להיום אין הנחיות לבדיקות סטנדרטיות של מכשירי endovascular לפני יישום קליני, ומודלים של בעלי החיים נשארים underused 1. מודלים סטנדרטיים ירוויחו חשיבות פעם ניסויים פרה אקראיים רב מרכזי גם לצוץ בתחום זה של מחקר. יצירת פרצת מייקרו מאפשרת סטנדרטיזציה של מקור שתל, יחס נפח לפתח, וכלי הורהלפרצת זווית ציר ארוכה. הטכניקה שהוצגה נועדה ליצור פרצה סטנדרטית עם וריאציה מינימאלית בממד מפרצת, מיקום, וביחס לעורק ההורה. רמה גבוהה זו של תקינה והעלויות נמוכות יחסית להפוך את מודל כלי טוב לבדיקת חומרי אמבוליזציה והתקנים האחר כך נבחנו במודלים מורכבים יותר ויקרים אחרים. לסיכום מודל פרצת עכברוש דפנות מייקרו הציג הוא שיטה מהירה, זולה, ועולה בקנה אחד ליצור פרצות ניסיוניות שטופלו באמצעות גודל, צורה, ותצורה גיאומטרית של מפרצת ביחס לעורק ההורה.

קרע של מפרצת עורק מוח saccular גורם דימום מסכן חיים מוביל לשבץ, נזק נוירולוגים קבוע, או מוות. קרע ניתן למנוע על ידי אחד גזיר מייקרו או חסימת פרצת endovascular. טיפול רפואי למניעת צמיחה מפרצת וקרע טרם הוקם. מודלים ניסיוניים לפרצת saccular יש צורך ללמוד את הביולוגיה של מפרצת עורקים ולבדיקה של מכשירים טיפוליים חדשניים ואסטרטגיות. למטרות אלה, כמה דגמים שונים במינים שונים פותחו ופורסמו 1. מודלים מפרצת גדולות בחזירים, כלבים, ארנבות ומשמשים רצוי כדי לבדוק את חידושי endovascular באדריכלות מפרצת מורכבת 1,2. מודלים עכבריים מפרצת, ומצד שני, לאפשר בדיקת שאלות מחקר במינים מהונדסים גנטי 3,4 ולהקל על בירור ביולוגיה מפרצת בתאית ומולקולרירמה טובה בהרבה ממינים גדולים יותר 1. למרות שטרנס התרדמה endovascular ופריסת מכשיר טרנס הכסל מוגבלת לחולדות גדולות יותר (&gt; 400-500 גר &#39;) וסטנטים קטנים יותר מ2.0 מ&quot;מ ו1.5 מ&quot;מ קוטר 5,6, יכולים גם להיות ממוקמים סטנטים באמצעות החדרה ישירה לתוך אב העורקים בבטן קטע מחסה מפרצות הניסיוניות. עבודה קודמת באמצעות עכברוש מודל פרצת מייקר בטן דפנות אב העורקים הוכיחה ההיתכנות שלה במכשירי תסחיפי רומן בדיקות והשימוש בו בחקר הבסיס המולקולרי של ביולוגיה מפרצת 3,7. רבים מהמודלים מפרצת saccular פורסמו כרגע הניסיוניים דורשים ציוד יקר, סביבות מיוחדות (לדוגמא: חדרי ניתוח סטריליים עם יכולות שיקוף), יכולת רדיולוגיה התערבותית, או שימוש במינים יקרים. דרישות אלו מגבילות את השימוש הנרחב במודלים אלה, ולהוביל לשימוש במודלים שונים במעבדות שונות, אשר מ &#39;akes השוואת נתונים וניתוח-קשה, אם לא בלתי אפשרי. מודל ניסיוני פשוט, חזק, ולא יקר שדרוש ככלי סטנדרטי שניתן להשתמש באופן סטנדרטי במעבדות שונות כדי לקבל תוצאות דומות מהמוסדות שונים. לשם כך, יצרנו מודל מפרצת אב העורקים החולדה דפנות עורקי saccular. מטרת דו&quot;ח זה היא להציג הוראות נוהל צעד אחר צעד, מידע על ציוד דרוש, וכדי לדון במאפיינים אנטומיים וכירורגים חשובים ליצירת מייקרו מוצלחת של מפרצת דפנות אב העורקים בבטן בחולדה.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="752">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:236px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Medetomidine</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Any genericon</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Ketamin</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Any genericon</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Buprenorphine</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Any genericon</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Phosphate buffered saline</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Sodium dodecyl sulfate (0.1%)</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">3-0 resorbable suture</td>
			<td style="width:236px;">Ethicon Inc., USA</td>
			<td><a name="RANGE!C7">VCP824G</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">5-0 non absorbable suture</td>
			<td style="width:236px;">Ethicon Inc., USA</td>
			<td>8618G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">6-0 non absorbable silk suture</td>
			<td style="width:236px;">B. Braun, Germany</td>
			<td style="width:119px;">C0761060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">9-0 nylon micro suture</td>
			<td style="width:236px;">B. Braun, Germany</td>
			<td style="width:119px;">G1118471</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Spongostan</td>
			<td style="width:236px;">Ethicon Inc., USA</td>
			<td style="width:119px;">MS0002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Operation microscope</td>
			<td style="width:236px;">Leica , Germany</td>
			<td style="width:119px;">M651</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Digital microscope camera</td>
			<td style="width:236px;">Sony, Japan</td>
			<td style="width:119px;">SSC-DC58AP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Standard surgical instruments</td>
			<td style="width:236px;">B. Braun, Germany</td>
			<td style="width:119px;">Multiple</td>
			<td>See protocol 1.4</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Microsurgical instruments</td>
			<td style="width:236px;">B. Braun, Germany</td>
			<td style="width:119px;">Multiple</td>
			<td>See protocol 1.5</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Vascular clip applicator</td>
			<td style="width:236px;">B. Braun, Germany</td>
			<td style="width:119px;">FT495T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Temporary vascular clamps</td>
			<td style="width:236px;">B. Braun, Germany</td>
			<td style="width:119px;">FT250T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Graph Pad Prism statistical software&#160;</td>
			<td style="width:236px;">GraphPad Software, San Diego, California, USA</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>V 6.02 for Windows</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the helsinki rat microsurgical sidewall aneurysm model

