Method Article
שיטה מוצגת כדי לבנות מותאם אישית בעלות נמוכה, מצב נעול לייזר סיבים השני ליישומים פוטנציאליים מיקרוסקופ multiphoton, אנדוסקופיה, ו photomedicine. לייזר זה בנוי באמצעות חלקים זמינים מסחרית וטכניקות שחבור בסיסיות.
פרוטוקול מוצג כדי לבנות לייזר סיבים מותאמים אישית בעלות נמוכה אך ביצועים גבוהים (fs). זה כל-כך נורמלי פיזור (אנדי) הלייזר סיבים מסומם בנוי לחלוטין באמצעות חלקים זמינים מסחרית, כולל $8,000 ב סיבים אופטיים ומשאבה רכיבי לייזר, בתוספת $4,800 ברכיבים אופטיים סטנדרטיים ואביזרים החלל הנוסף. חוקרים חדשים לייצור סיבים אופטיים המכשיר עשוי גם לשקול השקעה סיבים בסיסיים שחבור ומכשור לייזר לאפיון הדופק (~ $63,000). חשוב לפעולת לייזר אופטימלית, שיטות לאימות true לעומת ביצועים (באופן חלקי או רעש) מוצגים. מערכת זו משיגה 70 fs משך הדופק עם אורך הגל של כ 1,070 ננומטר ושיעור החזרה פולס של 31 MHz. זה לייזר סיבים מציג את ביצועי השיא שניתן לקבל עבור מערכת בקלות התאספו לייזר סיבים, מה שהופך את העיצוב הזה אידיאלי עבור מעבדות מחקר במטרה לפתח טכנולוגיות לייזר קומפקטי ונייד fs המאפשרים יישומים חדשים של מיקרוסקופ רב-פוטון קליני וכירורגיה.
מוצק המצב לייזר (fs) פעמו לייזרים משמשים רבות עבור מיקרוסקופ ומחקר ביולוגי. דוגמה אחת טיפוסית היא השימוש של עירור הפוטון (MPE) מיקרוסקופ הקרינה הפלואורסצנטית, שם גבוה כוח שיא הכוח הממוצע נמוך הם רוצים להקל על תהליך MPE תוך צמצום מנגנוני פוטונזק. לייזרים רבים בעלי ביצועים גבוהים למצב מוצק הם זמינים מסחרית, ובשילוב עם מתנד פרמטרית אופטי (פופו), אורך הגל לייזר יכול להיות מכוון על מגוון רחב1. לדוגמה, מערכות מתנד מסחרי-פופו לייצר < 120 fs משכי פעימה (בדרך כלל עם שיעור החזרה של 80 MHz הדופק) ו > 1 W כוח ממוצע מ 680 ל 1,300 nm. עם זאת, את העלות של אלה מערכות לייזר מסחריות האלה מאוד משמעותי (> $200000), ומערכות מוצק המדינה דורשים בדרך כלל קירור מים אינם ניידים עבור יישומים קליניים.
טכנולוגיית לייזר סיבים פעמו הרבה יותר התבגר בשנים האחרונות. העלות של fs מסחרי פעמו לייזר סיבים הוא בדרך כלל נמוך באופן משמעותי מאשר לייזרים מוצק, אם כי ללא יכולת של כוונון רחב אורך הגל המוענקת על ידי מערכות מוצק המדינה שהוזכרו לעיל. שים לב כי לייזרים סיבים ניתן לזווג עם OPOs כאשר הרצוי (כלומר, סיבים היברידית מערכות מוצק-מצב). היחס הגדול משטח לנפח של מערכות לייזר סיבים מאפשר קירור אוויר יעיל2. מכאן, לייזרים סיבים ניידים יותר מאשר מערכות מוצק מדינה בשל גודלם הקטן יחסית ומערכת קירור פשוטה. עוד, שחבור היתוך של רכיבי סיבים מפחית את מורכבות המערכת ואת הסחף מכני בניגוד ליישור שטח חופשי של רכיבים אופטיים המרכיבים מכשירים מוצק. כל התכונות האלה להפוך לייזרים סיבים אידיאלי עבור יישומים קליניים. למעשה, לייזרים כל סיבים פותחו לפעולה תחזוקה נמוכה3,4,5, ו-polarization כל שמירה (PM)-לייזרים סיבים יציבים גורמים סביבתיים כולל שינויים טמפרטורה ולחות, כמו גם תנודותמכני 2,6,7,8.
