Method Article
פרוטוקול זה מתאר שיטת ייצור למצע גמיש לפיזור ראמאן משופר על פני השטח. שיטה זו שימשה לאיתור מוצלח של ריכוזים נמוכים של R6G ו Thiram.
מאמר זה מציג שיטת ייצור עבור מצע גמיש המיועד לפיזור ראמאן משופר על פני השטח (SERS). ננו-חלקיקי כסף (AgNPs) סונתזו באמצעות תגובת מורכבות המערבת חנקת כסף (AgNO3) ואמוניה, ולאחר מכן הפחתה באמצעות גלוקוז. ה-AgNPs שהתקבלו הציגו התפלגות גודל אחידה שנעה בין 20 ננומטר ל-50 ננומטר. לאחר מכן, 3-aminopropyl triethoxysilane (APTES) שימש כדי לשנות מצע PDMS שטופל על פני השטח עם פלזמה חמצן. תהליך זה הקל על הרכבה עצמית של AgNPs על המצע. הערכה שיטתית של ההשפעה של תנאי ניסוי שונים על ביצועי המצע הובילה לפיתוח מצע SERS עם ביצועים מצוינים וגורם משופר (EF). באמצעות מצע זה הושגו מגבלות גילוי מרשימות של 10-10 M עבור R6G (Rhodamine 6G) ו-10-8 M עבור Thiram. המצע שימש בהצלחה לאיתור שאריות חומרי הדברה על תפוחים, והניב תוצאות משביעות רצון ביותר. מצע SERS הגמיש מדגים פוטנציאל גדול ליישומים בעולם האמיתי, כולל זיהוי בתרחישים מורכבים.
פיזור ראמאן משופר פני השטח (SERS), כסוג של פיזור ראמאן, מציע את היתרונות של רגישות גבוהה ותנאי גילוי עדינים, ואף יכול להשיג זיהוי מולקולה בודדת 1,2,3,4. ננו-מבנים מתכתיים, כגון זהב וכסף, משמשים בדרך כלל כמצעי SERS כדי לאפשר זיהוי חומרים 5,6. שיפור צימוד אלקטרומגנטי על משטחים ננו-מבניים ממלא תפקיד משמעותי ביישומי SERS. ננו-מבנים מתכתיים עם גדלים, צורות, מרחקים וקומפוזיציות בין-חלקיקיים שונים יכולים להצטבר וליצור "נקודות חמות" רבות המייצרות שדות אלקטרומגנטיים אינטנסיביים עקב תהודה פלסמונית מקומית של פני השטח 7,8. מחקרים רבים פיתחו ננו-חלקיקי מתכת בעלי מורפולוגיות שונות כמצעי SERS, והראו את יעילותם בהשגת שיפור SERS 9,10.
מצעי SERS גמישים מוצאים יישומים רחבים, עם ננו-מבנים המסוגלים לייצר אפקטים של SERS המופקדים על מצעים גמישים כדי להקל על זיהוי ישיר על משטחים מעוקלים. מצעי SERS גמישים משמשים לגילוי ואיסוף אנליטים על משטחים לא סדירים, לא מישוריים או מעוקלים. מצעי SERS גמישים נפוצים כוללים סיבים, יריעות פולימר ויריעות תחמוצת גרפן11,12,13,14. ביניהם, polydimethylsiloxane (PDMS) הוא אחד החומרים הפולימריים הנפוצים ביותר ומציע יתרונות כגון שקיפות גבוהה, חוזק מתיחה גבוה, יציבות כימית, אי רעילות, הידבקות15,16,17. ל-PDMS חתך ראמאן נמוך, מה שהופך את השפעתו על אות הרמאןלזניחה-18. מאז פרפולימר PDMS הוא בצורה נוזלית, זה יכול להירפא על ידי חום או אור, מתן רמה גבוהה של שליטה ונוחות. מצעי SERS מבוססי PDMS הם מצעי SERS גמישים נפוצים יחסית, לאחר ששימשו במחקרים קודמים להטמעת ננו-חלקיקי מתכת שונים לגילוי חומרים ביוכימיים שונים עם ביצועים מופתיים19,20.