מודלים מפרצת saccular ניסוי הם הכרחיים לבדיקת אפשרויות טיפול כירורגים וendovascular רומן והתקנים לפני שהם הציגו לתוך פרקטיקה קלינית. יתר על כן, יש צורך במודלים ניסיוניים על מנת להבהיר את הביולוגיה מפרצת המורכבת מובילה לקרע של מפרצת saccular. כמה סוגים שונים של מודלים ניסיוניים לפרצת saccular הוקמו במינים שונים. רבים מהם, לעומת זאת, דורשים כישורים מיוחדים, ציוד יקר, או סביבות מיוחדות, המגביל את השימוש הנרחב שלהם. מודל ניסיוני פשוט, חזק, ולא יקר שדרוש ככלי סטנדרטי שניתן להשתמש באופן אחיד במוסדות שונים. המודל מפרצת דפנות אב העורקים בבטן עכברוש מייקרו משלב את האפשרות ללמוד שני אסטרטגיות טיפול endovascular רומן והבסיס המולקולרי של ביולוגיה מפרצת בסטנדרטית וזולאופן. שתלי סטנדרטיים באמצעות צורה, גודל, וגיאומטריה נקצרים מאב העורקים החזי יורדים של חולדה תורם ולאחר מכן הושתלו בעכברי נמען syngenic. מפרצת הם נתפרו מקצה לצד עם רציף או קטע 9-0 תפרי ניילון לאב העורקים בבטן infrarenal. אנו מציגים הוראות נוהל צעד אחר צעד, מידע על ציוד דרוש, ולדון בפרטים אנטומיים וכירורגים חשובים ליצירת מייקרו מוצלחת של מפרצת דפנות אב העורקים בבטן בחולדה.