כאן, שיטה מוצגת כדי לבנות לייזר בעלות חסכונית הלייזר אנדי עם חלקים זמינים מסחרית וטכניקות החדרת סיבים סטנדרטיים. שיטות לאפיון שיעור החזרה על הדופק, משך, וקוהרנטיות (מצב מלא-lock) מוצגים גם. לייזר סיבים כתוצאה מכך מייצרת פולסים נעולים מצב שניתן לדחוס 70 fs עם קצב החזרה של 31 MHz ו אורך הגל ממורכז ב 1,060 ל 1,070 nm. תפוקת הכוח המקסימלית מחלל הלייזר היא כ 1 W. הדופק פיזיקה של אנדי סיבים לייזרים באלגנטיות משתמשת האבולוציה לינארית הפולני מהותי סיבים אופטיים כרכיב מפתח של הבולם שניתן לשוללים2,3,9,10,11. עם זאת, משמעות הדבר היא שהעיצוב של אנדי אינו מיושם בקלות באמצעות סיבים מסוג PM (למרות שיישום ה-i-PM של הנעילה של המצב של אנדי מדווח, אם כי בעוצמה נמוכה ו-ps משך הפעימה12). לכן, יציבות סביבתית דורשת הנדסה משמעותית. הדור הבא עיצובים לייזר סיבים, כגון מתנד mamyshev יש את הפוטנציאל להציע יציבות סביבתית מלאה כמו כל-PM-סיבים התקנים מסוגל להגדיל את סדר הגודל של אנרגיית הדופק התאיים כמו גם הצעת ירידה משמעותית במשך הדופק כדי לאפשר יישומים המסתמכים על הדופק ספקטרום רחב13,14. הייצור המותאם אישית של עיצובים אלה חדשניים לייזר סיבים חדשים דורש ידע כיצד ושחבור סיבים ניסיון.
1. אחוי סיבים במצב יחיד (SMF)
הערה: סעיף 1 מורכב משלבים כלליים לאחוי SMFs. זהו לא חיוני, אבל מומלץ, צעד לתרגול סיבים splices באמצעות סיבים זולים. שלב זה מבטיח ביצועים נאותים של ציוד החבור לפני השימוש בחומרי סיבים אופטיים יקרי ערך.
2. הכנס את חלקי הסיבים
3. הבהר את חלקי הסיבים לטבלה האופטית
4. להרכיב את חלקי החלל החופשי
5. הגדרת רכיבי חלל מיותרים
6. השגת מצב נעול ביצועים עם האפיון של פלט הדופק לייזר
זה קריטי כדי לוודא פעולה נעולה מצב עם השלמת הליכים לייזר סיבים. חתימות של דור הדופק האופטימלי ויציבות הלייזר הן כדלקמן: ראשית, הדופק הפלט עשוי להיות מאופיין מספיק על ידי המכשור המתואר בשלב 6. ספקטרום הדופק הפלט מתוך מתנד לייזר צריך להיות ממורכז ליד 1,070 ננומטר עם הגוף האופייני חתול או באטמן הצורה המציינת מצב נעילה כפי שחזוי על ידי סימולציה מספרית של אנדי פולס פיסיקה15 (איור 2א). למרות הספקטרום האופייני הוא אינדיקציה מצוינת של קוהרנטיות הדופק, בדיקות נוספות מוצדקת כדי להבטיח מלוא מצב נעילה, יציבות, ואת ביצועי הלייזר הצפוי. כאבחון נוסף עבור נעילת מצב, משך הפעימה וספקטרום הכוח לחזרה הדופק נמדדים באמצעות autocorrelator ו מנתח הספקטרום RF, בהתאמה. השיא היחיד ללא המעמד צפוי עבור שתי המידות במהלך פעולה נעולה במצב. במהלך מדידות המתאם האוטומטי, ניתן לכוונן את צמד הסורגים כדי להשיג דחיסת פולס. משכי פעימה של 70 fs (ברוחב מלא-חצי מקסימום) נמדדו (איור 2ב'). משך הפעימה המדפד מתקרב לדחיסה המשוערת של עיצוב הלייזר הנוכחי: מגבלת ההמרה מחושבת באמצעות ספקטרום הפעימה הנמדד. שנית, יציבות הדופק עשוי להיבדק על ידי ניטור רציפה של כוח הפלט הממוצע ואת ספקטרום הדופק. הסחף הכוח הוא פחות ± 3.5% מעל 24 שעות (איור 2ג) ללא קירור פעיל כאשר ההתקנה לייזר מותקן על שולחן אופטי צף עם הרטט רעידות. רמת היציבות הזו מספיקה. לניסויים רבים בהדמיה המערכת ממשיכה להיות יציבה ועצמית מתחילה יותר משבוע כאשר היא מופעלת. הרכיבים בחלל החופשי עוברים הסחף המכני ונעילת המצב מפסידה לאחר מספר שבועות, אך ניתן לעתים קרובות לקבל מחדש את נעילת המצב על-ידי התאמות משניות של לוחיות גל כמתואר בשלב 6.
