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Biology

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Nanyang Technological University

Profilage Redox cellulaire utilisant une microscopie haute teneur

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10.9K Views

•

11:37 min

•

May 14th, 2017

DOI :

10.3791/55449-v

May 14th, 2017

•

Tom Sieprath¹^,², Tobias Corne¹^,², Joke Robijns¹, Werner J. H. Koopman³, Winnok H. De Vos¹^,²

¹Laboratory of Cell Biology and Histology, Department of Veterinary Sciences, University of Antwerp, ²Cell Systems and Imaging Research Group (CSI), Department of Molecular Biotechnology, Ghent University, ³Department of Biochemistry , Radboud Institute for Molecular Life Sciences, Radboud University Medical Center

Résumé

Cet article présente un flux de travail de microscopie à contenu élevé pour la quantification simultanée des niveaux de ROS intracellulaires, ainsi que le potentiel de la membrane mitochondriale et la morphologie - communément appelée morphofonction mitochondriale - dans les cellules adhérentes vivantes en utilisant les molécules rapporteurs fluorescentes perméables aux cellules 5- (et- 6) -chlorométhyl-2 ', 7'-dichlorodihydrofluorescéine diacétate, ester acétylique (CM-H2RFDA) et tétraméthylrhodamine méthylester (TMRM).

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Biologie cellulaire

Esp ces d oxyg ne r actives

Morphofunction mitochondriale

Imagerie cellulaire en direct

Microscopie haute teneur

Microscopie fluorescente

Microscopie quantitative multiparam trique

Chapitres dans cette vidéo

0:05

Title

10:38

Conclusion

9:35

Results: Effect of Saquinavir on Primary Human Fibroblasts

0:47

Seeding Cells in a 96-well Plate

1:48

Setting Up the Microscope and Acquisition Protocol

3:10

Loading of the Cells with CM-H₂DCFDA and TMRM

4:18

First and Second Live Imaging Rounds

6:22

Image Processing and Analysis

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