סדרת טייס מורכבת 14 חולדות. בהמשך לכך כולל של 84 בעלים חיים פעלו על פי הפרוטוקול שהוצג למספר פרויקטי מחקר בין מרץ לספטמבר 2012. 29 בעלי חיים נוספים שימשו כתורמים לשתלי saccular עורקים. הניסויים שנותרו בוצעו באמצעות שתלי טופל מראש שנקטפו ואוחסנו מניסויים קודמים והשתמשו בחולדות מאותו המין, המתח, המשקל, והגיל. משקל גוף, זמן פעילות כולל, זמן הידוק אב העורקים, זמן ליצירת השקה, זמן לעצירת דימום לאחר יצירת השקה, זמן איסכמיה שתל, וממדים מפרצת בזמן בריאה (רוחב פרצה ואורך) נרשמו והוציאו מטפסי דיווח מקרה כתובים . כל המאפיינים מסוכמים ומדמיינים בטבלה 1 ואיור 1. למעט חיה אחת שעבר ניתוח שני בשל פקקת של abdoדיסטלי אב העורקים minal לאתר ההשקה לא היה תמותה או תחלואה periprocedural. זמן ממוצע מבצע היה פחות מ 52 דקות (52 ± 12 דקות). בבעלי חיים עם השתלה של מפרצת syngeneic (n = 21) הזמן ממוצע איסכמיה שתל היה 29 ± 7 דקות. זמן הידוק אב העורקים ממוצע בסך הכל היה 25 ± 7 דקות. ממדי פרצה מתגלים להיות קבוע עם סטייה נמוכה של גודל (כלומר מ&quot;מ 2.5 ± 0.2 רוחב ואומרים אורך 3.8 ± 0.2 מ&quot;מ). הנתונים שנאספו עברו ניתוח והדמית תיאורים באמצעות תוכנה סטטיסטית. הערכים באים לידי ביטוי כממוצע סטיית ± סטנדרטי (SD) ו95% CI (CI). <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/51071/51071fig1highres.jpg" /> איור 1:.-Decellularized ללא או שתלי תלי decellularized תורם ילידים שלא טופלו מאב העורקים החזי הם מייד מחדש מושתלים לתוך חולדות נמען (1). שתלי להיותdecellularized מטופלים עם סולפט dodecyl נתרן (SDS) וצלזיוס ב-4 תואר מאוחסן עד מחדש השתלה (2). הפנל היסטולוגית מתאר חתך אורך דרך (משמאל) ו( מימין) קיר שתל שלא טופל decellularized. מכתים Hematoxylin-eosin. <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/51071/51071fig2highres.jpg" /> איור 2: מאפייני כירורגי. הגרפים לדמיין את התפלגות ערכי נתונים בודדים (נקודות שחורות קטנות), ממוצע נתונים (בר ארוך מודגש), וסטיית תקן (ברים שגיאה). <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/51071/51071fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <table border="1" cellpadding="0" cellspacing="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> מאפיין </td><td> אומר </td><td> ± SD </td><td> 95% CI עליון - תחתון </td></tr><tr><td> משקל גוף ממוצע (גרם) </td><td> 363 </td><td> 47 </td><td> 350-373 </td></tr><tr><td> זמן ממוצע פעולה (דקות) </td><td> 50 </td><td> 11 </td><td> 48-53 </td></tr><tr><td> זמן ממוצע הידוק אב העורקים (דקות) </td><td> 25 </td><td> 7 </td><td> 23 - 27 </td></tr><tr><td> זמן ממוצע השקה (דקות) </td><td> 18 </td><td> 6 </td><td> 16 - 19 </td></tr><tr><td> זמן ממוצע של עצירת דימום (דקות) </td><td> 2 </td><td> 2 </td><td> 2 - 3 </td></tr><tr><td> זמן ממוצע איסכמיה שתל (דקות) </td><td> 29 </td><td> 7 </td><td> 26 - 32 </td></tr><tr><td> אומר רוחב פרצה (מילימטר) </td><td> 2.5 </td><td> 0.2 </td><td> 2.4-2.5 </td></tr><tr><td> אומר אורך פרצה (מילימטר) </td><td> 3.7 </td><td> 0.5 </td><td> 3.5-3.8 </td></tr></tbody></table> טבלת 1: מאפייני כירורגי. SD = סטיית תקן; CI = רווח סמך

Watch this Scientific Journal Video about The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model at JoVE.com

The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model

Microsurgical sidewall aneurysms in rats are created by end-to-side anastomosis of an aortic graft to the abdominal aorta. We present step-by-step instructions and discuss anatomical and surgical details for successful experimental saccular aneurysm creation.

הדפנות מפרצת דגם הלסינקי עכברוש Microsurgical

Experimental saccular aneurysm models are necessary for testing novel surgical and endovascular treatment options and devices before they are introduced ...

the-helsinki-rat-microsurgical-sidewall-aneurysm-model

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

12.2K Views.  University of Helsinki, Helsinki, Finland. Microsurgical sidewall aneurysms in rats are created by end-to-side anastomosis of an aortic graft to the abdominal aorta. We present step-by-step instructions and discuss anatomical and surgical details for successful experimental saccular aneurysm creation.

Video: The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model

Microsurgical Venous Pouch Arterial-Bifurcation Aneurysms in the Rabbit Model: Technical Aspects

For ruptured human cerebral aneurysms endovascular embolization has become an equivalent alternative to aneurysm clipping.1 However, large clinical trials have shown disappointing long-term results with unacceptable high rates of aneurysm recanalization and delayed aneurysm rupture.2 To overcome these problems, animal experimental studies are crucial for the development of better endovascular devices.3-5
Several animal models in rats, rabbits, canines and swine are available.6-8 Comparisons of the different animal models showed the superiority of the rabbit model with regard to hemodynamics and comparability of the coagulation system and cost-effectiveness.9-11 
The venous pouch arterial bifurcation model in rabbits is formed by a venous pouch sutured into an artificially created true bifurcation of both common carotid arteries (CCA). The main advantage of this model are true bifurcational hemodynamics.12 The major drawbacks are the sofar high microsurgical technical demands and high morbidity and mortality rates of up to 50%.13 These limitations have resulted in less frequent use of this aneurysm model in the recent years. These shortcomings could be overcome with improved surgical procedures and modified peri- and postoperative analgetic management and anticoagulation.14-16 Our techniques reported in this paper demonstrate this optimized technique for microsurgical creation of arterial bifurcation aneurysms.

An optimized technique for the microsurgical creation of arterial bifurcation aneurysms mimicking bifurcation human cerebral aneurysms is described. A venous pouch is sutured into an artificially created true bifurcation of both common carotid arteries. Facilitated microsurgical techniques and aggressive postoperative anticoagulation and analgesia lead to minimized morbidity rates and high aneurysm patency rates.

Microsurgical ורידי עורקי פאוץ-הסתעפות מפרצת במודל הארנב: היבטים טכניים

For ruptured human cerebral aneurysms endovascular embolization has become an equivalent alternative to aneurysm clipping.1 However, large clinical trials ...

A Model of Chronic Nutrient Infusion in the Rat

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to affect the function of several organs and tissues and to contribute to the development of the many complications associated with obesity and the metabolic syndrome, including type 2 diabetes. To study the mechanisms by which excessive levels of glucose and fatty acids affect the pancreatic beta-cell and the secretion of insulin, we have established a chronic nutrient infusion model in the rat. The procedure consists of catheterizing the right jugular vein and left carotid artery under general anesthesia; allowing a 7-day recuperation period; connecting the catheters to the pumps using a swivel and counterweight system that enables the animal to move freely in the cage; and infusing glucose and/or Intralipid (a soybean oil emulsion which generates a mixture of approximately 80% unsaturated/20% saturated fatty acids when infused with heparin) for 72 hr. This model offers several advantages, including the possibility to finely modulate the target levels of circulating glucose and fatty acids; the option to co-infuse pharmacological compounds; and the relatively short time frame as opposed to dietary models. It can be used to examine the mechanisms of nutrient-induced dysfunction in a variety of organs and to test the effectiveness of drugs in this context.

A protocol for chronic infusions of glucose and Intralipid in rats is described. This model can be used to study the impact of nutrient excess on organ function and physiological parameters.

דגם של עירוי מזין כרוני בחולדה

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to  affect the function of several organs and tissues and to contribute to the  ...

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of Abdominal aortic aneurysm (AAA) pathophysiology. There is no abdominal aortic aneurysm endograft exclusion model cheap and reproducible, which would allow deep investigations of AAA before and after treatment. We hereby describe how to induce, and then to exclude with a covered coronary stentgraft an abdominal aortic aneurysm in a rat. The well known elastase induced AAA model was first reported in 19901 in a rat, then described in mice2. Elastin degradation leads to dilation of the aorta with inflammatory infiltration of the abdominal wall and intra luminal thrombus, matching with human AAA. Endovascular exclusion with small covered stentgraft is then performed, excluding any interactions between circulating blood and the aneurysm thrombus. Appropriate exclusion and stentgraft patency is confirmed before euthanasia by an angiography thought the left carotid artery. Partial control of elastase diffusion makes aneurysm shape different for each animal. It is difficult to create an aneurysm, which will allow an appropriate length of aorta below the aneurysm for an easy stentgraft introduction, and with adequate proximal and distal neck to prevent endoleaks. Lots of failure can result to stentgraft introduction which sometimes lead to aorta tear with pain and troubles to stitch it, and endothelial damage with post op aorta thrombosis. Giving aspirin to rats before stentgraft implantation decreases failure rate without major hemorrhage. Clamping time activates neutrophils, endothelium and platelets, and may interfere with biological analysis.

Histological and biochemical modifications after aneurysm endograft exclusion are still unclear. We describe a new model of endograft implantation on a murine aneurysm. Through thrombus analysis with and without persistant circulating blood stream interface, and new endovascular biomaterials evaluation, this model will help to better understand endovascular aneurysm exclusion pathobiology.

דגם Murine חדש של מפרצת אבי העורקים תיקון Endovascular

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and unrelieved pressure due to immobility. Animal models have been developed that attempt to mimic these conditions for the purpose of furthering our understanding of the complexity of chronic wounds. The model described herein is a rat ischemic skin flap model that permits a prolonged reduction of blood flow resulting in wounds that become ischemic and resemble a chronic wound phenotype (reduced vascularization, increased inflammation and delayed wound closure). It consists of a bipedicled dorsal flap with 2 ischemic wounds placed centrally and 2 non-ischemic wounds lateral to the flap as controls. A novel addition to this ischemic skin flap model is the placement of a silicone sheet beneath the flap that functions as a barrier and a splint to prevent revascularization and reduce contraction as the wounds heal. Despite the debate of using rats for wound healing studies due to their quite distinct anatomic and physiologic differences compared to humans (i.e., the presence of a panniculus carnosus muscle, short life-span, increased number of hair follicles, and their ability to heal infected wounds) the modifications employed in this model make it a valuable alternative to previously developed ischemic skin flap models.

The rat, due to its size, availability, and rather docile behavior, has been utilized as a research model for many years. The goal of this protocol is to utilize the rat as an ischemic skin wound healing model to provide valuable insight into the pathophysiology of chronic wounds.

הפגנה של דגם פצע עור העכברוש איסכמי

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and ...