לאחר נעילת מצב מאומת, חשוב גם לבדוק את ביצועי ההדמיה במהלך ניסויים מעשיים MPE ו מיקרוסקופ לינארית באמצעות מטרה בדיקה פשוטה ודגימות ביולוגיות. לדוגמה, פלט לייזר סיבים מותאם אישית עשוי להיות מכוון למיקרוסקופ סריקת לייזר מסחרי עבור עירור שני פוטון (2PE) הדמיה פלואורסצנטית (איור 3א). שים לב כי מבודדים החלל הנוסף, למרות אובדן נתונים, הוא הכרחי כדי למנוע השתקפויות בגב מן המיקרוסקופ אופטיקה להיכנס לתוך מתנד לייזר. אלה השתקפויות גב לעתים קרובות פסיקות מצב נעילה הדור הזריחה במהלך הדמיה. כאן, מבחן נערך עם מיקרוסקופ מסחרי קונפוקלית וקד סריקת לייזר וגלאי מסורק עם הגדרת הגודל המרבי כדי להגדיל את האות הזריחה שנאסף. דוגמית אחת פשוטה למיקרוסקופיה היא המדידה של פתרון צבע פלורסנט. ניסוי מיקרוסקופ ראשון הציע הוא למדוד את האות צבע פלורסנט במהלך התאמות של כוח הדופק באמצעות קבוצה של מסנני דחיסות נייטרלית. הדבר מסייע לוודא שהאות הפלואורסצנטית מותנית בעוצמת הלייזר הנשלחת למישור המדגם (איור 3ב), שהיא התגובה הצפויה עבור 2pe. בשלב הבא, תמונות של דגימות ביולוגיות... למשל (ראה איור 3C, בלתי מוכתם, מדגם שרימפס מלח קבוע), כמו גם הדור השני הרמוני (shg) מ קולגן סיבים ו 2pe של כתמי פלורסנט חיצוניים (ראה איור 3D, מדגםשל רקמת עוף המוכתם טרי מוכתם עם rhodamine B). כאימות נוסף של 2PE, שנאסף 2PE תמונות היפרספקטקטרליות של מטרות ססגוניות מיקרוספירה של פלורסנט מרובת צבעים הושוו עם תמונות היפרקטרליות שצולמו על ידי עירור ליניארי עם לייזרים דיודה מסחרית (איור 4). עירור הפוטון היחיד וספקטרום הזריחה של 2PE נותחו והושוו לשני צבעי המיקרוספירה המתאימים לשני צבעי פלורסנט נרגשים בנפרד על ידי מסחרי, גל רציף 514 ננומטר ו 594 לייזרים nm. ספקטרום הזריחה מתרגש על ידי לייזר בנוי מותאם אישית זהים ספקטרום נלקח עם לייזרים גל רציף מסחרי (הפוטון יחיד-עירור). באופן קולקטיבי, תוצאות אלה מציינות כי לייזר סיבים מותאמים אישית מייצר פולסים עם כוח שיא מספיק אחידות כדי ליצור פלואורסצנטית 2PE ו-SHG.