בהכנת מצעי SERS, הייצור של מבני ננו-פער הוא קריטי. טכנולוגיית שיקוע פיזי מציעה יתרונות כמו מדרגיות גבוהה, אחידות ויכולת שחזור, אך בדרך כלל דורשת תנאי ואקום טובים וציוד מיוחד, המגבילים את היישומים המעשיים שלה21. בנוסף, ייצור ננו-מבנים בקנה מידה ננומטרי מעטים נותר מאתגר עם טכניקות שיקוע קונבנציונליות22. כתוצאה מכך, ננו-חלקיקים המסונתזים בשיטות כימיות יכולים להיספח על גבי שכבות שקופות גמישות באמצעות אינטראקציות שונות, מה שמקל על הרכבה עצמית של מבנים מתכתיים בקנה מידה ננומטרי. כדי להבטיח ספיחה מוצלחת, ניתן להתאים אינטראקציות על ידי שינוי פיזי או כימי של משטח הסרט כדי לשנות את הידרופיליות פני השטח שלו23. ננו-חלקיקי כסף, בהשוואה לננו-חלקיקי זהב, מציגים ביצועי SERS טובים יותר, אך חוסר היציבות שלהם, במיוחד רגישותם לחמצון באוויר, גורם לירידה מהירה במקדם שיפור SERS (EF), המשפיע על ביצועי המצע24. לפיכך, חיוני לפתח שיטת חלקיקים יציבה.
נוכחותן של שאריות חומרי הדברה זכתה לתשומת לב רבה, ויצרה צורך דחוף בשיטות איתנות המסוגלות לאתר ולזהות במהירות סוגים שונים של כימיקלים מסוכנים במזון בשטח25,26. מצעי SERS גמישים מציעים יתרונות ייחודיים ביישומים מעשיים, במיוחד בתחום בטיחות המזון. מאמר זה מציג שיטה להכנת מצע SERS גמיש על-ידי חיבור ננו-חלקיקי כסף מסונתזים מצופים גלוקוז (AgNPs) על מצע PDMS (איור 1). נוכחות של גלוקוז מגן על AgNPs, הפחתת חמצון כסף באוויר. המצע מדגים ביצועי גילוי מעולים, מסוגל לזהות רודמין 6G (R6G) נמוך כמו 10-10 M וחומר הדברה Thiram נמוך כמו 10-8 M, עם אחידות טובה. יתר על כן, ניתן להשתמש במצע הגמיש לגילוי באמצעות הדבקה ודגימה, עם תרחישי יישום פוטנציאליים רבים.
1. סינתזה של ננו-חלקיקים
2. הכנת מצעים גמישים
במחקר זה פותח מצע SERS גמיש המורכב מ-AgNPs סינתטיים עטופים בגלוקוז ומורכבים בעצמם על PDMS באמצעות APTES, ומשיגים ביצועי זיהוי מצוינים עבור יישומי זיהוי חומרי הדברה מעשיים. גבולות הזיהוי של R6G ו-Thiram הושגו שניהם ב-10-10 M וב-10-8 M, בהתאמה, עם מקדם שיפור (EF) של 1 x 10 5. יתר על כן, המצע הפגין אחידות.
ה-AgNPs העטופים בגלוקוז סונתזו בשיטת טולנס משופרת28,29. מכלול AgNPs זה לא רק יצר אות SERS חזק, אלא גם הגן ביעילות על הכסף ב- AgNPs מפני חמצון, תוך שמירה על ביצועי הזיהוי. מתמונות מיקרוסקופ אלקטרונים סורק סביבתי (ESEM) באיור 2, החלקיקים המסונתזים נראו אחידים יחסית, כאשר רובם היו בעלי קטרים בין 40 ל-50 ננומטר. השכבה החיצונית של AgNPs הייתה עטופה בשכבת גלוקוז. מבנה זה סיפק שכבה דיאלקטרית לשכבה החיצונית של AgNPs והגן על חלקיקי הכסף מפני חמצון בעת חשיפה לאוויר, תוך שמירה על ביצועי SERS.
ניכר כי שדה חשמלי משופר חזק נוצר בין המרווחים של AgNPs, המשמש כגורם העיקרי לאות SERS. לכן, המצע משותק בצפיפות עם AgNPs על מצעים גמישים כדי להשיג ביצועים משופרים (איור 3). המצע הגמיש SERS בהרכבה עצמית שפותח במחקר זה הוא פשוט, איכותי וללא חומרים רעילים או מזיקים, מה שהופך אותו לידידותי לסביבה.
המצע הגמיש SERS שהוכן במחקר זה הציג ביצועי זיהוי מצוינים. כדי להעריך מצע SERS, ההיבט הקריטי הוא יכולת הזיהוי שלו. כאן, גורם ההשבחה (EF) הוגדר כדי להעריך את ביצועי ההשבחה של המצע, ו- R6G (ראה טבלת חומרים) שימש לקביעת מגבלת הזיהוי. ה-EF תואר על ידי30:
EF = (ISERS / IRaman) × (NRaman / NSERS)
מיקומי השיא31 של R6G והערכים המתאימים להם מוצגים בטבלה 1.
במחקר זה, ספקטרום הרמאן התקבל באמצעות לייזר 633 ננומטר עם מטרות 10x ו 50x. זמן האינטגרציה נקבע על 10 שניות לרכישת ספקטרום במהלך המדידה, כאשר עוצמת הלייזר של האירוע עמדה על 3.7 מגוואט. על-ידי הוספת 30 μL של תמיסות R6G בריכוזים משתנים על המצע והתבוננות באות הרמאן באמצעות גילוי ישיר, איור 4 ממחיש שהמצע הפגין יכולת גילוי מצוינת, והגיע לגבול גילוי של 10-10 M עבור R6G, דבר המעיד על ביצועי גילוי חזקים. לאחר מכן, תוך שימוש ב-10-5 M R6G כבדיקת הבדיקה, חושב מקדם ההשבחה (EF) של המצע כ-1 x 10 5 (תהליך החישוב מפורט בקובץ משלים 1), מה שמדגים אפקט שיפור בולט (איור 5).
מצע SERS הגמיש איפשר איתור חומרי הדברה. Thiram, חומר הדברה נפוץ dithiocarbamate (DTC) בגידול פירות וירקות, נועד לשלוט במחלות פטרייתיות ולמנוע הידרדרות במהלך אחסון והובלה32. עם זאת, חשיפה חוזרת או בליעה של שאריות Thiram עלולה לגרום לבעיות בריאותיות כגון עייפות, אובדן טונוס שרירים ומומים חמורים בעובר33,34. לכן, השגת זיהוי Thiram ברמת עקבות על פני השטח של פירות וירקות הוא קריטי. פסגות הראמאן35 של תירם וסיבתן מתוארות בטבלה 2.
ריכוזים שונים של תיראם הוחלו על המצע הגמיש כדי להעריך את ביצועי הגילוי שלו. איור 6 מראה שעבור זיהוי תיראם, שלוש הפסגות האופייניות העיקריות שלו ברורות, וגבול הגילוי מגיע ל-10-8 מ'.
המצע הגמיש איפשר גילויים מעשיים. בחיי היומיום, שאריות חומרי הדברה לעיתים נשארות על פני השטח של פירות. צריכת פירות לא שטופים עלולה להוות סיכונים בריאותיים. במחקר זה, מצע SERS גמיש יושם בשיטת "הדבק וקילוף", הצמדת המצע לפני השטח של תפוח ולאחר מכן הוצאתו לבדיקה.
איור 7 ממחיש כי בשיטה זו הושג זיהוי של 10-7 M Thiram, עם קווים ספקטרליים ברורים יחסית. לפיכך, מצע SERS גמיש שהוכן יכול להקל על שיטת זיהוי "הדבק וקילוף", לזהות ביעילות שאריות חומרי הדברה על משטחי פרי, ולהציע יישומים מעשיים יקרי ערך.
