Inyecciones intravítreas en el ojo ovino

Las inyecciones intravítreas se pueden utilizar para administrar agentes terapéuticos a la retina. Aquí se presenta un protocolo para inyecciones intravítreas en el ojo de oveja, como modelo del ojo humano. Las inyecciones intravítreas son mucho menos invasivas que otras inyecciones oculares.

Las inyecciones intravítreas se pueden usar con éxito para administrar un producto de terapia génica y tratar la degeneración retiniana en ovejas con lipofuscinosis ceroidea neuronal natural. Una vez anestesiada la oveja, comience a desinfectar asépticamente el ojo que se inyectará irrigándolo con una solución de povidona yodada al 1 a 5% utilizando una jeringa de 20 mililitros. Luego, coloque una cortina quirúrgica estéril y fenestrada sobre el ojo.

Coloque un espéculo ocular en los párpados para mantener el ojo abierto. Agarre la conjuntiva bulbar en la cara lateral dorsal del ojo con fórceps y gire el globo ocular ventromedialmente. Inserte la aguja aproximadamente siete milímetros posterior a la esclerótica en la cara lateral del ojo, y en ángulo posterior para evitar la lente.

Administrar la inyección única de 100 microlitros en forma de bolo, lo más cerca posible de la retina, sin alterar la superficie retiniana. Enjuague el ojo con aproximadamente 10 a 15 mililitros de solución de povidona yodada al 1 a 5% seguida de 10 mililitros de solución salina, antes de retirar el espéculo y la cortina. El análisis electrorretinográfico demostró la función retiniana preservada en el ojo tratado, mientras que el ojo no tratado disminuyó de manera similar a los animales afectados por CLN5.

La histología retiniana estaba casi normalizada en el ojo tratado con un grosor retiniano total comparable al de los animales de control sanos en la retina central. Por el contrario, el grosor de la retina no tratada fue comparable al de los animales afectados por CLN5. La expresión de la proteína ácida fibrilar glial, o GFAP, un marcador de estrés retiniano y astroglia, fue menor en los ojos tratados que en los ojos no tratados, lo que indica que la inflamación asociada a la enfermedad se atenuó después del tratamiento.

Con el establecimiento de un protocolo para las inyecciones intravítreas en el ojo de oveja, las ovejas ahora podrían usarse para probar la seguridad y eficacia de muchos agentes terapéuticos administrados por vía intravítrea.