איור 1: סכימטי של לייזר סיבים מותאמים אישית הגדרת אפיון הדופק. הקווים השחורים ממוספרים 1 ו-2 מציינים את פלט לייזר המשאבה. קווים שחורים ממוספרים 3-7 לציין סיבים תאיים עם אורך של כל סיב בין אחוי נקודות המצוין במטרים. הקווים השחורים הבלתי ממוספרים. מצביעים על סיבים בעלי חלל נוסף סימוני הצלב (x) מצביעים על אחוי נקודות. הקווים האדומים הם נתיבי אור בחלל החופשי. הקו השחור העבה בין ה-OSC לבין הפוטודיודה (PD) מציין כבל BNC. מנתח הספקטרום RF, אשר לוקח את אותו מיקום כמו OSC בעת שימוש, לא מוצג בדמות כי מנתח ספקטרום RF ניתן להחליף לתוך ההתקנה עבור OSC באמצעות מחבר BNC. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
איור 2: התוצאות של אפיון לייזר. (א) הספקטרום של פעימת הפלט מפעולת נעילת מצב לעומת הדמיה מספרית. (ב) עוצמת הקורלציה האוטומטית של הדופק המאותת בהשוואה להדמיה נומרית של מגבלת ההמרה. (ג) כוח הפלט של הלייזר במהלך 2 24 h בדיקות יציבות. (מותאם לדאדדזאדה ואח '17) אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
איור 3: התוצאות של בדיקות מיקרוסקופ MPE ביצועים. (A) סכמטי של לייזר סיבים בנוי בהתאמה אישית עם התפוקה שלה מכוונת למיקרוסקופ קונפוקלית מסחרי. (ב) העלילה יומן הרישום להפגין את התלות הריבועית של האות הזריחה mpe כפונקציה של כוח פלט לייזר, נמדד באמצעות פתרון של צבע פלורסנט. (ג) 2pe תמונה פלואורסצנטית אוטומטי של מדגם שרימפס מלח מוכתם וקבוע באמצעות לייזר סיבים מותאמים אישית. (ד) shg (ציאן) של קולגן סיבים ו 2pe הפלואורסצנטית (מגנטה) של התאים המוכתמת העור מרקמת עוף טרי באמצעות לייזר סיבים מותאמים אישית. קנה מידה של ברים = 50 μm. (מותאם לדדליזאדה ואח ') אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
איור 4: השוואה של זריחה 2PE באמצעות לייזר סיבים מותאמים אישית לעומת עירור הפוטון יחיד (1PE) באמצעות לייזרים דיודה מסחרית. (א) תמונה מרשימה של 1pe של מיקרוחרוזים ברורים באמצעות מספר לייזרים דיודה שונים (שמאל; אורכי גל 1pe מפורטים nm.) העוצמה פלורסנט פרופיל של חרוזים אותו נרגש על ידי לייזר דיודה 514 ננומטר (התיכון) ועל ידי לייזר סיבים מותאמים אישית (מימין). קנה מידה ברים = 50 μm. (ב) הספקטרום המנורמל של ירוק (שמאל) ו אדום (ימין) חרוזים נרגש על ידי לייזר דיודה לעומת לייזר סיבים מותאמים אישית. (מותאם לדאדדזאדה ואח '17) אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
נקודת שחבור | קצת | B | C | D |
אינדקס סיבים שמאלי | 1 | 3 | 4 | 6 |
קוטר ציפוי L (μm) | 250 | 250 | 250 | 250 |
קוטר לבוש (μm) | 125 | 130 | 125 | 125 |
קוטר ליבה (μm) | 105 | מיכל 5 | 6 | 6 |
אל מ (μm) | 105 | 4.8 | 7 | 6.2 |
מדד הסיבים הימניים | 2 | 4 | מיכל 5 | 7 |
קוטר ציפוי R (μm) | 250 | 250 | 250 | 250 |
קוטר לבוש R (μm) | 125 | 125 | 125 | 130 |
R קוטר ליבה (μm) | 105 | 6 | 6 | מיכל 5 |
R מ ' FD (μm) | 105 | 7 | 6.2 | 4.8 |
טבלה 1: סיכום של הפרמטרים של המשאבה לייזר סיבים מחבר נקודה (א) כמו גם שלוש סיבים תאיים מאחוי נקודות (B-D). כאן כיוון הפצת האור הוא מהסיבים השמאליים לסיבים הימניים. L = שמאל סיבים באחוי; R = סיבים מימין באחוי; MFD = קוטר שדה ממוצע.