מצע ה-SERS הגמיש שהוצג במחקר זה לא רק הציג ביצועי זיהוי יוצאי דופן, אלא גם הציע תרחישי יישום מעשיים.
איור 1: תכנון סכמטי של מצע ה-SERS הגמיש PDMS. איור המתאר את העיצוב של המצע הגמיש PDMS (Polydimethylsiloxane) המשמש לניסויי פיזור ראמאן משופר פני השטח (SERS). אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 2: תמונת ESEM של AgNPs מסונתזים. תמונת מיקרוסקופ אלקטרונים סורק סביבה (ESEM) המציגה את AgNPs (ננו-חלקיקי כסף) מסונתזים. סרגל קנה המידה בתמונה הוא 2 מיקרומטר, וקוטר ה- AgNPs נע בין כ- 20 ננומטר ל- 50 ננומטר. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 3: סימולציה של AgNPs. סימולציה המראה AgNPs (ננו-חלקיקי כסף) עם שיפור שדה מקומי משמעותי המתרחש במרווח בין החלקיקים. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 4: אותות SERS של ריכוזי R6G שונים. אותות פיזור ראמאן משופרים על פני השטח (SERS) המתקבלים עבור ריכוזים שונים של R6G (רודאמין 6G). מיקומי השיא באיור תואמים לאלה שבטבלה 1. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 5: אותות SERS של R6G על המצע הגמיש. אותות פיזור ראמאן משופרים על פני השטח (SERS) של R6G (Rhodamine 6G) שנאספו מ-10 נקודות אקראיות על המצע הגמיש כדי להדגים אחידות. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 6: אותות SERS של ריכוזי Thiram שונים. אותות פיזור ראמאן משופרים על פני השטח (SERS) המתקבלים עבור ריכוזים שונים של תיראם. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 7: אותות SERS של Thiram על פני הפרי. אותות פיזור ראמאן משופרים על פני השטח (SERS) של Thiram המתקבלים מפני השטח של תפוח בשיטת "הדבק וקילף". מגבלת הגילוי הגיעה ל 10-7 מ 'של Thiram. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
מיקום שיא (cm-1) | הקצאה |
612 | רטט כיפוף C-C-C במישור |
774 | C-H מתיחה |
1127 | C-H רטט כיפוף במישור |
1180 | רטט כיפוף C-H ו-N-H |
1310 | C=C מתיחה |
1364 | רטט מתיחה של קשר C-C |
1509 | רטט מתיחה של קשר C-C |
1574 | רטט מתיחה של קשר C=O |
1647 | רטט מתיחה של קשר C-C |
טבלה 1: הסטת ראמאן והקצאת מצב תדר בספקטרום R6G SERS. טבלה המפרטת את ערכי היסט הרמאן ואת הקצאות מצב התדר המתאים להם בספקטרום פיזור ראמאן משופר פני השטח (SERS) של R6G (רודאמין 6G).
מיקום שיא (cm-1) | הקצאה |
440 | עיוות CH3-N-C (δ (CH3-N-C)), C=S מתיחה (υ(C=S)) |
549 | מתיחה סימטרית S-S (υs (S-S)) |
928 | C=S מתיחה (υ (C=S)), מתיחה C-N (υ (CH3-N)) |
1136 | מתיחה C-N (υ (C-N)), מצבי CH3 המתנדנדים (ρ(CH3)) |
1388 | מתיחה C-N (υ (C-N)), עיוות סימטרי CH3 (υ(C=S)) |
טבלה 2: הקצאת מצב הסטת ראמאן ותדר בספקטרום Thiram SERS. טבלה המפרטת את ערכי היסט הרמאן ואת הקצאות מצב התדר המתאים להם בספקטרום פיזור ראמאן משופר פני השטח (SERS) של Thiram.
קובץ משלים 1: חישוב מקדם השבחה (ER). אנא לחץ כאן כדי להוריד קובץ זה.
במחקר זה הוצג מצע SERS גמיש, אשר חיבר AgNPs ל- PDMS באמצעות שינוי כימי והשיג ביצועים מצוינים. במהלך סינתזת חלקיקים, במיוחד בסינתזה של קומפלקס אמוניה כסופה (שלב 1.2), צבע התמיסה משחק תפקיד מכריע. הוספת כמות גדולה מדי של מי אמוניה עלולה להשפיע לרעה על איכות הסינתזה של AgNPs, מה שעלול להוביל לתוצאות גילוי לא מוצלחות. יש לשים לב לשינוי המצע (שלב 2.2) במהלך תהליך הסינתזה; אחרת, ייתכן שרכיבי AgNP לא יתחברו כראוי ל-PDMS, וכתוצאה מכך ביצועי הזיהוי ייחלשו.
בהכנות מעשיות, ביצועי הזיהוי של מצע SERS עשויים להפגין חוסר יציבות22. זה יכול להיות אופטימיזציה על ידי שינוי הממס של החומר. לדוגמה, שימוש באצטוניטריל כממס עבור Thiram מניב תוצאות טובות יותר מאשר שימוש באתנול. בנוסף, האיכות של Thiram יכולה להשפיע על אות SERS שזוהה, תוך הדגשת החשיבות של הבטחת כי ריאגנטים בשימוש נמצאים בתוך תאריכי התפוגה שלהם במהלך זיהוי.
בהשוואה למחקרים אחרים36,37,38, שיטת הזיהוי של המצע הגמיש SERS המוצעת במחקר זה היא פשוטה. AgNPs ניתן לסנתז בקלות באמצעות שיטה פשוטה, הימנעות הצורך בתנאי ניסוי מורכבים וסביבות, כמו גם תהליכי ייצור מורכבים. המצע ידידותי לסביבה ואינו מכניס מזהמים מזיקים. עם זאת, יש לציין כי בשל שכבת הגלוקוז סביב AgNPs, זה יכול להחליש את אפקט ההשבחה של חלקיקי כסף, דבר המצביע על כך שיש צורך בשיפור נוסף בגורם ההשבחה (EF) של מצע SERS. המצע הגמיש SERS, שהוכן בשיטה במחקר זה, דורש גם מחקר נוסף בזיהוי ביומולקולות.
מצע SERS גמיש המוצע במחקר זה מדגים ישימות בתרחישים מהחיים האמיתיים, מעשיר את השיטות לאיתור שאריות חומרי הדברה ונושא השלכות משמעותיות. יתר על כן, ביישומים עתידיים, מצע SERS גמיש טומן בחובו פוטנציאל גדול ליישומים ביו-רפואיים.
המחברים מצהירים כי אין ניגודי עניינים.
המחקר נתמך על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מענק מס '61974004 ו -61931018), כמו גם תוכנית המו"פ הלאומית של סין (מענק מס '2021YFB3200100). המחקר מודה למעבדה למיקרוסקופיית אלקטרונים באוניברסיטת פקין על מתן גישה למיקרוסקופ אלקטרונים. בנוסף, המחקר מודה ליינג קוי ולבית הספר למדעי כדור הארץ והחלל באוניברסיטת פקין על עזרתם במדידות ראמאן.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Ammonia (NH3.H2O, 25%) | Beijing Chemical Works | ||
APTES (98%) | Beyotime | ST1087 | |
BD-20AC Laboratory Chrona Treater | Electro-Technic Products Inc. | 12051A | |
D-glucose | Beijing Chemical Works | ||
Environmental Scanning electron microscope (ESEM) | FEI | QUANTA 250 | |
Raman microscope | Horiba JY | LabRAM HR Evolution | |
Rhodamine 6G | Beijing Chemical Works | ||
Silicone Elastomer Base and Silicone Elastomer Curing Agent | Dow Corning Corporation | SYLGARD 184 | |
Silver nitrate | Beijing Chemical Works | ||
Thiram (C6H12N2S2, 99.9%) | Beijing Chemical Works |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved