S'identifier

JoVE Journal

Genetics

This content is Open Access.

Un protocole universel pour à grande échelle gRNA bibliothèque Production provenant de toute Source d’ADN

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

11.0K Views

•

10:32 min

•

December 6th, 2017

DOI :

10.3791/56264-v

December 6th, 2017

•

Anna Köferle¹, Stefan H. Stricker¹^,²

¹MCN Junior Research Group, Munich Center for Neurosciences, Ludwig-Maximilian-Universität, BioMedical Center, ²Epigenetic Engineering, Institute of Stem Cell Research, Helmholtz Zentrum, German Research Center for Environmental Health

Résumé

Méthodes pour générer des bibliothèques gRNA à grande échelle devraient être simple, efficace et rentable. Les auteurs décrivent un protocole pour la production de bibliothèques gRNA issu de la digestion enzymatique de l’ADN cible. Cette méthode, CORALINA (génération de bibliothèque gRNA globale par activité nucléasique contrôlé) présente une alternative à la synthèse d’oligonucléotides personnalisée coûteux.

Explorer plus de vidéos

biblioth que gRNA

g n ration de la biblioth que

Chapitres dans cette vidéo

0:05

Title

0:48

Digestion of DNA with MNase and Separation of DNA Fragments by PAGE

3:05

Isolation of DNA Fragments from PAGE Gels and Linker Generation

4:26

End Repair of Gel-purified Fragments and Linker Ligation

5:32

Size Selection and Assembly of Vector-insert Construct

6:18

Electroporation of TG1 Electrocompetent E. coli Cells

8:38

Results: a gRNA Library can be Generated from and Target DNA

9:56

Conclusion

Vidéos Associées

article

Sélection de la taille Gel automatisé pour améliorer la qualité des bibliothèques de séquençage de prochaine génération Préparé à partir d'échantillons d'eau de l'environnement

10.5K Views

article

CRISPR Guide RNA clonage pour systèmes mammaliens

69.7K Views

article

Un protocole personnalisable pour chaîne Assemblée gRNA clonage (STAgR)

9.7K Views

article

Surexprimant ARN Long non codantes en utilisant activation génique CRISPR

8.8K Views

article

HOX Locus Focused CRISPR/sgRNA bibliothèque préalable identifier critique FCCT limites

8.2K Views

article

Identification des récepteurs de surface cellulaire à l’aide d’écrans génétiques CRISPR/Cas9 à l’échelle du génome

14.3K Views

article

Grand Insérer production bibliothèque génomique de l'environnement

15.9K Views

article

Assemblage modulaire basé sur CRISPR pour la construction à haut débit d’une bibliothèque de plasmides UAS-cDNA/ORF

817 Views

article

Assemblage modulaire basé sur CRISPR pour la construction à haut débit d’une bibliothèque de plasmides UAS-cDNA/ORF

817 Views

article

Assemblage modulaire basé sur CRISPR pour la construction à haut débit d’une bibliothèque de plasmides UAS-cDNA/ORF

817 Views

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. Tous droits réservés.

Nous utilisons des cookies afin d'améliorer votre expérience sur notre site web.

En continuant à utiliser notre site ou en cliquant sur le bouton ''continuer'', vous acceptez l'utilisation de cookies.

Apprendre encore plus