הפרוטוקולים המפורטים כאן לסנתז ידע ומומחיות שהיו מנהג נפוץ במעבדה לייזר פיסיקה במשך עשורים, אבל אשר מוכר לעתים קרובות לחוקרים ביו-רפואיים רבים. עבודה זו מנסה להפוך את טכנולוגיית לייזר סיבים מהירה יותר נגיש יותר לקהילה הרחבה. עיצוב לייזר הסיבים אנדי הוא מבוסס היטב, כפי שפותחה לראשונה בעבודות הזרע של חכמים ועמיתים3. עם זאת, היישומים של טכנולוגיה זו על ידי קבוצות אחרות הביאו לפעמים דיווחים של לייזרים שאינם פועלים כראוי, הממחישות את הצורך לחנך חוקרים ביורפואיים בהיבטים לא טריוויאלי של אפיון הדופק ופעולה נעולה במצב.
לתשומת לבך, ייצור לייזר ותפעול מותאמים אישית בדרך כלל אינם מתאימים למעבדות שאינן מוכרות לפעולת לייזר ובטיחות. הכשרה בטיחות לייזר והתחשבות של מפגעים חיוניים לפני שמנסים לבנות מחלקה 4 לייזר. מכיוון שמערכת הלייזר פתוחה, יש שתי קורות השתקפות עיקריים (מגיע מהגרגים מדחס ו-PBS החלל) ו מספר השתקפויות קטין מאופטיקה אחרים שצריך להיות חסום. יש לאבטח את רכיבי החלל החופשי לטבלה אופטית יציבה על מנת לשמור על היישור. לעומת זאת, לייזרים מסחריים הם תמיד סגורים לבטיחות ולעתים קרובות לנצל מנגנוני יישור אוטומטי, מה שהופך אותם קל ובטוח יותר לפעול.
כפי שהוזכר, לייזר סיבים מותאמים אישית הציג כאן מייצג אולי את הביצועים הטובים ביותר שניתן לצפות עבור מערכת שנבנתה בקלות אשר ממזער עלויות החומר. העיצוב והאיכות של הsplices הוא גורם קריטי ליעילות הלייזר, קלות הייצור והחוסן בפני פגיעה בנקודות. אחוי באיכות נמוכה לא יכול רק להפחית את יעילות פלט המשאבה, אלא גם לייצר חום במהלך המבצע, ובכך, נזק לחלל. כדי להשיג splices באיכות גבוהה, אחד צריך לוודא הסכין סיבים משולבים נקיים. כפי שהוזכר לעיל, הכותנה ספוגה באלכוהול יש להשתמש כדי לנקות את כל משטחי העבודה על בסיס קבוע. בנוסף, כאשר זוויות קליב גדול (> 0.3 °) מתרחשים, מומלץ מאוד לצאת לחופשי כדי לשפר את האיכות של אחוי.
ברגע שהמצב נעול, המערכת יציבה למדי ונשארת עצמית במהלך תקופה של יותר משבוע. במקרה של רטבאליות בשוגג במערכת או להיסחף מכני של רכיבי החלל החופשי לאורך זמן, המערכת תאבד מצב נעילה, אבל לייזר נעילת מצב יכול לעתים קרובות להיות התאושש בקלות על ידי התאמת מעט צלחות גל. כדי לשמור על פלט יציב, בקרת טמפרטורה של סיבים פעילים הוא המפתח. לכן, המערכת משמשת במיטבו בחדר ממוזג עם זרימת אוויר מינימלית בקרבתה. המערכת היא בעלת אטימות יחסית לויברציות קטנות. למעשה, ההשפעה של רטט מכני לא ניתן להבחין הן בתחומים הרקתית והספקטרלית אם המערכת היא לשים על שולחן אופטי פסיבי-לח. נגיעה רכיבי סיבים של מתנד יהיה perturb במצב נעילה, אבל מצב נעילה הוא התאושש פשוט על ידי החזרת סיבים בחזרה למיקומו המקורי המשוער.
לבסוף, מארז הטופס הקומפקטי של לייזרים סיבים הוא אטרקטיבי לפיתוח מערכות קליניות ניידים. (לדוגמה, מערכות מבוססות עגלה ניידות). בעוד שהגודל הקטן ביותר בהשוואה ללייזר של מצב מוצק, עיצוב לייזר סיבים מותאם אישית המוצג כאן מכיל מספר רכיבים של שטח פנוי המחייבים יישור. זה מגביל באופן משמעותי את הניידות של המערכת. ניתן להחליף את כל הרכיבים האלה בחלל החופשי עם אנלוגיות של רכיבי סיבים. עבודה עתידית תכלול פיתוח של עיצובי לייזר כל סיבים חדשים באמצעות סיבים PM כדי לפתח מערכות עמידות לשינויים סביבתיים.
המחברים לא מצהירים על אינטרסים מתחרים.
אנו מודים לד"ר א. קרונין-פורמן ו-מ. וייצמן (תאגיד האולימפוס של קבוצת הפתרונות המדעיים של אמריקה) לסיוע ברכישת תמונות. עבודה זו נתמכת על ידי המכונים הלאומיים של מלגת הבריאות K22CA181611 (to B.Q.S.) והקרן למשפחות ריצ'ארד וסוזן סמית ' (ניוטון, M.A.) פרס משפחת סמית ' למצוינות במחקר ביו-רפואי (לB.Q.S.).
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Adapters, mirrors, posts, mounts, and translational stage (optomechanics) | Thorlabs | TR6-P5 (3x), AD12NT (2x), PFSQ20-03-M01, PFSQ05-03-M01, KMS, KM100C, KM100CL, KM200S, LT1, LT101, UPH2-P5, UPH3-P5 (2x) | Standard optical components |
Advanced optical fiber cleaver | AFL | CT-100 | |
Autocorrelator | Femtochrome | FR-103XL/IR/FA/CDA | |
Beamsplitter mount | Thorlabs | BSH1/M | |
Factory fusion splicer | AFL | FSM-100P | |
Fiber collimators | OZ Optics (Canada) | LPC-08-1064-6/125-S-1.6-7.5AS-60-X-1-2-HPC | 3x |
Fiber-coupled,high-speed photodiode detector | Thorlabs | DET08CFC | |
Free-space isolator | Thorlabs | IO-5-1050-HP | |
Free-space isolator | Thorlabs | IO-3D-1050-VLP | |
Half waveplate | Union Optics (China) | WPZ2312 | 2x |
High power multimode fiber pump module | Gauss Lasers (China) | Pump-MM-976-10 | |
High power pump and signal combiner | ITF Technology (Canada) | MMC02112DF1 | |
Index matching gel | Thorlabs | G608N3 | |
Optical spectrum analyzer | Keysight | Agilent 70951B | |
Oscilloscope | Keysight | Agilent 54845A | |
Passive double clad fiber(5/130 μm) | ITF Technology (Canada) | MMC02112DF1 | 3m, Included with combiner |
Polarizing beamsplitter | Thorlabs | PBS253 | |
Quarter waveplates | Union Optics (China) | WPZ4312 | 2x |
Quartz birefringent filter plate | Newlight (Canada) | BIR1060 | |
RF spectrum analyzer | Tektronix | RSA306B | |
Single mode fiber (6/125 μm) | OZ Optics (Canada) | LPC-08-1064-6/125-S-1.6-7.5AS-60-X-1-2-HPC | 1m, Included with collimators |
Single mode fiber coupler | AFW (Australia) | FOSC-2-64-30-L-1-H64-2 | |
Transmission diffraction grating 1 | LightSmyth | T-1000-1040-3212-94 | For compressor |
Transmission diffraction grating 2 | LightSmyth | T-1000-1040-60x12.3-94 | For compressor |
Waveplate rotation mount | Thorlabs | RSP1/M | 4x |
Ytterbium-doped single mode double clad fiber | Thorlabs | YB1200-6/125DC | 3m |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved