Culture en vrac non fractionnée de muscles squelettiques de souris pour récapituler la niche et la quiescence des cellules souches

Nos recherches portent sur l’étude des muscles squelettiques sains et malades, avec un accent particulier sur les cellules satellites. L’un des aspects fondamentaux que nous explorons est l’identification d’activateurs transcriptionnels qui coordonnent l’expression des gènes spécifiques aux cellules. Ce protocole nous permet d’effectuer des tests rapides pour déterminer la spécificité.

Dans le domaine de la recherche sur les muscles squelettiques, les approches de séquençage de l’ARN unicellulaire et mononoyau sont fréquemment utilisées pour étudier différentes populations cellulaires en homéostasie, en régénération et en maladie. De plus, les cellules satellites pourraient être isolées par tri cellulaire activé par fluorescence, ou FACS, et cultivées pour tester des hypothèses et valider les résultats du séquençage. L’étude in vitro des cellules satellites représente un défi de taille.

Des études récentes ont mis en évidence le rôle de la niche des cellules satellites dans sa physiologie. Bien qu’il soit courant de cultiver des cellules satellites isolées de FACS, la réplication de la niche des cellules satellites in vitro n’a pas encore été réalisée. Notre protocole fournit un moyen efficace et pratique de cultiver des tissus musculaires entiers, y compris des cellules non myogéniques, telles que les cellules endothéliales et les progéniteurs fibro-édoprogénétiques.

Nous avons montré que les cellules de type quiescent apparaissent dans la semaine qui suit la culture. Ce protocole pourrait également être utilisé pour étudier l’influence d’autres cellules sur le rétablissement de ce pool de type quiescent.