A Novel Microsurgical Model for Heterotopic, En Bloc Chest Wall, Thymus, and Heart Transplantation in Mice

Exploration of novel strategies in organ transplantation to prolong allograft survival and minimizing the need for long-term maintenance immunosuppression must be pursued. Employing vascularized bone marrow transplantation and co-transplantation of the thymus have shown promise in this regard in various animal models.1-11 Vascularized bone marrow transplantation allows for the uninterrupted transfer of donor bone marrow cells within the preserved donor microenvironment, and the incorporation of thymus tissue with vascularized bone marrow transplantation has shown to increase T-cell chimerism ultimately playing a supportive role in the induction of immune regulation. The combination of solid organ and vascularized composite allotransplantation can uniquely combine these strategies in the form of a novel transplant model. Murine models serve as an excellent paradigm to explore the mechanisms of acute and chronic rejection, chimerism, and tolerance induction, thus providing the foundation to propagate superior allograft survival strategies for larger animal models and future clinical application. Herein, we developed a novel heterotopic en bloc chest wall, thymus, and heart transplant model in mice using a cervical non-suture cuff technique. The experience in syngeneic and allogeneic transplant settings is described for future broader immunological investigations via an instructional manuscript and video supplement.

To study combined solid organ and vascularized composite allotransplantation, we describe a novel heterotopic en bloc chest wall, thymus, and heart transplant model in mice using a cervical non-suture cuff technique.

Microsurgical דגם חדשני לHeterotopic, כמקשה אחת בחזה קיר, קורנית, ולב השתלה בעכברים

Exploration of novel strategies in organ transplantation to prolong allograft survival and minimizing the need for long-term maintenance immunosuppression ...

The Dimethylnitrosamine Induced Liver Fibrosis Model in the Rat

Four to six week old, male Wistar rats were used to produce animal models of liver fibrosis. The process requires four weeks of administration of 10 mg/kg dimethylnitrosamine (DMN), given intraperitoneally for three consecutive days per week. Intraperitoneal injections were performed in the fume hood as DMN is a known hepatoxin and carcinogen. The model has several advantages. Firstly, liver changes can be studied sequentially or at particular stages of interest. Secondly, the stage of liver disease can be monitored by measurement of serum alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) enzymes. Thirdly, the severity of liver damage at different stages can be confirmed by sacrifice of animals at designated time points, followed by histological examination of Masson&#39;s Trichome stained liver tissues. After four weeks of DMN dosing, the typical fibrosis score is 5 to 6 on the Ishak scale. The model can be reproduced consistently and has been widely used to assess the efficacy of potential anti-fibrotic agents.

We describe a method to produce an animal model of liver fibrosis in the rat, and assess the degree of fibrosis by histological examination of the liver. The model can be used to study the development of liver disease as well as to test the efficacy of potential anti-fibrotic agents.

מודל הפיברוזיס Dimethylnitrosamine מושרה בחולדה

Four to six week old, male Wistar rats were used to produce animal models of liver fibrosis. The process requires four weeks of administration of 10 mg/kg ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

Contractility איזומטרי מדידה של עורק מצע המעי העליון העכבר באמצעות חוט Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to injury. In fact, the most common type of eye injury found in clinic is a corneal abrasion. Here, we utilize an ocular burr to induce an abrasion resulting in removal of the corneal epithelium in vivo on anesthetized mice. This method allows for targeted and reproducible epithelial disruption, leaving other areas intact. In addition, we describe the visualization of the abraded epithelium with fluorescein staining and provide concrete advice on how to visualize the abraded cornea. Then, we follow the timeline of wound healing 0, 18, and 72 h after abrasion, until the wound is re-epithelialized. The epithelial abrasion model of corneal injury is ideal for studies on epithelial cell proliferation, migration and re-epithelialization of the corneal layers. However, this method is not optimal to study stromal activation during wound healing, because the ocular burr does not penetrate to the stromal cell layers. This method is also suitable for clinical applications, for example, pre-clinical test of drug effectiveness.

This protocol describes a method to inflict an abrasion to the ocular surface of the mouse, and to follow the wound healing process thereafter. The protocol takes advantage of an ocular burr to partially remove the surface epithelium of the eye in anaesthetized mice.

אפיתל שחיקה הקרנית עם עינית Burr כמודל עבור קרנית ריפוי פצעים

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...

An Ex Vivo Tissue Culture Model for Fibrovascular Complications in Proliferative Diabetic Retinopathy

Diabetic retinopathy (DR) is the most common microvascular complication of diabetes and one of the leading causes of blindness in working-age adults. No current animal models of diabetes and oxygen-induced retinopathy develop the full-range progressive changes manifested in human proliferative diabetic retinopathy (PDR). Therefore, understanding of the disease pathogenesis and pathophysiology has relied largely on the use of histological sections and vitreous samples in approaches that only provide steady-state information on the involved pathogenic factors. Increasing evidence indicates that dynamic cell-cell and cell-extracellular matrix (ECM) interactions in the context of three-dimensional (3D) microenvironments are essential for the mechanistic and functional studies towards the development of new treatment strategies. Therefore, we hypothesized that the pathological fibrovascular tissue surgically excised from eyes with PDR could be utilized to reliably unravel the cellular and molecular mechanisms of this devastating disease and to test the potential for novel clinical interventions. Towards this end, we developed a novel method for 3D ex vivo culture of surgically-excised patient-derived fibrovascular tissue (FT), which will serve as a relevant model of human PDR pathophysiology. The FTs are dissected into explants and embedded in fibrin matrix for ex vivo culture and 3D characterization. Whole-mount immunofluorescence of the native FTs and end-point cultures allows thorough investigation of tissue composition and multicellular processes, highlighting the importance of 3D tissue-level characterization for uncovering relevant features of PDR pathophysiology. This model will allow the simultaneous assessment of molecular mechanisms, cellular/tissue processes and treatment responses in the complex context of dynamic biochemical and physical interactions within the PDR tissue architecture and microenvironment. Since this model recapitulates PDR pathophysiology, it will also be amenable for testing or developing new treatments.

Here, we present a protocol to study the pathophysiology of proliferative diabetic retinopathy by using patient-derived, surgically-excised, fibrovascular tissues for three-dimensional native tissue characterization and ex vivo culture. This ex vivo culture model is also amenable for testing or developing new treatments.

מודל תרביות רקמה לשעבר Vivo עבור סיבוכים Fibrovascular Proliferative רטינופתיה סוכרתית

Diabetic retinopathy (DR) is the most common microvascular complication of diabetes and one of the leading causes of blindness in working-age adults. No ...

Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. An aneurysm forms as a result of progressive weakening and eventual dilation of the aorta, which can rupture or tear once it reaches a critical diameter. Aneurysms of the descending aorta in the chest, called descending thoracic aortic aneurysms (dTAA), make up a large proportion of aneurysm cases in the United States. Uncontained dTAA rupture is almost universally lethal, and elective repair has a high rate of morbidity and mortality. The purpose of our model is to study dTAA specifically, to elucidate the pathophysiology of dTAA and to search for molecular targets to halt the growth or reduce the size of dTAA. By having a murine model to study thoracic pathology precisely, targeted therapies can be developed to specifically test dTAA. The method is based on the placement of porcine pancreatic elastase (PPE) directly on the outer murine aortic wall after surgical exposure. This creates a destructive and inflammatory reaction, which weakens the aortic wall and allows for aneurysm formation over weeks to months. Though murine models possess limitations, our dTAA model produces robust aneurysms of predictable size. Furthermore, this model can be used to test genetic and pharmaceutical targets which may arrest dTAA growth or prevent rupture. In human patients, interventions such as these could help avoid aneurysm rupture, and difficult surgical intervention.

We describe a surgical protocol to consistently induce robust descending thoracic aortic aneurysms in mice. The procedure involves left thoracotomy, thoracic aorta exposure, and placement of a sponge soaked in porcine pancreatic elastase on the aortic wall.

המודל הכירורגי של מורנה של Elastase אקטואלי המושרה מפרצת אבי העורקים החזי

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. ...